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雷替曲塞联合卡培他滨三线化疗转移性结直肠癌临床观察

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江西医药 2024年第8期59卷 729-731,737页

作者：曾纪权王小文曾浩天朱伟何勤思郑舞郑智温群江西省肿瘤医院南昌330029 安福县中医院安福343200 江西省人民医院南昌330006

目的探讨转移性结直肠癌三线化疗采用雷替曲塞联合卡培他滨方案的有效性及安全性,为转移性结直肠癌治疗提供可行的化疗方案。方法回顾性分析本院2018年1月至2023年12月既往已使用了标准的一、二线化疗的转移性结直肠癌患者,采用雷替曲... 详细信息

目的探讨转移性结直肠癌三线化疗采用雷替曲塞联合卡培他滨方案的有效性及安全性,为转移性结直肠癌治疗提供可行的化疗方案。方法回顾性分析本院2018年1月至2023年12月既往已使用了标准的一、二线化疗的转移性结直肠癌患者,采用雷替曲塞联合卡培他滨作为三线方案化疗,分析该方案的疗效和不良反应。结果该方案治疗转移性结直肠癌28例患者,其中5例患者(17.9%)达到了部分缓解,11例患者(39.3%)疾病稳定,12例患者(42.8%)疾病进展,客观缓解率为17.9%,疾病控制率为57.2%。不良反应有白细胞减少(32.1%)、贫血(50.0%)、恶心呕吐(64.3%)及丙氨酸转氨酶升高(39.3%),多数为1~2级。结论雷替曲塞联合卡培他滨可作为转移性结直肠癌三线化疗的可选方案。

关键词：雷替曲塞联合卡培他滨三线化疗转移性结直肠癌

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贝母素乙对人结肠癌HCT-116细胞基因表达谱的影响及其自噬的研究

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贝母素乙对人结肠癌HCT-116细胞基因表达谱的影响及其自噬的研究

作者：何勤思南昌大学

学位级别：硕士

研究背景及目的:结肠癌(colon cancer)是消化系统常见的恶性肿瘤之一,我国结肠癌的发病率逐年上升。结肠癌的治疗一般以手术治疗为主,并配合化学治疗以及靶向治疗,但患者尤其是晚期结肠癌患者的生存及预后不甚理想。中医药在结肠癌的治... 详细信息

