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PRRSV BZ4-19株的分离鉴定及其全基因序列分析

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中国兽医科学 2024年第2期54卷 200-207页

作者：李思琪刘莹刘濮毓任晓祥李岩岩王文钊左玉柱范京惠河北农业大学动物医学院河北保定071001 河北省兽医生物技术创新中心河北保定071001

为了解山东滨州某猪场PRRSV的流行及变异情况,将该猪场采集的疑似PRRSV阳性病料进行RT-PCR检测,检测出的阳性样品用Marc-145细胞进行分离,设计了9对扩增引物用于分离株(BZ4-19)的全基因扩增,将扩增出的全基因序列进行核苷酸及其推导的... 详细信息

为了解山东滨州某猪场PRRSV的流行及变异情况,将该猪场采集的疑似PRRSV阳性病料进行RT-PCR检测,检测出的阳性样品用Marc-145细胞进行分离,设计了9对扩增引物用于分离株(BZ4-19)的全基因扩增,将扩增出的全基因序列进行核苷酸及其推导的氨基酸序列分析。最终成功在Marc-145细胞上分离到1株RespPRRS MLV-like毒株,全基因扩增结果显示其全长为15412 bp(不含polyA尾);核苷酸同源性分析说明,其与美洲经典株VR2332及RespPRRS MLV(疫苗株)同源性最高,分别为99.4%和99.8%。将BZ4-19分离株与VR2332、RespPRRS MLV的氨基酸序列进行比较分析揭示,VR2332与RespPRRS MLV共有30处氨基酸差异,在这30处差异中,分离株与VR2332有7处一致,与RespPRRS MLV有23处一致。在鉴别VR2332与RespPRRS MLV的9处可能与毒力相关的氨基酸位点时,分离株有7处与VR2332相同,由此推测本研究分离到的毒株属于疫苗株RespPRRS MLV返强毒株,我国具有上述分子变化的PRRSV的流行应被关注。

关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV) 经典美洲株 RespPRRS MLV株病毒分离鉴定流行病学

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表达CSFV E2线性表位的PCV2病毒样颗粒的制备及免疫原性研究

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中国预防兽医学报 2024年第1期46卷 70-77页

作者：李岩岩张帅赵云环任晓祥李思琪王文钊左玉柱范京惠河北农业大学动物医学院河北保定071001 河北省兽医生物技术创新中心河北保定071001

为制备携带猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP),并在小鼠体内评价其免疫原性,本研究采用PCR扩增PCV2 Cap基因,利用重叠延伸PCR将PCV2 Cap蛋白的诱饵表位(aa169~aa180)替换成编码两个连续的CSFV E2蛋白线性表位(a... 详细信息

为制备携带猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP),并在小鼠体内评价其免疫原性,本研究采用PCR扩增PCV2 Cap基因,利用重叠延伸PCR将PCV2 Cap蛋白的诱饵表位(aa169~aa180)替换成编码两个连续的CSFV E2蛋白线性表位(aa829~aa837)的融合基因(PCV2-Cap^(169~180)-E2^(829~837))经测序鉴定正确后克隆至载体pET-32a(+)中,构建重组质粒p-Cap-E2并采用PCR方法鉴定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达重组蛋白(PCV2-Cap-E2),采用改良的镍亲和层析法纯化重组蛋白,并利用SDS-PAGE与western blot对重组蛋白的表达形式及反应原性鉴定;利用透射电镜观察纯化的重组蛋白能否形成VLP;利用本研究制备的VLP、PCV2及CSFV商品化疫苗分别免疫小鼠,采用ELISA方法检测免疫后不同时间小鼠体内的抗体水平及细胞因子含量。SDS-PAGE结果显示,在49 ku处出现目的条带,且重组蛋白主要以可溶性形式表达,纯化得到单一的目的蛋白;western blot结果显示,重组蛋白能够与猪源PCV2多克隆抗体(PAb)、猪源CSFV PAb及HRP标记的6×His-Tag小鼠单克隆抗体(MAb)发生特异性反应,在49 ku处出现特异性条带;电镜观察可见重组蛋白形成规则的VLP;抗体的ELISA结果显示,与PBS对照相比,VLP能够诱导小鼠产生较高的PCV2及CSFV抗体水平(P<0.01),与各商品化疫苗均无显著差异。细胞因子的ELISA结果显示,与PBS对照组相比,VLP能够诱导小鼠产生较高水平的细胞因子(P<0.01)。体外病毒中和试验结果显示,VLP免疫的小鼠血清中具有中和PCV2的活性。综上所述,本实验首次在大肠杆菌中可溶性表达并获得了纯化的重组蛋白(PCV2-Cap-E2),且其能够在体外自组装成VLP,并可刺激小鼠产生针对PCV2 Cap蛋白及CSFV E2蛋白的特异性抗体,为研制针对PCV2和CSFV的新型二联VLP疫苗提供了物质基础。

