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针灸对顺铂所致肾损伤小鼠氧化应激反应影响的研究

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针灸对顺铂所致肾损伤小鼠氧化应激反应影响的研究

作者：付雪鸽河南中医药大学

学位级别：硕士

目的本课题采用健康雄性昆明种小鼠制备顺铂化疗肾损伤模型,通过对比针灸治疗前后,小鼠肾脏组织病理学的改变,从细胞形态学方面观察针灸对顺铂化疗小鼠肾脏的影响,并运用酶联免疫法(ELISA)检测小鼠肾脏组织内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)... 详细信息

目的本课题采用健康雄性昆明种小鼠制备顺铂化疗肾损伤模型,通过对比针灸治疗前后,小鼠肾脏组织病理学的改变,从细胞形态学方面观察针灸对顺铂化疗小鼠肾脏的影响,并运用酶联免疫法(ELISA)检测小鼠肾脏组织内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)以及超氧化物歧化酶(SOD)的含量,基于氧化应激反应初步探讨针灸修复、改善顺铂所致肾损伤的作用机理。方法将70只健康雄性SPF级小鼠适应性喂养3天后,称重,剔除两极,保留60只。用随机数字表法将小鼠分为空白组(A)、模型组(B)、针刺组(C)、艾灸组(D),每组15只,染色编号。各组小鼠以0.01m L/g的剂量采用腹腔注射的方法给药,空白组给予0.9%Nacl溶液,模型组、针刺组、艾灸组给予1mg/m L浓度的顺铂溶液,共给药1次,24小时后模型成功。针刺组和艾灸组选取“大椎”、“肝俞”(双)、“肾俞”(双)、“足三里”(双)四穴进行治疗,针刺组采用管式进针法,各穴位进针3mm,静留针6min;艾灸组每两个穴位为一组进行艾灸治疗,每组穴位灸3min共6min;每日1次,连续治疗5天,空白组和模型组仅陪同固定,不予治疗。在治疗前后,每组随机选取3只小鼠,摘取肾脏以4%中性多聚甲醛固定,进行肾脏组织病理学观察,其余小鼠采用酶联免疫法(ELISA)检测肾脏组织中ROS、SOD、MDA的含量,整理数据,运用SPSS24.0统计软件进行分析。结果1DDP对小鼠肾脏组织形态的影响:治疗前,空白组小鼠肾小管及肾小球结构清晰,细胞排列较齐;模型组、针刺组、艾灸组小鼠肾小管管腔内可见脱落的上皮细胞,肾小球萎缩,囊腔扩大,血管壁增厚。表明以0.01m L/g的顺铂剂量,腹腔注射1次,可成功制备小鼠肾损伤模型。2针刺和艾灸对DDP小鼠肾脏组织形态的影响:针刺和艾灸治疗后,与模型组相比,针刺组和艾灸组小鼠肾小管上皮细胞脱落情况减轻,肾小球结构有所恢复。表明针刺和艾灸均可以改善和修复DDP造成的小鼠肾损伤。3针刺和艾灸对DDP小鼠肾脏组织中ROS含量的影响:与空白组相比,模型组ROS含量上升,具有显著性差异(P<0.05);针灸治疗5天后,与模型组相比,针刺组和艾灸组ROS含量均下降,具有显著性差异(P<0.05);与针刺组相比,艾灸组ROS含量较低,具有显著性差异(P<0.05)。表明针刺和艾灸可减少ROS的含量,且艾灸优于针刺。4针刺和艾灸对DDP小鼠肾脏组织中MDA含量的影响:与空白组相比,模型组MDA含量上升,具有显著性差异(P<0.05);针灸治疗5天后,与模型组相比,针刺组和艾灸组MDA含量均下降,具有显著性差异(P<0.05);与针刺组相比,艾灸组MDA含量较低,具有显著性差异(P<0.05)。表明针刺和艾灸可减少MDA的含量,且艾灸优于针刺。5针刺和艾灸对DDP小鼠肾脏组织中SOD活性的影响:与空白组相比,模型组SOD活性下降,具有显著性差异(P<0.05);针灸治疗5天后,与模型组相比,针刺组和艾灸组SOD活性均上升,具有显著性差异(P<0.05);与针刺组相比,艾灸组SOD活性较高,具有显著性差异(P<0.05)。表明针刺和艾灸可提高SOD活性,且艾灸优于针刺。结论1针灸可降低DDP小鼠肾脏组织中ROS、MDA的含量,通过减轻ROS的脂质过氧化反应,减少脂质过氧化物MDA的产生,抑制氧化应激反应对肾脏组织的损伤。2针灸可提高DDP小鼠肾脏组织中SOD的活性,抑制和清除肾组织中活性氧的过表达,阻断其脂质过氧化反应,减少MDA的生成,使氧化与抗氧化之间达到动态平衡。3针刺和艾灸相比,艾灸更有利于通过增加SOD的活性,降低肾组织中ROS、MDA的含量,来修复和改善顺铂所致的小鼠肾组织损伤。

