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丙型肝炎病毒核心蛋白激活iNOS表达对DNA的损伤作用研究

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军事医学科学院院刊 2006年第6期30卷 537-540页

作者：任勇亚南京医科大学病理学系南京210029

目的:在转基因小鼠中,研究丙肝病毒(HCV)核心蛋白激活诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)表达对DNA的损伤作用。方法:携带HCV cDNA的质粒载体pSG-1/HCV显微注射入C57小鼠受精卵。取12月龄小鼠肝组织标本,RT-PCR和W estern印迹检测HCV和iNOS的... 详细信息

目的:在转基因小鼠中,研究丙肝病毒(HCV)核心蛋白激活诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)表达对DNA的损伤作用。方法:携带HCV cDNA的质粒载体pSG-1/HCV显微注射入C57小鼠受精卵。取12月龄小鼠肝组织标本,RT-PCR和W estern印迹检测HCV和iNOS的表达水平。尾静脉注射小分子RNA干扰片段作为实验组,PBS作为对照组,对比各组小鼠的iNOS在mRNA和蛋白水平的表达情况及其体内NO的含量。通过连接反应介导的PCR(LM-PCR)方法,评价iNOS和NO水平变化对DNA双链断裂(DSB)的影响。结果:在转基因小鼠的肝脏中,有HCV和iNOS的特异性高表达,NO含量和DSB水平也远高于未转染HCV基因的正常小鼠。经RNA干扰作用6 d后,实验组小鼠的iNOS表达在mRNA和蛋白水平都有非常明显的下降(P<0.01);同时NO含量也下降(P<0.01),DSB现象基本消失。结论:HCV核心蛋白在肝细胞中能激活iNOS的表达,诱导生成NO,进而引发DSB现象,造成对基因组DNA的损伤。RNA干扰可以有效逆转HCV对iNOS基因的激活,对于治疗和预防HCV患者发生的肝癌具有重要意义。

关键词：丙肝病毒诱导型一氧化氮合成酶 DNA损伤 DNA双链断裂 RNA干扰基因表达

P73、p16～（Ink4a）、cyclinD1、p27～（Kip1）、CDK4及Ki67在胃癌中的表达及相关性研究

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P73、p16～（Ink4a）、cyclinD1、p27～（Kip1）、CDK4及Ki67在胃...

作者：任勇亚山西医科大学

学位级别：硕士

目的：探讨胃癌p73、p16、cyclinD1、p27、CDK4、ki67的表达、相关性及其与胃癌临床病理指标和预后的关系。分析胃癌相关基因在胃癌发生、发展中的作用，为临床早期诊断及基因治疗提供依据。方法：应用免疫组织化学SP法检测胃癌及... 详细信息