研究背景及目的:结肠癌(colon cancer)是消化系统常见的恶性肿瘤之一,我国结肠癌的发病率逐年上升。结肠癌的治疗一般以手术治疗为主,并配合化学治疗以及靶向治疗,但患者尤其是晚期结肠癌患者的生存及预后不甚理想。中医药在结肠癌的治疗中具有一定疗效,可以通过降低结肠癌的复发转移机率,改善患者的生存质量,但临床治疗效果个体差异较大,作用机制仍有待进一步明确。在前期研究中发现,中药提取物贝母素乙(peiminine)在体外实验中能够明显抑制人结肠癌HCT-116细胞生长,因此,本研究拟继续研究贝母素乙对人结肠癌HCT-116细胞基因表达谱的影响,并观察贝母素乙对人结肠癌HCT-116细胞自噬的作用,明确该单体对人结肠癌HCT-116细胞的分子作用靶点和作用机制,为该药物的开发及临床应用提供理论依据。研究方法:1.采用Affymetrix公司的PrimeView?Human Gene Expression Array基因表达谱芯片探究中药提取物贝母素乙对人结肠癌HCT-116细胞基因表达谱的影响。将实验分为贝母素乙组和对照组,分别干预人结肠癌HCT-116细胞后,提取总RNA,随后基因芯片杂交步骤按照北京博奥晶典生物技术有限公司提供的基因表达谱芯片实验操作流程进行,并进行数据处理和分析。2.将稳定表达GFP-LC3的质粒成功转染至人结肠癌HCT-116细胞,用不同浓度(0uM、50uM、100uM、200uM)的贝母素乙作用该细胞,对照组用相同体积的DMSO处理,使用共聚焦显微镜观察自噬现象;将不同处理的贝母素乙作用HCT-116细胞,即5个给药浓度(0 uM,50uM,100uM,200 uM,400uM)和五个给药时长(0小时,4小时,8小时,12小时,24小时),蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测自噬相关蛋白的表达。研究结果:1.筛选出37个差异基因,贝母素乙组和对照组比较,显著上调5个,下调32个。经过GO(Go Ontology)富集分析,差异基因主要集中在生物学过程和分子功能方面,而在细胞组分方面无明显差异;在生物学过程中差异基因主要集中在热生成调控、运动行为调控、尿嘧啶核苷代谢过程、肾上腺素能受体信号通路的调控、脂肪组织代谢的调控和G蛋白偶联受体信号通路的调控;在分子功能方面表现为肾上腺素能受体结合活性和尿嘧啶核苷磷酸化酶活性。经过KEGG富集分析,差异表达基因主要集中在药物代谢酶、嘧啶代谢、酮体合成和降解、维生素B6代谢、核糖体方面。2.在共聚焦显微镜下,可以明显观察到贝母素乙组中多个明亮的绿色荧光斑点聚集成团块状,形成自噬斑,而对照组呈散点状分布,且随着贝母素乙浓度的升高,自噬细胞数量逐渐增多。蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测,与对照组相比,200 uM和400uM的贝母素乙以及200 uM的贝母素乙处理细胞不同时长(4小时,8小时,12小时,24小时),LC3B-II/LC3B-I比值及SQSTM1(p62)均成显著升高的趋势(p<0.05)。结论:从基因层面的结果提示差异表达基因有37个,这些基因的变化均可能是贝母素乙抗肿瘤作用的靶点,主要体现在对细胞增殖、氟尿嘧啶代谢通路的影响、能量代谢、对YY1转录因子的调控四个方面。其中YY1基因的上调,共聚焦显微镜观察到自噬斑,蛋白免疫印迹法检测到自噬蛋白LC3B-II、SQSTM1(p62)的表达,均提示贝母素乙对人结肠癌HCT-116细胞的作用与自噬相关,有利于贝母素乙药理活性的深入研究,为浙贝母抗肿瘤的临床应用提供理论依据。

关键词：贝母素乙结肠癌基因芯片 YY1 自噬

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靶向RAS信号通路的抗肿瘤药物治疗

实用癌症杂志 2016年第7期31卷 1216-1218页

作者：何勤思钟军郑智南昌大学医学院 334000 江西省肿瘤医院 330029

RAS蛋白（KRAS,NRAS,和HRAS）属GTPases蛋白超家族一员,可作为分子开关激动下游RAF蛋白激酶（BRAF,CRAF,和ARAF）。而RAF蛋白激酶中重要的底物是MAPK/ERK激酶（MEK1,MEK2）。MEK激酶只有一个主要的细胞外信号调节激酶（ERK）,因此,使用... 详细信息

RAS蛋白（KRAS,NRAS,和HRAS）属GTPases蛋白超家族一员,可作为分子开关激动下游RAF蛋白激酶（BRAF,CRAF,和ARAF）。而RAF蛋白激酶中重要的底物是MAPK/ERK激酶（MEK1,MEK2）。MEK激酶只有一个主要的细胞外信号调节激酶（ERK）,因此,使用磷酸化的ERK激酶则可鉴别小分子药物是否能抑制RAS/RAF/MEK/ERK通路的信号传导。

关键词：肿瘤 RAS/RAF/MEK信号通路靶向药物治疗

中药提取物贝母素乙对人结肠癌HCT-116细胞基因表达的影响

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中医杂志 2016年第17期57卷 1504-1509页

作者：张喆何勤思吴晨雯陈信义郑智中日友好医院北京市朝阳区樱花东街2号100029 江西省肿瘤医院南昌大学医学院研究生部北京中医药大学东直门医院

目的观察中药提取物贝母素乙对人结肠癌HCT-116细胞的可能作用途径。方法取人结肠癌HCT-116细胞接种于6孔板,每孔1ml共计2000细胞,设对照组和贝母乙素组,每组3个平行标本,贝母素乙组中每孔加入贝母素乙200μg,最终工作浓度200μg/ml,对... 详细信息

