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人工诱导突出椎间盘自然回缩后椎间盘的高度测量及强度分析

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中国组织工程研究 2025年第27期29卷 5785-5794页

作者：白亮付苏严旭张春霖李莹郑州大学第一附属医院骨科河南省郑州市450000

背景:人工诱导突出椎间盘自然回缩技术是一种治疗颈、腰椎间盘突出症微创、对突出椎间盘而言无创的创新性有效方法,但回缩术后突出颈、腰椎间盘能否保持原有的高度及生物力学强度,目前尚未见相关研究报道。目的:测量人工诱导突出椎间盘... 详细信息

背景:人工诱导突出椎间盘自然回缩技术是一种治疗颈、腰椎间盘突出症微创、对突出椎间盘而言无创的创新性有效方法,但回缩术后突出颈、腰椎间盘能否保持原有的高度及生物力学强度,目前尚未见相关研究报道。目的:测量人工诱导突出椎间盘自然回缩手术前后突出颈、腰椎间盘相邻椎体形心高度,以分析回缩术后椎间盘生物力学强度的变化,为人工诱导突出椎间盘自然回缩技术治疗颈、腰椎间盘突出症提供新的依据。方法:回顾性分析2013年1月至2023年1月在郑州大学第一附属医院接受人工诱导突出椎间盘自然回缩手术治疗的颈/腰椎间盘突出患者140例。应用相关软件在人工智能辅助标定下,于MRI T_(1)图像中测量患者人工诱导突出椎间盘自然回缩术前及术后各随访时间节点的颈椎、腰椎相邻椎体形心高度。以未手术的T_(1)/T_(2)和T_(12)/L_(1)节段分别作为颈椎、腰椎对照组,若术前颈/腰椎间盘突出患者的相邻椎体形心高度值小于其自身T_(1)/T_(2)或T_(12)/L_(1)对照节段相邻椎体形心高度值超过8%者为“高度降低组”(以下简称A组),其余为“高度不变组”(以下简称B组)。统计学分析A组和B组人工诱导突出椎间盘自然回缩手术前后相邻椎体形心高度的差异,同时根据人工智能辅助测量所得颈、腰椎突出椎间盘的体积,分析其与相邻椎体形心高度变化的相关性。结果与结论:①共纳入140例患者,其中颈椎组60例、腰椎组80例,术后随访7 d-12个月;②颈椎组共281个椎间盘,其中对照组60个颈椎间盘,术前与术后末次随访相邻椎体形心高度平均值分别约为20.46 mm和20.17 mm,差异无显著性意义(P>0.05);A组162个颈椎间盘,术前与术后末次随访相邻椎体形心高度均值分别为16.65 mm和15.92 mm,差异无显著性意义(P>0.05);术前与术后颈椎突出椎间盘体积均值分别是510.28 mm^(3)和364.76 mm^(3),与相邻椎体形心高度改变无显著相关性(P>0.05);B组64个颈椎间盘,术前与术后末次随访相邻椎体形心高度平均值分别为20.15 mm和19.09 mm,差异无显著性意义(P>0.05);术前与术后颈椎突出椎间盘体积平均值分别是515.32 mm^(3)和361.98 mm^(3),与相邻椎体形心高度改变无显著相关性(P>0.05);③腰椎组共258个椎间盘,其中对照组80个腰椎间盘,术前与术后末次随访相邻椎体形心高度平均值分别约为33.03 mm和32.40 mm,差异无显著性意义;A组59个腰椎间盘,术前与术后末次随访相邻椎体形心高度平均值分别为30.08 mm和31.67 mm,差异无显著性意义;术前与术后腰椎突出椎间盘体积均值分别是690.51 mm^(3)和496.58 mm^(3),与相邻椎体形心高度改变无显著相关性(P>0.05);B组119个腰椎间盘,术前与术后末次随访相邻椎体形心高度平均值分别为35.91 mm和34.12 mm,差异无显著性意义;术前与术后腰椎突出椎间盘体积均值分别是698.70 mm^(3)和535.99 mm^(3),与相邻椎体形心高度改变无显著相关性;④提示无论颈、腰椎突出椎间盘高度是否下降,人工诱导突出椎间盘自然回缩术后其高度都可以维持与术前一致的水平,可见突出椎间盘回缩并不影响其生物力学强度,提示人工诱导突出椎间盘自然回缩技术宜在突出节段椎间隙高度下降前实施,这样对维持自然回缩椎间盘生物力学强度更具价值。