目的：探讨胃癌p73、p16、cyclinD1、p27、CDK4、ki67的表达、相关性及其与胃癌临床病理指标和预后的关系。分析胃癌相关基因在胃癌发生、发展中的作用，为临床早期诊断及基因治疗提供依据。方法：应用免疫组织化学SP法检测胃癌及正常胃组织中p73、p16、cyclinD1、p27、CDK4、ki67的表达。应用SAS 8.0统计软件进行结果分析。结果：1．胃癌组织中p73蛋白阳性表达26／68例(38.24％)，显著高于对照级1／20(5％)(P＜0.01)。p73蛋白表达与患者年龄、性别、胃癌肉眼分型及浸润深度等无明显关系，而与组织学分级、淋巴结转移及临床分期有关：高分化胃癌表达低于中、低分化胃癌表达(P＜0.01)(中、低分化胃癌间表达无显著差异);有淋巴结转移者表达高于无淋巴结转移者(P＜0.01);Ⅰ～Ⅱ期胃癌表达低于Ⅲ～Ⅳ期胃癌表达(P＜0.01)。 2．胃癌p16和p27蛋白表达阳性率分别为57.35％(39／68)、44.12％(30／68)，而对照组分别为85.00％(17／20)、75％(15／20)，两组表达阳性率差异均显著(P＜0.01)。p16和p27表达与胃癌分化度、淋巴结转移、临床分期有关：高、中分化胃癌p16和p27表达阳性率均显著高于低分化癌(P＜0.01);有淋巴结转移者表达低于无淋巴结转移者表达(P＜0.01);Ⅰ～Ⅱ期胃癌表达高于Ⅲ～Ⅳ期胃癌表达(P＜0.01)。 ***1和CDK4在正常胃组织中表达阳性率为0.00％(0／20)和10％(2／20)，在胃癌组为73.53％(50／68)和61.76％(42／68)，两组比较差异高度显山1叮医科大学*2003届祠两习卜学位士仑文* 著(尹***)。川一W期胃癌表达显著高J几I一11期胃癌表达(l气0.01)。 5.胃癌中pl6!nk，”与cyclinD一表达呈负相关关系(尹<0.0一)。ki67与pl6，·k‘” 表达呈负相关关系切<0.01)。cyelinDI与CDK4表达呈JI一相关关系(p<0.01)。ki67 与p27k‘p’表达呈负相关关系护<0.01)。结论:胃癌发生和发展的机制涉及p一6，nk‘，、p27k‘p’、e，elino一和eoK4调一}了通路中多个基囚的异常，而日‘与胃癌分级、淋巴结转移及临床分期等有关。CDK4 和cyclin01蛋白高表达是胃癌发生‘!，的旱期分子事件，lJJ作为胃乡泉旱期诊断的标志物。pl6，nk‘a、p27k’p，f氏表达反l映了胃癌恶犷t进展，是有价值的预后l习子。eyelinol 与pl6lnk4a有协同作用。p73在胃痛中呈高表达，提示它，刁能科为癌基囚参与了胃癌的发生和发展，是重要的生物学标志。ki67是增殖细胞核抗原，可用J飞评估肿瘤细胞的增殖活性。ki67与pl6，nk4a者联合作为筛选癌前病变高危个休的生物指标更有意义。

关键词：胃肿瘤免疫组织化学癌基因肿瘤抑制基因细胞周期 p73 p16Ink4a cyclinDl p27kipl CDK4 ki67

HIPK2对肝癌细胞HepG2生物学表型的调控机制研究

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军事医学科学院院刊 2008年第1期32卷 19-22,26页

作者：任勇亚杜丽坚南京医科大学病理学系南京210029

目的:研究外源同源结构域相互作用蛋白激酶2(HIPK2)基因表达对人肝癌细胞系HepG2裸鼠成瘤性的影响及机制。方法:将人HIPK2基因的全长cDNA序列克隆至腺病毒载体(pAdeno-HIPK2),制备Adeno-HIPK2重组腺病毒。以50 pfu/细胞的Adeno-HIPK2感... 详细信息

目的:研究外源同源结构域相互作用蛋白激酶2(HIPK2)基因表达对人肝癌细胞系HepG2裸鼠成瘤性的影响及机制。方法:将人HIPK2基因的全长cDNA序列克隆至腺病毒载体(pAdeno-HIPK2),制备Adeno-HIPK2重组腺病毒。以50 pfu/细胞的Adeno-HIPK2感染HepG2细胞作为实验组,Adeno-lacZ感染作为阴性对照,未感染细胞作为空白对照,观察各组细胞的裸鼠成瘤性和细胞凋亡情况,并绘制细胞生长曲线。第6周取材,检测各组样品中HIPK2、JNK1、JNK2、P53、mdm2的水平和JNK激酶活性。结果:实验组细胞的裸鼠成瘤性明显降低,细胞凋亡率有所上升。实验组的P53和mdm2的蛋白表达分别是对照组的3倍和15%,JNK1和JNK2基本不变,但JNK激酶活性则升至对照组的5倍。结论:HIPK2高表达可以激活JNK激酶途径,并有效提高细胞内P53水平,使HepG2细胞的裸鼠成瘤性下降,是肝癌生物治疗中重要目的基因。

关键词： HIPK2 肝癌 JNK丝裂原活化蛋白激酶类 P53 mdm2 细胞凋亡

大肠癌p16^(Ink4a)和周期素D1的表达及临床意义

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江苏医药 2008年第11期34卷 1104-1105,I0001页

作者：焦学信任勇亚南京医科大学 210029 上海梅山医院

目的探讨大肠癌p16Ink4a和周期素(cyclin)D1的表达及其临床病理指标和预后的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测大肠癌及正常大肠黏膜中p16Ink4a和周期素D1的表达水平。结果大肠癌组织中p16Ink4a和周期素D1表达率为57.35%和73.53%,而... 详细信息

