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有机肥施用条件下木聚糖降解菌促进土壤生物固氮机理

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有机肥施用条件下木聚糖降解菌促进土壤生物固氮机理

作者：何小慧南京农业大学

学位级别：硕士

长期过量施用化学氮肥会导致土壤酸化、板结、盐渍化以及生物多样性衰减,氮肥利用率低下。施用有机肥能够显著提高土壤有机质含量,激发微生物活性,从而增强微生物对外界碳源的利用能力。微生物需要消耗ATP进行固氮,而大部分固氮菌通过... 详细信息

长期过量施用化学氮肥会导致土壤酸化、板结、盐渍化以及生物多样性衰减,氮肥利用率低下。施用有机肥能够显著提高土壤有机质含量,激发微生物活性,从而增强微生物对外界碳源的利用能力。微生物需要消耗ATP进行固氮,而大部分固氮菌通过碳代谢产生ATP供给固氮,因此碳源的有效性对生物固氮具有重要意义。施用有机肥不仅给土壤带来了化学养分,还给固氮微生物提供了大量碳源,而固氮微生物对这些碳源的响应尚不明确。本研究从水稻田间长期不同施肥处理对水稻产量、土壤理化性质、土壤固氮酶活的影响入手,探究有机肥输入对土壤微生物固氮潜势的影响;通过添加不同类型的碳源底物测定土壤固氮酶活,研究对于固氮菌而言不同碳源的生物有效性;木聚糖作为植物细胞壁的主要成分之一,通过氢键与纤维素微纤维紧密结合,是有机肥碳源组分之一,本研究通过筛选固氮菌株以及木聚糖降解菌,再通过微生物混合培养模式将两株菌接种到含有木聚糖的培养基中,研究在以木聚糖为单一碳源条件下,木聚糖降解菌的添加对固氮菌活性的影响。通过一系列实验本研究获得了以下结果:1.水稻田间试验共设置五种施肥处理:不施肥处理（CK）,不施氮肥处理（PK）,施化肥处理（NPK）,化肥有机肥配施处理（NPKM）和单施有机肥处理（PM）。长期施用化肥会导致土壤p H下降,不同施肥方式对土壤有机质含量、电导率、p H值的影响较大,其中PM处理土壤p H为7.78,显著高于其它处理,施用有机肥可以改善土壤理化性质。NPKM处理水稻产量最高,为10810.94 kg·ha,比CK、PK、NPK、PM处理分别高84.6%、68.5%、37.2%和15.9%（p<0.05）;NPKM处理的氮素积累总量、氮素吸收利用率（RE）、氮素农学利用率（AE）、氮素偏生产力（PEP）、氮素生理利用率（PE）均比NPK、PM处理高。PM处理土壤固氮酶活为22.6μmol·g·min,显著高于其它施肥处理,比NPK处理高3.75倍,说明有机肥作为碳源底物能极大提升土壤固氮潜势。2.利用乙炔还原法测定不同时期不同碳源底物时的土壤固氮酶活,研究结果表明:不同碳源在一定程度上可以提高土壤的固氮酶活性。加入单一碳源培养72小时后,以蔗糖为碳源底物时土壤固氮酶活显著高于其他处理（p<0.05）,葡萄糖次之;不论培养时间长短,核糖、木糖的碳源有效性均不高。培养30 d后,蔗糖处理、葡萄糖处理和组合碳源处理的土壤固氮酶活随着时间的推移而下降,土壤固氮微生物对木聚糖水解产物的响应不同,与木糖相比,甘露糖、半乳糖更易被固氮微生物利用。3.从水稻土中分离得到具有固氮酶活性的固氮菌T5和具有木聚糖降解能力的M2,结合形态学观察、生理生化特征和分子生物学鉴定,确定T5属于草螺菌属（Herbaspirillum seropedicae）,固氮酶活为0.62μmol·g·min;M2菌株为纤维芽孢杆菌属（Paenibacillus cellulositrophicus）,木聚糖酶活为1.77μg·min。T5生长最适p H在4～10之间,弱嗜盐微生物;M2生长最适p H在5～9之间,非嗜盐微生物;两者对于碳源的偏好性类似,都倾向于酯类、醇类、酸类碳源,对L-天冬酰胺酸、丙酮酸甲酯、D-甘露醇、D-氨基葡萄糖酸的利用程度更高。4.平板对峙实验表明T5与M2两株菌之间无拮抗效果,将两株菌混合培养降解木聚糖并测定固氮酶活。培养基纯培养实验结果表明:当以木聚糖为唯一碳源时,固氮菌T5的固氮酶活性无法检测到,表明菌株T5无法利用木聚糖产生能源进行固氮;添加菌株M2后,菌株T5的固氮酶活达到2819.6μg·kg·d,说明菌株T5能利用M2降解木聚糖的产物进行固氮;但在以甘露醇为碳源底物时,混合培养的固氮酶活低于T5单独培养,M2对T5固氮产生抑制作用,因为两株菌对甘露醇具有竞争作用。土壤培养结果表明:单独添加0.15 mg·g的葡萄糖对土壤固氮酶活影响不大,而添加1mg·g浓度的木聚糖可以显著提高土壤固氮酶活;加入T5菌液后,土壤固氮酶活下降,同时添加两种菌液时土壤固氮酶活下降更明显,表明接种固氮菌和木聚糖降解菌对土壤生物固氮具有负激发效应;同时添加0.15 mg·g的葡萄糖和1 mg·g的木聚糖后再接种固氮菌和木聚糖降解菌,土壤固氮酶活低于单独添加碳源的处理（p<0.05）,而高于单独接菌处理,说明土壤固氮酶活性主要受有效碳源总量调控。结论:化肥有机肥配施能显著提高水稻产量和氮素利用率,施用有机肥可以改善土壤理化性质,提高土壤固氮酶活性。添加不同类型的碳源在一定程度上可以提高土壤固氮酶活性,但是不同碳源的生物有效性有所区别,对土壤固氮微生物的影响也大不相同。将不能利用木聚糖的固氮菌T5与能降解木聚糖的M2在木聚糖为唯一碳源底物的条件下混合培养,发现共培养时固氮酶活显