关键词：椎间盘腰椎间盘突出颈椎间盘突出形心核磁共振人工智能生物力学

初级纤毛介导成骨前体细胞系MC3T3-E1传代衰老减低成骨分化能力

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中国组织工程研究 2025年第18期29卷 3741-3746页

作者：高丰王纪亮王洪波杨永胜刘源付苏内蒙古自治区中医医院内蒙古自治区呼和浩特市010000 郑州大学第一附属医院骨科河南省郑州市450000

背景:在大段骨缺损修复中,由于种子细胞传代等多种因素可引起成骨类细胞衰老,造成组织工程骨植入体内后成骨分化活性降低。近年来,初级纤毛介导细胞衰老的机制已被广泛研究,但“传代衰老-成骨活性减低”的初级纤毛相关机制尚未完全明了... 详细信息

背景:在大段骨缺损修复中,由于种子细胞传代等多种因素可引起成骨类细胞衰老,造成组织工程骨植入体内后成骨分化活性降低。近年来,初级纤毛介导细胞衰老的机制已被广泛研究,但“传代衰老-成骨活性减低”的初级纤毛相关机制尚未完全明了。目的:探讨初级纤毛调控成骨性MC3T3-E1细胞传代衰老的可能机制。方法:成骨前体细胞系MC3T3-E1细胞传代至第10代(早期传代)及第40代(晚期传代),同时使用siRNA沉默IFT88阻碍初级纤毛生成,即将细胞分为第10代组、第40代组、第10代+siRNA IFT88-组、第40代+siRNA IFT88-组。各组细胞成骨诱导3 d,采用RT-PCR和Western blot检测衰老标志物CDKN2A(P16)的表达、成骨活性标志物骨形态发生蛋白2和碱性磷酸酶的表达、Hedgehog通路IHH的表达;茜素红染色和初级纤毛免疫荧光染色分析初级纤毛形态;对初级纤毛阳性率与IHH、骨形态发生蛋白2的表达进行Spearman相关性分析。结果与结论:①成骨诱导3 d,第40代组MC3T3-E1细胞的CDKN2A(P16)表达显著高于第10代组,而在siRNA IFT88-干预后差异消失;②第10代组的初级纤毛细胞阳性率高于第40代组,siRNA IFT88-则显著性抑制第10代与第40代细胞的初级纤毛表达;③第10代组MC3T3-E1细胞的碱性磷酸酶及骨形态发生蛋白2的转录活性和蛋白表达均高于第40代组,通过siRNA抑制初级纤毛表达后,上述差异减低或者消失;④初级纤毛细胞阳性率与IHH蛋白表达及骨形态发生蛋白2蛋白表达呈正相关。结果表明:初级纤毛介导了成骨性MC3T3-E1细胞的传代衰老,可调控成骨分化能力。

关键词： MC3T3-E1细胞初级纤毛衰老成骨分化传代骨形态发生蛋白2 Hedgehog通路组织工程细胞

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圣与隐:两汉《楚辞·渔父》旨解辨异

江海学刊 2023年第3期 225-233页

作者：付苏南京师范大学文学院

自东汉王逸始,历代注家多以《楚辞·渔父》旨意为渔父劝隐而屈原不从。详细对读该篇原文与《楚辞章句》可以看出,上说似不自洽且与屈原、渔父二人立场自陈存在断裂。原文中双方论争的焦点不在仕与隐,而在圣人入世当与世推移还是不流于... 详细信息

