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不同术前肠道准备对结直肠癌术后肠道菌群变化的影响

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不同术前肠道准备对结直肠癌术后肠道菌群变化的影响

作者：伍颖君南方医科大学

学位级别：硕士

人体的胃肠道是数百亿微生物滋生繁衍的家园,隐匿生存着超过500种细菌种群。结肠的内容物中可含有细菌约1011～1012cfu/g,其中绝大多数是专性厌氧菌,约占总数的99%以上,占少数的是兼性厌氧菌、专性需氧菌及微氧菌。当肠道微生态处于健... 详细信息

人体的胃肠道是数百亿微生物滋生繁衍的家园,隐匿生存着超过500种细菌种群。结肠的内容物中可含有细菌约1011～1012cfu/g,其中绝大多数是专性厌氧菌,约占总数的99%以上,占少数的是兼性厌氧菌、专性需氧菌及微氧菌。当肠道微生态处于健康平衡的状态下,以双歧杆菌、乳酸杆菌为主的益生菌群犹如肠道的士兵,定植于整个肠黏膜上皮表面,构成了一道天然的生物屏障,保护人体免受细菌、寄生虫、病毒、真菌等病原体的侵袭。益生菌还可以产生一些类似抗菌素的物质,溶解病毒或致病菌,降低肠腔内表面的pH值,抵抗各种病原体的定植。如果益生菌生长受抑,生物屏障的定植抗力下降,此时在肠腔中游走的致病菌(大肠杆菌、肠球菌、葡萄球菌等)便可黏附于肠黏膜,继而通过受损的肠黏膜上皮入血,造成肠道菌群易位(bacteria translocation,BT)或导致各种慢性疾病甚至癌症。肠道菌群失调(dysbacteriosis)是诱发肠源性感染的常见病因之一。手术对机体的创伤打击、围手术期抗生素的应用、术后的禁食禁水以及长期的肠外营养支持均可造成肠黏膜屏障功能的损伤,造成肠道微生态环境紊乱,导致肠道菌群失调,使得肠道腐生菌大量繁殖,而益生菌的生长则明显受到抑制。若此时不给予相应的干预,势必导致肠道菌群及内毒素易位,菌群易位在原发病的基础上可对机体造成二次打击,引起肠源性全身感染,促发全身性炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome, SIRS),甚至发生多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome, MODS)。择期手术的结直肠癌患者术前接受肠道准备,主要目的是为了减少术中的污染与降低术后吻合口漏的发生。传统的肠道准备方案要求患者由入院当天开始即给予抗生素抑制肠道细菌生长,通过口服缓泻剂和反复间断地灌肠以促进肠内容物排出,从而达到肠道相对清洁的目的。