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鲑鱼甲病毒病研究进展

水产科学 2014年第10期33卷 662-666页

作者：于力史秀杰郑晓聪何俊强贾鹏兰文升王津津刘荭深圳出入境检验检疫局广东深圳518045

1疾病概述冷水鲑科鱼类价格昂贵,是世界三大养殖鱼类之一,主要分布于欧洲和北美。目前我国的鲑科鱼养殖以虹鳟（Oncorhynchus mykiss）为主,年产量占世界总产量的1%以下,每年需要进口大量的鲑鱼,尤其是大西洋鲑鱼（Salmo salar）,鲑鱼... 详细信息

1疾病概述冷水鲑科鱼类价格昂贵,是世界三大养殖鱼类之一,主要分布于欧洲和北美。目前我国的鲑科鱼养殖以虹鳟（Oncorhynchus mykiss）为主,年产量占世界总产量的1%以下,每年需要进口大量的鲑鱼,尤其是大西洋鲑鱼（Salmo salar）,鲑鱼甲病毒病对于我国的鲑科鱼养殖具有潜在的威胁。

关键词：鲑鱼甲病毒鲑鱼胰腺病检测方法

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鲤春病毒血症病毒核酸适配体的筛选及分析

中国动物检疫 2017年第2期34卷 101-105页

作者：于力王津津卢奕良郑晓聪贾鹏何俊强史秀杰刘莹刘荭深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心广东深圳518045 深圳大学生命与海洋科学学院广东深圳518060

核酸适配体(Aptamer)是一类单链短DNA或RNA片段,具有一定的空间结构,对特定靶分子具有亲和力。本研究采用指数富集配体系统进化技术(SELEX),首次筛选出针对鲤春病毒血症病毒(SVCV)的核酸适配体A2和A15,经过荧光PCR、凝胶阻滞和病毒中和... 详细信息

核酸适配体(Aptamer)是一类单链短DNA或RNA片段,具有一定的空间结构,对特定靶分子具有亲和力。本研究采用指数富集配体系统进化技术(SELEX),首次筛选出针对鲤春病毒血症病毒(SVCV)的核酸适配体A2和A15,经过荧光PCR、凝胶阻滞和病毒中和实验,证明了其对SVCV具有结合力和抑制作用,在该病的检测和防治方面具有良好的前景。

关键词：核酸适配体指数富集配体系统进化技术鲤春病毒血症病毒病毒抑制

云南锦鲤养殖场鲤浮肿病毒的鉴定及基因型分析

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病毒学报 2017年第6期33卷 905-913页

作者：温智清刘莹唐绍林王飞王津津史秀杰于力郑晓聪何俊强兰文升贾鹏刘荭深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心深圳518045 深圳市检验检疫科学研究院深圳518001 广州利洋水产科技股份有限公司广州510510 河南省水产技术推广站郑州450008

锦鲤睡眠病(Koi sleepy disease,KSD)是一种由鲤浮肿病毒(Carp edema virus,CEV)引起鲤科鱼类死亡的病毒性传染病,已经对世界鲤科鱼类养殖业造成危害。2016年,中国云南某锦鲤养殖场养殖的锦鲤出现以体表出血、眼睛凹陷、沉于池底昏睡为... 详细信息

锦鲤睡眠病(Koi sleepy disease,KSD)是一种由鲤浮肿病毒(Carp edema virus,CEV)引起鲤科鱼类死亡的病毒性传染病,已经对世界鲤科鱼类养殖业造成危害。2016年,中国云南某锦鲤养殖场养殖的锦鲤出现以体表出血、眼睛凹陷、沉于池底昏睡为主要临床症状的疾病,发病水温为11℃~20℃,累计死亡率30%~50%。从该养殖场不同池塘采集两个样品,使用nested PCR和real-time PCR方法进行实验室诊断。结果表明,两个样品CEV检测结果均为阳性,发病锦鲤鳃和肾脏CEV病毒载量为250.02~1 332.94拷贝/250ng,鳃中CEV病毒载量约为肾脏的6~7倍。在排除寄生虫、细菌、SVCV和KHV感染后,推测CEV可能是引起此次云南锦鲤场发生疫情的病原,但还需回归感染实验做进一步验证。基于CEV P4a基因的遗传进化分析结果表明,此次从云南发病锦鲤检出的两个CEV毒株均属于IIa基因型,且与英国(R083株)和日本CEV毒株(CyPP-3)的遗传进化关系最近。

