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异源O-抗原重组鼠伤寒沙门菌疫苗候选株的构建及其免疫效果评价

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异源O-抗原重组鼠伤寒沙门菌疫苗候选株的构建及其免疫效果评价

作者：代勤龙四川农业大学

学位级别：硕士

沙门菌能够引起多种动物的胃肠道疾病,其包含多种流行性血清型。O-抗原是沙门菌的保护性抗原,其特异性抗体能够有效地清除细菌的感染。本研究通过异源表达O-抗原的策略,构建了三株表达纽波特沙门菌O-抗原的重组鼠伤寒沙门菌疫苗株,并在... 详细信息

沙门菌能够引起多种动物的胃肠道疾病,其包含多种流行性血清型。O-抗原是沙门菌的保护性抗原,其特异性抗体能够有效地清除细菌的感染。本研究通过异源表达O-抗原的策略,构建了三株表达纽波特沙门菌O-抗原的重组鼠伤寒沙门菌疫苗株,并在小鼠模型上评估了这些重组疫苗株的免疫原性和免疫保护效果。1鼠伤寒沙门菌重组株的构建利用Gibson组装法构建表达纽波特沙门菌O-抗原基因簇部分基因(wzx-wbaR-wbaL-wbaQ-wzy-wbaW-wbaZ)的表达质粒pCZ11,将其导入三株鼠伤寒沙门菌突变株SLT19(Δasd)、SLT20(ΔasdΔrfbN)、SLT22(ΔasdΔrfbN?pagL::TaraC P rfbN)中,得到三株鼠伤寒沙门菌重组株SLT19(pCZ11)、SLT20(pCZ11)、SLT22(pCZ11)。银染和免疫印迹实验表明,SLT19(pCZ11)能够同时表达同源鼠伤寒沙门菌和异源纽坡特沙门菌O-抗原;SLT20(pCZ11)只表达异源O-抗原;阿拉伯糖存在时,SLT22(pCZ11)能够同时表达两种O-抗原,阿拉伯糖不存在时,只表达异源O-抗原。以上结果表明,本研究成功的构建了三株表达异源O-抗原的重组株。2鼠伤寒沙门菌重组株生物学特性研究生物学特性实验结果显示,相较于野生株,三株重组株的运动力和对多黏菌素B的敏感性显著降低,但仍表现了和野生株相当的定殖能力和毒力。以上结果表明,异源O-抗原的表达降低了细菌的泳动能力和对多黏菌素B的敏感性,但并没有改变细菌的定殖能力和毒力。3疫苗株的免疫原性及交叉保护力评价分别缺失三株重组株的毒力基因crp,获得三株鼠伤寒沙门菌疫苗株SLT25(pCZ11)、SLT26(pCZ11)、SLT27(pCZ11)。分别在第一周和第七周对小鼠进行初次免疫和加强免疫,ELISA结果显示,在免疫后第七周,三个免疫组均产生了高水平的针对同源、异源LPS的血清IgG应答,其中SLT26(pCZ11)组产生的异源LPS抗体应答最为显著。血清补体杀菌实验证实,三个免疫组血清均能有效地杀伤鼠伤寒沙门菌和纽波特沙门菌,其中SLT26(pCZ11)组针对纽波特沙门菌的杀菌效果最显著。在鼠伤寒沙门菌攻毒后,三个免疫组组织器官中的细菌载量均显著降低,且三个疫苗株均提供100%的同源保护率。在纽波特沙门菌攻毒后,三个免疫组的细菌载量均显著降低,其中SLT26(pCZ11)、SLT27(pCZ11)组的细菌清除效果优于SLT25(pCZ11)组。与之对应,SLT25(pCZ11)疫苗株仅提供50%的异源保护率,SLT26(pCZ11)和SLT27(pCZ11)疫苗株能够提供100%的异源保护率。以上结果表明,本研究构建的SLT26(pCZ11)和SLT27(pCZ11)疫苗株可以用于预防鼠伤寒沙门菌和纽波特沙门菌,同时也表明,O-抗原有能力激发机体清除细菌,表明异源表达O-抗原是开发沙门菌二价疫苗的有效策略。