关键词：猪圆环病毒2型病毒样颗粒猪瘟病毒E2蛋白 Cap蛋白

3种消毒剂对猪场4种常见细菌的杀菌效果试验

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动物医学进展 2024年第8期45卷 139-144页

作者：王文钊李妍代飞王敬友顾文源张帅赵云环任晓祥范京惠左玉柱河北农业大学动物医学院/河北省兽医生物技术创新中心河北保定071001 河北科星药业有限公司河北石家庄0500352 河北省动物疫病预防控制中心河北石家庄050035

为了研究聚六亚甲基双胍盐酸盐、过硫酸氢钾复合物、戊二醛-癸甲溴铵在不同作用浓度、不同作用时间对大肠埃希氏菌、葡萄球菌、沙门氏菌以及肺炎克雷伯菌的灭活效果,为猪场选用消毒剂提供参考。采用悬液定量杀菌试验方法,研究3种消毒剂... 详细信息

为了研究聚六亚甲基双胍盐酸盐、过硫酸氢钾复合物、戊二醛-癸甲溴铵在不同作用浓度、不同作用时间对大肠埃希氏菌、葡萄球菌、沙门氏菌以及肺炎克雷伯菌的灭活效果,为猪场选用消毒剂提供参考。采用悬液定量杀菌试验方法,研究3种消毒剂在不同作用浓度、不同作用时间对大肠埃希氏菌、葡萄球菌、沙门氏菌以及肺炎克雷伯菌的灭活效果。结果显示,以杀菌对数值5.00作为评价标准来判断,聚六亚甲基双胍盐酸盐在500mg/L、5min内对大肠埃希氏菌、葡萄球菌、沙门氏菌以及肺炎克雷伯菌的杀灭对数值>5.00;过硫酸氢钾复合物在2000mg/L、5min内对大肠埃希氏菌、葡萄球菌、沙门氏菌以及肺炎克雷伯菌的杀灭对数值>5.00;戊二醛-癸甲溴铵在2000mg/L、10min内对葡萄球菌、沙门氏菌以及肺炎克雷伯菌的杀灭对数值>5.00,大肠埃希氏菌杀灭效果评测试验中,在试验浓度和时间中没有结果显示杀灭对数值5.00。结果表明除了戊二醛-癸甲溴铵对大肠埃希氏菌的杀灭效果相对较差外,3种消毒剂在试验浓度下均具有良好的杀灭细菌繁殖体效果。

关键词：聚六亚甲基双胍盐酸盐过硫酸氢钾复合物戊二醛-癸甲溴铵灭菌效果

基于机器学习的混合高分子材料打印缺陷的研究

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基于机器学习的混合高分子材料打印缺陷的研究

作者：任晓祥沈阳理工大学

学位级别：硕士

本文以科技部重点研发计划“3D打印可降解椎间融合器”为依托,在已经完成部分项目基础上进一步深入开展的。本文针对微挤出式3D打印过程中使用混合高分子材料作为打印原料时常见缺陷——翘曲变形为研究对象,通过分析整个打印过程,建立... 详细信息