关键词：锦鲤睡眠病(KSD) 鲤浮肿病毒(CEV) 云南基因型

鱼病毒性神经坏死病病毒(VNNV)不同基因型鉴别方法的建立及在VNN检疫和监测中的应用

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水产学报 2004年第6期28卷 695-702页

作者：刘荭史秀杰高隆英何俊强江育林陈焕春华中农业大学动物医学院动物病毒室深圳出入境检验检疫局动植食中心水生动物病重点实验室华中农业大学动物医学院动物病毒室湖北武汉　430070深圳出入境检验检疫局动植食中心水生动物病重点实验室广东深圳　518001

从GenBank中查找出乙型野田村病毒组中海水鱼类各病毒的序列,并用Sequencher多重序列比较软件将其分到条纹神经坏死病毒(stripedjacknervousnecrosisvirus,SJNNV)组、条纹星鲽神经坏死病毒(barfinfloundernervousnecrosisvirus,BFNNV)组、红点石斑鱼神经坏死病毒(redspottedgroupernervousnecrosisvirus,RGNNV)组和虎斑东方神经坏死病毒(tigerpuffernervousnecrosisvirus,TPNNV)组4个基因型的组别中。用DNAsis序列比较软件比较同一基因型各基因序列之间的同源性,均在85%以上;不同基因型之间序列的同源性,均在66%以下。结合Premier引物设计软件和Sequencher序列多重比较软件,设计了4对引物,采用逆转录聚合酶链式反应(RT PCR)来鉴别这4个不同的基因型。对从深圳口岸进境的产地为台湾的海水鱼苗和广东、福建两省养殖的主要海水鱼类进行检疫和监测,结果在进境的海水鱼苗中检出有RGNNV基因型的VNNV,在福建和广东省养殖的石斑鱼成鱼和鱼苗的病鱼体内均检测到RGNNV基因型的VNNV,对上述扩增产物基因序列进行比较,相似性均在96.5%以上,推导出的氨基酸序列与玛拉巴石斑鱼神经坏死病毒(MNNV)序列相似性均为100%。

关键词：病毒性神经坏死病病毒基因型鉴别

真鲷虹彩病毒实时定量PCR检测方法的建立与应用

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渔业科学进展 2011年第2期32卷 111-116页

作者：赵玉然谭乐义刘荭赵巍梁成珠史秀杰徐彪朱来华何俊强岳志芹山东出入境检验检疫局技术中心青岛266002 深圳出入境检验检疫局水生动物疫病国家重点实验室 518010

以真鲷虹彩病毒(Red-sea breamiridovirus,RSIV)主要衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)的基因保守片段为靶序列,利用Pri mer Express3.0软件设计定量PCR引物,建立了RSIV的SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测方法。将RSIV MCP基因连接pMD18-T载体,构建重组质粒,经过梯度稀释后作为标准品,根据标准品拷贝数(X)与Ct值的关系绘制了标准曲线,为Ct=-3.1841gX+40.270,相关系数R2=0.9969。熔解曲线分析表明,定量PCR产物的Tm值为82.5℃。该方法的检测限为2.20×102拷贝/反应,对流行性造血器官坏死病毒、淋巴囊肿病毒、蛙病毒3、甲鱼虹彩病毒都没有扩增反应,具有特异性。利用该方法对84批海水鱼类(石鲽、大菱鲆、鲈鱼)进行检测,其中5批鱼样品感染RSIV,并利用标准曲线对病毒含量进行了定量分析。

关键词：真鲷虹彩病毒实时定量PCR 衣壳蛋白基因 SYBR GreenⅠ

水生动物中分离的副溶血性弧菌菌株分子分型研究

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中国动物检疫 2012年第6期29卷 47-53,63页

作者：史秀杰郑晓聪阮周曦贾鹏何俊强王津津兰文升杨锦舜刘荭深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心广东深圳518045

本研究通过采用核糖体分型RT、脉冲场凝胶电泳PFGE、多位点序列分型MLST三种方法,对从水生动物中分离到的59株副溶血性弧菌进行分子分型研究。结果将59株副溶血性弧菌分为43个RT型,9个大的聚类群,DI为0.9754;51个PFGE型,13个大的聚类群... 详细信息