关键词：丙二醛超氧化物歧化酶活性氧顺铂肾损伤氧化应激

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桡骨小头骨折案

中国针灸 2017年第9期37卷 955-956页

作者：黄正瑜牛云云于冬冬付雪鸽庄语河南中医药大学针灸推拿学院郑州450003

患者,男,25岁。初诊日期：2016年9月26日。主诉：右上肢肘关节周围肿胀、屈肘不利4月余。患者自述2017年2月因事故致右手骨折,经X线片诊断为右上肢肘关节处桡骨小头骨折（见图1）,并于郑州市医院进行桡骨小头骨折切开复位术伴内固定治疗... 详细信息

患者,男,25岁。初诊日期：2016年9月26日。主诉：右上肢肘关节周围肿胀、屈肘不利4月余。患者自述2017年2月因事故致右手骨折,经X线片诊断为右上肢肘关节处桡骨小头骨折（见图1）,并于郑州市医院进行桡骨小头骨折切开复位术伴内固定治疗,置入Herbert螺钉于桡骨小头桡侧缘。

关键词：桡骨小头骨折初诊日期 Herbert 骨折切开复位术内固定捻转提插平刺病理反应点患者自述通经活络

针灸对环磷酰胺小鼠骨髓细胞DNA核苷酸切除修复基因ERCC1和RRM1的影响

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时珍国医国药 2018年第4期29卷 1008-1010页

作者：于冬冬付雪鸽路玫滕迎春程相琨华金双牛云云河南中医药大学针灸推拿学院河南郑州450046 河南中医药大学国际教育学院河南郑州450046 河南中医药大学第一附属医院 450046

目的通过观察针灸对环磷酰胺(CTX)化疗后小鼠骨髓中切除修复交叉互补基因1(ERCC1)以及核糖核苷酸还原酶1(RRM1)的调节作用,探讨针灸改善化疗后小鼠骨髓抑制的分子生物学机制。方法选取清洁级雄性(KM)小鼠40只,随机分为空白组、模型组、... 详细信息

目的通过观察针灸对环磷酰胺(CTX)化疗后小鼠骨髓中切除修复交叉互补基因1(ERCC1)以及核糖核苷酸还原酶1(RRM1)的调节作用,探讨针灸改善化疗后小鼠骨髓抑制的分子生物学机制。方法选取清洁级雄性(KM)小鼠40只,随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组,每组10只。针刺组、艾灸组选取"大椎"、"膈俞"、"肾俞"和"足三里"分别进行针刺、艾灸治疗,每天1次,连续治疗5天,空白组、模型组每日陪同固定,不做任何治疗。各组小鼠于第6天取股骨ELISA法检测骨髓中ERCCI和RRMI的含量。结果针刺和艾灸可以明显上调CTX模型小鼠骨髓细胞DNA修复基因的表达,促进骨髓细胞DNA损伤的核苷酸切除修复,从而减轻CTX造成的骨髓抑制。结论针灸可以促进骨髓细胞DNA的核苷酸切除修复的能力,保护因化疗引起的骨髓造血细胞损伤,应该是针灸改善小鼠化疗所致骨髓抑制,保护骨髓造血功能的重要机制之一。

