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PCR-变性梯度凝胶电泳法初探婴儿期肠道菌群菌种演替

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中国当代儿科杂志 2017年第3期19卷 331-336页

作者：李姗珊苗俊杰伍梓汐姚建蓉李鸣余倩何方四川大学华西公共卫生学院营养与食品卫生学及毒理学系四川成都610041 河北医科大学公共卫生学院卫生检验教研室河北石家庄050017 四川大学华西第二医院产科四川成都610041 四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系四川成都610041

目的通过研究婴儿粪便菌种组成,探索婴儿期肠道菌群定植规律。方法收集15例健康婴儿出生后第0、2、4、7、10、14、28天,以及3、6、12月时的新鲜粪便,采用PCR-变性梯度凝胶电泳(DGGE)检测肠道菌群结构,对其优势菌种进行测序,分析婴儿期... 详细信息

目的通过研究婴儿粪便菌种组成,探索婴儿期肠道菌群定植规律。方法收集15例健康婴儿出生后第0、2、4、7、10、14、28天,以及3、6、12月时的新鲜粪便,采用PCR-变性梯度凝胶电泳(DGGE)检测肠道菌群结构,对其优势菌种进行测序,分析婴儿期肠道菌群菌种演替过程。结果 DGGE指纹图谱可见,婴儿期的肠道菌群结构随出生后时间变化显著;克隆测序结果显示,变形菌门的细菌定植最早,以专性需氧菌肠杆菌、假单胞菌为主,其次是厚壁菌门的专性厌氧菌(梭状芽孢杆菌、小韦荣球菌)和兼性厌氧菌(多枝梭菌)定植,随后疣微菌门定植,放线菌门定植最晚,以双歧杆菌为主,并逐渐成为优势菌群。结论婴儿期肠道中专性需氧菌首先定植,随后是专性厌氧菌和兼性厌氧菌。变形菌门细菌定植最早,厚壁菌门细菌次之,随后是疣微菌门细菌,以双歧杆菌为主的放线菌门细菌定植最晚。

关键词：肠道菌群变性梯度凝胶电泳婴儿

老年人肠道菌群特征与代谢和免疫机能相关性的探究

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营养学报 2017年第3期39卷 228-233页

作者：伍梓汐苗俊杰李姗珊王舒悦余倩何方四川大学华西公共卫生学院成都610041

目的研究老年人肠道菌群的特征,探索肠道菌群与机体的生理生化、免疫机能的相关性。方法对成都地区170名中老年人进行生理、生化及免疫指标的检测的同时、采用荧光原位杂交方法(fluorescence in situ hybridization,FISH)对其粪便中的... 详细信息

目的研究老年人肠道菌群的特征,探索肠道菌群与机体的生理生化、免疫机能的相关性。方法对成都地区170名中老年人进行生理、生化及免疫指标的检测的同时、采用荧光原位杂交方法(fluorescence in situ hybridization,FISH)对其粪便中的细菌总数、乳酸杆菌(Lactobacillus sp.)、拟杆菌(Bacteroides sp.)、梭菌属(Clostridium sp.)进行定量分析检测。结果 55~65岁乳酸杆菌浓度显著高于55岁及以下组(P0.05)、乳酸杆菌数量(r=0.150,P>0.05)、拟杆菌数量(r=0.190,P<0.05)、梭菌属数目(r=0.180,P<0.05)均呈正相关关系;乳酸杆菌与空腹血糖的相关系数为0.241(P<0.01);拟杆菌/梭菌比例与HDL-C显著正相关(r=0.200,P<0.05);总菌数与Ig G正相关(r=0.177,P<0.05)。结论肠道乳酸杆菌、拟杆菌、梭菌数量显著地增多可能是人体肠内细菌老化的重要的特征之一;肠道乳酸杆菌数也许可作为早期发现糖尿病高危人群的新指标;以提高肠道乳酸杆菌为目的中老年人群的益生菌的开发方向需要进一步研究。

关键词：老年人乳酸杆菌拟杆菌/梭菌高密度脂蛋白糖脂代谢

2015—2016年成都市1～4月龄婴儿肠道乳酸杆菌及生化特性

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卫生研究 2018年第5期47卷 776-781页

作者：李姗珊万群程如越葛林伍梓汐李鸣张旭光肖健黄远英何方四川大学华西公共卫生学院营养与食品卫生学及毒理学系成都610041 汤臣倍健股份有限公司

目的探索早期婴儿肠道乳酸杆菌的优势菌种及生化特征。方法收集41名1~4月龄健康婴儿粪便,采用选择培养基分离乳酸杆菌,通过形态、好氧性、碳水化合物代谢(API 50)和16S RNA测序等分析技术对分离菌株进行分类学鉴定,以及使用API ZYM检测... 详细信息

