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计算流体力学在组织工程中的应用进展

中国修复重建外科杂志 2021年第6期35卷 776-780页

作者：唐辉伍津津陆军军医大学大坪医院皮肤科重庆400042

目的综述计算流体力学(computational fluid dynamics,CFD)在组织工程中的应用进展。方法广泛查阅CFD应用于组织工程的相关文献,主要对CFD用于生物反应器设计改良或优化、模拟体外组织再生过程中的流体动力学和细胞生长动力学等方面进... 详细信息

目的综述计算流体力学(computational fluid dynamics,CFD)在组织工程中的应用进展。方法广泛查阅CFD应用于组织工程的相关文献,主要对CFD用于生物反应器设计改良或优化、模拟体外组织再生过程中的流体动力学和细胞生长动力学等方面进行综述。结果 CFD的模拟预测能力可为生物反应器的设计优化和体外组织工程组织培养提供重要的指导作用,且结合实验研究能进一步提高模型预测结果的准确性。结论 CFD作为新兴和有效的研究工具,已在组织工程中展现出独特优势并取得显著进展,但更全面、准确地模拟组织再生全过程仍需进一步研究。

关键词：计算流体力学组织工程组织再生生物反应器应用进展

组织工程皮肤及人脾淋巴细胞植入重度联合免疫缺陷小鼠的研究

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中国修复重建外科杂志 2010年第3期24卷 350-355页

作者：毕建军伍津津张才茂朱堂友鲁元刚第三军医大学大坪医院野战外科研究所皮肤科重庆400042

目的组织工程皮肤已逐渐应用于临床,但其免疫原性仍存在争议。通过重度联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)小鼠重建人免疫系统,观察移植的组织工程皮肤的免疫排斥情况。方法按朱堂友等的方法体外构建组织工程皮肤和... 详细信息

目的组织工程皮肤已逐渐应用于临床,但其免疫原性仍存在争议。通过重度联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)小鼠重建人免疫系统,观察移植的组织工程皮肤的免疫排斥情况。方法按朱堂友等的方法体外构建组织工程皮肤和无细胞真皮基质。取雄性4～6周龄SCID小鼠20只,体重16～17g,随机分为4组(n=5)。A、B、C组于小鼠侧腹部切除1cm×1cm大小全层皮肤后,A组移植组织工程皮肤,B组移植自愿捐赠的人包皮,C组将无细胞真皮基质埋植皮下;D组为正常对照,不作处理。移植术后2周A、B、C组取材行HE染色,观察各移植材料存活情况。并于各组小鼠腹腔注射3×107个人脾淋巴细胞,4周内定期行大体、组织学、免疫组织化学、人IgG免疫荧光染色,观察是否发生免疫排斥反应。结果HE染色示A组组织工程皮肤具有真、表皮双层结构,类似人正常皮肤组织;B组人包皮仍保持人皮肤的正常组织结构;C组无细胞真皮基质位于原位,无明显被降解迹象。植入人脾淋巴细胞后,A、C、D组HE染色未见明显炎性细胞浸润;同时间点B组炎性细胞浸润程度均明显高于其他3组,比较差异有统计学意义(P<0.05)。A组植入人脾淋巴细胞2周后表皮全层细胞抗人角蛋白14单克隆抗体(monoclonal anti-body,mAb)染色阳性,抗人Ⅳ型胶原mAb染色阳性;A、C、D组抗人CD3、CD4、CD8 mAb染色均未见阳性细胞;B组2周后真皮、皮下组织中大量抗人CD3、CD4和CD8 mAb染色阳性细胞。A、C、D组于植入人脾淋巴细胞后人IgG免疫荧光染色均未见阳性结果;B组3周后真皮深部大血管管壁人IgG mAb免疫荧光染色阳性。结论组织工程皮肤免疫原性较弱,植入SCID小鼠后未见明显的免疫排斥反应。