关键词：鼠伤寒沙门菌纽坡特沙门菌 O-抗原生物学特性免疫原性保护力

不同pH下微生物燃料电池降解含硫偶氮染料废水的效能及其机理

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环境工程学报 2021年第1期15卷 115-125页

作者：李莉代勤张赛刘灏重庆大学环境与生态学院三峡库区生态环境教育部重点实验室重庆400045

构建单室空气阴极微生物燃料电池反应器(MFC)并用于处理含硫偶氮染料有机废水,研究初始pH对单室MFC的产电性能和对偶氮染料及硫化物的去除效果以及阳极生物膜电化学行为的影响。利用紫外可见光谱全波长扫描(UV-vis),高效液相(HPLC)和液... 详细信息

构建单室空气阴极微生物燃料电池反应器(MFC)并用于处理含硫偶氮染料有机废水,研究初始pH对单室MFC的产电性能和对偶氮染料及硫化物的去除效果以及阳极生物膜电化学行为的影响。利用紫外可见光谱全波长扫描(UV-vis),高效液相(HPLC)和液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析偶氮染料还原反应过程的中间产物。结果表明,以乙酸盐为底物,单室MFC的阳极液在中性条件下有利于系统性能的提高。pH由5.0增加到9.0过程中,单室MFC的产电性能先增加后减小,中性条件下产电性能和目标物降解率最佳,其次为偏酸和偏碱条件,过酸或过碱最差。当pH=7.0时,电池的最大功率密度为24.5 mW·m^(-2),内阻最小为154.1Ω;微生物的活性最高,硫化物和偶氮染料的降解率最大,硫化物去除率为98.40%,染料的脱色率达到84.60%,COD的降解率为49.56%。另外,通过CV扫描可知,pH对阳极产电菌的氧化还原能力有显著影响,中性条件下阳极产电菌的氧化能力最强。联苯胺和3,4-二氨基萘-1-磺酸被证实为刚果红降解反应典型的中间产物,而硫化物氧化的主要产物是硫单质,硫代硫酸盐和硫酸盐。以上研究结果可为处理实际的含硫偶氮染料废水提供一定的参考。

关键词：微生物燃料电池偶氮染料产电 pH 循环伏安

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大跨度系杆拱桥抗震动力分析

大跨度系杆拱桥抗震动力分析

作者：代勤杰安徽建筑工业学院

学位级别：硕士

悬臂飞燕式系杆拱桥是一种中承式组合体系的拱桥,大多是以三跨形式存在,以系杆和桁架拱作为主要受力构件的组合桥梁,具有结构新颖、线型美观的特点。这种组合体系既有梁桥和拱桥二者共同的力学特性,同时由于其空间复杂性,又不同于两者,... 详细信息

悬臂飞燕式系杆拱桥是一种中承式组合体系的拱桥,大多是以三跨形式存在,以系杆和桁架拱作为主要受力构件的组合桥梁,具有结构新颖、线型美观的特点。这种组合体系既有梁桥和拱桥二者共同的力学特性,同时由于其空间复杂性,又不同于两者,故研究其静动力特性成为当下急待解决的问题,又因为随着桥梁施工方法和理论研究的不断完善,桥梁的跨度也是飞速增大,随之而来的就是这种大跨度系杆拱桥的抗震设计,近年来的地震灾害时刻提醒我们桥梁的抗震研究一直都是重中之重的课题。论文主要介绍了桥梁地震反应分析所采用几种理论计算方法,并在此基础上,以某城市大跨度系杆拱桥(钢箱混凝土主梁,主跨188m)为工程实例,采用大型有限元桥梁计算软件MIDAS CIVIL,建立了全桥的空间模型,对该拱桥进行了反应谱分析、时程分析,分析了桩基础对大跨度拱桥地震响应的影响以及行波效应对大跨度系杆拱桥的影响。主要研究内容包括： (1)建立大跨度系杆拱桥全桥的有桩模型和无桩模型,分别计算了拱桥的自振特性,分析了桩土相互作用效应对大跨度系杆拱桥的自振特性及地震内力反应和位移反应的影响。 (2)采用反应谱分析法,分别计算顺桥向、横桥向和竖向的地震反应,和三个方向地震组合作用的最大地震响应。 (3)对大跨度系杆拱桥进行了线性动力时程分析,并与反应谱方法的计算结果相互比较,得到该拱桥的地震响应结果;对非一致地震激励下对大跨度系杆拱桥的行波效应影响作了分析研究。