目的探索早期婴儿肠道乳酸杆菌的优势菌种及生化特征。方法收集41名1~4月龄健康婴儿粪便,采用选择培养基分离乳酸杆菌,通过形态、好氧性、碳水化合物代谢(API 50)和16S RNA测序等分析技术对分离菌株进行分类学鉴定,以及使用API ZYM检测其19种酶活性。结果共收集71株乳酸杆菌,包括副干酪乳杆菌(L.paracasei)30株,格氏乳杆菌(L.gasseri)13株,唾液乳杆菌(L.salivarius)10株,短乳杆菌(L.brevis)4株,鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)3株,发酵乳杆菌(L.fermentum)和植物乳杆菌(L.plantarum)各1株,未鉴定到种9株。7种乳酸杆菌对49种碳水化合物代谢有异同,有14种碳水化合物均不能发酵,均能发酵的碳水化合物有4种,在其余31种碳水化合物的代谢上具有菌种差异。大多数乳酸杆菌的亮氨酸芳胺酶、半乳糖苷酶和葡萄糖苷酶活性强,其他酶活性因种株不同差异较大。结论副干酪乳杆菌、格氏乳杆菌和唾液乳杆菌可能是1~4月龄健康婴儿肠道乳酸杆菌的主要菌种。婴儿肠道乳酸杆菌的碳水化合物利用能力和酶活性具有一定的共同特征和种株差异。

关键词：乳酸杆菌婴儿碳水化合物酶活性

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黄酒对小鼠肝脏功能及肠道菌群的影响

中国酿造 2020年第7期39卷 41-45页

作者：蒋丰岭周玮忻伍梓汐程如越沈曦李鸣张明陈历水刘蕾何方四川大学华西公共卫生学院四川成都610041 北京工商大学食品与健康学院北京100048 中粮营养健康研究院食品研发中心北京100020

该实验探究黄酒对小鼠肝脏功能及其肠道菌群构成的影响。将24只4周龄雄性昆明种小鼠随机等分为3组,分别灌胃生理盐水、酒精、黄酒,连续灌胃30 d后,检测血液生化指标,二代测序检测粪便细菌的种群构成。结果表明,对照组小鼠血清中的谷丙... 详细信息

该实验探究黄酒对小鼠肝脏功能及其肠道菌群构成的影响。将24只4周龄雄性昆明种小鼠随机等分为3组,分别灌胃生理盐水、酒精、黄酒,连续灌胃30 d后,检测血液生化指标,二代测序检测粪便细菌的种群构成。结果表明,对照组小鼠血清中的谷丙转氨酶(ALT)浓度显著高于酒精组和黄酒组(P<0.05)。黄酒组受试小鼠粪便细菌的Ace、Chao1、PD_whole_tree指数均显著低于对照组和酒精组(P<0.05)。三个组肠道菌群组成具有一定差异。门水平上,对照组变形菌门(Proteobacteria)相对丰度显著高于酒精组和黄酒组(P<0.05);属水平上,对照组瘤胃球菌属(Ruminococcus)相对丰度显著低于酒精组和黄酒组(P<0.05),而单胞菌属(Stenotrophomonas)相对丰度显著高于酒精组和黄酒组(P<0.05),对照组颤螺旋菌属(Oscillospira)相对丰度显著低于酒精组(P<0.05)。低度酒精以及同样酒精度下的黄酒短期投用未对小鼠肝脏功能造成明显影响,并可通过抑制部分肠道致病菌的生长,增加有益菌,从而起到一定的调节肠道菌群的作用。

关键词：黄酒肝脏功能肠道菌群调节作用

益生菌与肥胖及相关代谢性疾病关系的研究进展

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益生菌与肥胖及相关代谢性疾病关系的研究进展

第五届两岸四地营养改善学术会议

作者：蒲芳芳李姗珊于晓红伍梓汐李鸣何方四川大学华西公共卫生学院

目的:肥胖及其相关的代谢性疾病已经成为重大的公共卫生问题之一。近期有研究证据表明肠道菌群可在肥胖及相关代谢性疾病的发生发展中发挥重要作用。探讨益生菌、肠道菌群在肥胖及其相关疾病中的作用可能会为防治肥胖提供薪的方法。本...