关键词：碳源有效性生物固氮混合培养木聚糖有机肥

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新时代班主任如何创新班级管理教学工作

小学生(下旬刊) 2022年第4期 53-54页

作者：何小慧江苏省高邮市第一小学教育集团府前街校区

小学时期是学生成长和发展的起步阶段，对学生未来的发展有着至关重要的作用。在这一阶段的教学中，教师不但要为学生传授文化知识，更要通过班级管理帮助学生养成良好的学习习惯，掌握更多的学科技能。班主任作为一个特殊的教育群体，... 详细信息

小学时期是学生成长和发展的起步阶段，对学生未来的发展有着至关重要的作用。在这一阶段的教学中，教师不但要为学生传授文化知识，更要通过班级管理帮助学生养成良好的学习习惯，掌握更多的学科技能。班主任作为一个特殊的教育群体，要扮演好自身的角色，承担起教育管理职责。这就需要从自身出发更新教育理念，提高管理素质，加快创新型工作及管理方式的应用，确保教学工作紧跟时代发展的步伐，有目的、有计划地加强对学生群体的培育，提高班集体的凝聚力，推动全体学生的均衡发展。基于此，本文从尊重学生主体地位、突出班级管理的民主化，搭建家校合作桥梁、突出班级管理的合作化，完善班级规章制度、突出班级管理的制度化，组织多元活动、突出班级管理的丰富化，发挥客户端作用、突出班级管理现代化几个层面论述小学班主任创新班级管理工作的对策。

关键词：小学阶段班主任班级管理创新性

孩子出现心理问题,谁之错——一位患儿妈妈的反思

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健康 2022年第7期 34-36页

作者：何小慧张雪倩北京回龙观医院

晚樱开放的季节,我陪着孩子来到北京回龙观医院的儿童心理病房住院治疗。在这之前的近两年时间里,我和孩子一起经历了病痛的折磨和康复的艰辛,伴着时不时跌宕的心绪,熬过了一个又一个希望和沮丧的交错。当走过这样的历程,我深刻感受到,... 详细信息

