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犬β防御素CBD122原核表达及其抗感染活性检测

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犬β防御素CBD122原核表达及其抗感染活性检测

作者：任艳蓉中国农业科学院

学位级别：硕士

防御素具有广谱抗微生物活性,并对肿瘤细胞有细胞毒作用,还具有免疫调控功能。抗生素大量使用导致细菌耐药性产生,而防御素有良好抗菌和抗病毒效果,不易产生耐药性,具有良好的临床应用前景。由于犬β防御素提取和分离过程繁杂,目前关于... 详细信息

防御素具有广谱抗微生物活性,并对肿瘤细胞有细胞毒作用,还具有免疫调控功能。抗生素大量使用导致细菌耐药性产生,而防御素有良好抗菌和抗病毒效果,不易产生耐药性,具有良好的临床应用前景。由于犬β防御素提取和分离过程繁杂,目前关于犬β防御素体外表达及应用研究还较少,且其作用机制也尚未完全阐明。本研究将犬β防御素(CBD122)先后在大肠杆菌和乳酸菌中进行表达纯化后,对其抗感染功能进行评价。(1)犬β防御素在大肠杆菌中的表达及鉴定:CBD122(Gen Bank登录号:DQ011991)基因序列合成并克隆至p Cold I载体,构建p Cold I-CBD122质粒。重组质粒转至BL21菌株,利用IPTG诱导表达。37℃诱导5h,IPTG浓度为0.5 mmol/L时r CBD122表达量最佳。纯化得到纯度较高的可溶性r CBD122。rCBD122纯化后表达量为0.22 mg/m L,后续进行功能活性测定。(2)犬β防御素在乳酸菌中的表达及鉴定:将CBD122基因序列进行首尾串联得到2×CBD122并连接至p NZ8148载体,完成p NZ8148-2×CBD122质粒的构建。利用电转化方法重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000菌株中,获得重组乳酸菌***-p NZ8148-2×CBD122。利用Nisin作为诱导剂进行诱导表达,在30℃静置诱导5h,Nisin终浓度为1ng/m L时表达量最高。可溶性r2×CBD122表达量为2.6 mg/m L,后续进行功能活性测定。(3)重组犬β防御素抑菌活性检测:将r CBD122和r2×CBD122以及空载诱导表达产物加入接种大肠杆菌(DH5α)固体LB培养基中培养,测量抑菌圈直径。阴性对照PBS组以及空载组无抑菌环,r2×CBD122抑菌环直径大小为1.02 cm,r CBD122抑菌环直径大小为0.81 cm,表明重组蛋白均能够有效抑制大肠杆菌的生长,且r2×CBD122效果优于r CBD122。(4)重组犬β防御素抗病毒活性检测:利用表达犬瘟热病毒(CDV)dog SLAM受体的Vero细胞系(Vero-dog SLAM)进行重组蛋白抗VSV-GFP和CDV SD(14)7毒株效价的测定。r CBD122抗VSV-GFP感染效价为1.17×10～4IU/m L;r2×CBD122抗VSV-GFP效价为4.69×10～4IU/mL。rCBD122抗CDV感染效价为2.34×10～4IU/m L,r2×CBD122抗CDV感染效价为1.88×10～5IU/m L。荧光定量RT-PCR检测CDV SD(14)7的RNA载量来验证重组蛋白抗CDV复制的能力。r CBD与r2×CBD均在作用24 h后特异性抑制CDV在易感细胞上的复制水平(P<0.01),r CBD作用组病毒RNA载量下降16.31倍;而r2×CBD作用组下降10.86倍;但48h与72h抑制作用均较弱(P<0.05)。(5)重组犬β防御素调节免疫因子功能检测:重组蛋白与犬巨噬细胞DH82共孵育,荧光定量RT-PCR检测细胞中CD80、CD86分子表达水平。在共孵育48h后,r CBD122刺激后CD80和CD86分子表达水平比PBS组分别提高了47.48倍和85.71倍;而r2×CBD122刺激后CD80和CD86分子表达水平分别提高了142.56倍和205.10倍(P<0.0001)。结果表明,r CBD122和r2×CBD122均能够有效刺激DH82使其表达CD80、CD86分子上调。综上,本研究分别利用大肠杆菌和乳酸乳球菌表达系统成功构建了r CBD122和r2×CBD122,均具有较好的抑菌和抗病毒活性,能够有效刺激DH82细胞CD80和CD86转录水平上调,但r2×CBD122功能活性较r CBD122更优。本研究为将来阐明防御素作用机制、开发新型抗病毒或抗菌宠物药物奠定了基础。

