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端粒酶阴性小鼠肿瘤的诱导及其肿瘤细胞的分离培养

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端粒酶阴性小鼠肿瘤的诱导及其肿瘤细胞的分离培养

作者：何大健昆明理工大学

学位级别：硕士

肿瘤是机体在各种致癌因素作用下,局部组织的某一类（个）细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控,导致其克隆性异常增生而形成的非正常组织。肿瘤是当前世界范围内影响公众健康的主要疾病,其中人类25%的死亡源于肿瘤。据分析,有10～15... 详细信息

肿瘤是机体在各种致癌因素作用下,局部组织的某一类（个）细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控,导致其克隆性异常增生而形成的非正常组织。肿瘤是当前世界范围内影响公众健康的主要疾病,其中人类25%的死亡源于肿瘤。据分析,有10～15%肿瘤通过不激活端粒酶而延长端粒的途径（alternative lengthening of telomeres,ALT）获得永生,并在肿瘤治疗压力下肿瘤细胞容易选择ALT途径逃离死亡。肿瘤干细胞是近年来研究肿瘤发生、发展和转移的热点,目前仅见从端粒酶阳性的肿瘤细胞系中分离出肿瘤干细胞,对于端粒酶阴性肿瘤中是否具有肿瘤干细胞,仍然存在较大的争议。其关键制约因素是没有遗传背景清楚、稳定的端粒酶阴性肿瘤细胞系,限制了探讨端粒酶阴性肿瘤干细胞存在与否,于是建立小鼠端粒酶阴性肿瘤细胞系就成为弄清这一科学问题的重要钥匙。本研究选取了mTR-/-p53-/-、mTR-/-p53+/-和mTR-/-p53+/+三种基因敲除小鼠及野生型小鼠。mTR-/-p53-/小鼠进行自发成瘤,对野生型和mTR-/-p53+/和mTR-/-p53+/+基因型小鼠利用二甲基苯蒽（DMBA）通过灌肺、饲喂、表皮涂抹、腹腔注射、皮下注射的方法诱导其成瘤。通过两种培养法,即Cocktail法和组织块培养法分离培养肿瘤组织,经细胞单克隆形成率和在裸鼠体内成瘤能力证明其致瘤性。结果发现,（1）除了涂抹方法外,其他给药途径均可诱导小鼠成瘤;（2）野生型与mTR-/-p53+/基因型小鼠可在胸腺、脾脏、肝脏、肌肉、肠道部分被诱发出肿瘤,二者在成瘤的类型、成瘤时间上没有明显差异,但mTR-/-p53+/+小鼠未见成瘤;（3）mTR-/-p53-/自发成瘤的比率为20%,其与诱导的成瘤性差异不明显;（4）培养mTR-/-p53+/基因型小鼠诱导肉瘤组织获得贴壁肿瘤细胞系NS-12-Al和TS-12-B2。这两种肿瘤细胞的单克隆形成率分别为13.3%和20%;（5）NS-12-Al和TS-12-B2两株肿瘤细胞系注射入裸鼠皮下验证了其致瘤能力,且证实其移植瘤亦为端粒酶阴性。本论文研究中首次通过药物诱导方法成功获得端粒酶阴性小鼠肿瘤,并培养出端粒酶阴性肿瘤组织细胞系,裸鼠体内成瘤证明其强致瘤性,为下一步研究端粒酶阴性肿瘤干细胞及其特性奠定了重要基础。

关键词：端粒酶 ALT肿瘤诱导 DMBA 单克隆

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通行高能离子对新经典撕裂模的影响

通行高能离子对新经典撕裂模的影响

作者：何大健南华大学

学位级别：硕士

本文分别研究了通行高能离子产生的环向力矩和极化电流对新经典撕裂模稳定性的影响。首先，利用漂移动力论方法，在求解共振产生的作用在磁岛上的环向力矩的过程中，重新考虑了电漂移的作用。结果表明在环向动量平衡方程中v>0的通行高... 详细信息