目的:肥胖及其相关的代谢性疾病已经成为重大的公共卫生问题之一。近期有研究证据表明肠道菌群可在肥胖及相关代谢性疾病的发生发展中发挥重要作用。探讨益生菌、肠道菌群在肥胖及其相关疾病中的作用可能会为防治肥胖提供薪的方法。本文综述了肠道菌群对肥胖及其相关代谢性疾病的作用以及益生菌的调节作用,为今后益生菌的功效研究提供依据。方法:以关键词"益生菌"、"肠道菌群"、"肥胖"、"代谢性疾病"等在Putbmed及CNKI中进行文献检索,总结

关键词：

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益生菌免疫调节功能研究

食品科技 2017年第1期42卷 29-33页

作者：伍梓汐李姗珊沈曦李鸣崔文静张其圣何方四川大学华西公共卫生学院成都610041 河北一然生物科技有限公司石家庄050800 四川省食品发酵工业研究设计院成都611130

目的:使用小鼠巨噬细胞和致敏模型小鼠探讨乳酸杆菌及双歧杆菌的菌株特异性免疫调节及抗过敏作用的可能性。方法:使用Lactobacillus acidophilus 6091(6091)、L.plantarum R-1-1(R-1-1)与小鼠巨噬细胞样细胞系J774A.1细胞(J774A.1细胞)... 详细信息

目的:使用小鼠巨噬细胞和致敏模型小鼠探讨乳酸杆菌及双歧杆菌的菌株特异性免疫调节及抗过敏作用的可能性。方法:使用Lactobacillus acidophilus 6091(6091)、L.plantarum R-1-1(R-1-1)与小鼠巨噬细胞样细胞系J774A.1细胞(J774A.1细胞)进行共培养,用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定共培养上清液白细胞介素-6,10(Interleukin-6,10,IL-6,10)。使用R-1-1、6091、Bifidobacterium bifidum TMC3115(TMC3115)菌体对受试小鼠进行连续灌胃持续5周,在7、21、28 d分别注射卵清白蛋白(OVA)和氢氧化铝诱导其产生过敏反应,采用ELISA试剂盒检测血液总Ig E,同时用实时荧光定量PCR法检测脾脏细胞的IL-6、IL-12、TNF-α关于m RNA的表达。结果:各受试菌株有意地诱导J774A.1细胞产生IL-10、IL-6(P<0.05)。各受试菌株灌胃小鼠血液Ig E与OVA阳性对照组比较显著地降低(P<0.05);同时,各受试菌株灌胃小鼠脾脏细胞的IL-6、IL-12、TNF-α和OVA阳性对照组比较显著地降低(P<0.05);结论:6091、R-1-1、TMC3115能有效地通过活化巨噬细胞调节机体的免疫调节作用,降低血液Ig E产生,其作用机制可能与诱导IL-10的分泌,进而同时下调了TH1和TH2免疫应答有关。

关键词：益生菌免疫调节过敏

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乳酸杆菌的抗过敏作用研究

乳酸杆菌的抗过敏作用研究

益生菌：技术及产业化——第十三届益生菌与健康国际研讨会

作者：周玮忻伍梓汐王茂林郭佳汶沈曦李鸣何方四川大学华西公共卫生学院

目的探究乳酸杆菌对食物抗原致敏模型小鼠的抗过敏的可能性及机制。方法使用嗜酸乳杆菌6091（L.acidophilus 6091,6091）、植物乳杆菌（L.plantarumR-1-1,R-1-1）对6-8周龄雄性BALB/C小鼠进行连续灌胃（N=10）,在7、21、28 d注射卵清白... 详细信息

