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芦笋种质资源的ISSR分析及筛选的抗病芦笋品种再生体系的建立

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芦笋种质资源的ISSR分析及筛选的抗病芦笋品种再生体系的建立

作者：代真真海南大学

学位级别：硕士

芦笋,又名石刁柏,其营养价值和经济价值极高,具有“蔬菜之王”之美称。国内生产上所用芦笋品种一直依赖于进口,进口种子价格昂贵且品种混乱。且多适合干旱地带。茎枯病(Phomapsis asparagi Sacc)是芦笋生产上的一种毁灭性的病害,在我国... 详细信息

芦笋,又名石刁柏,其营养价值和经济价值极高,具有“蔬菜之王”之美称。国内生产上所用芦笋品种一直依赖于进口,进口种子价格昂贵且品种混乱。且多适合干旱地带。茎枯病(Phomapsis asparagi Sacc)是芦笋生产上的一种毁灭性的病害,在我国南方多发严重,抗病品种的需求迫在眉睫。本文从国内外搜集了24份芦笋种质资源通过ISSR分子标记技术进行遗传多样性研究和抗茎枯病接种鉴定,开展了优良抗病种质的组织培养,取得以下研究结果： 1.采用改良的SDS法、改良的CTAB法和试剂盒法等3种方法提取芦笋基因组DNA,探索了三种提取方法对芦笋DNA质量的影响。实验结果表明,改进的CTAB法提取的DNA条带明显,且条带整齐一致,DNA纯度和产量均优于其它两种方法。 2.建立了适合于芦笋种质资源ISSR分子标记分析的PCR反应体系。 3.从100条ISSR引物中筛选出10条多态性引物对24个芦笋品种进行了ISSR分析,共获得98个扩增位点,其中多态性位点74个,占总扩增位点数的75.61%。每条引物扩增位点数的平均数为10个。实验结果表明：遗传相似系数在0.76-0.93之间,从相似系数看24份芦笋种质的亲缘关系较近;在相似系数0.771点时,可以把24个品种分为四组,并且相似系数在0.899处时,荷兰的品种全部聚在一起;主成分分析的结果与遗传相似系数分析结果一致。 4.通过对芦笋幼苗的室内接种抗病鉴定,结果表明：高抗品种为阿波罗、紫色激情、格兰德和杰西奈特四个品种,以上四个品种可作为抗病育种的基础材料。 5.通过实验获得以泽西奈特品种的芦笋茎尖、茎段、种子不同外植体进行愈伤诱导,得出茎尖为诱导愈伤的最佳外植体。 6.开展了诱导培养再生植株的研究。实验结果表明：用75%的酒精对芦笋嫩茎浸泡消毒30s、无菌水冲洗4-5次、0.1%HgCl2处理12min效果最好,污染率低且存活率高,其存活率可达100%;最适芦笋茎尖诱导愈伤组织的培养基为：MS+BA0.3mg/L+NAA1.5mg/L+25g/L蔗糖+琼脂7g/L (pH5.8);最适宜愈伤组织增殖诱导分化不定芽的培养基为：MS+2,4-D1.5mg/L+BA0.1mg/L+30g/L蔗糖+琼脂8g/L(pH5.8);最适生根培养基为：1/2MS+0.5mg/L IBA+lmg/L PP333+0.3mg/L BA+琼脂8g/L(pH5.8)。

关键词：芦笋 ISSR 抗病性鉴定茎尖组织培养

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基于统计学习方法的进化算法研究

基于统计学习方法的进化算法研究

作者：代真真华东师范大学

学位级别：硕士

进化算法是一种求解全局最优问题的有效算法。近年来它引起学术领域的广泛关注并成功应用于工程,具有切实的研究意义和研究价值。在研究和应用过程中,人们发现进化算法可能会出现计算量大、局部搜索能力差、搜索盲目等问题。本文采用统... 详细信息

进化算法是一种求解全局最优问题的有效算法。近年来它引起学术领域的广泛关注并成功应用于工程,具有切实的研究意义和研究价值。在研究和应用过程中,人们发现进化算法可能会出现计算量大、局部搜索能力差、搜索盲目等问题。本文采用统计学习方法改善进化算法的上述问题。主要研究内容包括：(1)提出基于代理模型的进化算法。构造计算量小、消耗少的近似模型,代替原有的高精度分析计算模型,控制算法的计算花销和指导种群个体的进化方向。(2)提出基于正交局部搜索的进化算法。在全面的实验中根据正交表选取具有代表性的实验样例进行实验。另外在正交分组时,采取基于统计分析的方法进行分组,提升进化算法的局部搜索能力。(3)提出基于均值漂移的进化算法。个体根据其相对于均值的偏移量和种群密度来选择进化方向。实验表明代理模型、正交实验设计、均值漂移这三种统计学习方法分别适应于不同类别的问题求解,利于更快更准确的得到优化问题的近似最优解。