本文分别研究了通行高能离子产生的环向力矩和极化电流对新经典撕裂模稳定性的影响。首先，利用漂移动力论方法，在求解共振产生的作用在磁岛上的环向力矩的过程中，重新考虑了电漂移的作用。结果表明在环向动量平衡方程中v>0的通行高能离子与v 大,通行高能离子产生的总的环向力矩几乎为零。接下来仅将v>0的通行高能离子所产生的环向力矩带入由环向动量平衡方程和修正的卢瑟福方程所组成的方程组中，数值结果表明：磁岛旋转频率与宽度并不随时间做稳定的周期性振荡。其次，利用漂移动力论方法，考虑了电漂移和磁漂移的作用，得到了通行高能离子产生的极化电流表达式，发现：v>0和v 大时，前者对新经典撕裂模稳定性的影响将变得不可忽略。最后将该极化电流的解析表达式带入饱和磁岛的色散关系中，得到了考虑高能通行离子时的饱和磁岛的阈值宽度，并且发现：v 0的通行高能离子产生的极化电流对新经典撕裂模起不稳定作用，它们产生的总的极化电流对新经典撕裂模起稳定作用。

关键词：通行高能离子新经典撕裂模环向力矩极化电流漂移动力论方法

中缅树鼩三个多潜能基因cDNA片段的克隆和序列分析

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Zoological Research 2013年第2期34卷 127-131页

作者：王彩云马云瀚何大健杨世华昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650500 昆明理工大学医学院云南昆明650500 中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223

该实验从中缅树鼩(Tupaia belangeri)组织中成功克隆Klf4、Sox2和c-Myc基因的部分序列,长度分别为382、612和485bp,分别编码127、204和161个氨基酸。树鼩的Klf4、Sox2和c-Myc序列与人相应序列的相似性分别为89%、98%和89%。将树鼩Klf4、... 详细信息

该实验从中缅树鼩(Tupaia belangeri)组织中成功克隆Klf4、Sox2和c-Myc基因的部分序列,长度分别为382、612和485bp,分别编码127、204和161个氨基酸。树鼩的Klf4、Sox2和c-Myc序列与人相应序列的相似性分别为89%、98%和89%。将树鼩Klf4、Sox2和c-Myc基因分别与其他物种的这3个基因进行系统进化分析,发现Klf4和Sox2基因所构建的系统进化树结构较为一致,但与c-Myc所构建的系统进化树有所不同,表明这些基因在进化上存在差异。Klf4、Sox2和c-Myc基因的克隆为进一步研究其功能奠定了基础。

关键词：树鼩 Klf4 Sox2 c-Myc 序列分析

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乳腺癌干细胞分子特性及其治疗新策略

生命科学 2011年第10期23卷 963-968页

作者：何大健吴长清黄云超杨世华昆明理工大学生命科学与技术学院衰老与肿瘤分子遗传学实验室昆明650224 昆明医学院第三附属医院云南省肿瘤医院胸外科昆明650118

乳腺癌是一种严重影响女性健康甚至危及生命的疾病。环境、饮食习惯、疾病等均有可能诱发人类乳腺细胞癌基因活化或抑癌基因失活,其诱发过程可通过细胞、动物模型所证实。最新研究指出,乳腺癌肿瘤干细胞的分子特性研究为乳腺癌发生、发... 详细信息

乳腺癌是一种严重影响女性健康甚至危及生命的疾病。环境、饮食习惯、疾病等均有可能诱发人类乳腺细胞癌基因活化或抑癌基因失活,其诱发过程可通过细胞、动物模型所证实。最新研究指出,乳腺癌肿瘤干细胞的分子特性研究为乳腺癌发生、发展的认识提供了重要的佐证。另外,MicroRNAs在乳腺癌中表现促进或抑制瘤细胞生长与分化。这些研究的深入开展将为乳腺癌的防治提供新思路。

关键词：乳腺癌 ER 肿瘤干细胞 miRNA 分子标记

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乳腺癌肿瘤干细胞的研究进展

生物技术通报 2011年第9期27卷 27-31页

作者：何大健吴长清杨世华昆明理工大学生命科学学院昆明650224

干细胞(stem cell,SC)是一类具有自我更新、多向分化潜能的特殊细胞群体。而肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)不仅具备了干细胞方面的特征,同时还有其自身特殊性。乳腺癌中肿瘤干细胞的发现为乳腺癌的治疗提供了创新性策略。近年来,有... 详细信息

