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贵州豆腐柴属植物狐臭柴体外抗炎活性及作用机制研究

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贵州豆腐柴属植物狐臭柴体外抗炎活性及作用机制研究

作者：付立霞贵州大学

学位级别：硕士

狐臭柴(Premna puberula Pamp.)为我国民间药食兼用的植物资源,广泛分布于华东、中南、华南、西南等地区。人们常采摘狐臭柴的叶片加工制作成健康的绿色豆腐,味道鲜美,口感细腻。不仅营养价值高,还能清热退火,改善睡眠,深受广大群众的... 详细信息

狐臭柴(Premna puberula Pamp.)为我国民间药食兼用的植物资源,广泛分布于华东、中南、华南、西南等地区。人们常采摘狐臭柴的叶片加工制作成健康的绿色豆腐,味道鲜美,口感细腻。不仅营养价值高,还能清热退火,改善睡眠,深受广大群众的喜爱。狐臭柴除食用价值之外,还具有药用价值,能清热解毒,消肿止痛,收敛止血。目前,国内外对狐臭柴的研究主要集中在果胶开发利用及种苗繁育方面,而关于其化学成分及生物活性的研究报道相对匮乏。本文基于脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症细胞模型,对狐臭柴的叶、茎、根和根皮等不同部位开展抗炎活性研究,在此基础上进一步阐释其抗炎作用机制。主要研究内容如下:(一)狐臭柴不同部位提取物总酚和总黄酮含量测定及抗炎活性比较采用回流提取法制备狐臭柴叶、茎、根和根皮不同部位的水提物和醇提物,分别以芦丁和没食子酸为对照品,采用紫外可见分光光度法测定狐臭柴不同提取物总酚和总黄酮含量。结果发现狐臭柴叶醇提物的总酚含量最高(3.867%),其次是根皮水提物(2.577%)和叶水提物(2.573%)。总黄酮含量最高的是叶醇提物(2.496%),其次是根皮水提物(2.086%)和茎水提物(1.994%)。在LPS诱导RAW264.7的体外炎症细胞模型中,使用Griess法和Elisa法测定细胞上清液中促炎介质和细胞因子的含量,结果狐臭柴不同提取物均能抑制一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的释放量,且呈剂量依赖关系。其中,狐臭柴叶醇提物和根皮水提物对炎症因子的抑制作用优于其他提取物。以狐臭柴不同提取物的总酚、总黄酮含量作为比较序列,细胞上清液中NO、IL-6和TNF-α的释放量为参考序列,采用灰色关联法分析各因素之间相互关系,并计算灰色关联度。结果显示总酚-IL-6(0.665)>总酚-NO(0.635)>总酚-TNF-α(0.549),黄酮-IL-6(0.694)>黄酮-NO(0.691)>黄酮-TNF-α(0.556),其中总酚和总黄酮的含量对IL-6释放量的指标关联度最高。(二)狐臭柴叶醇提物(EE)和狐臭柴根皮水提物(WE)化学成分及抗炎作用机制研究采用UPLC-Q-TOF-MS对EE和WE的化学成分进行分析鉴定,结果从EE中鉴定出74种化学成分,WE中鉴定出72种化学成分。Western blot检测发现EE和WE可以降低炎症特异性蛋白(iNOS和COX-2)的表达,抑制IKBα、p38、ERK、JNK的蛋白磷酸化和降解,并下调细胞核p65/胞浆p65蛋白表达的比值。免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜研究结果发现,EE和WE可抑制LPS诱导RAW264.7细胞内NF-κB p65从胞浆转移到细胞核中。另外,qRT-PCR和DCFH-DA荧光探针结果发现,EE和WE能有效抑制细胞炎症因子(COX-2、iNOS、IL-6、TNF-α和IL-1β)的mRNA表达水平和ROS的大量产生。(三)狐臭柴不同部位挥发油化学成分及抗炎活性比较通过水蒸气蒸馏法制备狐臭柴叶、茎、根不同部位的挥发油,采用GC-MS对其化学成分进行分析,结果从狐臭柴叶、茎和根挥发油中分别鉴定出59种、74种、22种化学成分。通过MTT法考察狐臭柴挥发油对RAW264.7细胞的毒性作用,使用Griess法和Elisa法发现狐臭柴不同部位的挥发油均能显著抑制炎症因子NO、TNF-α和IL-6的释放量。其中,狐臭柴茎挥发油抑制炎症因子的作用优于其他部位挥发油。(四)狐臭柴茎挥发油(EO)抗炎活性及作用机制研究采用qRT-PCR研究EO对LPS诱导RAW264.7细胞炎症因子的影响,结果发现EO能够显著抑制促炎因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)和促炎酶(iNOS和COX-2)的mRNA表达水平。DCFH-DA荧光探针法检测细胞中ROS水平,结果EO对LPS诱导的ROS水平上调具有抑制作用。Western blot检测发现,EO可以下调iNOS和COX-2的表达,抑制NF-κB信号通路细胞核p65蛋白表达及p65、IκBα的磷酸化。此外,还降低了 MAPKs信号通路p38、JNK和ERK蛋白的磷酸化水平。综上,通过对狐臭柴不同提取物及挥发油的研究,发现狐臭柴叶醇提物、根皮水提物和茎挥发油均表现出较好的抗炎活性,具有良好的应用开发前景。进一步研究发现,狐臭柴发挥抗炎活性的内在分子机制与下调NF-κB和MAPKs信号通路有关。本论文的研究,为狐臭柴的保健作用及功能性食品开发提供支撑,并为贵州省豆腐柴属植物的综合开发利用提供依据。