自东汉王逸始,历代注家多以《楚辞·渔父》旨意为渔父劝隐而屈原不从。详细对读该篇原文与《楚辞章句》可以看出,上说似不自洽且与屈原、渔父二人立场自陈存在断裂。原文中双方论争的焦点不在仕与隐,而在圣人入世当与世推移还是不流于俗。王注之前《渔父》已见流传并受到关注,该篇与《淮南子·氾论训》《论六家要旨》《史记·伯夷列传》等西汉前期语涉圣人之道的多个文献存在文本交叉现象。在此语境下,渔父与屈原的对话指向通变立功和不变立德两种圣人之道的碰撞,西汉有关屈原的评价也多本于此。二百余年后王逸对《渔父》隐逸旨意的解读,或意在导扬屈原之淑身淑世以回应东汉中后期士人隐遁避祸的风气。《楚辞·渔父》意指在两汉的转变彰显出屈原正道直行的思想胜利和道德坚守的时代价值。

关键词：《楚辞·渔父》屈原圣人之道立功立德

重组腺病毒介导的OX40-Ig局部基因治疗对大鼠同种异体复合组织移植的免疫调节

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重组腺病毒介导的OX40-Ig局部基因治疗对大鼠同种异体复合组织移...

作者：付苏第四军医大学

学位级别：硕士

目的:探讨重组腺病毒载体(AdOX40Ig)介导的OX40-Ig局部基因治疗在阻断OX40/OX40L共刺激途径抑制复合组织同种异体移植急性排斥反应中的作用。方法:构建了含人OX40胞外段和人IgG1Fc段的重组腺病毒表达载体AdOX40Ig。应用一种新的体外基... 详细信息

目的:探讨重组腺病毒载体(AdOX40Ig)介导的OX40-Ig局部基因治疗在阻断OX40/OX40L共刺激途径抑制复合组织同种异体移植急性排斥反应中的作用。方法:构建了含人OX40胞外段和人IgG1Fc段的重组腺病毒表达载体AdOX40Ig。应用一种新的体外基因转染方法,使移植物局部能够分泌免疫调节分子OX40-Ig融合蛋白。采用近交系大鼠下腹壁浅动脉(superficial inferior epigastric artery,SIEA)皮瓣移植模型,检验AdOX40Ig介导的OX40-Ig局部表达对阻断OX40/OX40L共刺激途径延长移植物存活时间的作用。实验分为5组,分别比较了单纯地移植术前AdOX40Ig灌注转染治疗方案、小剂量雷帕霉素治疗方案及二者相结合对移植物存活时间的影响。应用组织病理学分级对移植物存活进行评估。结果:移植物经体外基因转染后,自身能够高表达OX40-Ig蛋白。术后第7天未处理组(A组,7.8±1.2d)和AdEGFP转染组(B组,7.1±1.2d)的皮瓣均发生了GradeⅢ级免疫排斥反应。单独使用AdOX40Ig灌注转染组(C组,8.3±0.8d)的皮瓣存活时间与A及B组比较并无显著差异(p>0.05);然而,联合小剂量雷帕霉素治疗后,皮瓣的平均存活时间可达18.6±1.3d,与单独应用小剂量雷帕霉素组相比有显著差异(E组,13.5±0.5d,p<0.01)。结论:研究表明,OX40-Ig局部的免疫调节作用与小剂量的雷帕霉素相协同可延长移植物的存活时间。该方法有效地减小了术后早期全身性免疫抑制剂的用量,为异体复合组织移植免疫耐受的诱导提供了新思路。

关键词：同种异体复合组织移植共刺激免疫耐受 OX40 局部基因治疗

神经肽P物质对大鼠骨髓基质干细胞的生物学调控效应及相关经典Wnt/β-catenin通路机制的实验研究

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神经肽P物质对大鼠骨髓基质干细胞的生物学调控效应及相关经典Wnt...