关键词：犬防御素原核表达抑菌活性抗病毒活性免疫因子

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后危机时代私募股权基金监管的国际比较研究

后危机时代私募股权基金监管的国际比较研究

作者：任艳蓉山西财经大学

学位级别：硕士

进入二十一世纪，随着我国资本市场的逐步开放，具有潜在发展空间的金融领域，正在吸引着更多的国际投资者来我国进行投资。以私募股权基金为代表的新型投资方式被视为最主要的金融改革手段，对我国资本市场的发展起到了积极的推动作用... 详细信息

进入二十一世纪，随着我国资本市场的逐步开放，具有潜在发展空间的金融领域，正在吸引着更多的国际投资者来我国进行投资。以私募股权基金为代表的新型投资方式被视为最主要的金融改革手段，对我国资本市场的发展起到了积极的推动作用。本文的研究目的旨在于通过理论分析、比较分析、辩证分析以及实证分析等方法，揭示出我国私募股权基金在自身发展与监管等方面存在的问题与不足，从而明确私募股权基金监管的改革方向，促进我国私募股权基金的发展。文章通过对私募股权基金概念、退出机制、私募股权基金监管模式以及私募股权基金风险控制等理论性介绍之后，进一步比较分析了金融危机后美国、英国和日本等发达国家现阶段采取的私募股权基金监管措施：美国在金融危机之前坚持行业自律的监管方式，优点在于监管灵活性大、监管成本低，不足之处在于监管缺乏有效性，金融危机后美国吸取经验教训，逐步加强政府部门的监管;英国的监管方式是以行业自律为主，法律监管为辅，这种监管方式下的法律法规虽然健全，但是容易产生滞后性;日本严格坚持政府监管，虽然安全性高，但是容易使投资者缺乏投资的积极性。监管内容方面，上述三个国家的监管均是强调通过对私募股权基金运作过程进行监管，从而保护投资者的根本利益。我国应该借鉴美、英、日三个国家的监管方式，结合国内实际发展情况，坚持以政府监管为主，行业自律为辅的监管手段。同时，还需要分别对私募股权基金融资、投资管理以及退出阶段进行分别的监督与管理。除此之外，我国还应该重点关注私募股权基金的风险控制，包括降低监管成本、加强惩罚力度以及重点监管中小型私募股权基金管理公司等建议。但是，由于我国私募股权基金正处于发展阶段，使得监管部门对私募股权基金的监管仍旧是一项长期而艰巨的任务。我国应该不断改进与完善监管机制，改善我国资本市场投资环境，最终推动我国私募股权基金健康、快速的发展。

关键词：私募股权基金后危机时代风险监管

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中国金融监管体制分析及其改革取向

东方企业文化 2010年第5期 163-164页

作者：任艳蓉山西财经大学财政金融学院

随着金融全球化趋势的日益加强,金融监管的重要性也逐渐被世界各国所关注。本文在简单介绍金融监管相关概念的基础上,通过对我国金融监管主体、监管模式以及金融创新等方面的具体分析,指出中国现行金融监管体制还存在监管主体缺乏配合... 详细信息

随着金融全球化趋势的日益加强,金融监管的重要性也逐渐被世界各国所关注。本文在简单介绍金融监管相关概念的基础上,通过对我国金融监管主体、监管模式以及金融创新等方面的具体分析,指出中国现行金融监管体制还存在监管主体缺乏配合、金融创新发展缓慢、分业监管与整体金融机构相矛盾等问题。为提高监管的适应性和效率,我们应结合自身发展实际,不断提高金融预警系统,鼓励金融监管创新,逐步将金融监管模式由分业监管向功能性监管转变,以促进我国金融市场平稳、有序、健康的发展。

关键词：金融监管金融监管体制金融创新

犬瘟热病毒神经致病机制及与其神经嗜性相关的多种受体

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犬瘟热病毒神经致病机制及与其神经嗜性相关的多种受体

阻燃成炭剂trimer和微胶囊红磷复配阻燃聚甲醛的研究

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十九次全国学术研讨会

作者：任艳蓉赵建军中国农业科学院特产研究所

引言犬瘟热病毒(CDV)能够感染大量陆生的食肉动物,其中以犬科动物为主。与其他麻疹病毒(如麻疹病毒)类似,CDV感染动物后,CDV与宿主细胞表面受体结合后通过膜融合机制进入宿主细胞内开始增殖,当前研究表明CDV的受体主要为信号淋巴细胞激...

