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马铃薯纺锤块茎类病毒株系鉴定

植物病理学报 1993年第4期23卷 361-365页

作者：何小源周广和刘艾生中国农科院植物保护研究所

以加拿大的马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTV)强毒、中毒和弱毒株系样品作对照,用改进的往返—聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,鉴定了发生在我国北方种植的马铃薯上的PSTV株系类型。从60个马铃薯品种488个样品中,所有检... 详细信息

以加拿大的马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTV)强毒、中毒和弱毒株系样品作对照,用改进的往返—聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,鉴定了发生在我国北方种植的马铃薯上的PSTV株系类型。从60个马铃薯品种488个样品中,所有检测到的PSTV的电泳迁移率与加拿大的弱毒株系迁移率相同。表明所有检测到的PSTV都属弱毒株系。首次明确发生在我国北方种植的马铃薯上的PSTV以弱毒株系为主要类型。没有分离到强毒株系或其它株系。

关键词：马铃薯 PSTV 鉴定病毒

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浅谈在教学中如何提高学生的语文素质

新世纪论丛

新世纪论丛 2006年第3期 106-107页

作者：何小源北流勾漏中学广西玉林 537400

文章着重阐述教学应该从全面培养学生的素质的角度出发,通过语言文字训练,从而促使学生语文素质的转化提高。

关键词：素质训练转化

白喉和破伤风类毒素的定量测定——***试验和火箭免疫电泳试验与絮状试验的比较

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微生物学免疫学进展 1988年第3期 57-60页

作者： Lene Ljunggvist ,何小源

在Ramon絮状试验中,最广泛用于表示白喉和破伤风毒素及类毒素浓度的Lf单位,其原始定义为分别与一个国际单位(Iu)的白喉和破伤风抗毒素等价结合的毒素或类毒素量。如果已知类毒素的浓度(Lf/ml),则可采用絮状试验测定抗毒素的效价(Iu/ml)... 详细信息

在Ramon絮状试验中,最广泛用于表示白喉和破伤风毒素及类毒素浓度的Lf单位,其原始定义为分别与一个国际单位(Iu)的白喉和破伤风抗毒素等价结合的毒素或类毒素量。如果已知类毒素的浓度(Lf/ml),则可采用絮状试验测定抗毒素的效价(Iu/ml)。同样,用已知效价的抗毒素(Iu/ml)可以测定未知类毒素的浓度(Lf/ml)。由于一些抗毒素和对应毒素的中和能力及凝絮能力不同,因此,就难于维持这种定义。这两种特性似乎不是相同的。因此,建立了用于絮状试验的白喉抗毒素专用参考品。对于破伤风抗毒素,国际标准品指定两种效价:以国际单位(Iu)标定的破伤风抗毒素效价和以Lf-当量单位标定的第二效价。最近,决定用Lf单位标定的类毒素代替抗毒素作为参考品的结果进行了研究。这种

关键词：白喉破伤风火箭免疫电泳抗毒素疫喉锁口风梭状芽孢杆菌感染免疫毒素脱毒毒素类毒素 Mancini 絮状试验定量测定

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吸附破伤风类毒素快速、敏感的检定方法

微生物学免疫学译刊 1987年第1期 49-51页

作者： Gupta PK 何小源

在破伤风类毒素(TT)生产和质量控制的实验室里,通常按照WHO规程进行检定试验。目前,检定试验常采用定量类毒素和变量抗毒素的絮状反应来进行。然而在该试验中,经常出现假带,而且当TT浓度较低时,需较长时间才能出现絮状。为此,在TT絮状... 详细信息

在破伤风类毒素(TT)生产和质量控制的实验室里,通常按照WHO规程进行检定试验。目前,检定试验常采用定量类毒素和变量抗毒素的絮状反应来进行。然而在该试验中,经常出现假带,而且当TT浓度较低时,需较长时间才能出现絮状。为此,在TT絮状试验时需要“一带血清”,但制备“一带血清”是不容易的。最近,WHO建

关键词：吸附破伤风类毒素上清液沉淀物试验量破伤风抗毒素絮状试验免疫沉淀试验 TT

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应用基因枪法获得抗大麦黄矮病毒转基因小麦

植物病理学报 2000年第2期30卷 116-121页

作者：成卓敏吴茂森夏光敏陈惠民何小源周广和中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100094 山东大学生物系济南250100

以我国特有的大麦黄矮病毒 GPV株系的外壳蛋白 ( CP)基因为材料 ,设计合成了分别含有 Act启动子或 Emu启动子的植物表达载体 p PPI2、p PPI3和 p PPI5。采用基因枪法分别转化小麦幼胚和愈伤组织。诱导成苗后进行 PCR检测 ,T0 代阳性率为... 详细信息

以我国特有的大麦黄矮病毒 GPV株系的外壳蛋白 ( CP)基因为材料 ,设计合成了分别含有 Act启动子或 Emu启动子的植物表达载体 p PPI2、p PPI3和 p PPI5。采用基因枪法分别转化小麦幼胚和愈伤组织。诱导成苗后进行 PCR检测 ,T0 代阳性率为 18%。对转基因苗的后代进行进一步检测 ,部分转基因苗阳性株至 T3代 PCR检测阳性率为 10 0 % ,PCR结果 CP探针杂交呈阳性反应 ,序列测定结果与 GPV CP基因序列一致 ,表明 GPV CP基因已整合到小麦基因组中。室内抗病性鉴定结果 ,虽然转基因植株全部发病 ,但对大麦黄矮病毒 GPV株系具有一定的延迟发病作用。