关键词：进化算法全局优化代理模型正交实验设计均值漂移

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黑曲霉柠檬酸发酵过程研究及其优化

黑曲霉柠檬酸发酵过程研究及其优化

作者：代真真华东理工大学

学位级别：硕士

本文对以玉米粉为原料的柠檬酸发酵过程进行了研究及优化。采用参数相关性分析对柠檬酸的发酵过程特性有了深入的认识,确定了发酵过程的基本培养条件为：临界氧浓度40%、发酵温度37.5℃、发酵初始pH 3.8-4.1。利用HPLC对发酵过程产... 详细信息

本文对以玉米粉为原料的柠檬酸发酵过程进行了研究及优化。采用参数相关性分析对柠檬酸的发酵过程特性有了深入的认识,确定了发酵过程的基本培养条件为：临界氧浓度40%、发酵温度37.5℃、发酵初始pH 3.8-4.1。利用HPLC对发酵过程产生的杂酸种类及浓度进行了研究,发现黑曲霉Co-827以玉米粉为基质进行的柠檬酸发酵过程产生的杂酸主要有草酸、顺乌头酸、反乌头酸,且浓度很低,发酵液中柠檬酸纯度达到99%以上对发酵过程进行了优化。种龄由28 h减少到22 h,在此种龄下进行发酵,发酵周期缩短7 h,柠檬酸浓度也有所提高。液化时间减半能使发酵初期溶磷浓度减少,有利于发酵过程产酸的启动及对菌体生长的控制。补充CO2的实验得到了很好的效果,产酸量提高到14.2%,转化率由87.3%提高到94.6%。对不同液化条件下玉米粉的液化结果进行了研究,得到了高效的液化条件：95℃、液固比3.17：1、搅拌转速160 rpm,同时研究了不同加酶量、介质pH、液化时间对液化液中营养元素溶出的影响,实验结果表明,高加酶量、自然pH、液化合格后立即终止液化的液化条件有利于柠檬酸发酵。

关键词：黑曲霉柠檬酸发酵参数相关液化

藏红花素对孤独症模型鼠学习记忆及海马BDNF、CREB表达的影响研究

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藏红花素对孤独症模型鼠学习记忆及海马BDNF、CREB表达的影响研究

作者：代真真佳木斯大学

学位级别：硕士

目的:探究藏红花素对孤独症模型鼠学习记忆及海马神经元数量、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophicor,BDNF)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cyclic AMP response element bingding protein,CREB)表达的影响。从而为藏红花素... 详细信息

目的:探究藏红花素对孤独症模型鼠学习记忆及海马神经元数量、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophicor,BDNF)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cyclic AMP response element bingding protein,CREB)表达的影响。从而为藏红花素治疗孤独症提供新思路、新方向。方法:随机选取健康清洁级Wistar雌性大鼠20只,参照Schneider造模方法,于E12.5天腹腔注射丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)600mg/kg,标记为VPA组孕鼠,所产下的仔鼠为孤独症模型组仔鼠;随机选取10只孕鼠腹腔注射同等剂量生理盐水,标记为NS组孕鼠,所产下的仔鼠为正常对照组仔鼠。随机选取7日龄孤独症模型组仔鼠80只,7日龄正常对照组仔鼠(NS组)40只;将孤独症模型组仔鼠随机分为两组即藏红花素组(CVPA组)40只,溶剂对照组(VPA组)40只;CVPA组仔鼠选取P7、P14、P21时间窗,分别标记为CVPA-1组、CVPA-2组、CVPA-3组,每日腹腔注射藏红花素50mg/kg,时长21天;VPA组和NS组仔鼠选取相同时间窗,分别记为VPA-1组、VPA-2组、VPA-3组、NS-1组、NS-2组、NS-3组,每日腹腔注射同等剂量的生理盐水,时长21天。分别观察藏红花素不同干预时间窗仔鼠的行为和学习记忆能力。应用尼氏染色、免疫荧光、免疫印迹及图像分析技术,观察藏红花素不同干预时间窗仔鼠海马神经元形态、Neu N阳性细胞数量及BDNF、CREB蛋白表达的变化。结果:(1)VPA组孕鼠孕期体重增加及产仔鼠数量均较NS组少(p0.05);藏红花干预时间窗为P7和P14时,CVPA-1组和CVPA-2组仔鼠分别与VPA-1组和VPA-2组相比,学习记忆能力提高(p0.05)。结论:藏红花素干预能够改善孤独症模型鼠的学习记忆能力,增加海马Neu N阳性细胞数量;促进孤独症模型鼠海马BDNF、CREB蛋白表达;藏红花素对孤独症模型鼠的干预因用药时间窗不同效果不同,P7、P14干预时间窗有改善作用,P21干预时间窗效果不明显。