然而抗生素尤其是广谱抗生素的应用可抑制肠内大部分菌群的生长,使肠道菌群的正常格局被破坏,引起菌群失调或二重感染。此外,反复的机械灌肠可导致脱水、电解质紊乱、营养不良,降低患者对手术的耐受性,高压逆流灌肠反复刺激肿瘤可增加其转移机会[3];肠壁充血水肿、肠黏膜上皮细胞受损,可干扰肠道正常菌群生长,让条件致病菌有机会大量繁殖并穿越屏障,诱发肠源性全身感染。目前,已有大量的研究证明,肠道菌群失调参与许多消化道疾病的发生发展过程,结直肠癌患者术后出现顽固性腹泻、不明原因的低热以及复杂性腹腔感染等,可能与术前的抗生素应用和肠黏膜屏障的机械性损伤密切相关。本研究拟通过研究传统与快速肠道准备方法对肠道微生态的影响,分析肠道菌群失调的影响因素及其与术后发生肠源性感染的关系,进而指导我们在临床上对大肠癌患者围手术期的处理,避免术后出现严重的菌群失调。 [材料和方法] 一、一般资料以2010年3月至2011年3月本中心的60例大肠癌患者为研究对象,纳入标准：①病理确诊为大肠癌;②患者一般情况良好,未合并有严重的心、肺、肾、肝功能障碍及代谢性疾病,未发现有远处转移病灶,③术前不伴有严重的肠梗阻、肠穿孔,未接受过放、化疗。根据不同的术前肠道准备方案随机分成2组,其中实验组行1天肠道准备,对照组行3天的肠道准备。对照组27例,男性患者13例,女性患者14例;平均年龄54.96±1.87岁;手术方式包括右半结肠切除术10例,左半结肠切除术4例,乙状结肠切除术4例,Dixon’s术6例,Mile’s术3例;按TNM分期：Ⅰ期5例,Ⅱ期12例,Ⅲ期10例。平均手术时间2.12±0.09小时;平均失血量109.63±8.05ml。试验组33例,男性患者19例,女性患者14例;平均年龄58.21±1.36岁;手术方式包括右半结肠切除术11例,左半结肠切除术4例,乙状结肠切除术6例,Dixon’s术5例,Mile’s术4例,Hartmann术3例;按TNM分期：Ⅰ期8例,Ⅱ期8例,Ⅲ期17例。平均手术时间2.08±0.08小时;平均失血量110.91±7.86ml。两组患者性别、年龄、手术方式、手术时间、失血量及TNM肿瘤分期均无明显差异。本研究经医院伦理委员会批准,并获得患者或家属的知情同意。二、术前肠道准备方案对照组：①术前3d以半流食为主,手术前1d改为全流食;②术前3d口服庆大霉素8wu+甲硝唑0.4g,3次/d;③入院后即开始应用乳果糖缓泻剂30ml/d;④手术前1d20：00和术晨6：00分别行清洁灌肠。实验组：①术前3d以半流食为主,手术前1d改为全流食;②术前1d口服庆大霉素8wu+甲硝唑0.4g,3次/日;③术前1d18：00口服磷酸钠溶液90g：④术前不进行机械性肠道灌洗。麻醉诱导期间(术前30min左右),两组患者均静脉