目的观察中药提取物贝母素乙对人结肠癌HCT-116细胞的可能作用途径。方法取人结肠癌HCT-116细胞接种于6孔板,每孔1ml共计2000细胞,设对照组和贝母乙素组,每组3个平行标本,贝母素乙组中每孔加入贝母素乙200μg,最终工作浓度200μg/ml,对照组加入等体积二甲基亚砜,药物处理后72 h吸出培养基,进行总RNA提取。应用基因芯片技术检测两组的差异基因表达谱,并对差异基因进行GO、KEGG富集分析和聚类分析。结果共筛选出差异基因37个,其中显著上调基因共5个,其余为下调基因共32个(差异倍数≥2,P<0.05)。GO分析主要影响通路集中在生物学过程中的热生成调控、运动行为调控、尿嘧啶核苷代谢过程、肾上腺素能受体信号通路的调控、脂肪组织代谢的调控和G蛋白偶联受体信号通路的调控;分子功能方面的肾上腺素能受体结合活性和尿嘧啶核苷磷酸化酶活性。KEGG富集分析主要影响通路集中在药物代谢酶、嘧啶代谢、酮体合成和降解、维生素B6代谢、核糖体等方面。聚类分析结果显示,贝母素乙组相对对照组上调基因中RPL和PHLDA1两群联系较为紧密,在下调基因中UPP1与ARRDC3两群联系较为紧密。结论贝母素乙能显著影响结肠癌HCT-116细胞中的嘧啶代谢通路,抑制其细胞增殖,促进其能量代谢。

关键词：结肠癌贝母素乙浙贝母基因表达

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自噬在中医药治疗大肠癌中的作用研究

世界中医药 2016年第9期11卷 1932-1936页

作者：何勤思白桦郑智南昌大学医学部研究生院南昌330029 中国中医科学院广安门医院南区北京102618 江西省肿瘤医院江西省肿瘤转化医学重点实验室南昌330029

大肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一,发病率和病死率逐年上升。目前,大肠癌的治疗多以手术治疗为主,但大多数患者发病时已属晚期,治疗及预后不佳。中医药在防治大肠癌的复发转移,改善患者生存质量方面具有较好的治疗优势,但临床治疗效果个... 详细信息

大肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一,发病率和病死率逐年上升。目前,大肠癌的治疗多以手术治疗为主,但大多数患者发病时已属晚期,治疗及预后不佳。中医药在防治大肠癌的复发转移,改善患者生存质量方面具有较好的治疗优势,但临床治疗效果个体差异较大,作用机制和作用靶点仍有待进一步明确。近年来研究表明,细胞自噬在肿瘤发生、发展中扮演重要角色,也成为目前抗肿瘤治疗的研究热点^([1]),本文对中医药通过自噬作用抗大肠癌的研究进行综述,为中医药防治大肠癌的研究提供依据和参考。

关键词：大肠癌自噬中医药

Peiminine通过调控COX-2/PGE2/EGFR信号通路促进人结肠癌HCT-116细胞凋亡的分子机制

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实用癌症杂志 2021年第6期36卷 871-874页

作者：饶军熊爱华张康梅何勤思郑智江西省肿瘤医院南昌大学附属肿瘤医院330029

目的研究Peiminine调控COX-2/PGE2/EGFR信号通路促使人结肠癌HCT-116细胞凋亡的分子机制。方法基于ELISA法、Real-time qPCR和Western Blot法测定Peiminine处理人结肠癌HCT-116细胞后PGE2、COX-1、COX-2、ERK、P-ERK、P53、P-P53、P38和P-P38含量的变化。结果与对照组(Ctrl)相比,Peiminine处理后细胞内PGE2含量显著降低(P<0.01)。同时利用Real-time qPCR和Western Blot法检测发现Peiminine能够明显降低人结肠癌HCT-116细胞COX-2的含量,IL-6和NF-κB也显著下调而IL-10明显上调。后期的研究发现EGFR信号通路中关键蛋白(ERK、P-ERK、P53、P-P53、P38和P-P38)的表达量经Peiminine处理后均降低,具有统计学差异(P<0.01)。结论Peiminine可以抑制COX-2的表达和PGE2的生成,改善抗肿瘤免疫反应,抑制EGFR信号通路,从而促进肿瘤细胞凋亡,达到抗肿瘤的作用。

关键词：贝母素乙 COX-2/PGE2/EGFR信号通路结肠癌HCT-116细胞凋亡

结直肠癌根治术后癌胚抗原假阳性的表达及临床意义

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江西医药 2019年第12期54卷 1533-1534,1537页