关键词：孤独症藏红花素海马神经元 BDNF CREB

针刺联合作业疗法干预孤独症谱系障碍社会生活能力的临床研究

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中国康复医学杂志 2024年第5期39卷 669-674页

作者：汪辉党伟利马丙祥李伟代真真河南中医药大学第一附属医院儿科河南省郑州市450000 河南中医药大学儿科医学院

目的:观察针刺联合作业疗法对孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)儿童社会生活能力的干预疗效。方法:选取我院2021年1月至2022年12月收治的3—6岁ASD儿童72例,采用随机数字表法分为对照组与观察组,每组36例。对照组运用作业... 详细信息

目的:观察针刺联合作业疗法对孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)儿童社会生活能力的干预疗效。方法:选取我院2021年1月至2022年12月收治的3—6岁ASD儿童72例,采用随机数字表法分为对照组与观察组,每组36例。对照组运用作业疗法,观察组在对照组基础上结合针刺治疗,连续治疗12周。采用Gesell发育诊断量表(GDS)、孤独症儿童行为量表(ABC)、婴儿-初中生社会生活能力量表(S-M)和孤独症儿童心理教育量表第3版(PEP-3)评测比较两组治疗效果,并统计针刺过程中副反应情况。结果:观察组总有效率为83.33%,与对照组总有效率为61.11%相比较明显提升(P<0.05)。治疗后两组儿童Gesell发育量表适应性行为、粗大、精细、语言及个人-社会等5大能区评分及总分均较治疗前提升,且观察组效果明显优于对照组(P<0.05)。两组儿童ABC交往、生活自理因子评分及总分均较治疗前降低,观察组效果优于治疗组(P<0.05)。两组儿童S-M评分高于治疗前,观察组效果优于对照组(P<0.05)。两组PEP-3个人自理、适应行为评分均明显提高,观察组提高更明显(P<0.05)。观察组儿童针刺过程中的副反应较小。结论:针刺联合作业疗法能有效改善孤独症儿童的发育水平,提高社会生活能力,有利于孤独症儿童的预后。

关键词：针刺作业疗法孤独症谱系障碍社会生活能力

坛紫菜两种Hsp90基因的克隆及表达特征分析

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水产学报 2014年第3期38卷 340-349页

作者：代真真李兵徐燕纪德华陈昌生谢潮添集美大学水产学院

以坛紫菜转录组测序获得的unigene序列为基础,采用RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术克隆获得了坛紫菜的两条Hsp90基因序列:PhHsp90-1和PhHsp90-2。序列分析结果表明,PhHsp90-1序列全长2 572 bp,包含一个2 427 bp的开放阅读框... 详细信息

以坛紫菜转录组测序获得的unigene序列为基础,采用RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术克隆获得了坛紫菜的两条Hsp90基因序列:PhHsp90-1和PhHsp90-2。序列分析结果表明,PhHsp90-1序列全长2 572 bp,包含一个2 427 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含809个氨基酸,分子量为90.2 ku,等电点为4.79,属于Hsp90内质网亚家族(登录号:KF732651);PhHsp90-2序列全长2 510 bp,包含一个2 280 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含760个氨基酸,分子量为86.2 ku,等电点为4.81,属于Hsp90细胞质亚家族(登录号:KF732652)。基因表达水平的定量分析结果表明,高温和失水胁迫对两条PhHsp90基因的表达水平均有显著影响,但在表达模式上存在明显差异。高温胁迫不同时间水平下,两条PhHsp90基因的表达均表现为先上调后下调的趋势;而在失水胁迫下,当失水率小于60%时,两条基因的表达水平均没有发生显著变化,但当失水率大于60%时,两条基因的表达水平均显著上调,说明两条PhHsp90基因均在应答高温胁迫和高度失水胁迫中发挥着重要作用。