关键词：狐臭柴抗炎化学成分 NF-κB MAPKs

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两个菠萝品种对不同形态氮素的获取策略

中国生态农业学报（中英文） 2023年第6期31卷 895-903页

作者：陈晓慧许秀玉付立勇潘艳菊冯莹蔡志全佛山科学技术学院园艺系佛山528000 广东省林业科学研究院广州510173 广东省森林资源保育中心广州510173

氮是与菠萝产量关系密切的大量营养元素之一。本试验分别在4月和9月两个生长季节,选择了广东省徐闻县田间生长的‘巴厘’和‘台农17’两个菠萝品种不同年龄的植株为研究对象,测定了不同年龄植株的形态、生理和生长特征,并利用稳定性同位... 详细信息

氮是与菠萝产量关系密切的大量营养元素之一。本试验分别在4月和9月两个生长季节,选择了广东省徐闻县田间生长的‘巴厘’和‘台农17’两个菠萝品种不同年龄的植株为研究对象,测定了不同年龄植株的形态、生理和生长特征,并利用稳定性同位素15N示踪技术分析了菠萝对3种形态氮素[铵态氮、硝态氮和氨基酸态氮(甘氨酸)]的获取策略,以探讨菠萝吸收氮素的偏好。结果表明,在4月份果实收获期,与‘巴厘’相比,‘台农17’菠萝的产量(单个鲜果重)和根生物量较低,但其植株高度、单株生物量、叶片N、K含量和比叶面积无显著差异,叶片碳稳定性同位素(δ^(13)C)和P含量较高。在4月和9月,两菠萝品种间对不同形态的氮素吸收均有显著差异。总体而言,‘台农17’比‘巴厘’的氮吸收能力强(P根系具有较强直接吸收利用有机氮的能力,菠萝的品种和生长阶段都是影响氮素获取策略的重要因素。

关键词：菠萝氮吸收偏好 15N示踪技术氮素获取策略氮素形态

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湖南大根垄钨多金属矿地电提取法机理

吉林大学学报（地球科学版） 2015年第6期45卷 1879-1885页

作者：欧阳菲罗先熔付立春中国地质大学(北京)地球科学与资源学院北京100083 广西隐伏金属矿产勘查重点实验室/桂林理工大学隐伏矿床预测研究所广西桂林541004 黑龙江有色金属地质勘查研究总院哈尔滨150046

笔者以湖南大根垄钨多金属矿为试验研究区,以20m点距在已知矿体上方取土壤样,并按照24h提取时间、1 000mL HNO3提取液、50cm电极间距等工作条件进行了地电提取试验。结果表明,地电提取前后土壤中的元素含量变化不大,被提取到的金属元素... 详细信息

笔者以湖南大根垄钨多金属矿为试验研究区,以20m点距在已知矿体上方取土壤样,并按照24h提取时间、1 000mL HNO3提取液、50cm电极间距等工作条件进行了地电提取试验。结果表明,地电提取前后土壤中的元素含量变化不大,被提取到的金属元素应属土壤金属总量的一部分。次生晕与地电提取的异常形态对比发现:Co、Ni较清晰,W次之,Cr无异常;元素的异常特征主要取决于土壤中该元素的活性形式所占比例。综合分析认为地电提取异常与矿体的相对位置有关:矿体的下坡位置以及控矿断裂附近容易形成异常,距离原生矿体太近则会对异常有明显干扰。在本矿区,矿体风化程度越高对Co、Ni的地电提取异常越有利;其异常宽度一般比次生晕窄。

关键词：地电提取钨多金属矿湖南大根垄异常特征

钢管约束橡胶混凝土短柱轴心受压力学特性研究

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沈阳建筑大学学报（自然科学版） 2020年第4期36卷 593-602页