关键词：小鼠环磷酰胺切除修复交叉互补基因1 核糖核苷酸还原酶1

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电针“盆腔点”为主治疗盆腔积液30例

中国针灸 2018年第8期38卷 831-832页

作者：于冬冬付雪鸽杨佳曼从志航赵斌杨兆勤河南中医药大学针灸推拿学院郑州450008

目的:观察电针"盆腔点"为主治疗盆腔积液的临床疗效。方法:30例盆腔积液患者,采用针刺结合电针治疗,穴取"盆腔点"(位于两侧髂脊最高点内侧三横指处)、天枢、气海、大巨、血海、足三里、三阴交,"盆腔点"加电针,选用断续波,留针30 min。... 详细信息

目的:观察电针"盆腔点"为主治疗盆腔积液的临床疗效。方法:30例盆腔积液患者,采用针刺结合电针治疗,穴取"盆腔点"(位于两侧髂脊最高点内侧三横指处)、天枢、气海、大巨、血海、足三里、三阴交,"盆腔点"加电针,选用断续波,留针30 min。每日治疗1次,10次为一疗程,疗程间隔2~3 d,治疗3个疗程后进行疗效评价。结果:痊愈10例,显效12例,有效6例,无效2例。总有效率为93.3%。结论:电针"盆腔点"为主治疗盆腔积液疗效较好。

关键词：盆腔积液盆腔点杨兆勤

针灸对CTX小鼠骨髓细胞DNA修复基因XRCC1和ADPRT的调控作用

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中国中医基础医学杂志 2018年第9期24卷 1270-1272页

作者：于冬冬牛云云路玫付雪鸽滕迎春河南中医药大学针灸推拿学院郑州450008 河南中医药大学国际教育学院郑州450008 河南中医药大学第一附属医院郑州450000

目的:观察针灸对骨髓抑制小鼠细胞DNA碱基切除修复基因XRCC1、ADPRT的调控作用。方法:选用清洁级、雄性昆明小鼠40只,体质量(20±2)g,自由饲养3 d后按体质量随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组,并用CTX造成骨髓抑制模型。针刺组、... 详细信息

目的:观察针灸对骨髓抑制小鼠细胞DNA碱基切除修复基因XRCC1、ADPRT的调控作用。方法:选用清洁级、雄性昆明小鼠40只,体质量(20±2)g,自由饲养3 d后按体质量随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组,并用CTX造成骨髓抑制模型。针刺组、艾灸组分别选取"大椎""膈俞""肾俞""足三里"施以针刺、艾灸治疗,空白组、模型组每日陪同固定不予治疗,每日1次,共治疗5 d,于第6天取各组小鼠双侧股骨,用ELISA法检测小鼠骨髓细胞DNA中XRCC1、ADPRT的含量变化。结果:与空白组比较,模型组、针刺组和艾灸组XRCC1、ADPRT含量均降低;与模型组比较,针刺组、艾灸组XRCC1、ADPRT含量均升高,表明针刺和艾灸能够显著上调CTX化疗小鼠骨髓细胞DNA中XRCC1、ADPRT的表达含量,提高DNA碱基切除修复能力,减轻骨髓抑制。结论:通过针刺、艾灸促进骨髓细胞DNA碱基切除修复能力是针灸改善骨髓抑制的关键机制之一。