关键词：结直肠肿瘤肠道准备肠道菌群感染并发症

肺腺癌中MACC1表达及其与肿瘤微环境免疫细胞浸润的相关性研究

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肺腺癌中MACC1表达及其与肿瘤微环境免疫细胞浸润的相关性研究

作者：伍颖君南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景肺癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,其中肺腺癌是最多见的病理类型。近年来,抗PD-1/PD-L1类免疫治疗的临床应用为特定肺癌患者群体带来了更好的生存获益。这类免疫治疗的原理是找到肿瘤微环境（Tumor microenvironment,TME... 详细信息

研究背景肺癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,其中肺腺癌是最多见的病理类型。近年来,抗PD-1/PD-L1类免疫治疗的临床应用为特定肺癌患者群体带来了更好的生存获益。这类免疫治疗的原理是找到肿瘤微环境（Tumor microenvironment,TME）中抑制免疫的通路并加以阻断,从而恢复机体正常的抗肿瘤免疫反应,达到治疗肿瘤的目的。大多数实体肿瘤的TME中存在免疫细胞浸润,细胞类型主要包括肿瘤相关淋巴细胞如T淋巴细胞、B淋巴细胞,以及肿瘤相关巨噬细胞和自然杀伤细胞等。肿瘤微环境中浸润的免疫细胞的类型、数量、定位与肿瘤的免疫状态关系密切,可在肿瘤发展过程中起关键作用,并影响肿瘤患者的免疫治疗策略和疗效,因此有必要进一步研究肺癌的肿瘤微环境中免疫细胞浸润水平以及其功能的调控因素。MA CC1（metastasis-associated in colon cancer 1）被证实在结肠癌、肝癌等多种肿瘤中起促癌作用,并且对肺癌预后有一定预测意义。MACC1高表达的肺癌亚组具有更高的术后复发率以及较差的生存预后。肺腺癌MACC1的表达水平是否影响其肿瘤微环境中的免疫细胞浸润,目前尚未明确。目的本文分别从MACC1与临床病理特征以及肿瘤微环境的相关性着手,分析MACC1与肺腺癌临床病理特征的相关性,并探讨MACC1表达水平是否影响肺腺癌肿瘤微环境中各种免疫细胞浸润的水平。方法通过TCGA数据库分析MACC1在多种肿瘤中的表达情况:下载肺腺癌基因表达谱数据及对应的临床资料和生存数据,分析MACC1在肺腺癌组织中的表达情况及临床相关性。从TCGA下载肺腺癌的基因表达数据,分为MACC1高表达和低表达的亚组,通过ImmuneCell AI在线工具,对18种T细胞亚型和6种其他类型免疫细胞（B细胞、NK细胞、单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和DC细胞）的浸润水平进行评分,分析MACC1表达水平对各种免疫细胞浸润的影响。收集手术切除的肺腺癌组织及配对的正常肺组织,通过免疫组化分析组织中的MACC1和CD8a表达,并收集对应患者的人口学资料、病理诊断和分期,分析MACC1在肺腺癌组织中的表达情况,以及MACC1表达与临床病理特征、肿瘤微环境中CD8+T细胞浸润水平的相关性。结果（1）TCGA分析发现:在多种肿瘤中,MACC1表达明显上调（P＜0.05）,MACC1表达水平高的亚组具有更短的总生存期（P＜0.05）。肺腺癌及其配对正常组织的基因表达数据也提示MACC1在肺腺癌中表达上调。（2）免疫组化分析发现:与配对的正常肺组织相比,MACC1在肺腺癌组织中的表达量明显增加（P＜0.05）;MACC1表达强度与患者的肿瘤分期及淋巴结转移呈正相关。（3）免疫细胞浸润分析发现:MACC1高表达的肺腺癌微环境中,CD8+T淋巴细胞、NK细胞、细胞毒性T细胞、Th1细胞、中性粒细胞浸润减少,而CD4+T淋巴细胞、DC细胞增多。免疫组化进一步证实:MACC1与肺腺癌肿瘤微环境中的CD8+T细胞浸润水平呈负相关,即肺癌组织中MACC1表达越高,肿瘤微环境中的CD8+T细胞浸润越少。结论（1）MACC1在大多数肿瘤中表达上调,且高表达水平与不良预后相关。（2）MACC1在肺腺癌中表达明显上调;MACC1表达强度与患者的肿瘤分期及淋巴结转移呈正相关;（3）MACC1的表达影响免疫细胞浸润水平,可能通过抑制抗肿瘤免疫反应,从而促进肿瘤进展。

关键词：肺腺癌 TGCA MACC1 肿瘤微环境免疫细胞浸润

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西妥昔单抗联合化疗对晚期结肠癌的治疗评价

药品评价 2019年第14期16卷 30-32页

作者：伍颖君广东省江门市中心医院胃肠外科

目的:观察西妥昔单抗联合化疗治疗晚期结肠癌的临床疗效。方法:选取2015年4月至2017年3月收治的86例晚期结肠癌患者按随机数字表法分成观察组和对照组,每组各43例。对照组患者行化疗,观察组在对照组的基础上给予西妥昔单抗。对比两组治... 详细信息

目的:观察西妥昔单抗联合化疗治疗晚期结肠癌的临床疗效。方法:选取2015年4月至2017年3月收治的86例晚期结肠癌患者按随机数字表法分成观察组和对照组,每组各43例。对照组患者行化疗,观察组在对照组的基础上给予西妥昔单抗。对比两组治疗效果、临床受益率、毒副反应发生率及治疗前、后生活质量。结果:观察组治疗总有效率及临床受益率均明显高于对照组(P0.05);两组治疗前生活质量得分无明显差别(P>0.05);观察组治疗后生活质量得分明显高于对照组(P<0.05)。结论:西妥昔单抗联合化疗能有效提高晚期结肠癌的治疗效果,并改善生活质量。