目的探讨大肠癌p16Ink4a和周期素(cyclin)D1的表达及其临床病理指标和预后的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测大肠癌及正常大肠黏膜中p16Ink4a和周期素D1的表达水平。结果大肠癌组织中p16Ink4a和周期素D1表达率为57.35%和73.53%,而对照组为85.00%和0.00%,两组表达阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。p16Ink4a和周期素D1表达与大肠癌分化度、淋巴结转移、临床分期有关。大肠癌中p16Ink4a与周期素D1蛋白表达呈负相关(P<0.01)。结论大肠癌发生机制涉及p16Ink4a和周期素D1调节通路中多个基因的异常,且与大肠癌分级、淋巴结转移及临床分期等有关。周期素D1蛋白高表达可能是大肠癌发生中的早期分子事件,可作为大肠癌早期诊断的标志物。p16Ink4a低表达反映了大肠癌恶性进展,是有价值的预后因子。

关键词：大肠肿瘤癌基因 p16^Ink4a 周期素D1

肾透明细胞癌VHL基因突变与CyclinD1过度表达的相关性

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癌症 2006年第2期25卷 175-178页

作者：任勇亚杜丽坚冯振卿冷静南京医科大学病理学系江苏南京210029

背景与目的:VHL基因突变与肾透明细胞癌发生关系密切,而CyclinD1基因通过促进细胞过度增殖,对肾透明细胞癌发生和发展起重要作用。本研究拟初步探讨肾透明细胞癌中VHL基因突变的状况及其与CyclinD1表达上升的相关性。方法:取50例肾透明... 详细信息

背景与目的:VHL基因突变与肾透明细胞癌发生关系密切,而CyclinD1基因通过促进细胞过度增殖,对肾透明细胞癌发生和发展起重要作用。本研究拟初步探讨肾透明细胞癌中VHL基因突变的状况及其与CyclinD1表达上升的相关性。方法:取50例肾透明细胞癌手术标本,抽提病变组织和癌周正常组织中的基因组DNA和总RNA。通过PCR扩增VHL基因各外显子序列并测序以及内切酶鉴定的方法,确定肿瘤组织中VHL基因突变的比率和具体位点。通过RT-PCR和Westernblot方法,检测相应肿瘤组织中CyclinD1的表达水平是否发生改变。结果:VHL基因序列检测结果表明,有42例(84.0%)肾透明细胞癌标本的VHL基因发生各种形式的突变,有12(24.0%)例甚至发生2种以上的基因突变。在57例VHL基因外显子突变中,1号外显子突变有17例(29.8%);2号外显子突变有26例(45.6%);3号外显子突变有14例(24.6%)。CyclinD1的表达水平在42例VHL基因发生突变的组织中均有不同程度的上升,达到正常对照组的2～10倍(3.91±1.54倍)(P<0.01),另8例表现为正常。结论:在肾透明细胞癌中存在各种VHL基因突变,导致CyclinD1过度表达。

关键词：肾肿瘤癌,肾透明细胞 VHL基因细胞周期素D1 基因突变

survivin、cyclin D1在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

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南京医科大学学报（自然科学版） 2010年第1期30卷 12-16,58页

作者：田智丹焦学信任勇亚戚晓红南京医科大学病理学与病理生理学系江苏南京210029 上海梅山医院普外科江苏南京210039

目的:探讨survivin、cyclinD1在结直肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:43例结直肠癌组织标本,应用实时荧光定量PCR对survivin、cyclinD1基因在结直肠癌组织及癌旁正常组织中的mRNA水平进行定量检测,同时应用蛋白免疫印记(Wes... 详细信息