关键词：针灸 XRCC1 ADPRT

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针刺列缺联合循经推拿治疗急性乳腺炎23例

中医研究 2019年第2期32卷 57-60页

作者：孟书德付雪鸽董永书河南中医药大学针灸推拿学院河南省中医药研究院附属医院河南郑州450004

目的:观察针刺列缺联合循经推拿治疗急性乳腺炎的临床疗效。方法:选择河南省中医药研究院附属医院针灸科门诊收治的急性乳腺炎患者23例,给予针刺列缺穴联合循经推拿治疗。1 d 1次,3 d为1疗程,1～2个疗程内判定疗效。结果:痊愈12例,好转9... 详细信息

目的:观察针刺列缺联合循经推拿治疗急性乳腺炎的临床疗效。方法:选择河南省中医药研究院附属医院针灸科门诊收治的急性乳腺炎患者23例,给予针刺列缺穴联合循经推拿治疗。1 d 1次,3 d为1疗程,1～2个疗程内判定疗效。结果:痊愈12例,好转9例,无效2例,有效率为91. 30%。结论:针刺列缺联合循经推拿治疗急性乳腺炎疗效确切。

关键词：急性乳腺炎/针刺疗法乳痈列缺推拿疗法

针灸对CTX荷瘤小鼠骨髓细胞中Notch信号通路相关差异基因蛋白表达量的影响

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时珍国医国药 2018年第7期29卷 1764-1766页

作者：路玫刘玉璐曹大明于冬冬程相琨姚甜甜黄正瑜杜雪源付雪鸽牛云云河南中医药大学河南郑州450008

目的选取荷瘤小鼠为研究对象,以环磷酰胺(CTX)化疗后骨髓抑制为切入点,通过观察荷瘤小鼠骨髓细胞Notch信号通路相关差异基因蛋白表达量的影响,揭示针灸改善荷瘤小鼠骨髓抑制新的作用机制,为临床上针灸治疗相关疾病开拓思路。方法选取清... 详细信息

目的选取荷瘤小鼠为研究对象,以环磷酰胺(CTX)化疗后骨髓抑制为切入点,通过观察荷瘤小鼠骨髓细胞Notch信号通路相关差异基因蛋白表达量的影响,揭示针灸改善荷瘤小鼠骨髓抑制新的作用机制,为临床上针灸治疗相关疾病开拓思路。方法选取清洁(SPF)级、雄性昆明种(KM)小鼠40只,自由饲养3d,在一定温度和湿度的无菌环境下复制小鼠荷瘤模型;植瘤7天后,对荷瘤小鼠进行尾静脉采血并查白细胞总数,挑选白细胞接近正常范围,瘤体生长良好的荷瘤小鼠32只。将挑选的荷瘤小鼠分为空白组、模型组、针刺组和艾灸组,每组8只。腹腔注射CTX造成骨髓抑制模型,空白组给予Nacl溶液150mg/kg,其余3组小鼠给予同体积的CTX,一次性完成。腧穴选取"大椎"、"膈俞"、"肾俞"、"足三里",对针刺组施以针刺治疗、艾灸组施以艾灸治疗,空白组和模型组每日只陪同抓取固定。在前期研究筛选的差异基因基础上,运用蛋白质印迹法(Western-Blot)更深层次的检测这4组荷瘤小鼠骨髓细胞中Notch信号通路jag1、notch2、numb1、numb2基因的蛋白表达量。结果经针刺和艾灸治疗后,针刺组和艾灸组numb1、numb2的表达含量比模型组高,而jag1、notch2的表达含量明显比模型组低。结论降低jag1和notch2的表达含量,抑制过度激活的Notch信号通路,可以减轻因CTX化疗引起的骨髓抑制。揭示了针灸改善荷瘤小鼠CTX化疗后的骨髓抑制,是通过调节骨髓细胞中的Notch信号通路实现的。验证了"Notch信号通路是针灸对抗骨髓抑制、改善造血等综合作用的关键机制"之假说。本研究选用带瘤的小鼠,更贴近临床癌症患者,可为临床提供新的实验室依据。