关键词：大跨度系杆拱桥桩土相互作用效应动力特性反应谱分析线性时程分析行波效应

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三种药物对黄鳝的急性毒性研究

水利渔业 2004年第5期24卷 29-31页

作者：阮国良杨代勤长江大学动物科学学院湖北荆州434025

研究了甲胺磷、治莠灵、胺醛复合物等对黄鳝的急性毒性作用,观察了黄鳝对不同药剂的毒性反应及症状,给出了3种药剂对黄鳝24h、48h、72h、96h的半致死浓度(LC50)和安全浓度。认为3种药剂对黄鳝的毒性由强到弱依次为:甲胺磷>治莠灵>胺醛... 详细信息

研究了甲胺磷、治莠灵、胺醛复合物等对黄鳝的急性毒性作用,观察了黄鳝对不同药剂的毒性反应及症状,给出了3种药剂对黄鳝24h、48h、72h、96h的半致死浓度(LC50)和安全浓度。认为3种药剂对黄鳝的毒性由强到弱依次为:甲胺磷>治莠灵>胺醛复合物。胺醛复合物的溶血作用与黄鳝死亡密切相关。

关键词：药物黄鳝急性毒性症状

间歇性禁食对黄鳝生长、消化酶活性及血液生化指标的影响

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水产学报 2013年第7期37卷 1058-1065页

作者：阮国良刘家芳杨代勤长江大学动物科学学院长江中游湿地农业教育部工程研究中心中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心

为了研究不同强度的间歇性禁食对黄鳝生长、消化酶活性及血液生化指标的影响。在(25±1)℃水温条件下,以鲜活水蚯蚓为饵料设定5种投喂模式饲养黄鳝:第一种为连续投喂的对照组;第二种禁食1 d后再投喂1 d;第三种禁食2 d后再投喂2 d;第四... 详细信息

为了研究不同强度的间歇性禁食对黄鳝生长、消化酶活性及血液生化指标的影响。在(25±1)℃水温条件下,以鲜活水蚯蚓为饵料设定5种投喂模式饲养黄鳝:第一种为连续投喂的对照组;第二种禁食1 d后再投喂1 d;第三种禁食2 d后再投喂2 d;第四种禁食4 d后再投喂4 d;第五种禁食8 d后再投喂8 d。5种方式分别以C、S1F1、S2F2、S4F4和S8F8表示,实验周期64 d。结果显示:(1)与对照组相比,遭受间歇性禁食的黄鳝的特定生长率(SGR)、相对增重率及终末体质量均显著性降低,但其实际摄食率(FR)却显著提升,且S1F1组的食物转换效率(FCE)显著高于其它各组。因而,不同强度的间歇性禁食均诱导出部分补偿生长效应,其中S1F1的部分补偿效应最强;(2)S1F1组胃组织的蛋白酶活性显著高于S2F2组,S1F1组和S2F2组胃组织的蛋白酶活性显著高于其它组;各实验组的胃、前肠、后肠和肝脏等组织的淀粉酶活性均与C组无显著差异;S1F1组肝脏组织和后肠组织的脂肪酶活性均显著高于C组、S4F4组和S8F8组;(3)各实验组血清的总蛋白含量和葡萄糖含量均无显著差异;C组与S1F1组之间的血清总胆固醇含量无显著差异,但却显著高于S2F2组、S4F4组和S8F8组;在S2F2组、S4F4组和S8F8组之间,其血清胆固醇含量随着间歇性禁食强度的增加而降低。实验结果表明,黄鳝在遭受间歇性禁食过程中,可通过相应消化酶活性的提升、食物利用率的改善以及消化生理机能的适应来获得生长补偿,且相对低强度的间歇性禁食(S1F1)可诱导出较强的补偿生长效应。

关键词：黄鳝间歇性禁食补偿生长消化酶血清生化指标

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大鲵肌肉及其天然饵料营养成分的比较研究

水产学报 1990年第4期14卷 351-356页

作者：杨代勤湖北农学院荆州

大鲵Megalobatrachus davidianus(Blanchard),俗名娃娃鱼,是我国现存的唯一一种大型两栖动物,并被列为我国的第二类保护动物。其肉质细嫩、鲜美,并有较高的药用价值,是特种水产品养殖的良好品种。但长期以来,国内外对大鲵的研究,多集中... 详细信息