引言犬瘟热病毒(CDV)能够感染大量陆生的食肉动物,其中以犬科动物为主。与其他麻疹病毒(如麻疹病毒)类似,CDV感染动物后,CDV与宿主细胞表面受体结合后通过膜融合机制进入宿主细胞内开始增殖,当前研究表明CDV的受体主要为信号淋巴细胞激活分子SLAM以及粘附连接蛋白nectin-4。CDV主要通过嗅觉神经顺行传播途径或通过血液循环感染淋巴细胞侵入中枢神经系统,从而引起食肉动物的脑组织慢性进行性或复发性脱髓鞘。然

关键词：

来源： cnki会议评论

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中国塑料 2016年第7期30卷 82-87页

作者：吴燕鹏王艳飞杨阳任艳蓉张文凯房晓敏丁涛徐元清河南大学化学化工学院精细化学与工程研究所河南开封475004 安阳工学院化学与环境工程学院河南安阳455000 河南大学阻燃与功能材料河南省工程实验室河南开封475004

采用兼具阻燃和成炭作用的笼状磷酸酯三(1-氧代-1-磷杂-2,6,7-三氧杂双环[2.2.2]辛烷-4-亚甲基磷酸酯)(trimer)和微胶囊红磷(MRP)复配阻燃聚甲醛(POM)。采用垂直燃烧试验、极限氧指数和热重分析研究复配阻燃体系对POM的阻燃性能,并对阻... 详细信息

采用兼具阻燃和成炭作用的笼状磷酸酯三(1-氧代-1-磷杂-2,6,7-三氧杂双环[2.2.2]辛烷-4-亚甲基磷酸酯)(trimer)和微胶囊红磷(MRP)复配阻燃聚甲醛(POM)。采用垂直燃烧试验、极限氧指数和热重分析研究复配阻燃体系对POM的阻燃性能,并对阻燃POM的力学性能进行分析。结果表明,trimer和MRP有很好的协同阻燃性能;trimer/MRP/ME的添加量为23%时,阻燃聚甲醛达到UL 94 V-0,极限氧指数最高达29.4%。

关键词：阻燃聚甲醛笼状磷酸酯微胶囊红磷成炭

由含香豆素和PEO链的响应性嵌段聚醚胺制备纳米粒子

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由含香豆素和PEO链的响应性嵌段聚醚胺制备纳米粒子

ADP协效APP/PER阻燃PP的制备及性能

2009年全国高分子学术论文报告会

作者：王瑞姜学松任艳蓉刘睿印杰上海交通大学化学化工学院纳米技术及应用国家工程研究中心

＜正＞通过二环氧和二胺单体的亲核加成/开环反应合成一种含有PEO短链及香豆素的新型嵌段聚醚胺（PEAC）。此嵌段聚醚胺可在水溶液中分散形成直径为50～60nm的尺寸均一的纳米粒子,并且可以通过TEM及紫外-可见光谱观测其在水中的团聚过... 详细信息

＜正＞通过二环氧和二胺单体的亲核加成/开环反应合成一种含有PEO短链及香豆素的新型嵌段聚醚胺（PEAC）。此嵌段聚醚胺可在水溶液中分散形成直径为50～60nm的尺寸均一的纳米粒子,并且可以通过TEM及紫外-可见光谱观测其在水中的团聚过程。结果表明此聚合物纳米粒子对温度及光具有迅速的响应性,并且可以形成微米级胶束内部包裹纳米粒子的复杂结构。