晚樱开放的季节,我陪着孩子来到北京回龙观医院的儿童心理病房住院治疗。在这之前的近两年时间里,我和孩子一起经历了病痛的折磨和康复的艰辛,伴着时不时跌宕的心绪,熬过了一个又一个希望和沮丧的交错。当走过这样的历程,我深刻感受到,孩子有时比我更痛苦,但也比我更勇敢。我感动于他小小身躯里的顽强,如一棵风雨袭击过的小树苗在拼命地努力生长。

关键词：北京回龙观医院小树苗住院治疗孩子

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黄曲霉A5p1脱色类黑精及其机理初探

黄曲霉A5p1脱色类黑精及其机理初探

作者：何小慧广西大学

学位级别：硕士

糖蜜酒精废水是一种难降解的有色污染物,利用微生物对其进行脱色是可行方法之一,本课题组曾经筛选到一株黄曲霉A5p1可有效脱色废水。为进一步弄清楚其脱色机理,本文以糖蜜酒精废水的主要色素成分——类黑精为对象,探讨菌株黄曲霉A5pl的... 详细信息

糖蜜酒精废水是一种难降解的有色污染物,利用微生物对其进行脱色是可行方法之一,本课题组曾经筛选到一株黄曲霉A5p1可有效脱色废水。为进一步弄清楚其脱色机理,本文以糖蜜酒精废水的主要色素成分——类黑精为对象,探讨菌株黄曲霉A5pl的脱色机制,以便更好地提高脱色效率。首先对黄曲霉A5p1脱色类黑精进程中的培养条件进行确定,分别考察了外加碳源、碳源浓度、外加氮源、氮源浓度以及初始pH对脱色的影响,实验结果表明：选用蔗糖作为碳源、NaNO3作为氮源,浓度分别为2.5%和0.2%(w/v),初始pH为6.0的培养基条件下,A5p1对20%的类黑精的脱色率在第8天达到最大的65%。在脱色前期脱色率与细胞干重呈正比,pH维持在5.0---6.0之间。开展菌株黄曲霉A5p1的脱色机理研究,利用灭活菌体对类黑精进行脱色以探讨生物吸附作用,通过提取胞内、胞外粗酶液研究生物降解作用,判定是否存在Lac、MnP和MIP等胞外酶酶系。实验结果表明,A5p1灭活菌对类黑精的吸附脱色可达24.5%,占总脱色率的1/3。生物降解主要以胞内酶为主要脱色酶系;胞外酶中Lac、MnP和MIP均可以检测到酶活力,虽与脱色率没有明显趋势关系但其作用不可排除。过氧化氢产率与脱色率变化趋势一致,推测过氧化氢的氧化作用是主要的脱色机理之一。最后在上述实验基础上,研究产过氧化氢酶之一的葡萄糖氧化酶在脱色进程中的作用,通过添加激活剂NaCl、抑制剂NaHSO3和酶催化产物葡萄糖酸验证葡萄糖氧化酶的作用大小。实验结果显示,无论在有无外加刺激物的条件下,葡萄糖氧化酶均与过氧化氢产率及脱色率的变化趋势一致,说明葡萄糖氧化酶是A5p1产过氧化氢的酶系之一,也是主要的脱色酶之一;但因为三者之间变化程度的不同,推测可能含有其他的产过氧化氢酶系作用。而在马丁培养基中培养的A5p1未检测到葡萄糖氧化酶活力,初步推测可能是因为GOD是由类黑精诱导产生的。根据类黑精机理探讨得出的结论,探讨了糖蜜酒精废水中是否存在葡萄糖氧化酶及相应的脱色作用。结果发现,糖蜜酒精废水脱色体系中也存在葡萄糖氧化酶的作用,酶活力变化趋势也与过氧化氢产率及脱色率的一致。但是脱色率受葡萄糖氧化酶和过氧化氢的影响较类黑精小,可能还存在其他酶系作用。

