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猪后肢动脉生成过程中血管内皮细胞eNOS的表达

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中南大学学报（医学版） 2006年第1期31卷 63-65页

作者：伍校琼蔡维君罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410013

目的:研究猪后肢动脉生成过程中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达及其活性。方法:猪股动脉行单侧结扎术,另一侧行假手术,两周后处死动物。应用免疫荧光组织化学技术检测侧支血管中eNOS表达,用抗磷酸化的eNOS抗体(P-eNOS)检测eNOS的活性。用... 详细信息

目的:研究猪后肢动脉生成过程中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达及其活性。方法:猪股动脉行单侧结扎术,另一侧行假手术,两周后处死动物。应用免疫荧光组织化学技术检测侧支血管中eNOS表达,用抗磷酸化的eNOS抗体(P-eNOS)检测eNOS的活性。用Le ica激光共聚焦显微镜观察并拍照,图片用S ilicon G raph icsOctane进行处理。结果:在正常小动脉血管中eNOS的表达非常低,呈弱阳性;在生长的侧支血管中eNOS的表达显著上调,呈强阳性。在正常血管和生长的侧支血管中eNOS的表达都定位于内皮细胞。在生长的侧支血管中,P-eNOS表达水平非常高,免疫双重染色证实eNOS和P-eNOS的表达共同定位于内皮细胞。结论:侧支血管发育过程中,eNOS的表达被上调,并具有生物活性,高水平和具有活性的eNOS可能通过调节内皮细胞的增殖、移动及对炎症的控制,从而对侧支血管的生长发挥重要作用。

关键词：猪动脉生成一氧化氮合酶磷酸化的一氧化氮合酶

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静脉移植物巨噬细胞浸润途径的实验研究

中南大学学报（医学版） 2005年第2期30卷 179-182页

作者：伍校琼蔡维君罗学港中南大学湘雅基础医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410078

目的:探讨外膜是否是静脉移植物巨噬细胞浸润的一条重要途径。方法:应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再塞标本中CD68(巨噬细胞的标记物)、CD31(内皮细胞的标记物)的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用SiliconGraphi... 详细信息

目的:探讨外膜是否是静脉移植物巨噬细胞浸润的一条重要途径。方法:应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再塞标本中CD68(巨噬细胞的标记物)、CD31(内皮细胞的标记物)的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用SiliconGraphicsOctane进行处理,并对CD68阳性细胞进行计数。结果:在正常静脉血管,外膜中有少量CD68阳性细胞,中膜和内膜中少见;在病变的血管中,CD68免疫阳性细胞在外膜、中膜和内膜都可观察到,与正常血管相比差异有统计学意义(P<0. 05),且有从外膜向中膜和内膜迁移的趋势;中膜CD68免疫阳性细胞的分布和中膜毛细血管的生成过程密切相关。结论:外膜可能是静脉移植物巨噬细胞浸润的一条重要途径。

关键词：巨噬细胞浸润静脉移植物实验研究 CD68阳性细胞激光共聚焦显微镜免疫阳性细胞组织化学技术免疫荧光内皮细胞静脉血管正常血管毛细血管标记物外膜中膜内膜统计学

proBDNF对培养的海马神经元存活的影响及其机制

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中南大学学报（医学版） 2007年第5期32卷 800-805页

作者：王慧陈旦伍校琼黄菊芳罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410013

目的:初步探讨proBDNF(precursor of brain-derived neurotrophic factor)对海马神经元的可能作用及其机制。方法:采用体外培养胚鼠海马神经元,并给予proBDNF,preBDNF(propeptide of proBDNF)和抗proBDNF血清处理;30min,1h和48h后行尼氏染色,ELK-p(Ets domain protein),ErK2(extracellularsignal regulated kinase)和c-fos免疫细胞化学染色。结果:给予proBDNF处理后,可见培养细胞内ELK-p,ErK2和c-fos表达明显上调,部分细胞核深染;而用抗血清中和内源性proBDNF后,ELK-p、ErK2和c-fos均下调,且细胞出现肿胀、空泡样变化。preBDNF处理组细胞与正常对照组类似。结论:proBDNF可维持海马神经元的存活,其机制可能与激活ErK和ELK信号通路有关。

关键词： proBDNF ERK ELK 海马

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大鼠骨髓基质干细胞向神经元样细胞的分化

中南大学学报（医学版） 2004年第1期29卷 18-20页

作者：李昌琪刘丹伍校琼卢大华罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410078

目的 :体外定向诱导大鼠骨髓基质干细胞 (BMSCs)向神经元样细胞的分化。方法 :用DMEM培养液冲洗骨髓 ,收集骨髓细胞接种在培养瓶中体外扩增、纯化。用诱导剂诱导BMSCs分化为神经元样细胞。用免疫组化ABC法鉴定神经丝蛋白 (NF 2 0 0 )、... 详细信息