关键词：组织工程皮肤免疫原性重度联合免疫缺陷小鼠免疫排斥

三维培养汗腺腺上皮细胞形成汗腺样结构的初步研究

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中国修复重建外科杂志 2009年第2期23卷 156-160页

作者：周立奉伍津津雷霞路荣鲁元刚唐书谦第三军医大学大坪医院野战外科研究所皮肤科重庆市创伤愈合与组织工程研究所重庆400042

目的探索体外构建人外泌汗腺样结构的方法。方法取自愿捐献的正常腋部全层皮肤,分离培养汗腺腺上皮细胞,倒置相差显微镜下观察。将汗腺腺上皮细胞以2×105个/cm2密度接种至Matrigel凝胶下(A组)、凝胶上(B组)、凝胶中(C组),进行三维立体... 详细信息

目的探索体外构建人外泌汗腺样结构的方法。方法取自愿捐献的正常腋部全层皮肤,分离培养汗腺腺上皮细胞,倒置相差显微镜下观察。将汗腺腺上皮细胞以2×105个/cm2密度接种至Matrigel凝胶下(A组)、凝胶上(B组)、凝胶中(C组),进行三维立体培养,激光扫描共聚焦显微镜、HE染色及免疫组织化学染色观察有无汗腺样结构形成。结果原代汗腺分泌部上皮细胞接种后24 h可见细胞贴壁,贴壁细胞呈梭形,2～3 d后细胞呈多克隆麦粒样生长,14 d后细胞融合呈铺路石样生长,融合后的汗腺腺上皮细胞呈扁平多角形,中间有较大圆形核;第1代细胞形态与原代极为相似;第2代细胞形态不规则,多数伸出长伪足;第3代细胞多呈星形状,细胞体积大,与邻近细胞相互融合。A组汗腺腺上皮细胞三维立体培养11 d形成管腔结构;B组汗腺腺上皮细胞立体培养8 h,细胞胞浆伸长呈丝状,与邻近细胞相连呈管腔或半管腔形,但细胞增殖不明显;C组汗腺腺上皮细胞三维立体培养2～3 d,细胞分裂增生,增生细胞彼此紧密排列成管腔结构,中间可见明显腔隙,随新生细胞增多,管腔结构逐渐演变为不规则球形结构。激光扫描共聚焦显微镜观察示C组形成球形结构,细胞团中央有管腔结构;球形结构HE染色示为管腔结构,免疫组织化学染色示角蛋白18、癌胚抗原表达阳性,与汗腺分泌部管状结构极为相似。结论汗腺腺上皮细胞在Matrigel凝胶中三维立体培养可形成汗腺样结构。

关键词：汗腺组织工程三维培养 Matrigel 汗腺样结构

HPV16型E6蛋白诱导PHK多倍体的形成与消除细胞纺锤体检查点无关

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中国肿瘤临床 2009年第1期36卷 38-41页

作者：陈凌沈柱伍津津第三军医大学大坪医院野战外科研究所皮肤科重庆市400042 第三军医大学西南医院皮肤科

目的：人乳头瘤病毒16型（human papillomavirus，HPV 16）与包括宫颈癌在内的多种肿瘤的发生明确相关。诱导宿主基因组不稳定性可能是HPV16致瘤的重要机制之一。本研究对HPV16型E6蛋白诱导人原代角质形成细胞（primary human keratinoc... 详细信息