干细胞(stem cell,SC)是一类具有自我更新、多向分化潜能的特殊细胞群体。而肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)不仅具备了干细胞方面的特征,同时还有其自身特殊性。乳腺癌中肿瘤干细胞的发现为乳腺癌的治疗提供了创新性策略。近年来,有关乳腺癌肿瘤干细胞的筛选标记和方法以及信号转导通路方面的研究颇多,但其中也不乏争议。就乳腺癌干细胞研究的最新进展作一综述。

关键词：乳腺癌肿瘤干细胞分子标记信号通路

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深度学习在心力衰竭检测中的应用综述

计算机科学与探索 2025年第1期 65-78页

作者：王永威魏德健曹慧姜良山东中医药大学智能与信息工程学院

随着生物医学技术的发展，利用生物信号进行心力衰竭的早期诊断已成为提高患者生存率和降低治疗成本的关键策略。在此背景下，深度学习技术的迅猛发展为心力衰竭检测开辟了新路径。系统地综述了深度学习在心力衰竭检测中的最新进展和应... 详细信息

随着生物医学技术的发展，利用生物信号进行心力衰竭的早期诊断已成为提高患者生存率和降低治疗成本的关键策略。在此背景下，深度学习技术的迅猛发展为心力衰竭检测开辟了新路径。系统地综述了深度学习在心力衰竭检测中的最新进展和应用。概述了心力衰竭检测涉及的主要生物医学信号和公开数据集。详细分析了深度学习在心力衰竭诊断领域的应用及其发展，特别是对卷积神经网络和长短期记忆网络处理心电图、心率变异性、心音等关键生物医学信号的能力进行了深入分析，总结了这些技术的优势、局限性，并对各类模型性能进行了比较。探讨了通过融合多种人工智能技术所构建的混合模型在提升检测精度和模型泛化能力方面的潜力，以及如何利用模型的可解释性来增加检测过程的透明度，提升医生的信任度。最后总结了当前研究存在的不足，并对未来研究方向提出展望，强调了跨学科合作在推动心力衰竭检测技术进步中的重要性。

关键词：心力衰竭生物医学信号深度学习卷积神经网络循环神经网络混合模型

人脐带间充质干细胞抑制脓毒症小鼠肺组织细胞的焦亡

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中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6642-6648页

作者：何长良王炎罗玲刘坚中山市古镇人民医院呼吸与危重症医学科广东省中山市528400 湘潭市中心医院/湖南大学附属医院综合ICU 湖南省湘潭市411100

背景:急性肺损伤是脓毒症患者的常见严重并发症,其发病机制复杂,目前尚无有效的药物治疗方案。人脐带间充质干细胞通过抑制细胞过度焦亡从而改善脓毒症急性肺损伤的作用机制愈发受到重视。目的:探索人脐带间充质干细胞对脓毒症所致急性... 详细信息

背景:急性肺损伤是脓毒症患者的常见严重并发症,其发病机制复杂,目前尚无有效的药物治疗方案。人脐带间充质干细胞通过抑制细胞过度焦亡从而改善脓毒症急性肺损伤的作用机制愈发受到重视。目的:探索人脐带间充质干细胞对脓毒症所致急性肺损伤小鼠肺组织细胞焦亡的影响及机制。方法:48只Balb/c雄性小鼠按随机数字法分为假手术组、模型组、治疗组(n=16)。模型组、治疗组行盲肠结扎穿孔建立脓毒症所致急性肺损伤模型,假手术组仅开腹后缝合。治疗组术后6 h尾静脉注射200μL人脐带间充质干细胞悬液(5×105个细胞),模型组及假手术组术后6 h尾静脉注射200μL生理盐水。术后28 h,各组随机取5只小鼠予以尾静脉注射伊文思蓝检测肺血管通透性;收集各组剩余小鼠肺泡灌洗液和肺组织,ELISA检测肺泡灌洗液中白细胞介素1β、白细胞介素18水平,计数肺泡灌洗液中细胞总数及巨噬细胞数;苏木精-伊红染色观察肺组织病理学形态,TUNEL染色观察肺组织细胞焦亡情况,RT-PCR、Western blot检测肺组织中Toll样受体4、GSDMD及Caspase-11的mRNA和蛋白表达。结果与结论:与模型组相比,治疗组术后28 h肺血管通透性显著下降(P<0.05),肺泡灌洗液中白细胞介素1β、白细胞介素18水平降低(P<0.05),细胞总数及巨噬细胞数降低(P<0.05),肺损伤程度减轻,肺组织细胞焦亡指数降低(P<0.05),肺组织Toll样受体4、GSDMD、GSDMD-N及Caspase-11 mRNA及蛋白表达水平均显著下降(P<0.05)。结果表明,人脐带间充质干细胞可能通过抑制Toll样受体4/Caspase-11/GSDMD信号通路活化,改善肺组织细胞焦亡,从而在一定程度上改善脓毒症小鼠肺损伤的严重程度。