关键词：西妥昔单抗化疗晚期结肠癌

青年乳腺癌与老年乳腺癌患者分子分型及临床病理特征的对比分析

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实用临床医学（江西） 2018年第2期19卷 35-37页

作者：伍颖君李超江门市中心医院普外科广东江门529000

目的比较青年乳腺癌与老年乳腺癌患者的分子分型及临床病理特征。方法收集120例女性乳腺癌患者,选取其中年龄≤35岁的患者55例纳入青年组,将年龄≥60岁的同期乳腺癌患者65例纳入老年组。回顾性分析2组患者的病理类型、病理分期及分子分... 详细信息

目的比较青年乳腺癌与老年乳腺癌患者的分子分型及临床病理特征。方法收集120例女性乳腺癌患者,选取其中年龄≤35岁的患者55例纳入青年组,将年龄≥60岁的同期乳腺癌患者65例纳入老年组。回顾性分析2组患者的病理类型、病理分期及分子分型的特点。结果青年组与老年组乳腺癌患者分子分型总体分布不同,差异有统计学意义(P2cm的所占比例高,临床分期晚,病理分级高,容易有淋巴结转移差异均有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。结论青年乳腺癌较老年乳腺癌更具有侵袭性,易发生淋巴结转移。青年乳腺癌较老年乳腺癌患者在病理类型、病理分期及分子分型存在明显的差异。

关键词：青年乳腺癌老年乳腺癌分子分型临床病理特征

术前不同肠道准备对结直肠癌术后肠道菌群变化的影响

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中华胃肠外科杂志 2012年第6期15卷 574-577页

作者：伍颖君吴承堂张晓槟区文弢黄鹏南方医科大学南方医院普通外科广州510515

目的比较传统肠道准备与快速肠道准备对结直肠癌患者术后肠道菌群变化的影响。方法前瞻性人组2010年3月至2011年3月间南方医科大学南方医院收治的60例结直肠癌患者，按抓阄的方法随机分成试验组（33例，术前仅行1d的肠道准备）和对照组... 详细信息

目的比较传统肠道准备与快速肠道准备对结直肠癌患者术后肠道菌群变化的影响。方法前瞻性人组2010年3月至2011年3月间南方医科大学南方医院收治的60例结直肠癌患者，按抓阄的方法随机分成试验组（33例，术前仅行1d的肠道准备）和对照组（27例，按传统的3d方案进行肠道准备）。分别于肠道准备前和术后第1次排粪时，留取粪便进行肠道菌群分析，并观察术后肠道菌群紊乱及感染性并发症的发生情况。结果两组患者术后均发生不同程度的肠道菌群失调，表现为双歧杆菌、乳酸杆菌等益生菌种计数较术前明显减少（P〈0．05），且对照组较试验组下降更明显（P〈0．05）；而大肠杆菌、葡萄球菌等致病菌的计数则明显高于术前（P〈0．05），且对照组明显高于试验组（P〈0．05）。试验组术后感染性并发症发生率为9．1％（3／33），明显低于对照组的29．6％（8／27）（P〈0．05）。结论快速肠道准备在一定程度上可减轻术后肠道菌群的紊乱程度，并降低术后感染性并发症的发生率。

关键词：结直肠肿瘤肠道准备肠道菌群感染并发症

特异性miR-221抑制剂对结直肠癌细胞增殖及凋亡的影响

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南方医科大学学报 2011年第4期31卷 674-677页

作者：王伟孙凯吴承堂雷尚通曾俊杰伍颖君李国新南方医科大学南方医院普通外科广东广州510515

目的探讨miR-221在结直肠癌细胞中的表达状况及特异性miR-221抑制剂对癌细胞增殖和凋亡的影响。方法应用实时荧光定量PCR(real-time Q-PCR)检测四种人结肠癌细胞系HT-29、Lovo、SW-480、Caco2中miRNA-221表达状况,并以人脐静脉内皮细胞H... 详细信息