本文以科技部重点研发计划“3D打印可降解椎间融合器”为依托,在已经完成部分项目基础上进一步深入开展的。本文针对微挤出式3D打印过程中使用混合高分子材料作为打印原料时常见缺陷——翘曲变形为研究对象,通过分析整个打印过程,建立定性物理模型,借助有限元分析微挤出模块热传导探讨翘曲缺陷产生过程以及影响因素。将打印零散数据按照机器学习方法,收集数据、优化数据、特征选取、算法引入、分析原因。本文主要内容有:(1)分析了微挤出式3D打印技术的工作原理及过程,指出打印过程中的可调参数及其作用;分析了加工过程中成型件翘曲变形产生的机理及其影响因素;阐述了加工过程中对成型件翘曲量的测度方法。(2)分析微挤出式3D打印技术传热过程,根据打印设备构建挤出模块有限元仿真模型,并通过实验验证喷嘴温度与温控之间关系。根据翘曲建立物理模型,实验验证模型定性关系,收集实验数据,以及通过实验结果分析减少翘曲措施。将已经合格打印支架进行部分表征实验以及SEM观察成纤维细胞在支架上黏附实验。(3)为符合决策树算法使用模式,对打印实验数据进行预处理,分析决策树、随机森林算法概念与原理,对打印数据中影响较大特征进行决策树分析。最后找到翘曲特征中影响最大的两个变量,对极大缓解翘曲缺陷做出努力。

关键词：微挤出式3D打印翘曲变形机器学习有限元仿真

全生命周期视角下中国建筑碳排放空间关联网络演化及影响因素分析

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环境科学 2024年第3期45卷 1243-1253页

作者：任晓松李昭睿山西财经大学管理科学与工程学院太原030031 北京理工大学管理与经济学院北京100081 北京理工大学能源与环境政策研究中心北京100081

基于全生命周期视角核算2011~2019年中国省际建筑碳排放量,采用社会网络分析方法,探究碳排放空间关联网络演化及其影响因素.结果表明:(1)中国建筑碳排放空间关联网络形态明显存在,网络密度和网络关联数逐渐上升,网络紧密性和稳定性逐渐... 详细信息

基于全生命周期视角核算2011~2019年中国省际建筑碳排放量,采用社会网络分析方法,探究碳排放空间关联网络演化及其影响因素.结果表明:(1)中国建筑碳排放空间关联网络形态明显存在,网络密度和网络关联数逐渐上升,网络紧密性和稳定性逐渐提高.(2)上海、浙江、天津、北京和江苏处于碳排放空间关联网络的核心和支配地位.(3)北京、天津、江苏、内蒙古、上海和山东属于“净受益”板块,接收其他地区的建筑碳排放;广东、重庆、福建和浙江属于“经纪人”板块,实现了建筑碳排放生产端和消费端的动态平衡;其余省份均扮演“净溢出”角色,主动向外省发出建筑碳排放量.板块间的关联关系远大于板块内部的关联关系.(4)经济发展、空间邻接关系、城镇化、建筑业过程结构和产业结构差异对建筑碳排放空间关联产生显著影响.研究结果可为建筑业区域协同减排提供参考.

关键词：建筑碳排放引力模型空间关联社会网络分析二次指派程序

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全球史与国际关系理论的再认识

世界经济与政治 2024年第1期 22-37,172页

作者：任晓北京外国语大学区域与全球治理高等研究院北京100089 复旦大学国际问题研究院

长期以来,世界历史和国际关系理论研究都深受西方中心主义的影响,其着眼点和思想材料大多聚焦或取自欧洲/西方的历史尤其是外交史。全球史是一种较新的研究取向和视角,具有宏阔视野、整体史观、多中心观和比较历史等特性,在学术倾向和... 详细信息

长期以来,世界历史和国际关系理论研究都深受西方中心主义的影响,其着眼点和思想材料大多聚焦或取自欧洲/西方的历史尤其是外交史。全球史是一种较新的研究取向和视角,具有宏阔视野、整体史观、多中心观和比较历史等特性,在学术倾向和精神上与全球国际关系学相通。既有国际关系理论主要由西方建构,有其可取之处,但也存在不可忽视的缺陷。对“硬科学”的过度偏好混淆了社会科学与自然科学的不同性质,产生了“科学主义”的谬误。我们对此应予以反思,而比较历史分析为这种纠偏提供了重要的可行路径。通过概括分析全球史这一学术取向的特征并阐明国际关系理论与全球史的潜在共通之处,有助于寻找国际关系元理论创新的生长点。比较历史分析作为一种研究方法和路径具有重要的价值,能够为理论创新提供新的可能性,使国际关系理论的发展呈现新的面貌。