目的：人乳头瘤病毒16型（human papillomavirus，HPV 16）与包括宫颈癌在内的多种肿瘤的发生明确相关。诱导宿主基因组不稳定性可能是HPV16致瘤的重要机制之一。本研究对HPV16型E6蛋白诱导人原代角质形成细胞（primary human keratinocytes，PHK）形成多倍体以及对PHK有丝分裂纺锤体检查点的影响进行初步的探索。方法：取正常人包皮组织，分离表皮，常规方法培养PHK。脂质体介导法将pBabe-16E6质粒转染逆转录病毒包装细胞PA317。挑选G418抗性克隆，检测病毒滴度，将表达HPV16型E6蛋白的高滴度逆转录病毒感染PHK。通过逆转录PCR法和免疫印迹法证实HPV16E6成功感染PHK。PHK经Nocodazole处理后，利用流式细胞仪分析多倍体形成，于不同时间点收集细胞、固定，进行抗磷酸化组蛋白染色，利用流式细胞仪分析细胞有丝分裂指数差异。结果：HPV16型E6成功感染PHK，并呈功能性表达。HPV16型E6可诱导PHK形成多倍体，表达E6蛋白的PHK和对照细胞以相似的动力学进入和退出有丝分裂。结论：HPV16型E6对PHK有丝分裂过程中的纺锤体检查点无直接影响，鉴于有丝分裂后期检查点在细胞有丝分裂过程中较持久和严格的作用，本研究结果提示，对有丝分裂后期检查点的作用可能是HPV16型E6蛋白诱导宿主细胞多倍体形成的重要机制。为进一步探讨HPV相关肿瘤的分子发生机制奠定了一定基础。

关键词：人乳头瘤病毒 E6蛋白原代角质形成细胞细胞周期检查点多倍体

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光动力对细菌生物膜的作用研究进展

中华皮肤科杂志 2014年第4期47卷 299-301页

作者：雷霞黄正伍津津第三军医大学大坪医院野战外科研究所皮肤科重庆400042 美国科罗拉多大学丹佛分校肿瘤中心

细菌生物膜（bacterial biofilm）是细菌在生长过程中为适应环境而形成的微菌落聚集物，由细菌和细胞外基质组成。生物膜对机体免疫清除和抗生素的杀菌作用抵抗力很强，与体内的很多慢性感染灶相关，如何清除生物膜仍然是抗菌治疗中的... 详细信息

细菌生物膜（bacterial biofilm）是细菌在生长过程中为适应环境而形成的微菌落聚集物，由细菌和细胞外基质组成。生物膜对机体免疫清除和抗生素的杀菌作用抵抗力很强，与体内的很多慢性感染灶相关，如何清除生物膜仍然是抗菌治疗中的严峻挑战。近年的研究表明，光动力疗法是治疗生物膜感染的新策略，本文拟综述近年来光动力治疗细菌生物膜的研究进展。

关键词：细菌生物膜光动力疗法慢性感染灶抗菌治疗光动力治疗适应环境生长过程基质组成

高能紫外线联合复方倍他米松治疗Ⅴ型甲扁平苔藓疗效分析

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临床皮肤科杂志 2015年第1期44卷 49-51页

作者：杨利李凤伍津津雷霞中国人民解放军第二十二医院皮肤科青海格尔木816000 第三军医大学大坪医院皮肤科重庆400042

扁平苔藓（lichen planus，LP）是一种发生于皮肤和黏膜上的慢性炎症性疾病，发病机制尚不明确。5％～10％LP患者会累及指（趾）甲，导致甲凹凸不平、甲板变薄、甲纵嵴、甲裂缝，甚至瘢痕和翼状胬肉。称为甲扁平苔藓（nail lichen planu... 详细信息

扁平苔藓（lichen planus，LP）是一种发生于皮肤和黏膜上的慢性炎症性疾病，发病机制尚不明确。5％～10％LP患者会累及指（趾）甲，导致甲凹凸不平、甲板变薄、甲纵嵴、甲裂缝，甚至瘢痕和翼状胬肉。称为甲扁平苔藓（nail lichen planus，NLP）。NLP分5型，

关键词：甲扁平苔藓高能紫外线糖皮质激素

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人工皮肤的临床治疗研究进展

重庆医学 2002年第9期31卷 877-879页

作者：伍津津第三军医大学大坪医院皮肤科重庆400042

近20年来随着组织工程学的建立和形成,组织工程的研究正成为生命科学研究领域的焦点之一,而组织工程皮肤产品开发的成功,使人工皮肤的研究实现了质的飞跃,它是由活性细胞接种在支架材料上形成的组织工程化皮肤,有真皮层或同时具有表皮... 详细信息

近20年来随着组织工程学的建立和形成,组织工程的研究正成为生命科学研究领域的焦点之一,而组织工程皮肤产品开发的成功,使人工皮肤的研究实现了质的飞跃,它是由活性细胞接种在支架材料上形成的组织工程化皮肤,有真皮层或同时具有表皮层和真皮层,因此是一种活性生物敷料[1].在国外人工皮肤的研究较多,部分已形成产品应用于临床,现就其临床应用情况综述如下.

