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中国冠心病康复循证实践指南(2024版)第二部分

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中华物理医学与康复杂志 2024年第7期46卷 577-586页

作者：中华医学会物理医学与康复学分会四川大学华西医院魏全葛均波何成奇励建安王璐骨琳刘佳霓付琛颖钟雯刘瑞刘志倩不详四川大学华西医院康复医学中心复旦大学附属中山医院心内科南京医科大学第一附属医院康复医学中心四川十大兴学化华开西医院康复医学中心四川大学华西医院国家老年疾病临床医学研究中心

临床问题及推荐意见(11~20),临床问题11:如何提高冠心病患者对药物治疗的依从性?推荐意见:①向冠心病患者提供用药指导,推荐发病后开展强化用药教育或动机性访谈(牛津分级,证据质量1a,推荐强度A;GRADE分级,1B)。②推荐在上述强化教育的... 详细信息

临床问题及推荐意见(11~20),临床问题11:如何提高冠心病患者对药物治疗的依从性?推荐意见:①向冠心病患者提供用药指导,推荐发病后开展强化用药教育或动机性访谈(牛津分级,证据质量1a,推荐强度A;GRADE分级,1B)。②推荐在上述强化教育的基础上,配合使用手机、平板电脑等工具进行短信提醒、智能呼叫,进而提高患者对药物治疗的依从性(牛津分级,证据质量1b,推荐强度A;GRADE分级,1B)。

关键词：冠心病患者用药教育循证实践证据质量推荐意见平板电脑治疗的依从性智能呼叫

IgE重链2-4区蛋白的重组表达、与FcεRⅠ的相互作用功能分析及单克隆抗体的制备和鉴定

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IgE重链2-4区蛋白的重组表达、与FcεRⅠ的相互作用功能分析及单...

作者：付琛颖南方医科大学

学位级别：硕士

Ⅰ型变态反应性疾病,包括哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎及食物过敏等,在过去的20年中发病率逐年上升,全世界约有1.0～1.5亿人忠有哮喘,每年可导致约18万人死亡。估计全球为防治哮喘的经济代价已超过用于结核病和艾滋病的总和。目前,比... 详细信息