目的探讨miR-221在结直肠癌细胞中的表达状况及特异性miR-221抑制剂对癌细胞增殖和凋亡的影响。方法应用实时荧光定量PCR(real-time Q-PCR)检测四种人结肠癌细胞系HT-29、Lovo、SW-480、Caco2中miRNA-221表达状况,并以人脐静脉内皮细胞HUVEC作为正常对照;设计并合成miR-221、anti-miR-221(微小RNA抑制剂)寡核苷酸,以脂质体转染Caco2细胞系,以Real-time Q-PCR再次检测转染后细胞中miR-221表达状况,并通过噻唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪观察细胞的增殖和凋亡状态。结果与正常细胞相比,4种人结肠癌细胞系中miR-221表达均显著增高,差异具有统计学意义(P<0.01);癌细胞转染anti-miR-221后,G0/G1期细胞比例明显增加,而S期细胞比例显著下降,并可见细胞凋亡的发生(P<0.01)。结论 miR-221特异性抑制剂可通过抑制细胞增殖同时诱导凋亡而抑制结直肠癌细胞生长,提示miR-221作为结直肠癌生物治疗有效靶点有进一步研究价值。

关键词：结直肠癌 miRNA-221 增殖凋亡

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经胸乳入路腔镜甲状腺手术180例体会

腹腔镜外科杂志 2014年第7期19卷 541-543页

作者：王庆涛伍颖君江门市中心医院广东江门529000

目的：总结经胸乳入路腔镜甲状腺手术的技巧及并发症的预防经验。方法：回顾分析2011年6月至2013年8月为180例患者经胸乳入路行腔镜甲状腺切除术的手术过程及并发症发生情况,总结手术并发症的危险因素及预防措施。结果：179例手术获得成... 详细信息

目的：总结经胸乳入路腔镜甲状腺手术的技巧及并发症的预防经验。方法：回顾分析2011年6月至2013年8月为180例患者经胸乳入路行腔镜甲状腺切除术的手术过程及并发症发生情况,总结手术并发症的危险因素及预防措施。结果：179例手术获得成功,1例因术中出血中转开放手术。单发甲状腺腺瘤43例,结节性甲状腺肿116例,原发性甲状腺机能亢进2例,甲状腺癌19例。手术时间平均（105±10）min;术中出血量10-50 ml,平均（15±9.5）ml;术后发生皮下淤血7例、颈前积液12例、颈部及胸前皮肤发紧不适5例、一过性低钙18例、喉上神经损伤9例、暂时性喉返神经损伤13例。结论：掌握手术适应证,具备熟练的腔镜操作技巧,严格遵循腔镜手术操作规范,熟悉甲状腺的解剖结构,是手术成功及减少并发症的关键。

关键词：甲状腺切除术内窥镜检查胸乳入路

差分化细胞群分级系统在结直肠腺癌中的应用价值研究

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循证医学 2022年第6期22卷 350-354,363页

作者：张志发伍颖君彭辉广州中医药大学第二附属医院/广东省中医院病理科广州510120 广东省中医院珠海医院病理科广东珠海519015

背景与目的基于传统肿瘤分化程度的组织学分级(tumor differentiation grade,TDG)系统应用广泛,但存在预后价值不足、构成比分布不均等局限性。基于量化差分化细胞群(poorly differentiated cluster,PDC)的新分级系统具有可重复性和提... 详细信息