关键词：基因枪法大麦黄矮病毒转基因小麦

白喉和破伤风类毒素的定量测定——1.絮状试验和Lf-单位

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微生物学免疫学译刊 1988年第3期 54-57页

作者： Lyng.J 何小源

引言白喉和破伤风毒素、类毒素和抗毒素的絮状试验是由Ramon建立的。此法简单、快速、经济和不需要动物或精密仪器。因此,对于毒素和类毒素浓度的评价仍然很重要。花絮状试验中,将毒素或类毒素和马抗毒素做不同的混合,然后观察其絮... 详细信息

引言白喉和破伤风毒素、类毒素和抗毒素的絮状试验是由Ramon建立的。此法简单、快速、经济和不需要动物或精密仪器。因此,对于毒素和类毒素浓度的评价仍然很重要。花絮状试验中,将毒素或类毒素和马抗毒素做不同的混合,然后观察其絮凝反应。如果混合物选择适当,絮状首先出现在一管或二管中,尔后出现在两边的试管中。首先出现絮状的混合物中,含有接近等价最适比例的毒素(或类毒素)和抗毒素。现在使用的絮状试验方法有两种:最初且最常用的是Ramon试验或β-法,即定量的毒素或类毒素和变量的抗毒素混合。另一法为Dean-Webb试验或α-法,即采用定量抗毒素和变量毒素或类毒素的混合。

关键词：絮状试验 Lf 最适比例破伤风类毒素破伤风毒素试管架定量测定絮凝反应结合物国际标准品

用聚合酶链式反应(PCR)检测马铃薯纺锤块茎类病毒

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中国病毒学 1992年第3期7卷 362-366页

作者：何小源周广和成卓敏王立阳陈剑波中国农业科学院植物保护研究所北京100094

用DNA合成仪合成两个马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid, PSTVd)特异性引物,从感病的马铃薯块茎组织的核酸抽提液中,用反转录酶合成PSTVd eDNA,然后用PCR法进行扩增,扩增产物用电泳检测,建立了用PCR法检测PSTVd的新方... 详细信息

用DNA合成仪合成两个马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid, PSTVd)特异性引物,从感病的马铃薯块茎组织的核酸抽提液中,用反转录酶合成PSTVd eDNA,然后用PCR法进行扩增,扩增产物用电泳检测,建立了用PCR法检测PSTVd的新方法。结果表明,该方法特异性强,灵敏度可达0.15pg,比现有其它检测方法高,而且样品用量少。

关键词：马铃薯纺锤块类病毒聚合酶链反应

大麦黄矮病毒GPV外壳蛋白基因序列分析及其植物表达质粒的构建

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中国科学（C辑） 1996年第3期26卷 250-256页

作者：成卓敏何小源吴茂森周广和 Paul Keese P.M.Waterhouse 中国农业科学院植物保护研究所澳大利亚联邦科学和工业组织植物所

大麦黄矮病毒GPV株系是我国特有的一个株系,与国外已报道的大麦黄矮病毒MAV,PAV,SGV,RPV和RMY在血清学上无反应.通过对GPV.外壳蛋白基因的序列分析,明确了病毒的外壳蛋白基因由603个核苷酸组成,编码201个氨基酸,分子量为22218ku.同MAV,P... 详细信息

大麦黄矮病毒GPV株系是我国特有的一个株系,与国外已报道的大麦黄矮病毒MAV,PAV,SGV,RPV和RMY在血清学上无反应.通过对GPV.外壳蛋白基因的序列分析,明确了病毒的外壳蛋白基因由603个核苷酸组成,编码201个氨基酸,分子量为22218ku.同MAV,PAV,RPV株系一样,在GPV外壳蛋白基因框架中(ORF)含有1个Vpg框架结构,分子量为17024ku.外壳蛋白基因序列同源性比较结果显示,GPV株系和RPV株系同源性较高,核苷酸和氨基酸的同源性分别为83.7%和77.5%.而与PAV和MAV株系同源性较低,核苷酸和氨基酸的同源性分别为56.9%,53.2%和44.1%,43.8%.按照GPV外壳蛋白基因序列,设计寡聚核苷酸引物,通过RT-PCR反应,得到GPV外壳蛋白基因全长cDNA,克隆到表达质粒,构建了高等植物表达载体pPPI1,pPPI2和pPPI5.

关键词：大麦黄矮病毒 GPV 外壳蛋白基因植物表达载体

应用基因工程创造抗黄矮病毒转基因小麦新种质

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植物保护 1996年第3期22卷 18-20页

作者：成卓敏何小源陈彩层夏光敏吴茂森张杰陈惠民肖红郭光心周广和中国农业科学院植物保护研究所

应用花粉管通道法和基因枪法将大麦黄矮病毒ＧＰＶ株系外壳蛋白基因导入小麦栽培品种，获得了抗大麦黄矮病毒ＧＰＶ株系的转基因小麦株系（文献检索证明世界上无任何其它抗病毒转基因小麦报道）。转基因植株经ＰＣＲ、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ... 详细信息

应用花粉管通道法和基因枪法将大麦黄矮病毒ＧＰＶ株系外壳蛋白基因导入小麦栽培品种，获得了抗大麦黄矮病毒ＧＰＶ株系的转基因小麦株系（文献检索证明世界上无任何其它抗病毒转基因小麦报道）。转基因植株经ＰＣＲ、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ检测，证明ＣＰ基因可稳定遗传到Ｔ３代；经Ｗｅｓｔｅｒｎ测定，证明ＣＰ基因在转基因小麦中已经得到表达；经带毒蚜温室和田间人工接种试验，获得了一些抗病性明显的后代。

关键词：大麦黄矮病毒基因工程抗病毒转基因小麦