关键词：全球史国际关系理论全球国际关系学比较历史分析自主知识体系

国际关系学中的共生学派:中国经验与国际回响

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学术月刊 2024年第5期56卷 70-76页

作者：任晓北京外国语大学区域与全球治理高等研究院北京100089 复旦大学国际问题研究院上海200433

近十余年来,中国国际关系学界围绕“共生”相关理论问题展开了积极活跃的学术探讨,已然形成了一个学术流派。从有关事实看,中国国际关系学中的共生学派仍然在生长发展之中,并已引起国际学术界的注意和重视。本文试图就国际关系学共生学... 详细信息

近十余年来,中国国际关系学界围绕“共生”相关理论问题展开了积极活跃的学术探讨,已然形成了一个学术流派。从有关事实看,中国国际关系学中的共生学派仍然在生长发展之中,并已引起国际学术界的注意和重视。本文试图就国际关系学共生学派的成长梳理其发展过程,并就其已经引起的国际反响作一交代和阐述。

关键词：国际关系学学术流派相关理论问题学术探讨国际反响共生学派

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光催化去芳构化合成桥环化合物

有机化学 2024年第2期44卷 670-671页

作者：任晓钰许兆青兰州大学基础医学院 730000

桥联苯并氮杂环作为许多天然产物和生物活性分子中重要骨架,已经引起了生物化学和制药领域的科学家广泛关注[1].然而,由于该类骨架分子在合成方面大都需要对底物进行多步的预功能化,使得这些有价值的桥环体系的开发受到了一定的限制.近... 详细信息

桥联苯并氮杂环作为许多天然产物和生物活性分子中重要骨架,已经引起了生物化学和制药领域的科学家广泛关注[1].然而,由于该类骨架分子在合成方面大都需要对底物进行多步的预功能化,使得这些有价值的桥环体系的开发受到了一定的限制.近些年来,尽管光促进的去芳构化反应已经取得长足发展[2],但大部分的反应都局限于富电子的芳烃,如吲哚、苯酚以及吡咯类似物等[3],而对于缺电子芳烃的去芳构化反应的发展较少,大部分都集中在Birth型还原反应.此外,与分子内去芳构反应相比[4],分子间反应更灵活,可以增加目标产物的官能团多样性,并且不需要额外的步骤来制备复杂的底物.

关键词：芳构化反应桥环化合物缺电子氮杂环还原反应天然产物生物活性分子光催化

卤盐催化的α,β-环氧羧酸酯与异氰酸酯[3+2]环加成反应研究

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有机化学 2024年第1期44卷 251-258页

作者：王化坤任晓龙宣宜宁广东药科大学药学院广州510006

研究了一种α,β-环氧羧酸酯与异氰酸酯之间的[3+2]环加成反应.以溴化镁为催化剂,通过α,β-环氧羧酸酯与异氰酸酯发生[3+2]环加成反应,高效地合成出手性噁唑烷-2-酮.反应具有良好的底物适应性,对于手性环氧化合物参与的反应,产物对映... 详细信息

研究了一种α,β-环氧羧酸酯与异氰酸酯之间的[3+2]环加成反应.以溴化镁为催化剂,通过α,β-环氧羧酸酯与异氰酸酯发生[3+2]环加成反应,高效地合成出手性噁唑烷-2-酮.反应具有良好的底物适应性,对于手性环氧化合物参与的反应,产物对映体过量值保持良好.产物在碱性条件下开环,合成出紫杉醇C-13侧链((2R,3S)-3-苯甲酰胺-2-羟基3-苯基丙酸甲酯),光学纯度高达97%ee.

关键词：不对称合成 [3+2]环加成噁唑烷-2-酮紫杉醇侧链

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