作者：付苏南方医科大学

学位级别：硕士

临床上骨折及骨不愈合等骨科常见疾病,其治疗始终是骨科领域研究的热点和难点问题,如疗效不佳则严重影响患者功能预后。近年来,创伤骨科如外固定架等治疗技术及组织工程骨研究的迅猛发展,均得益于对骨折再生与重建机制的深入研究探索。... 详细信息

临床上骨折及骨不愈合等骨科常见疾病,其治疗始终是骨科领域研究的热点和难点问题,如疗效不佳则严重影响患者功能预后。近年来,创伤骨科如外固定架等治疗技术及组织工程骨研究的迅猛发展,均得益于对骨折再生与重建机制的深入研究探索。由此可见,对骨折再生和重建过程中多种因素的生物学效应及调控机制进行广泛深入的研究,将为临床治疗提供了全新治疗思路和技术方法。神经因素在骨组织再生及重建过程中作用重要,而神经肽正是神经因素发挥调节作用的主要物质。P物质(Substanc P, SP)是广泛分布于骨髓和骨膜的感觉神经元分泌的一种神经肽,其生物化学结构由11种氨基酸构成,参与调控骨组织细胞如骨髓基质干细胞、成骨细胞的生物学效应。SP已被证实参与了细胞炎症反应、增殖、成骨分化、凋亡和动员过程。骨再生及重建过程中神经肽SP阳性的神经纤维数量增加,提示SP可能直接参与局部的骨形成调控过程。不少体内和体外细胞学实验已经表明,SP可以通过促进骨髓基质干细胞(BMSCs)增殖能力增强、成骨基因表达及矿化来促进骨形成过程,调控骨折愈合生理过程。骨形成过程中骨髓基质干细胞需要一定的数量基础,而神经肽SP可能是维持大鼠骨髓基质干细胞数量基础的调控因子,即通过调控细胞增殖和凋亡来控制细胞数量。已有研究表明,SP可作用于人结肠癌细胞抑制细胞凋亡信号通路并可抑制辐射损伤的大鼠骨髓基质干细胞凋亡,初步显示了P物质的保护作用。然而,SP是否可作用于大鼠骨髓基质干细胞发挥调控去血清诱导凋亡的作用,目前尚未研究。因此,进一步探索研究神经肽P物质对骨髓基质干细胞去血清诱导凋亡的调控效应有助于理解神经肽在骨折愈合过程中的保护效应。神经肽SP的调控作用通常需要通过相关受体实现,SP受体主要是神经激肽-1受体(NK-1受体),此受体可介导SP促进骨形成的生物学效应过程。已有研究证实骨髓基质干细胞和成骨细胞MC3T3-E1细胞能够稳定表达NK-1受体的mRNA,且表达部位位于细胞的细胞质及细胞膜内,提示SP相关调控作用的可行性。NK-1受体可介导某些抗凋亡反应,如NK-1受体拮抗剂可诱导人类癌细胞株(Hep-2)凋亡。因此NKl-1受体表达及SP调控凋亡机制的相关性可能是神经肽P物质调控骨折愈合生理过程的关键环节。细胞生物学效应的调控离不开细胞信号通路。已有研究证实经典Wnt/β-catenin通路和MAPK信号通路等多种细胞信号通路参与了P物质调控BMSCs增殖和矿化,但Wnt信号通路是否参与SP抗骨髓基质干细胞去血清诱导凋亡尚未证实。经典Wnt/β-catenin信号通路是骨代谢生理的关键通路因素。经典Wnt通路可以概括为β-连环蛋白(β-catenin)在细胞质内表达增加,积累到一定程度时可进入核内引起下游Wnt相关基因如c-myc等转录表达。研究表明,SP调控骨髓基质干细胞增殖效应、促进BMSCs和前成骨细胞(MC3T3-E1)分化程度均与经典Wnt通路有关,而Wnt信号通路与细胞凋亡通路也具有相关性。因此SP的抗凋亡作用是否由经典Wnt信号通路介导有必要进行研究。以上研究背景提示目前存在三个问题,即：P物质是否能够调控骨髓基质干细胞的去血清诱导凋亡过程?其调控效应具有何种浓度及时间特点?其调控机制涉及何种凋亡信号通路及Wnt信号通路改变?这些问题的解释将进一步加深目前对神经因素通过神经肽调控骨折愈合过程的分子机制的研究,以及骨折修复过程中的神经保护作用的理解。本研究主要是研究神经肽P物质对大鼠BMSCs去血清诱导凋亡的调控效应、凋亡蛋白3等凋亡信号改变及相关经典Wnt/β-catenin通路机制,同时探讨NK-1受体表达水平在细胞凋亡过程中的变化情况。本实验主要的实验材料、方法、内容和结论主要包括以下几个部分：研究目的1.神经肽P物质对大鼠骨髓基质干细胞去血清凋亡的影响。2.神经肽P物质作用下去血清诱导凋亡的大鼠骨髓基质干细胞的凋亡通路相关信号改变情况。3.神经肽P物质调控骨髓基质干细胞凋亡与经典Wnt/β-catenin通路的关系。第1部分大鼠骨髓基质干细胞的获取鉴定及NK-1受体检测实验目的：通过全骨髓培养法获取纯度较高的大鼠BMSCs,并通过流式鉴定其纯度,同时研究其NK-1受体表达。实验方法：1.大鼠骨髓基质干细胞获取实验动物选择年龄一个月左右重量80-100g大小的SD大鼠,按照实验动物伦理学要求直接脱颈法处死,于清洁条件无菌器械辅助下,按层次切开大鼠解剖结构后获取大鼠的股骨及胫骨。使用针头冲洗骨髓腔,加入DMEM培养基(含10%胎牛血清)行全骨髓法分离培养BMSCs。2.大鼠骨髓基质干细胞培养原代培养大鼠骨髓基质干细胞48-72h后,首次换液后及时清洗培养瓶,去除未贴壁细胞后传代培养,按照1：2或1：3的接种比例经胰酶消化后传代至培养瓶中,采用含胎牛血清(10%)及青霉