关键词：针灸荷瘤小鼠环磷酰胺 Notch信号通路骨髓抑制

针灸对环磷酰胺化疗小鼠骨髓细胞Notch信号通路差异基因蛋白表达的影响

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中华中医药学刊 2019年第5期37卷 1031-1034页

作者：路玫付雪鸽滕迎春曹大明李建伟王光安河南中医药大学国际教育学院河南郑州450008 河南中医药大学针灸推拿学院河南郑州450008 河南中医药大学第一附属医院河南郑州450008 河南中医药大学职业技术培训鉴定中心河南郑州450008

目的:通过观察针灸对环磷酰胺(CTX)化疗小鼠骨髓细胞notch信号通路中差异基因蛋白表达的影响,探讨针灸改善化疗后小鼠骨髓抑制的分子生物学机制。方法:选用雄性昆明种清洁小鼠40只,体质量(18±2)g,自由喂养3 d后,随机分为空白组、模型... 详细信息

目的:通过观察针灸对环磷酰胺(CTX)化疗小鼠骨髓细胞notch信号通路中差异基因蛋白表达的影响,探讨针灸改善化疗后小鼠骨髓抑制的分子生物学机制。方法:选用雄性昆明种清洁小鼠40只,体质量(18±2)g,自由喂养3 d后,随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组,每组10只,检查基础白细胞计数后,将两极小鼠剔除,每组仅保留8只用于实验的小鼠。针刺组、艾灸组、模型组按照100 mg/(kg·d)用药量腹腔注射环磷酰胺注射液,空白组小鼠按体质量0.02 mL/g的用药量注射生理盐水,连续3 d,第3天造模4 h后模型成功,按照小鼠造模的顺序进行治疗。针刺组和艾灸组选取"大椎""膈俞""肾俞""足三里"分别进行针刺和艾灸,1次/d,连续5 d;空白组、模型组只抓取、固定,不治疗。第6天小鼠脱颈处死,在干冰上取一侧的肱骨和股骨,剔净骨头后,用生理盐水冲洗,在75%乙醇中浸泡2 min后,再用生理盐水冲洗,并立即放入-80℃低温冰箱保存,运用Western-blot法检测。结果:针刺和艾灸可使CTX小鼠外周血白细胞提前一天回升并提前一天达到正常水平;治疗5 d后,针刺组、艾灸组与模型组比,jag1、notch2蛋白含量下降(P0.05),但有升高趋势,针刺组与艾灸组相比无显著性差异(P>0.05)。结论:针刺和艾灸增加numb蛋白的含量、降低notch蛋白的含量,抑制过度激活的notch信号通路,应该是针灸减轻骨髓抑制、保护造血功能、增加外周血白细胞的重要机制之一。

关键词：针灸骨髓抑制环磷酰胺 notch信号通路

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脐针疗法治疗不寐案1例

中国民间疗法 2017年第11期25卷 20-21页

作者：付雪鸽牛云云黄正瑜王延超河南中医药大学河南郑州450003

患者,女,53岁。患者自2016年3月初自觉入睡困难,经亲友介绍于2016年6月5日来我科尝试治疗。自诉：夜间焦躁难眠,入睡浅且易惊醒,自觉心跳加快,悸动不安,深层睡眠时间极短甚或彻夜难眠。刻下症：精神倦怠,气虚乏力懒言,嘴角有约绿豆大小... 详细信息

患者,女,53岁。患者自2016年3月初自觉入睡困难,经亲友介绍于2016年6月5日来我科尝试治疗。自诉：夜间焦躁难眠,入睡浅且易惊醒,自觉心跳加快,悸动不安,深层睡眠时间极短甚或彻夜难眠。刻下症：精神倦怠,气虚乏力懒言,嘴角有约绿豆大小的口疮,口干少津,舌红,左寸脉浮数,双侧尺脉沉弱。中医诊断为不寐（心肾不交型）。

关键词：不寐脐针病案