大鲵Megalobatrachus davidianus(Blanchard),俗名娃娃鱼,是我国现存的唯一一种大型两栖动物,并被列为我国的第二类保护动物。其肉质细嫩、鲜美,并有较高的药用价值,是特种水产品养殖的良好品种。但长期以来,国内外对大鲵的研究,多集中在外部形态观察、系统解剖分析、生态及资源调查,未进行过营养方面的研究,而要保护并利用大鲵资源,进行人工养殖,对大鲵及其天然饵料营养方面的了解是不可缺少的,因此开展大鲵肌肉及其天然饵料营养成分比较研究,对保护和利用大鲵资源具有一定的意义。

关键词：大鲵肌肉天然饵料营养成分

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树脂类药物在临床上的应用

中医药学报 1994年第1期22卷 20-22页

作者：宋纬文代勤福建省三明市医学科学研究所

树脂类药物在临床上的应用福建省三明市医学科学研究所宋纬文，代勤（３６５０００）历古自今，临床应用的树脂类药物约有２０余种。其入药大体分为三种类型：一类为生品直接入药，如桃胶、乳香、没药等；一类系经加工后入药，如龙脑冰... 详细信息

树脂类药物在临床上的应用福建省三明市医学科学研究所宋纬文，代勤（３６５０００）历古自今，临床应用的树脂类药物约有２０余种。其入药大体分为三种类型：一类为生品直接入药，如桃胶、乳香、没药等；一类系经加工后入药，如龙脑冰片、干漆等，另一类系树脂经埋藏地下...

关键词：树脂类药物临床应用

转化生长因子β1通过ERK/MAPK信号转导通路促进脑胶质瘤细胞侵袭

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南方医科大学学报 2013年第12期33卷 1744-1747页

作者：刘丽华代勤闵志刚张明西安交通大学医学院第一附属医院神经内科陕西西安710061 西安交通大学医学院第一附属医院影像中心陕西西安710061

目的探讨转化生长因子β1对脑胶质瘤细胞SF767细胞侵袭能力的影响以及可能的分子机制。方法转化生长因子β1分别干预脑胶质瘤细胞SF767细胞12、24、48 h,Western blotting检测EMT和ERK/MAPK通路相关蛋白表达情况,MTT法检测和对比干预前... 详细信息

目的探讨转化生长因子β1对脑胶质瘤细胞SF767细胞侵袭能力的影响以及可能的分子机制。方法转化生长因子β1分别干预脑胶质瘤细胞SF767细胞12、24、48 h,Western blotting检测EMT和ERK/MAPK通路相关蛋白表达情况,MTT法检测和对比干预前后细胞增殖情况,体外侵袭实验观察细胞侵袭能力改变。结果 Western blotting显示E-cadherin表达下调,而Vimentin和MMP-2表达上调。在ERK/MAPK信号转导通路中,ERK表达未见变化,但P-ERK表达上调,核转录因子Zeb-1表达增强。体外增殖实验显示干预后细胞倍增时间明显缩短;体外侵袭实验显示干预后穿膜细胞明显增多,统计学显示有显著性差异(P<0.05)。结论转化生长因子β1可能通过ERK/MAPK信号转导通路诱导EMT促进脑胶质瘤细胞SF767细胞侵袭。

关键词：转化生长因子β1 上皮间质转化 ERK MAPK信号转导通路脑胶质瘤 E-cadherin

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基于排序算法的轿车零件功能评估规划

汽车技术 2006年第3期 26-29页

作者：代勤华储国平上海交通大学

介绍了车身零件的功能评估方法,描述了轿车零件功能评估与整车开发流程的关系,并对影响评估进程的几个因素进行了分析。针对零件匹配结构和方式设计了匹配参数,且利用前向BP神经网络对拼装时间进行求解。在此基础上进一步研究了零件拼... 详细信息

介绍了车身零件的功能评估方法,描述了轿车零件功能评估与整车开发流程的关系,并对影响评估进程的几个因素进行了分析。针对零件匹配结构和方式设计了匹配参数,且利用前向BP神经网络对拼装时间进行求解。在此基础上进一步研究了零件拼装过程特点,获得了一个具有优先约束关系和不同准备时间的可中断多平行机排序模型。以某车右侧围为例,对拼装时间的计算方法和拼装过程的排序进行了说明。

关键词：轿车开发流程拼装时间排序算法入树约束