目的 :体外定向诱导大鼠骨髓基质干细胞 (BMSCs)向神经元样细胞的分化。方法 :用DMEM培养液冲洗骨髓 ,收集骨髓细胞接种在培养瓶中体外扩增、纯化。用诱导剂诱导BMSCs分化为神经元样细胞。用免疫组化ABC法鉴定神经丝蛋白 (NF 2 0 0 )、微管相关蛋白 (MAP 2 )、神经元特异核蛋白 (NeuN)、巢蛋白 (Nestin)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、GAD和ChAT的表达。结果 :BMSCs经诱导后 ,胞体增大 ,并伸出细长突起 ,与神经元形态相似。免疫组化显示大部分细胞NF 2 0 0 ,MAP 2 ,NeuN和Nestin表达阳性 ,(3± 0 .8) %的细胞GAD表达阳性 ,(5± 0 .3) %的细胞ChAT表达阳性 ,而GFAP表达阴性。结论 :BMSCs可被诱导分化为神经元样细胞 ,部分细胞可表达GAD与ChAT。

关键词：大鼠骨髓基质干细胞神经元样细胞细胞分化免疫组化ABC法细胞培养

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人静脉移植物中MCP-1的表达

中国临床解剖学杂志 2006年第4期24卷 419-421,424页

作者：伍校琼蔡维君罗学港黄菊芳中南大学湘雅基础医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410013

目的:探讨人静脉移植物中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达及其与巨噬细胞浸润的关系。方法:应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再塞标本中MCP-1、CD68(巨噬细胞的标记物)、CD31(内皮细胞的标记物)的表达进行了检测,用激光共聚... 详细信息

目的:探讨人静脉移植物中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达及其与巨噬细胞浸润的关系。方法:应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再塞标本中MCP-1、CD68(巨噬细胞的标记物)、CD31(内皮细胞的标记物)的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用SiliconGraphicsOctane进行处理。结果:在正常静脉血管中,MCP-1表达很弱;外膜中有少量CD68免疫阳性细胞,中膜和内膜中少见;CD31免疫阳性细胞仅在血管腔内皮细胞和外膜小血管中可见。在病变静脉血管,MCP-1在内皮细胞、平滑肌细胞中的表达呈强阳性;CD68免疫阳性细胞在外膜、中膜和内膜均可见到;CD31免疫阳性细胞不仅出现在血管腔内皮细胞和外膜小血管内皮细胞,且在中膜小血管内皮细胞也大量出现。免疫双重染色显示内皮细胞和巨噬细胞均表达MCP-1。结论:人静脉移植物MCP-1的表达上调,且和巨噬细胞的浸润关系密切,提示MCP-1对静物移植物炎症细胞的浸润及新内膜的形成有非常重要的作用。

关键词： MCP-1 CD68 CD31 静脉移植物共聚焦显微镜术

NMDAR1和GABA_A受体的α_1及α_3亚单位在成年猫小脑的定位分布

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神经解剖学杂志 2004年第1期20卷 77-80页

作者：伍校琼蔡维君李昌琪罗学港中南大学基础医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410013

用免疫组织化学反应及 Nissl染色探讨了 NMDAR1及 GABAA受体α1 和α3亚单位在成年猫小脑皮质及小脑核的定位分布。结果表明 ,NMDAR1免疫反应产物主要分布在 Purkinje细胞胞质和分子层的树突 ,分子层的星形细胞和篮细胞以及颗粒细胞层... 详细信息

用免疫组织化学反应及 Nissl染色探讨了 NMDAR1及 GABAA受体α1 和α3亚单位在成年猫小脑皮质及小脑核的定位分布。结果表明 ,NMDAR1免疫反应产物主要分布在 Purkinje细胞胞质和分子层的树突 ,分子层的星形细胞和篮细胞以及颗粒细胞层的颗粒细胞和胶质细胞呈中等强度的阳性反应 ,小脑核的神经元胞质和部分突起着色明显。 GABAA受体的α1 亚单位免疫反应产物主要分布在 Purkinje细胞胞质和树突 ,分子层的星形细胞和胶质细胞呈弱阳性 ,小脑核的神经元阳性反应明显。GABAA 受体的α3亚单位免疫反应产物主要分布在 Purkinje细胞胞质和树突 ,分子层的星形细胞和篮细胞着色明显 ,胶质细胞呈免疫反应弱阳性 ,小脑核神经元及纤维着色明显。在 Purkinje细胞层 NMDAR1、GABAA受体α1 及α3亚单位免疫阳性神经元分别占 Purkinje细胞总数的 80 % ,61% ,88%。结论 :NMDAR1、GABAA受体的α1 及α3亚单位在成年猫小脑具有广泛的分布。这些受体在介导小脑的复杂功能中可能发挥重要的作用。

关键词：免疫组织化学小脑猫 NMDARl GABAA 受体神经元分布

NGF、BDNF及受体trkA、trkB、trkC在正常猴脊髓的表达

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神经解剖学杂志 2002年第3期18卷 240-242,T008页