关键词：类黑精黄曲霉A5p1 H2O2产率葡萄糖氧化酶生物脱色

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类风湿关节炎的六经辨证浅谈

四川中医 2022年第7期40卷 37-42页

作者：邵侠飞何小慧黄丽娟李冬云阳县人民医院中医风湿免疫科重庆云阳404500 漳州市中医院肛肠科福建漳州363000

类风湿性关节炎作为一种慢性疾病,以全身关节疼痛、僵硬、畸形等症状为主要临床表现,目前针对类风湿性关节炎的诊治并未形成统一的认识。而“六经辨证”体系作为辨证论治准则之“尖端”,其可以较好适应类风湿性关节炎各个阶段的病变过程... 详细信息

类风湿性关节炎作为一种慢性疾病,以全身关节疼痛、僵硬、畸形等症状为主要临床表现,目前针对类风湿性关节炎的诊治并未形成统一的认识。而“六经辨证”体系作为辨证论治准则之“尖端”,其可以较好适应类风湿性关节炎各个阶段的病变过程,因此以太阳、阳明、少阳、少阴、太阴、厥阴论治类风湿性关节炎病诊治,为诊治类风湿性关节炎提供了一个较好的治疗思路。

关键词：类风湿性关节炎六经辨证论治病机

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抗肿瘤新药——法乐通

国外医学（肿瘤学分册） 1998年第1期25卷 22-24页

作者：何小慧冯奉仪中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院100021

法乐通为新一代抗雌激素抗肿瘤新药,抗肿瘤作用机制与三苯氧胺(TAM)相似,基础和临床研究显示,其对乳腺癌的疗效相当于或高于TAM。一线治疗绝经后晚期乳腺癌的有效率为50％。毒副反应轻微,主要为消化道反应及抗雌激素反应。尚未发现长期... 详细信息

法乐通为新一代抗雌激素抗肿瘤新药,抗肿瘤作用机制与三苯氧胺(TAM)相似,基础和临床研究显示,其对乳腺癌的疗效相当于或高于TAM。一线治疗绝经后晚期乳腺癌的有效率为50％。毒副反应轻微,主要为消化道反应及抗雌激素反应。尚未发现长期服用TAM所致的肝细胞癌和子宫内膜癌等副作用。

关键词：法乐通乳腺癌药物疗法新药

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杏鲍菇原生质体再生变异菌株的筛选

杏鲍菇原生质体再生变异菌株的筛选

作者：何小慧福建师范大学

学位级别：硕士

本实验以采自福建省福清市火麒麟食用菌技术开发有限公司的杏鲍菇子实体为材料,自行分离出菌丝体作为出发菌株,通过杏鲍菇原生质体的制备与再生得到发生无性突变的菌株。通过单一变量,如酶系的组成、溶壁酶浓度、pH、酶解时间、温度、... 详细信息

本实验以采自福建省福清市火麒麟食用菌技术开发有限公司的杏鲍菇子实体为材料,自行分离出菌丝体作为出发菌株,通过杏鲍菇原生质体的制备与再生得到发生无性突变的菌株。通过单一变量,如酶系的组成、溶壁酶浓度、pH、酶解时间、温度、渗透压稳定剂的浓度以及菌龄对杏鲍菇菌株原生质体的制备条件进优化试验。得到结果为：温度28℃下PDA平板倒置培养菌丝5d,用0.6mol/L的甘露醇作稳压剂,2.0%浓度(V/M)的单一溶壁酶,调节至pH5.5,设置摇床温度30℃、转速50r/min的条件下酶解菌丝2.5h。通过显微镜下多次计数,计算后得到原生质体浓度为6.10×106个/mL。由于原生质体再生是本试验获得变异菌株的关键,所以本试验对杏鲍菇原生质体再生条件进行优化,分别从再生培养基渗透压稳压剂的种类、再生培养基的组成成分和再生培养的温度三方面进行摸索试验,得到的结果为：最适再生渗透压稳定剂为0.6mol/L蔗糖,最适再生培养基为麦芽糖综合-蔗糖高渗培养基(其成分为麦芽糖10g,可溶性淀粉10g,葡萄糖4g,酵母浸粉4g,磷酸二氢钾1g,七水合硫酸镁1g,维生素B11g和0.6mol蔗糖,1000ml去离子水,调至pH5.5),原生质体再生培养温度28℃。初步筛选原生质体再生得到的无性变异菌株,最后选出8株分别编号为R’1-R’8,将这8株菌和原始菌株一起进行拮抗试验、菌丝体日平均生长值测量和抗绿色木霉、青霉以及黑曲霉的试验验。得到结果为：R’1、R’2和R’8均为气生菌丝旺盛菌株;R’5和R’7经过多次传代后,菌落形态相似,和R’6的菌落形态都是中间凸起边缘不规则;R’3、R’4和亲本都能在适当的培养条件下在PDA平板上形成子实体;所有9株菌对绿色木霉均无抵抗能力,对青霉都有较强的抵抗能力,对曲霉的抵抗力因菌株不同而异。