关键词：坛紫菜热激蛋白90 RACE 荧光定量PCR

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苹果渣发酵生产蛋白饲料及鲤鱼离体消化研究

饲料研究 2013年第1期36卷 70-74页

作者：陈建军曹香林雷梦云代真真河南师范大学生命科学学院河南师范大学生命水产学院

研究利用混菌固态发酵技术对副产物苹果渣的生物发酵体系进行优化,并对其发酵产物在鲤鱼肝胰和肠道不同部位的离体消化率进行研究,从而为饲料资源的开发利用提供理论依据。选取对发酵苹果渣营养成分影响较显著的菌种比例、氮源比例和发... 详细信息

研究利用混菌固态发酵技术对副产物苹果渣的生物发酵体系进行优化,并对其发酵产物在鲤鱼肝胰和肠道不同部位的离体消化率进行研究,从而为饲料资源的开发利用提供理论依据。选取对发酵苹果渣营养成分影响较显著的菌种比例、氮源比例和发酵时间3个因素为考察对象,分别确定3个水平,采用L9(34)正交试验对发酵苹果渣生产菌体蛋白饲料进行优化;将筛选出的最优发酵苹果渣,以鲤鱼消化道和肝胰中提取的粗酶液为酶解液,采用离体消化法进行酶解动力学的深层研究。研究表明:在L9(34)正交试验的9个发酵饲料中,经极差分析,确定最佳方案为黑曲霉∶酵母菌∶枯草芽孢杆菌=2∶1∶1;氮源配比为豆粕∶尿素∶硫酸铵=0∶1%∶1%;发酵时间:72 h。将发酵后和未发酵的苹果渣用鲤鱼消化道和肝胰粗酶液进行离体消化试验,结果表明:苹果渣发酵后干物质和粗蛋白的消化率远远高于未发酵的;在1～5 h内氨基酸生成量也远远高于未发酵苹果渣,且氨基酸生成量呈线性递增,酶解速度肝胰最大,其次为前肠和中肠,再次为后肠。苹果渣经发酵后蛋白质含量达到16.3%,提高了167.6%,氨基酸生成量大大提高。结果表明:苹果渣经混菌发酵后,可以变废为宝,作为新型生物饲料利用。

关键词：苹果渣正交试验离体消化酶解动力学

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孤独症谱系障碍应用行为分析干预的研究进展

中国儿童保健杂志 2021年第6期29卷 623-626页

作者：代真真姜志梅朱俊丽佳木斯大学附属第三医院发育与行为儿科黑龙江佳木斯154003

孤独症谱系障碍(ASD)是在儿童发育早期出现的一种神经发育性障碍。临床主要表现为社交障碍、刻板行为及兴趣狭窄,共同限制和损害了儿童的日常生活功能。近年来ASD的干预措施越来越多,应用行为分析(ABA)是目前唯一经美国卫生局认可的治疗... 详细信息

孤独症谱系障碍(ASD)是在儿童发育早期出现的一种神经发育性障碍。临床主要表现为社交障碍、刻板行为及兴趣狭窄,共同限制和损害了儿童的日常生活功能。近年来ASD的干预措施越来越多,应用行为分析(ABA)是目前唯一经美国卫生局认可的治疗ASD的方法,其有效性已经被证实,现已广泛应用于ASD儿童的治疗。本文将主要从应用行为分析的基本理论、作用及与其它干预方法的效果比较进行综述。

关键词：应用行为分析孤独症谱系障碍儿童

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餐具清洗消毒安全指标抽检结果分析

科技视界 2020年第10期 200-201页

作者：邢苏代真真安徽中青检验检测有限公司合肥230088

本次方案随机调查安徽省的合肥、蚌埠、淮南、宣城、黄山五个城市508家餐饮服务提供者,合格345家,合格率68.6%,其中社会餐饮270家,合格172家,合格率63.7%,食堂233家,合格173家,合格率74.2%;社会餐饮,特别是中小型企业的合格率最低。各... 详细信息

本次方案随机调查安徽省的合肥、蚌埠、淮南、宣城、黄山五个城市508家餐饮服务提供者,合格345家,合格率68.6%,其中社会餐饮270家,合格172家,合格率63.7%,食堂233家,合格173家,合格率74.2%;社会餐饮,特别是中小型企业的合格率最低。各方面结果显示,中小企业的消毒制度需要加大力度进行监督监管。

关键词：食品餐具清洗消毒不合格分析