作者：闻洋于蛟付立平内蒙古科技大学建筑与土木工程学院内蒙古包头014010

目的研究钢管约束橡胶混凝土短柱轴心受压的力学性能.方法设计了16根圆柱体短柱,混凝土强度等级为C30与C40,以不同参数的橡胶粉和不同厚度钢管进行两组正交试验.对试件荷载的横纵向变形曲线,应变曲线进行分析.并通过正交分析的方法得到... 详细信息

目的研究钢管约束橡胶混凝土短柱轴心受压的力学性能.方法设计了16根圆柱体短柱,混凝土强度等级为C30与C40,以不同参数的橡胶粉和不同厚度钢管进行两组正交试验.对试件荷载的横纵向变形曲线,应变曲线进行分析.并通过正交分析的方法得到各个参量的最优水平组合.结果所有试件均为剪切破坏,随着橡胶掺量的增加,其刚度与极限承载力不断降低.当橡胶混凝土强度等级和体积取代率一致时,随含钢率增大,极限承载力也随之增加.由正交试验结果分析得出最优水平组合为橡胶体积取代率10%,橡胶粒径380μm,含钢率11.9%.结论利用笔者提出的承载力公式所得计算结果与试验值基本吻合,且理论值偏低,满足安全与使用要求.

关键词：钢管约束橡胶混凝土力学性能正交试验含钢率

集束化护理在预防妇科手术患者深静脉血栓形成中的应用研究

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实用妇科内分泌电子杂志 2019年第24期6卷 155-156页

作者：付立仙李光雪孙颖李琼侯根翼遵义医科大学附属医院贵州遵义563000

目的研究集束化护理在预防妇科手术患者深静脉血栓形成中的应用。方法142例分成两组,对照组实行常规护理,研究组实施集束化护理,观察护理效果。结果①护理后,组间Fib与D-D指标差异显著(P<0.05);②研究组1例深静脉血栓形成,对照组6例深... 详细信息

目的研究集束化护理在预防妇科手术患者深静脉血栓形成中的应用。方法142例分成两组,对照组实行常规护理,研究组实施集束化护理,观察护理效果。结果①护理后,组间Fib与D-D指标差异显著(P<0.05);②研究组1例深静脉血栓形成,对照组6例深静脉血栓形成,研究组发生率低于对照组(P<0.05)。结论集束化护理在妇科手术病人中,作用显著,建议推广。

关键词：集束化护理妇科手术深静脉血栓形成

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方城灰鹅遗传资源调查初报

现代牧业 2023年第3期7卷 34-37页

作者：黄炎坤刘健吉进卿王录坡王建钦付立典王鑫磊杨朋坤刘贤睢富根河南牧业经济学院河南郑州450046 河南省畜牧总站河南郑州450003 方城县农业农村局河南方城473200 南阳黄牛科技中心河南南阳473000 南阳市金航有机农场河南方城473200

在全国第三次畜禽遗传资源普查过程中,方城县提请“方城灰鹅”(暂定名)作为新的遗传资源。河南省畜牧总站组织有关专家进行现场调查,对“方城灰鹅”成年种鹅群的外貌特征进行观察,对鹅群的生产性能、产地条件和形成历史等进行深入访谈... 详细信息

在全国第三次畜禽遗传资源普查过程中,方城县提请“方城灰鹅”(暂定名)作为新的遗传资源。河南省畜牧总站组织有关专家进行现场调查,对“方城灰鹅”成年种鹅群的外貌特征进行观察,对鹅群的生产性能、产地条件和形成历史等进行深入访谈。与国内主要灰鹅品种外貌特征和生产性能进行对比。

关键词：方城灰鹅遗传资源外貌特征生产性能对比分析

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林地土壤及其真菌对毛红椿种子发芽及幼苗保存的影响

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林业科学研究 2017年第5期30卷 871-877页

作者：郭晓燕付立张露苏恒梁跃龙江西农业大学江西特色林木资源培育与利用2011协同创新中心江西南昌330045 江西农业大学生物科学与工程学院江西南昌330045 江西九连山国家级自然保护区江西龙南341700

[目的]通过不同群落毛红椿天然林林地土壤及其真菌对种子萌发和幼苗存活影响的研究,探讨影响毛红椿天然更新的障碍因素。[方法]在江西九连山国家级自然保护区内的3个毛红椿天然优势群落中,分别取距离毛红椿母树3个不同距离(2.5、5.0、7.... 详细信息