背景与目的基于传统肿瘤分化程度的组织学分级(tumor differentiation grade,TDG)系统应用广泛,但存在预后价值不足、构成比分布不均等局限性。基于量化差分化细胞群(poorly differentiated cluster,PDC)的新分级系统具有可重复性和提高预后价值的优势。本研究旨在探讨PDC分级与结直肠腺癌临床病理参数之间的关系,分析新型组织学分级系统在临床应用中的价值。方法回顾性收集2015年1月至2015年12月,在广东省中医院行根治性手术切除的结直肠腺癌标本445例,其中男性237例,女性208例,年龄31~93岁,中位年龄64岁,肿瘤最大直径0.9~9.0 cm,平均最大直径4.7 cm,左半结肠癌155例,右半结肠癌112例,直肠癌178例。按照标准的评估方法对PDC进行计数并分成三级,分析结直肠腺癌各项病理学参数与不同级别PDC之间的关系;按照世界卫生组织(World Health Organization,WHO)的方法将TDG分成二类,比较PDC与TDG两个系统的分布差异,并使用改良的PDC系统(二级)对TDG构成比较大的部分进行再分层分析。结果445例结直肠腺癌,按PDC分级系统,PDC1级为122例(27.4%),PDC2级为126例(28.3%),PDC3级为197例(44.3%),PDC分级与肿瘤浸润深度、淋巴管血管侵犯、淋巴结转移、神经侵犯、远处转移及肿瘤出芽呈正相关(P0.05)。按TDG分级系统,低级别TDG(TDG low,TDG⁃L)和高级别TDG(TDG high,TDG⁃H)的病例分别为365例(82.0%,构成比明显偏大),80例(18.0%),PDC的构成比分布较TDG平均。使用改良的PDC分级系统对365例TDG⁃L进行再分层,改良的PDC分级与TDG⁃L组中的肿瘤浸润深度、淋巴管血管侵犯、淋巴结转移、神经侵犯及肿瘤出芽呈正相关(P<0.05)。结论PDC与结直肠腺癌侵袭性的生物学行为密切相关,基于PDC分级系统对结直肠腺癌进行新的组织学分级是可行的,将为患者提供更多的有价值的预后信息,还可使用PDC将TDG⁃L进行再分层,PDC分级系统可能是比传统组织学分化程度更客观和实用的预后分类参数。

关键词：新型组织学分级系统肿瘤分化程度差分化细胞群结直肠癌

肠息肉样变的炎性假瘤样滤泡树突状细胞肉瘤2例并文献复习

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临床与病理杂志 2023年第2期43卷 416-424页

作者：张志发伍颖君彭辉赵敏广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院)病理科广州510120 广东省中医院珠海医院病理科广东珠海519000

通过对2例以结肠息肉为表现的炎性假瘤样滤泡树突状细胞肉瘤(inflammatory pseudotumor-like follicular dendritic cell sarcoma,IPT-like FDCS)的临床资料、组织学形态、免疫组织化学、原位杂交进行分析,并复习相关文献,探讨IPT-like ... 详细信息

通过对2例以结肠息肉为表现的炎性假瘤样滤泡树突状细胞肉瘤(inflammatory pseudotumor-like follicular dendritic cell sarcoma,IPT-like FDCS)的临床资料、组织学形态、免疫组织化学、原位杂交进行分析,并复习相关文献,探讨IPT-like FDCS的临床病理学特征。病例1,女,50岁;病例2,女,56岁。2例均因粪便潜血试验阳性行肠镜检查时发现肠息肉就诊。镜下肿瘤边界清楚,黏膜表面溃疡,黏膜层和黏膜下层可见由明显的淋细胞和浆细胞浸润而形成的带蒂息肉样病变,肿瘤性的梭形细胞分散于显著的淋巴浆细胞背景中,瘤细胞呈圆形、卵圆形或梭形,细胞质淡染透明,核膜薄,染色质分布均匀,核仁小而清晰。免疫表型:病例1 D2-40阳性。病例2 CD21,CD23、CD35和D2-40均阳性。2例原位杂交Epstein-Barr编码区(Epstein-Barr encoding region,EBER)均阳性。病例1术后随访65个月,病例2术后随访40个月,均预后良好。呈肠息肉样表现的IPT-like FDCS非常罕见。认识本病可避免误诊为其他常见类型的结肠息肉病。EBER和FDC相关免疫组织化学标记在鉴别诊断中起重要作用。

关键词：肠息肉炎性假瘤样滤泡树突状细胞肉瘤原位杂交Epstein-Barr编码区鉴别诊断

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