关键词：人工皮肤临床治疗研究进展组织工程

影响毛囊器官型培养中胶原凝胶收缩的几个因素分析

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浙江大学学报（医学版） 2003年第4期32卷 323-326页

作者：吕中法伍津津刘荣卿钟白玉郑敏浙江大学医学院附属第二医院浙江杭州310009 第三军医大学重庆400038

目的 :观察鼠尾胶原、毛乳头细胞和毛囊上皮细胞的浓度对毛囊器官型培养模型中胶原凝胶收缩的影响。方法 :用不同浓度的鼠尾胶原、毛乳头细胞和毛囊上皮细胞制备成毛囊器官型培养模型 ,体外培养 10 d,隔日测量培养凝胶的直径 ,观察其对... 详细信息

目的 :观察鼠尾胶原、毛乳头细胞和毛囊上皮细胞的浓度对毛囊器官型培养模型中胶原凝胶收缩的影响。方法 :用不同浓度的鼠尾胶原、毛乳头细胞和毛囊上皮细胞制备成毛囊器官型培养模型 ,体外培养 10 d,隔日测量培养凝胶的直径 ,观察其对胶原凝胶收缩的影响。结果 :鼠尾胶原、毛乳头细胞和毛囊上皮细胞的浓度对毛囊器官型培养模型中胶原凝胶的收缩均有明显影响 (P<0 .0 1)。鼠尾胶原的浓度越高 ,胶原凝胶的收缩程度越小 ;而毛乳头细胞和毛囊上皮细胞的浓度对胶原凝胶收缩的影响则恰好相反 ,浓度越高 ,胶原凝胶的收缩程度越大。结论 :鼠尾胶原、毛乳头细胞和毛囊上皮细胞的浓度是影响毛囊器官型培养模型中胶原凝胶收缩的主要因素。

关键词：毛囊/细胞学凝胶类上皮细胞细胞培养胶原器官型培养大鼠

培养毛乳头细胞bFGF、ET-1、SCF的表达及其生物学特性

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浙江大学学报（医学版） 2004年第4期33卷 296-299页

作者：吕中法伍津津刘荣卿钟白玉郑敏浙江大学医学院附属第二医院皮肤科浙江杭州310009 第三军医大学附属西南医院皮肤科重庆400038

目的 :观察不同传代培养人毛乳头细胞的 b FGF、ET- 1、SCF表达变化情况及对其诱导毛囊再生能力的影响。方法 :采用细胞培养、免疫组织化学和原位杂交技术 ,对不同传代培养的毛乳头细胞的 b FGF、ET- 1、SCF的表达变化情况进行观察 ,同... 详细信息

目的 :观察不同传代培养人毛乳头细胞的 b FGF、ET- 1、SCF表达变化情况及对其诱导毛囊再生能力的影响。方法 :采用细胞培养、免疫组织化学和原位杂交技术 ,对不同传代培养的毛乳头细胞的 b FGF、ET- 1、SCF的表达变化情况进行观察 ,同时观察其对诱导毛囊再生能力的影响。结果 :低传代培养毛乳头细胞 ET- 1、SCF表达较强 ,传代 >6代后 ET- 1和 SCF转为阴性 ;并发现毛乳头细胞表达 ET- 1和 SCF越强 ,其诱导毛囊再生能力也越高。结论 :毛乳头细胞诱导毛囊再生的能力与其表达 ET- 1和

关键词：毛囊细胞培养毛乳头细胞 ET-1 SCF