关键词：神经肽 P物质骨髓基质干细胞凋亡经典Wnt/β-catenin通路

日本文化背景下对Lily A Arasaratnam跨文化交际能力测评工具的验证

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日本文化背景下对Lily A Arasaratnam跨文化交际能力测评工具的验...

作者：付苏华中科技大学

学位级别：硕士

世界逐渐成为地球村，个体逐渐成为世界公民。然而，每一个人都有他/她自身的文化背景，在理解并接受来自其他种族、文化背景的人的过程中，跨文化交际能力的重要性十分突出。因此，反复验证科学合理的评价方法以对跨文化交际能力进行... 详细信息

世界逐渐成为地球村，个体逐渐成为世界公民。然而，每一个人都有他/她自身的文化背景，在理解并接受来自其他种族、文化背景的人的过程中，跨文化交际能力的重要性十分突出。因此，反复验证科学合理的评价方法以对跨文化交际能力进行测评显得尤为重要。本文有三个研究目的：一是应用Lily ***的评价方法，对经历跨文化交际的人们进行跨文化交际能力的测评，二是检验该测评方法的有效性和可靠性，三是在实际测试中完善该测评方法，进一步消弭各分项的可能出现的歧义与理解区别。本文受试者是120名日本名古屋大学的国际留学生。本文作者使用Lily ***的跨文化交际能力测评方法，调查了他们的跨文化交际能力及相关影响因素的情况。同受试的国际留学生进行访谈，了解国际留学生对于该测评量表的各个分项的看法。作者通过问卷回收数据，运用描述性统计展示留学生跨文化交际能力和跨文化交际能力影响因素的情况。应用SPSS软件，对相关数据进行了信度分析和因子分析以检验问卷的信度和结构效度。作者还通过问卷访谈，找出并分析各分项的歧义问题。研究结果表明1）Lily A. Arasaratnam的跨文化交际能力测评方法很好的反应了日本文化背景下国际留学生跨文化交际能力的现状。2）该测评量表具较高的有效性和可靠性。3）该测试量表中存在一些项目歧义。通过项目分析，各个歧义问题得到了解决，使得该测评方法得到完善。本文研究结果的启示是一个成熟的跨文化交际能力测评方法需要进行反复的测试验证。各个分项的歧义问题在反复的测试分析当中会暴露出来，消弭了这些歧义问题，测评方法才能更完善，跨文化交际能力的相关研究结果才会更准确。