作者：曾纪权郑智何勤思朱伟郝晶郑舞肖凯江西省肿瘤医院南昌330029 江西中医药大学南昌330006

目的探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)术后癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)的假阳性发生率和假阳性升高截止值与肿瘤复发或转移的关系,为国内CEA水平升高的处理提供新的依据。方法回顾性分析本院2011年1月-2015年12月围手术... 详细信息

目的探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)术后癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)的假阳性发生率和假阳性升高截止值与肿瘤复发或转移的关系,为国内CEA水平升高的处理提供新的依据。方法回顾性分析本院2011年1月-2015年12月围手术期CEA正常,接受结直肠癌根治术后1900余例患者,监测CEA水平升高至正常范围以上的病例及数值。分析CEA异常升高与结直肠癌术后的复发或转移之间的关系。结果CEA水平升高至正常范围以上的139例患者。其中34例CEA水平呈假阳性升高,103例呈真阳性提示CRC复发或转移,另有2例真阳性升高表明新的非CRC,而是其它部位的原发恶性肿瘤。在假阳性升高的34例患者中,只有3例(8.8%)的测量值大于15ng/ml,大于20ng/ml的假阳性未出现。结论CEA假阳性的测试结果在5-10ng/ml的范围内是常见的,大于15ng/ml的假阳性结果很少见,CEA水平大于20ng/ml考虑都与癌症的复发或转移有关。

关键词：结直肠癌癌胚抗原假阳性

论建构中国自主法学知识体系的本土资源——以中国古代律学的传承与创新为视角

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华东政法大学学报 2024年第2期27卷 107-120页

作者：何勤华路培欣华东政法大学法律文明史研究院华东政法大学涉外法治研究院上海文史馆华东政法大学法律学院

构建中国自主法学知识体系,不仅需要研习马克思主义法学理论,深入领会习近平法治思想,积极借鉴世界各国法治文明的成果,密切关注当下中国法治建设的实践,也需要传承中华优秀传统法律文化中的本土资源:中国古代律学知识体系。分析“律学... 详细信息

构建中国自主法学知识体系,不仅需要研习马克思主义法学理论,深入领会习近平法治思想,积极借鉴世界各国法治文明的成果,密切关注当下中国法治建设的实践,也需要传承中华优秀传统法律文化中的本土资源:中国古代律学知识体系。分析“律学”一词的丰富内涵,明辨律学体系的各项固有缺陷,吸收中国古代律学知识体系中的基本范畴、研究方法、分支学科和法典(律典)化成果,可以助力中国自主法学知识体系的创造性转化与创新性发展,为人类法治文明的进步和发展作出新的贡献。

关键词：中国自主法学知识体系本土资源律学传承与创新

建构中国自主社科法学知识体系的历史传统探析

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学术月刊 2024年第6期56卷 100-111页

作者：张顺何勤华华东政法大学法律学院上海200042 华东政法大学涉外法治研究院上海201620

党的二十大报告指出要加快构建中国自主哲学社会科学学科体系,其重要任务之一就是构建中国自主法学知识体系。而根据法学界近年所达成的共识,在法学学科中,当下主要分成两大形态:法教义学和社科法学。前者所要解决的是法学学科内部的关... 详细信息

党的二十大报告指出要加快构建中国自主哲学社会科学学科体系,其重要任务之一就是构建中国自主法学知识体系。而根据法学界近年所达成的共识,在法学学科中,当下主要分成两大形态:法教义学和社科法学。前者所要解决的是法学学科内部的关系,主要涉及实在法规范的法意阐释、体系构建和顺利实施;后者即社科法学主要解决法学学科的外部关系,研究法学学科与其他相关学科的交叉与融会发展的问题。因此,构建中国自主社科法学知识体系是构建中国法学知识体系的任务之一。而要做到这一点,不仅需要深入研习构建中国自主社科法学知识体系的理论指导、思想渊源、实践成果和域外经验,也需要从中华传统法律文化中发掘优秀的历史传统,汲取中国古代律学及交叉学科知识体系建设中的学术积累和创新经验。

关键词：社科法学知识体系历史传统律学交叉学科创造性转化与创新性发展