关键词：聚醚胺聚合物微米及纳米粒子响应性

来源： cnki会议评论

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工程塑料应用 2019年第1期47卷 138-142页

作者：鲁哲宏李豪任艳蓉刘保英房晓敏丁涛河南大学化学化工学院功能有机分子工程研究所河南开封475004 阻燃与功能材料河南省工程实验室河南开封475004

以二乙基次膦酸铝(ADP)为协效剂,与聚磷酸铵(APP)/季戊四醇(PER)传统膨胀型阻燃体系复配,通过熔融共混制备了膨胀阻燃聚丙烯(PP)。采用极限氧指数(LOI)、垂直燃烧测试、锥形量热仪、扫描电子显微镜和热重分析研究了阻燃PP的性能及相关... 详细信息

以二乙基次膦酸铝(ADP)为协效剂,与聚磷酸铵(APP)/季戊四醇(PER)传统膨胀型阻燃体系复配,通过熔融共混制备了膨胀阻燃聚丙烯(PP)。采用极限氧指数(LOI)、垂直燃烧测试、锥形量热仪、扫描电子显微镜和热重分析研究了阻燃PP的性能及相关作用机制。结果表明,ADP和APP/PER具有很好的协同阻燃作用,它不但可以同时提高阻燃体系的残炭量和炭层质量,有效抑制熔滴,还可以降低燃烧过程中的生烟量,是更加绿色的阻燃体系。当阻燃体系的总添加量为24%,APP/PER和ADP的质量比为6∶1时,阻燃PP的LOI可达到29.8%,垂直燃烧等级为V–0级,且生烟性比不添加ADP的体系下降了76.9%。阻燃机理研究表明,该体系是以凝聚相为主的凝聚相和气相协同阻燃机制。

关键词：聚丙烯阻燃二乙基次膦酸铝聚磷酸铵季戊四醇协效作用

超强酸催化Friedel-Crafts反应制备无醚磺化聚芳基质子交换膜

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高分子学报 2024年第12期55卷 1730-1741页

作者：黄梓俊龙志陈策能徐珂钱彬彬任艳蓉丁涛房晓敏河南大学化学与分子科学学院开封475001 中国科学院深圳先进技术研究院深圳518055 深圳理工大学材料科学与能源工程学院深圳518000

通过三氟甲磺酸催化Friedel-Crafts反应,合成了含有三氟异亚丙基的无醚聚芳前驱体聚合物.考察了不同芳基单体、电子云密度和空间位阻等因素对前驱体聚合物分子量的影响,并优化反应条件,实现了前驱体的合成.特别是,以联苄和三氟丙酮为原... 详细信息

通过三氟甲磺酸催化Friedel-Crafts反应,合成了含有三氟异亚丙基的无醚聚芳前驱体聚合物.考察了不同芳基单体、电子云密度和空间位阻等因素对前驱体聚合物分子量的影响,并优化反应条件,实现了前驱体的合成.特别是,以联苄和三氟丙酮为原料合成的前驱体聚合物PAAF,展现出了高分子量(Mw=201 kDa,Mn=63 kDa)特性;随后,经氯磺酸三甲基硅烷基酯后磺化制备了sPAAF,其不仅保持了高分子量(Mw=201 kDa,Mn=63 kDa),还具备了高离子交换容量(2.40 mmol/g).在80℃完全水合状态下,质子电导率最高可达102 mS/cm,热分解温度为258℃,化学稳定性良好,在芬顿测试后质量衰减率仅为11%,表明该系列材料具有良好的化学稳定性.本研究旨在通过引入不同的亚苯基结构和功能基团,深入探讨聚合物结构与膜性能之间的构效关系,为开发低成本、高性能的无醚聚苯基质子交换膜材料奠定基础.

关键词：聚合物合成质子交换膜无醚聚苯磺酸功能化

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柔韧性石油发酵尼龙1212的制备与力学性能

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塑料工业 2001年第5期29卷 29-30页

作者：刘民英王玉东赵清香王万杰任艳蓉郭珂李相魁郑州大学材料工程系郑州450052

选择弹性体、酯类、醇类三种不同的增韧剂 ,采用共混挤出法 ,制备柔韧性石油发酵尼龙 12 12。研究了不同增韧剂、不同加入量对柔韧性石油发酵尼龙 12 12的力学性能的影响 ,试验发现 ,当增塑剂B、C的质量分数为 8%～ 10 %时。

关键词：柔韧性石油发酵尼龙1212 制备力学性能