作者：伍校琼李昌琪刘丹蔡维君罗学港中南大学湘雅医学院神经生物学研究室长沙410078

采用免疫组织化学方法观察了神经生长因子 (NGF) ,脑源性神经营养因子 (BDNF)以及 NGF家族因子受体 trk A、trk B、trk C的免疫阳性反应在正常猴脊髓的分布。结果表明 :NGF免疫反应阳性的神经元在脊髓灰质各层中均有分布 ,灰、白质内也... 详细信息

采用免疫组织化学方法观察了神经生长因子 (NGF) ,脑源性神经营养因子 (BDNF)以及 NGF家族因子受体 trk A、trk B、trk C的免疫阳性反应在正常猴脊髓的分布。结果表明 :NGF免疫反应阳性的神经元在脊髓灰质各层中均有分布 ,灰、白质内也可见较多的 NGF免疫反应阳性的胶质细胞。 BDNF在脊髓各型神经无有明显的表达 ,特别是前角运动神经元。 trk A、trk B、trk C的免疫阳性反应产物主要分布在灰质的神经元及胶质细胞。本实验结果揭示了在正常猴脊髓中神经营养因子 (NGF、BDNF )及受体 trk A、trk B、trk C的表达状况 ,提示这些神经营养因子及受体在维持猴脊髓神经元的正常生理功能中具有重要作用。

关键词： NGF BDNF 受体 trKA trkB trkC 表达神经营养因子免疫组织化学脊髓猴

静脉移植物中整合素α5β1的表达及其与再狭窄的关系

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第三军医大学学报 2006年第19期28卷 1949-1951页

作者：伍校琼蔡维君罗学港中南大学湘雅基础医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410013

目的检测人静脉移植物中整合素α5β1的表达。方法应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再狭窄标本中整合素α5β1和α-smooth musc le actin(α-SMA)的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用S iliconG raph ics Octane进... 详细信息

目的检测人静脉移植物中整合素α5β1的表达。方法应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再狭窄标本中整合素α5β1和α-smooth musc le actin(α-SMA)的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用S iliconG raph ics Octane进行处理。结果在正常静脉血管中,整合素α5β1在中膜平滑肌细胞和内皮细胞呈微弱表达;α-SMA在中膜平滑肌细胞表达;在病变静脉血管,整合素α5β1在中膜平滑肌细胞、内膜内皮细胞中的表达呈强阳性,在内膜平滑肌细胞中也有弱表达。α-SMA除在中膜平滑肌细胞表达外,在内膜平滑肌细胞也有表达。结论静脉移植物整合素α5β1在中膜平滑肌细胞、内膜内皮细胞表达显著上调,提示整合素α5β1参与静脉移植物再狭窄的形成。

关键词： integrin α5β1 α—SMA 静脉移植物共聚焦免疫荧光术

NMDAR1和GABA_A受体的α_1及α_3亚单位在成年猴小脑的定位分布

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中南大学学报（医学版） 2004年第1期29卷 21-24页

作者：伍校琼李昌琪蔡维君陈本锐罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖与神经生物学系长沙410013

目的 :探讨NMDAR1和GABAA 受体的α1及α3 亚单位在成年恒河猴小脑皮质及小脑核的定位分布。方法 :用免疫组织化学染色技术及尼氏染色技术。结果 :NMDAR1免疫反应产物主要分布在Purkinje细胞胞质和分子层的树突 ,分子层的星形细胞以及... 详细信息

目的 :探讨NMDAR1和GABAA 受体的α1及α3 亚单位在成年恒河猴小脑皮质及小脑核的定位分布。方法 :用免疫组织化学染色技术及尼氏染色技术。结果 :NMDAR1免疫反应产物主要分布在Purkinje细胞胞质和分子层的树突 ,分子层的星形细胞以及颗粒细胞层的颗粒细胞呈免疫反应产物弱阳性 ,胶质细胞呈中等强度的染色 ,小脑核的神经元胞质和部分突起染色明显。GABAA 受体的α1亚单位免疫反应产物主要分布在Purkinje细胞胞质和树突 ,分子层的星形细胞和胶质细胞呈中等强度的染色 ,小脑核的神经元染色明显。GABAA 受体的α3 亚单位免疫反应产物主要分布在Purkinje细胞胞质和树突 ,胶质细胞及小脑核神经元染色明显。在Purkinje细胞层NMDAR1,GABAA 受体α1及α3 亚单位免疫阳性神经元分别占总Purkinje细胞数的 (90 .0± 2 .1) % ,(83.0± 2 .3) % ,及 (78.0± 1.8) %。结论 :NMDAR1,GABAA 受体的α1及α3 亚单位在成年恒河猴小脑具有广泛的分布。

关键词： NMDAR1 GABA 受体免疫组织化学尼氏染色技术免疫反应神经元胶质细胞小脑神经递质