关键词：跨文化交际能力跨文化交际能力测评方法验证分项歧义

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“后营改增时代”地方税收法律体系完善研究

“后营改增时代”地方税收法律体系完善研究

作者：付苏华西南政法大学

学位级别：硕士

“营改增”即营业税改征增值税是我国继1994年分税制改革以来税法领域的又一项重大改革,不仅涉及两大税种的整合,还带动了其他税种的联动改革。按照国务院“力争‘十二五’期间全面完成营改增改革”的部署,改革已进入攻坚阶段,“后营改... 详细信息

“营改增”即营业税改征增值税是我国继1994年分税制改革以来税法领域的又一项重大改革,不仅涉及两大税种的整合,还带动了其他税种的联动改革。按照国务院“力争‘十二五’期间全面完成营改增改革”的部署,改革已进入攻坚阶段,“后营改增时代”到来。这一背景下,地方税收法律体系凸显出许多问题,主要表现为财政转移支付立法阙如、地方税收法律体系主体税种缺失、税收征管领域存在缺陷三个方面,亟待加以完善。一个行之有效的途径是在分析所面临问题的基础上,以相关税法理论原则为指导,考察国外地方税收法律体系的模式并借鉴有益经验,立足我国实际,对地方税收法律体系存在的问题逐一设计完善方案。沿着这条思路,本文分为以下五个部分:第一部分对营改增与地方税收法律体系两大概念进行解读。前者从营改增的含义、营改增改革的功效评估、“后营改增时代”三个方面展开,为全文的论述提供背景素材;后者在对地方税界定的基础上,探讨地方税收法律体系的构成,构造一个广义的地方税收法律体系概念。第二部分析营改增改革措施及改革中出现的问题的基础上,总结出营改增背景下我国地方税收法律体系存在的三个突出问题,包括财政转移支付立法阙如、地方税收法律体系主体税种缺失和税收征管领域存在缺陷,完善地方税收法律体系即以这三个问题为出发点。第三部分罗列完善我国地方税收法律体系需遵循的理论原则,包括税收法定原则、税收公平原则、税收效率原则,这三大原则为我国提高税收法律的立法级次、完善税收实体法与程序法的制度设计提供指引。第四部分对国外地方税收法律体系进行考察。首先介绍美国、法国、德国、日本四个发达国家的地方税收法律体系模式,在对各国模式进行分析和总结的基础上,结合我国面临的三个突出问题,探讨国外经验对我国完善地方税收法律体系的有益启示。第五部分是“后营改增时代”完善地方税收法律体系的设想。针对前述三大问题,相应地从完善纵向税收分配法律制度、优化地方税税种设置、推动税收执法系统的构建与法则完善三个方面展开。具体而言,完善纵向税收分配法律制度包括合理规定中央与地方共享税权重、建立规范的财政转移支付法律制度;优化地方税税种设置涵盖完善所得税法与资源税法律制度、进行房地产税与环境保护税立法;推动税收执法系统的构建与法则完善涉及制定税务机关组织法、完善税收征管法律制度。

关键词：营改增地方税收法律体系完善

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基于ASP的高校网上选课系统的设计与实现

基于ASP的高校网上选课系统的设计与实现

作者：付苏嘉云南大学

学位级别：硕士

高校网上选课系统作为学校教务管理现代化所不可缺少的部分,为高校教学教务工作的管理带来了极大的帮助;本文以在学分制选课制度为基础的理论前提下,阐述了基于ASP的高校网上选课系统的研究背景、意义和现状;通过对高校实行学分制的情... 详细信息