关键词：人脐带间充质干细胞 Toll样受体4 Caspase-11 GSDMD 急性肺损伤急性呼吸窘迫综合征细胞焦亡脓毒症工程化干细胞

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玉米免耕播种机振动特性分析与优化

农机化研究 2025年第4期47卷 122-126页

作者：何俊艺何家盼湖南汽车工程职业学院湖南株洲412001

玉米免耕播种机在作业时会产生振动,影响播种机的工作效率和生产质量,故对其振动特性进行分析和优化非常重要。为此,对玉米免耕播种机振动特性进行了分析与优化。首先,通过试验测试和有限元模拟确定了播种机的振动特性,包括自然频率、... 详细信息

玉米免耕播种机在作业时会产生振动,影响播种机的工作效率和生产质量,故对其振动特性进行分析和优化非常重要。为此,对玉米免耕播种机振动特性进行了分析与优化。首先,通过试验测试和有限元模拟确定了播种机的振动特性,包括自然频率、振型等;然后,针对振动特性中存在的问题,采用了多种优化方法(如结构优化、材料优化等),以改善播种机的振动性能;最后,通过试验和仿真模拟验证了优化后的播种机性能。研究结果表明:通过优化设计,可以有效地降低播种机的振动幅值,提高工作效率和生产质量。

关键词：玉米免耕播种机振动特性自然频率振型振幅结构优化

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基于双色荧光法的乳化液流体动压润滑界面影响机理研究

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摩擦学学报 2025年第12期44卷 1662-1672页

作者：吕春风韩素立刘玉健郭峰邵晶薛子煜青岛理工大学机械与汽车工程学院山东青岛 266520 青岛理工大学工业流体节能与污染控制教育部重点实验室山东青岛 266520

利用面接触润滑油膜测量系统，结合双色荧光法，研究流体动压润滑中不同表界面对乳化液成膜机理的影响. 通过对钢块表面涂覆AF (Anti Finger Print)和FAS (Fluorodecyl-trimethoxysilane)进行疏水疏油处理，采用光干涉法测量乳化液流体... 详细信息

利用面接触润滑油膜测量系统，结合双色荧光法，研究流体动压润滑中不同表界面对乳化液成膜机理的影响. 通过对钢块表面涂覆AF (Anti Finger Print)和FAS (Fluorodecyl-trimethoxysilane)进行疏水疏油处理，采用光干涉法测量乳化液流体动压油膜厚度，结果显示乳化液的油膜厚度受到固/液界面润湿性的影响. 具体来说，在充分供油条件下，AF表面的油膜厚度最高，其次是Steel表面，而FAS表面的油膜厚度最低. 运用双色荧光法观察到乳化液的油水两相在竞争吸附行为中存在差异，在固体表面，油相分子优先黏附于固体表面形成有效油膜. 乳化液与不同表面接触时，在AF表界面分离油相与界面所需克服的黏附功最大，Steel表面次之，FAS表面最小，与油膜厚度试验结果相吻合.

关键词：流体动压润滑乳化液双色荧光法光干涉法油膜厚度