目的:探讨survivin、cyclinD1在结直肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:43例结直肠癌组织标本,应用实时荧光定量PCR对survivin、cyclinD1基因在结直肠癌组织及癌旁正常组织中的mRNA水平进行定量检测,同时应用蛋白免疫印记(Westernblot)检测其在结直肠癌组织及癌旁正常组织中蛋白水平的表达。结果:结直肠癌组织survivin、cyclinD1mRNA和蛋白水平的表达均较癌旁正常组织表达显著上调,其差异有统计学意义(P﹤0.05);survivin、cyclinD1mRNA和蛋白水平的表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿块大小、浸润深度无显著相关性(P﹥0.05),而与TNM分期、淋巴结转移有显著相关(P﹤0.05)。结论:提示survivin、cyclinD1基因在结直肠癌的发生、发展过程及预后中可能具有重要作用,有望成为新的肿瘤标志物或预后因子。

关键词： survivin cyclin D1 结直肠癌实时荧光定量PCR Western blot

周期素D1和生存素在大肠癌组织中的表达及其相关性

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江苏医药 2010年第11期36卷 1281-1284,F0002页

作者：焦学信田智丹任勇亚上海梅山医院普通外科南京210039 南京医科大学病理学系

目的探讨周期素(cyclin)D1和生存素(survivin)在大肠癌中的表达及其相互关系。方法应用RT-PCR和免疫组化检测周期素D1和生存素在43例大肠癌及其癌旁正常肠组织的基因转录水平和蛋白表达水平。结果周期素D1和生存素在大肠癌组织中表达明... 详细信息

目的探讨周期素(cyclin)D1和生存素(survivin)在大肠癌中的表达及其相互关系。方法应用RT-PCR和免疫组化检测周期素D1和生存素在43例大肠癌及其癌旁正常肠组织的基因转录水平和蛋白表达水平。结果周期素D1和生存素在大肠癌组织中表达明显高于癌旁组织(P<0.05),周期素D1和生存素在大肠癌中转录水平和蛋白水平表达均呈正相关(P<0.05)。结论周期素D1和生存素基因在结直肠癌组织中均呈高表达,两者在大肠癌的发生发展中发挥着协同作用。

关键词：周期素D1 生存素大肠癌

课程思政元素融入病理学教学效果的评价机制研究与探索

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科幻画报 2021年第7期 51-52页

作者：宋冬马娟任勇亚南京医科大学康达学院南京医科大学

近年来习近平总书记提出的"课程思政"新理念在全国高校开展,大思政体系的逐步形成是教育发展的必然趋势。保障医学生培养质量是建设卫生教育强国的重要组成部分,部分医学院校在遵循人才培养规律的前提下,将思政教育融入课堂。但如何将...

近年来习近平总书记提出的"课程思政"新理念在全国高校开展,大思政体系的逐步形成是教育发展的必然趋势。保障医学生培养质量是建设卫生教育强国的重要组成部分,部分医学院校在遵循人才培养规律的前提下,将思政教育融入课堂。但如何将思政元素与病理学知识点系统化融合、如何对融合后的教学效果做合理评价,尚未得到较统一的教学及评价体系。本文通过介绍在病理学教学中开展"课程思政"的教学效果,探讨其实施的重大意义,并探索将课程思政与病理学教学深度融合的教学效果评价机制。

关键词：

nm23基因产物/NDPK在膀胱癌的表达及临床意义

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山西中医学院学报 2000年第2期1卷 34-35页

作者：任勇亚李士瑛山西职工医学院山西太原030012 山西医科大学山西太原030001

目的 :探讨肿瘤转移抑制相关基因表达水平与膀胱癌生物学行为的关系。方法 :用免疫组化LSAB法分析nm2 3/NDPK在膀胱癌的表达及其与多种指标的关系。结果 :nm2 3/NDPK表达强度随肿瘤临床分期和病理分级的增高而增高。高分化肿瘤nm2 3/NDP... 详细信息

目的 :探讨肿瘤转移抑制相关基因表达水平与膀胱癌生物学行为的关系。方法 :用免疫组化LSAB法分析nm2 3/NDPK在膀胱癌的表达及其与多种指标的关系。结果 :nm2 3/NDPK表达强度随肿瘤临床分期和病理分级的增高而增高。高分化肿瘤nm2 3/NDPK表达明显低于中低分化肿瘤 ,有淋巴结转移者nm2 3/NDPK表达显著低于未转移者。结论 :nm2 3/NDPK可能在膀胱癌发生及转移中起不同调节作用 ,可作为评价膀胱癌恶性程度、肿瘤进展及预后的指标。

关键词：膀胱癌基因免疫组织化学