关键词：杏鲍菇原生质体制备再生抗杂能力

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白癜风的治疗进展及导师经验

白癜风的治疗进展及导师经验

作者：何小慧北京中医药大学

学位级别：硕士

本论文主要包括文献综述和导师治疗经验两部分。文献综述：综述一为中医学对白癜风的认识、治疗及研究概况,包括了中医古代文献对白癜风的论述,名老中医对白癜风病因病机的认识、治疗用药特点以及近年来中医治疗白癜风的研究进展。综述... 详细信息

本论文主要包括文献综述和导师治疗经验两部分。文献综述：综述一为中医学对白癜风的认识、治疗及研究概况,包括了中医古代文献对白癜风的论述,名老中医对白癜风病因病机的认识、治疗用药特点以及近年来中医治疗白癜风的研究进展。综述二为西医学关于白癜风病因及治疗的研究状况,也包括了国内外对白癜风病因的最新研究、近年来治疗方面的研究及临床科研成果,综述三为近年来中西医结合治疗白癜风的临床疗效观察及实验研究。经过归纳总结,在每个文献综述后,提出了自己的一些见解和观点,希望得到广大学者及专家的指正。导师经验：通过对蔡念宁老师论文的收集、学习及跟随她门诊抄方求教并收集病例45例,总结了蔡念宁老师治疗白癜风的临证经验及学术特色,从导师对白癜风病因病机、诊断、辨证及处方的经验认识及个人体会进行分述,并附病案加深了解。老师将白癜风辨证分为气血失和,肝肾不足,气滞血瘀三型,但临床上病情复杂,很难将三型截然分开,常常同时具备,以一型为主,常有气滞血瘀的表现,血瘀不通是本病的根本表现。故在治疗上常常三型并用,并注重行气化瘀之药的使用,如川芎、川楝子、青陈皮、苏木等行气理气、活血通经之品,临床上疗效显著。

关键词：白癜风综述治疗经验

海豚保卫战2D游戏在Unity3D下的开发

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电子技术与软件工程 2022年第1期 61-64页

作者：何小慧廖晓芳关韵婷广东外语外贸大学南国商学院广东省广州市510545

本文基于Unity3D软件开发的2D游戏,设计开发出一款小型休闲教育类游戏——海豚保卫战。随着人们生活方式的改变和生活水平的提高,不同年龄阶段的人都越来越注重精神方面的享受,更多的关注游戏带来的精神上的需求满足。该游戏充分展现2D... 详细信息

本文基于Unity3D软件开发的2D游戏,设计开发出一款小型休闲教育类游戏——海豚保卫战。随着人们生活方式的改变和生活水平的提高,不同年龄阶段的人都越来越注重精神方面的享受,更多的关注游戏带来的精神上的需求满足。该游戏充分展现2D游戏画面设计的优越性;同时,游戏的创作,一方面体现娱乐性,减轻各类人群的生活、学习和工作压力,使人生充满乐趣;另一方面,具有益智性与教育性意义,借助教育游戏的特点,将保护海洋生物、保护海洋世界、乃至保护环境的意识传达给玩家,将游戏的沉浸感和教育性结合起来,能够实现游戏形式与教育内容的无缝结合。通过教育游戏,寓教于乐,引发人们对自身行为的反思,促使我们的生活变得更美好。

关键词： Unity3D 2D游戏软件开发系统设计