高校网上选课系统作为学校教务管理现代化所不可缺少的部分,为高校教学教务工作的管理带来了极大的帮助;本文以在学分制选课制度为基础的理论前提下,阐述了基于ASP的高校网上选课系统的研究背景、意义和现状;通过对高校实行学分制的情况分析,明确了选课系统的设计目的,进行了可行性分析,提出了系统的架构为B/S结构;并对整个选课系统的开发过程进行了详细的论述。论文首先进行了系统各类用户角色的需求分析,分别讨论了系统的三类使用人员——学生、教师和教务管理人员对系统的具体要求;其中学生所要求的功能是选课并查询结果,教师所要求的功能是申报课程并查询选课名单;而管理人员所要求的功能是批准教师的开课申请,管理学生信息等。其次是系统功能分析：客户端可以实现对课程的申报、选课、查询等功能,在服务器端管理员可以实现课程审批、对普通用户进行增加、删除、修改操作等功能。系统开发工具采用DreamWeaver 8设计网页,使用ASP语言实现动态网页的交互,采用Access 2003为数据库系统,Windows XP为操作系统运行环境进行开发,由客户端和服务器端组成。论文采用面向对象的分析和设计方法,对该选课系统进行了UML建模分析,描述了系统各类角色的用例图、类图、顺序图、状态图、活动图,并进行了数据库设计,给出了数据库设计的E-R图。论文描述了系统建站、设计网页和数据库表,完成各项功能的过程,并进行了功能测试,整个系统界面简洁明了、操作方便,具有一定的实用价值。最后,论文对高校网上选课系统的设计进行了总结与展望,本课题的研究,目的在于解决网络环境下选修课程管理过程中存在的典型问题,充分提高教务管理工作的质量与效率,使学分制的选课实施与管理更加科学化、规范化。

关键词： MIS 网上选课系统 ASP UML 数据库

微环境诱导iPSCs和BMSCs向神经元样细胞分化-Reelin对细胞分化和极性化的调节作用

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微环境诱导iPSCs和BMSCs向神经元样细胞分化-Reelin对细胞分化和...

作者：付苏河南大学

学位级别：硕士

目的:研究小鼠诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)和小鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)在大脑微环境的诱导下向神经元样细胞分化的过程;尤其是探讨细胞极性的关键分子Reelin蛋白对... 详细信息

目的:研究小鼠诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)和小鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)在大脑微环境的诱导下向神经元样细胞分化的过程;尤其是探讨细胞极性的关键分子Reelin蛋白对干细胞分化的影响。方法:将iPSCs和BMSCs分别与WT和Reelin缺失小鼠(reeler小鼠)的海马脑片以及两种小鼠的脑匀浆上清共培养,观察二者在脑片微环境下的细胞分化和极性化改变,揭示Reelin蛋白对细胞分化和极性化的影响。结果:与WT和Reeler小鼠脑片共培养的iPSCs和BMSCs均出现神经元样细胞的分化。二者在WT小鼠海马脑片呈双C字型海马片层化分布,同时表现出很强的方位性;而与reeler小鼠海马脑片共培养的细胞分布则无明显规律性,呈均匀分布。此外,与脑匀浆上清培养基共培养的iPSCs和BMSCs,在共培养72小时后,部分类神经元样细胞可以被神经干细胞标记物(Nestin)和神经元特异标记物(NeuN)所标记,表明他们可以分化成为功能性神经元。且在共培养初期reeler微环境培养基中神经元分化和突起生长相对滞后。结论:在大脑微环境的诱导下,iPSCs和BMSCs可以向神经元样细胞,甚至功能性神经元分化,Reelin蛋白参与了细胞极性化过程,Reelin缺乏可造成神经细胞极性紊乱,并对神经元分化及突起生长有一定影响。

关键词：诱导多能干细胞骨髓间充质干细胞 Reelin蛋白大脑微环境细胞分化细胞极性化