目的探究乳酸杆菌对食物抗原致敏模型小鼠的抗过敏的可能性及机制。方法使用嗜酸乳杆菌6091（L.acidophilus 6091,6091）、植物乳杆菌（L.plantarumR-1-1,R-1-1）对6-8周龄雄性BALB/C小鼠进行连续灌胃（N=10）,在7、21、28 d注射卵清白蛋白和氢氧化铝诱导其产生过敏反应。35 d时处死小鼠,采用ELISA法检测血液总IgE,实时荧光定量PCR法检测脾脏的IL-6关于mRNA的表达,高通量测序法分析粪便中肠道菌群的丰度、多样性及菌种组成。结果 6091和R-1-1可以明显降低食物抗原致敏引起的血液IgE水平升高（P＜0.05）;与阳性组相比,6091组小鼠脾脏的IL-6明显降低（P＜0.05）,而R-1-1组未有统计学差异（P＜0.05）;食物抗原致敏未引起肠道优势菌群（如双歧杆菌、乳杆菌及拟杆菌等）相对丰度的改变（P＞0.05）,但肠道菌群的丰度明显升高（P＜0.05）,多样性未见统计学差异（P＞0.05）;R-1-1组的ace、Chao、PD-whole tree指数较空白组明显升高（P＜0.05）,而6091组与空白组相比,丰度和多样性均未见升高,且shannon指数明显降低（P＜0.05）。结论食物抗原致敏可引起受试小鼠肠道菌群的丰度升高。乳杆菌6091和R-1-1虽然均有抗过敏的潜能,但作用机制可能存在菌株特异性。推测6091有可能能直接作用于免疫细胞,又能改变肠道菌群进而影响机体免疫,这可能是6091在降低血清IgE和脾脏IL-6水平、缓解过敏方面更明显的原因之一。

关键词：益生菌抗过敏肠道菌群

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益生菌在婴幼儿过敏性疾病中的作用

益生菌在婴幼儿过敏性疾病中的作用

第五届两岸四地营养改善学术会议

作者：李姗珊于晓红蒲芳芳伍梓汐李鸣何方四川大学华西公共卫生学院(华西第四医院)

目的:近年来,过敏性疾病在全球范围内广泛流行,被世界卫生组织(WHO)列为"21世纪重点研究和预防的三大疾病之一"。许多研究表明,肠道菌群与过敏性疾病密切相关,并建议使用益生菌来防治该疾病。本文综述了过敏婴幼儿和健康婴幼儿肠道菌群...

目的:近年来,过敏性疾病在全球范围内广泛流行,被世界卫生组织(WHO)列为"21世纪重点研究和预防的三大疾病之一"。许多研究表明,肠道菌群与过敏性疾病密切相关,并建议使用益生菌来防治该疾病。本文综述了过敏婴幼儿和健康婴幼儿肠道菌群差异,以及益生菌在婴幼儿过敏性疾病预防和治疗中的可能性,为防治婴幼儿过敏性疾病提供切实有效的措施。方法:以关健词"益生菌"、"肠道菌群"、"过敏"、"婴幼儿"在Web of science、Pubmed和CNKI等数

关键词：

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益生菌影响认知功能的研究进展

益生菌影响认知功能的研究进展

中国食品科学技术学会第十三届年会

作者：蒲芳芳于晓红李姗珊伍梓汐李鸣何方四川大学华西公共卫生学院

随着年龄增长,人的认知功能可能出现量和质的衰退,轻则影响生活质量,重则导致痴呆,目前尚无特效治疗方法逆转认知功能衰退甚至痴呆的发生。随着微生态学的发展,大量科学证据表明肠道菌群可通过神经、内分泌、代谢及免疫等多种途径影响... 详细信息

随着年龄增长,人的认知功能可能出现量和质的衰退,轻则影响生活质量,重则导致痴呆,目前尚无特效治疗方法逆转认知功能衰退甚至痴呆的发生。随着微生态学的发展,大量科学证据表明肠道菌群可通过神经、内分泌、代谢及免疫等多种途径影响认知功能,益生菌可能会成为预防或改善认知功能衰退的有效手段之一。本研究就目前益生菌与认知功能的研究进行了综述,发现益生菌改善认知功能的可能机制除了调节肠道菌群以外,还可能有①降低全身炎症因子的活性,缓解脑部的慢性炎症;②促进外源性多胺（包括腐胺、精脒和精胺）的产生。多胺可以增加肠腔黏液的分泌,预防肠道屏障功能破坏,抑制炎症因子的产生,其抗诱变剂和抗氧化的特性还可以延缓衰老;③促进血清素前体色氨酸和脑衍生神经营养因子的提高,有助于抑郁症及认知功能障碍疾病的预防和早期治疗等。同时本研究还发现益生菌对认知功能的效果还存在争议,动物实验结果外推至人群有一定难度,这可能与益生菌的菌种/株特异性有关。有关益生菌可能改善宿主认知功能衰退的健康促进作用,还需大规模临床试验来进行验证,以及在菌株水平进行可能的机制分析。

关键词：益生菌肠道菌群认知功能衰退