本研究通过采用核糖体分型RT、脉冲场凝胶电泳PFGE、多位点序列分型MLST三种方法,对从水生动物中分离到的59株副溶血性弧菌进行分子分型研究。结果将59株副溶血性弧菌分为43个RT型,9个大的聚类群,DI为0.9754;51个PFGE型,13个大的聚类群,DI为0.9988;53个ST型,包括107个新的等位基因、46个新的ST型,DI为0.9982。结果显示PFGE的分辨力最高,MLST较PFGE稍低,RT的分辨力最低。总体来看59株副溶血性弧菌菌株间亲缘关系较远,从同一年份、同一地区、同类样品中分离到的菌株被分为不同的型,表现出较大的遗传多样性。

关键词：副溶血性弧菌核糖体分型脉冲场凝胶电泳多位点序列分型

GASA-SVM改进算法及其在柴油机供油系统故障诊断中的应用

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西南科技大学学报 2011年第2期26卷 44-48页

作者：何俊强李建勇姜涛涛代勤芳唐超重庆通信学院控制工程重点实验室重庆通信学院电力工程系重庆通信学院政治部中国人民解放军78088部队

针对目前支持向量机(SVM)参数选择的盲目性,结合遗传算法GA的并行搜索和模拟退火算法SA的概率突跳特性,提出一种改进的基于遗传退火算法(GASA)混合策略优化支持向量机惩罚函数和核函数参数的GASA-SVM算法。利用柴油机供油系统油压波形... 详细信息

针对目前支持向量机(SVM)参数选择的盲目性,结合遗传算法GA的并行搜索和模拟退火算法SA的概率突跳特性,提出一种改进的基于遗传退火算法(GASA)混合策略优化支持向量机惩罚函数和核函数参数的GASA-SVM算法。利用柴油机供油系统油压波形的实测数据,归一化处理后作为诊断模型的特征值,建立了基于GASA-SVM的柴油机供油系统故障诊断模型。通过与BP神经网络、RBF神经网络、SVM和GA-SVM故障诊断模型比较表明:应用GASA-SVM建立的故障诊断模型在故障识别准确性上优于其它网络模型,能够有效进行柴油机供油系统的故障诊断。

关键词：遗传退火算法(GASA) 支持向量机(SVM) 供油系统故障诊断

基于DE优化SVR的锂离子电池剩余容量预测

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重庆理工大学学报（自然科学） 2011年第3期25卷 92-96页

作者：唐超曹龙汉赵泽鑫何俊强吴珍毅重庆通信学院控制工程重点实验室重庆400035 煤炭科学研究总院重庆研究院重庆400039

在分析了支持向量机回归算法(SVR)对剩余容量模型非线性回归基础上,针对SVR参数选择难的问题,提出了一种基于微分进化(DE)算法优化SVR的算法。DE具有强劲的全局搜索能力,将其应用到SVR的参数寻优当中去,可以寻找到SVR的最优参数。将该... 详细信息

在分析了支持向量机回归算法(SVR)对剩余容量模型非线性回归基础上,针对SVR参数选择难的问题,提出了一种基于微分进化(DE)算法优化SVR的算法。DE具有强劲的全局搜索能力,将其应用到SVR的参数寻优当中去,可以寻找到SVR的最优参数。将该方法应用于锂离子电池剩余容量的预测模型,并将生成的模型和基于粒子群优化(PSO)算法的SVR锂离子电池容量预测模型比较。仿真结果表明,基于DE优化的SVR剩余容量预测的精准度高于PSO优化的SVR剩余容量预测精准度,为锂离子电池容量预测提供了一种新的方法。

关键词：支持向量机回归微分进化算法粒子群优化算法参数选择锂离子电池容量预测

泰国输华斑节对虾传染性皮下和造血器官坏死病毒的检测与分析

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中国动物检疫 2016年第6期33卷 83-85,89页

作者：于力刘莹郑晓聪王津津贾鹏何俊强刘荭深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心广东深圳518045

为研究进口斑节对虾传染性皮下和造血器官坏死病毒(Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus,IHHNV)的风险,本文采用了世界动物卫生组织(OIE)2015版手册中推荐的PCR方法,对2015年从泰国输华的329批次斑节对虾进行了IHHN... 详细信息

为研究进口斑节对虾传染性皮下和造血器官坏死病毒(Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus,IHHNV)的风险,本文采用了世界动物卫生组织(OIE)2015版手册中推荐的PCR方法,对2015年从泰国输华的329批次斑节对虾进行了IHHNV检测分析。结果发现,其阳性率高达36.8%,且主要是感染1型和2型,以及风险不明的未知型。因此,来自泰国的斑节对虾具有较高的IHHNV传入风险,应加强针对IHHNV的进口监测,减少其对我国对虾养殖的影响。

关键词：传染性皮下和造血器官坏死病毒斑节对虾未知基因型风险