Ⅰ型变态反应性疾病,包括哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎及食物过敏等,在过去的20年中发病率逐年上升,全世界约有1.0～1.5亿人忠有哮喘,每年可导致约18万人死亡。估计全球为防治哮喘的经济代价已超过用于结核病和艾滋病的总和。目前,比较成熟的抗过敏疗法及脱敏疗法,仅以抗炎和缓解症状为目标,且存在较严重的副反应,治疗效果也不满意。因此,寻找更新、更特异的治疗途径是当务之急。引起Ⅰ型超敏反应的物质称为过敏原,生活中的一些高蛋白食物、屋尘、花粉、真菌、人与动物皮毛、羽毛、昆虫、寄生虫、药物及其他化学物质等都可作为过敏原,通过吸入、食入、注射或接触使机体致敏。过敏原侵入机体后,鼻咽、扁桃体、支气管、胃肠粘膜等处固有层的浆细胞产生抗原特异性IgE,IgE通过与嗜碱性粒细胞和肥大细胞表面的IgE高亲和力受体(FcεR I)结合,使靶细胞处于致敏状态。 IgE与其高亲和力受体FcεRI之间的相互作用是引发过敏反应的关键步骤。最近对受体、IgE-Fc以及IgE-Fc:FcεRI复合物的结构研究显示了IgE及其受体这两种蛋白是怎样相互作用以引发肥大细胞对抗原进行应答反应的。IgE-Fc:FcεRI复合物的晶体结构阐明了抗体和受体形成1:1复合物的机理是受体结合抗体Fc段二聚体的每一条链。IgE-Fc在未结合受体时的结构显示了IgE内部可能有影响受体结合的大规模构象重排的潜力。对IgE-FcεRI相互作用的进一步认识可能有助于抑制这种作用模式,进而为过敏疾病提供潜在的治疗方法。受体两个不同的结合表面形成凸出的且不对称相互作用表面分别与两个Cε3决定域结合,形成两个相互结合的位点。位点一:由IgE一条重链上Cε3决定域的十二个氨基酸残基和受体上的八个氨基酸残基构成,IgE残基来自IgE-Fc序列的四个不同的区域,包括:Cε2-Cε3衔接区(334-336位残基)、BCloop(362-365)、DE loop(393-396)以及FG loop(424位残基),受体残基来自于D2决定域的两个区域:C带(117、119和121位残基)和C′-E区(126和129-132位残基)。横跨位点一表面有两个潜在的盐桥(αK117-Cε3D362以及αE132-Cε3R334)和四个潜在的氢键连接(αK117-Cε3G335、αY129-Cε3D362、αY131-Cε3D364和αY131-Cε3R334)。受体上的Y131残基镶嵌进由IgE-Fc Cε3中BC和FG loop以及Cε2-Cε3相互衔接的区域形成的口袋里。位点二:包括来自IgE的十个氨基酸残基和来自FcεRIα的八个氨基酸残基。IgE残基局限于Cε3决定域的两个不同的区域:Cε2-Cε3衔接区(332-337位残基)和FG loop(424-427位残基)。FcεRIα残基来自三个区域:D1-D2连接区(85-87位残基)、D2 BCloop(110-113位残基)以及D2 FG loop(156-158位残基)。受体的D1决定域不直接与IgE-Fc相互作用。位点二主要包括三个疏水性氨基酸,它们以三个潜在的与IgE-Fc相连接的氢键横跨复合物相互作用表面(αW156-Cε3G335、αQ157-Cε3N332及αQ157-Cε3R334)。IgE-Fc的P426嵌入到受体残基W87和W110之间,形成疏水性脯氨酸夹心。 IgE/FcεRI复合物晶体结构显示许多相互作用位点是由位于Cε3展开的氨基末端区域和Loop直接与受体接触构成。IgE Fc的Cε2决定域朝向Cε3区呈极不对称弯曲使Cε3具备了一个易接近位点和一个隐藏的位点。完整的包含Cε2决定域的IgE Fc晶体结构显示单体的IgE Fc中两个亚位点中只有一个是易接近的,这就需要发生构象上的改变以使第二个位点与IgE Fc结合。FcεRIα链与2个CH3均有CH2-CH3接头(linker)的残基在受体的顶端形成一个不对称的拱形结构。当特异性抗原与靶细胞上两个以上的IgE分子结合,通过桥联反应使两个以上的IgE分子靠近并发生构型改变。然后,交联的FcεRI可激活两种胞浆内蛋白激酶(Lyn和Syk),使之磷酸化而激活。最后,接头蛋白和GTP交换因子/GTP酶诱导胞内贮存的Ca释放,后者再促进细胞脱颗粒、释放血管活性物质及某些酶类,即出现过敏反应。鉴于过敏性疾病病人外周血淋巴细胞表达IgE含量比正常人增多,用RT-PCR方法从过敏性疾病病人外周血淋巴细胞钓取IgE Cε2-4 cDNA片段,克隆至pET28a(+)构建原核表达载体IgE Cε2-4-pET28a(+),将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达IgE Cε2-4区蛋白,通过Ni-NTA亲和层析纯化融合蛋白后,用免疫荧光方法鉴定重组蛋白与天然细胞表面受体FcεRI

关键词： IgE Cε2-4 表达单克隆抗体

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广州管圆线虫病发病机制的研究现状

中国病原生物学杂志 2010年第9期5卷 703-706页

作者：李莹付琛颖汤金萍董文其南方医科大学生物技术学院广东广州510515 无锡市传染病院江苏无锡214005

广州管圆线虫病是重要的食源性人兽共患寄生虫病,其临床表现多样,可侵犯中枢神经系统、肺部、眼部、乙状结肠等多处脏器。广州管圆线虫入侵宿主造成损伤的机制,认为与多种因素共同作用有关,血脑屏障功能障碍、中枢神经系统功能障碍、免... 详细信息