[目的]通过不同群落毛红椿天然林林地土壤及其真菌对种子萌发和幼苗存活影响的研究,探讨影响毛红椿天然更新的障碍因素。[方法]在江西九连山国家级自然保护区内的3个毛红椿天然优势群落中,分别取距离毛红椿母树3个不同距离(2.5、5.0、7.5 m)处的根区土壤和远离毛红椿母树(25 m以外)的非根区土壤,以非林地土为对照开展室内模拟播种和以根区土壤真菌的水或根系分泌物悬液对毛红椿幼苗进行灌根接种,观察种子萌发、幼苗存活和幼苗感病情况。[结果]各群落土壤中种子发芽均呈先上升后下降规律,且基本在第8 10天达到高峰;林地土与非林地土种子发芽率差异不显著,但林地根区土幼苗的存活率极显著低于非林地土和林地非根区土;距母树3个不同距离根区土的幼苗存活率差异不显著。灌根接种不同处理间幼苗存活率差异极显著,具体表现为接种RS2、RS5根区真菌的幼苗感病率显著高于根系分泌物及无菌水空白对照,且RS2真菌的根系分泌物悬浮液幼苗感病率显著高于其无菌水悬浮液。[结论]毛红椿种子萌发不受土壤环境的影响,但幼苗建成受根区范围内土壤的影响,根系分泌物和致病菌的互作显著降低幼苗保存率。由此推断,毛红椿根区土壤内存在幼苗的潜在致病菌及根系分泌物可增强其致病性。

关键词：毛红椿种子萌发幼苗存活土壤真菌

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播期对机插水稻群体性状及产量的影响

江苏农业科学 2016年第10期44卷 135-135,136,137,138页

作者：任海李旭吕小红隋鑫王宇付立东辽宁省盐碱地利用研究所辽宁盘锦124010

为完善盘锦稻区机插水稻精确定量栽培技术体系,探讨机插秧高产适宜播期,2013、2014连续2年以盐丰47为供试材料,采用小区对比试验,通过设置不同播期、同期栽插处理,测定不同播期对机插水稻群体性状及产量的影响。结果表明,随着播期推迟,... 详细信息

为完善盘锦稻区机插水稻精确定量栽培技术体系,探讨机插秧高产适宜播期,2013、2014连续2年以盐丰47为供试材料,采用小区对比试验,通过设置不同播期、同期栽插处理,测定不同播期对机插水稻群体性状及产量的影响。结果表明,随着播期推迟,秧龄逐渐缩短,株高、叶龄、假茎基宽、百株干质量、充实度、最长根长、根数均减少;秧龄缩短,各处理的每个时期叶片数随之减少。播期对机插水稻分蘖发生期有一定的影响。各处理群体茎蘖数随播期推迟秧龄的缩短,于N-n期逐渐减少,拔节期逐渐增多,齐穗期、成熟期呈先升后降的趋势。2年试验都表明,适当推迟播期,缩短秧龄,可以提高小苗后发优势,但秧龄过小,后期无效分蘖增多,成穗率降低。各处理叶面积指数随播期推迟秧龄的缩短,于移栽期、N-n期逐渐减小,拔节期、齐穗期逐渐增大。各处理干物质产量随播期推迟秧龄的缩短,于移栽期、N-n期逐渐减小,拔节期、齐穗期表现为先增后减。随播期推迟秧龄的缩短,各处理株高、穗长、实粒数逐渐降低,结实率逐渐提高。4月18日前后播种5月23日前后插秧的A2、B2处理,秧龄期35 d左右,秧苗素质最好,本田群体生长量适宜,齐穗期和成熟期干物质产量最大,实际产量最高,分别为9.77、11.03 t/hm2,比A1、A3、B1、B3处理分别高8.29、4.07、7.25、6.73百分点。

关键词：播期机插水稻群体生长发育产量

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地电化学提取技术条件的系统对比研究

地质与勘探 2006年第6期42卷 62-66页

作者：付立春罗先熔欧阳菲桂林工学院隐伏矿床预测研究所桂林541004

地电提取法是一种寻找隐伏矿床的有效方法,在国内很多矿床上都取得了很好的找矿效果。但对该方法具体野外工作条件的合理搭配尚无统一的规范。文章结合湖南省宜章县大根垄钨矿区、湖南省衡南县刘湾杨林坳钨矿区和广西大瑶山西侧北段盘... 详细信息

地电提取法是一种寻找隐伏矿床的有效方法,在国内很多矿床上都取得了很好的找矿效果。但对该方法具体野外工作条件的合理搭配尚无统一的规范。文章结合湖南省宜章县大根垄钨矿区、湖南省衡南县刘湾杨林坳钨矿区和广西大瑶山西侧北段盘龙铅锌矿区开展了地电化学勘查方法技术条件研究及找矿示范工作,对地电提取的野外工作条件进行对比研究,目的是比较不同因素的影响条件,从而优选出一套最佳的工作条件,供今后开展地电提取找矿工作参考使用。

关键词：地电提取技术条件湖南广西