广州管圆线虫病是重要的食源性人兽共患寄生虫病,其临床表现多样,可侵犯中枢神经系统、肺部、眼部、乙状结肠等多处脏器。广州管圆线虫入侵宿主造成损伤的机制,认为与多种因素共同作用有关,血脑屏障功能障碍、中枢神经系统功能障碍、免疫反应等均参与其中。了解其发病机制对临床诊断和治疗该病有指导性意义。

关键词：广州管圆线虫病发病机制血脑屏障功能障碍中枢神经系统功能障碍免疫反应综述

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肌少症在增龄过程中的发病机制研究

中国临床保健杂志 2023年第6期26卷 724-728页

作者：周黎行张弓长付琛颖程莹刘晓蕾胡凤娟黄婷婷董碧蓉国家老年疾病临床医学研究中心(四川大学华西医院) 成都610041

肌少症是一种随着年龄的增长,人体肌肉力量和质量逐渐退化的现象,在老年人群体中具有显著的流行率。该文对老年人肌少症的机制进行了综合分析,重点关注了肌卫星细胞的功能异常、肌纤维的结构和功能障碍以及炎症因子、肌源因子、激素水... 详细信息

肌少症是一种随着年龄的增长,人体肌肉力量和质量逐渐退化的现象,在老年人群体中具有显著的流行率。该文对老年人肌少症的机制进行了综合分析,重点关注了肌卫星细胞的功能异常、肌纤维的结构和功能障碍以及炎症因子、肌源因子、激素水平、氧化应激、神经肌肉接头的变化等多个机制。肌少症是一种复杂的疾病,涉及多种机制的异常。深入研究肌少症机制对于理解其发病过程、提高干预效果以及制定个性化的治疗方案具有重要意义。在未来的研究中,需要进一步深入探讨这些致病因素的相互作用和调控机制,以期能够从多个方面综合干预肌少症的发展。

关键词：肌减少症年龄因素成肌细胞肌疾病萎缩性肌力

IgE低亲和力受体基因的克隆、表达及初步鉴定

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热带医学杂志 2010年第5期10卷 538-541页

作者：尹晴陈白虹邱国真付琛颖董文其魏威李珍朱勇王萍南方医科大学生物技术学院生物制药系广州510515 广州市嘉合生物技术有限公司广州515663

目的利用基因重组的方法建立IgE低亲和力受体(FcεRⅡ)基因的原核表达系统。方法用RT-PCR方法从过敏性疾病病人外周血淋巴细胞扩增FcεRⅡcDNA基因,并将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,构建原核表达载体FcεRⅡ-pGEX-4T-1,将重组质粒... 详细信息

目的利用基因重组的方法建立IgE低亲和力受体(FcεRⅡ)基因的原核表达系统。方法用RT-PCR方法从过敏性疾病病人外周血淋巴细胞扩增FcεRⅡcDNA基因,并将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,构建原核表达载体FcεRⅡ-pGEX-4T-1,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta,诱导表达FcεRⅡ蛋白,通过割胶回收纯化,并用Western blot检测FcεRⅡ的表达。结果测序表明所扩增FcεRⅡcDNA基因,与已报道的序列一致。获得的重组蛋白经Western blot鉴定可以和人IgE特异性结合。结论成功构建了FcεRⅡ-pGEX-4T-1表达载体,获得了能和人IgE特异性结合的重组蛋白,为下一步FcεRⅡ单克隆抗体的制备及应用研究打下了基础。

关键词： IgE 低亲和力受体表达鉴定

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人源脂肪细胞SH2B1β基因的克隆表达

热带医学杂志 2009年第3期9卷 249-252页

作者：邱国真陈白虹曲戎梅付琛颖董文其魏威王文敬王萍南方医科大学生物技术学院生物制药系广州510515

目的获取人源脂肪细胞SH2B1β基因序列,构建SH2B1β-pET28a(+)重组表达质粒,在大肠杆菌中对其进行表达。方法利用RT-PCR方法从人源分化成熟的脂肪细胞RNA中扩增出SH2B1β的cDNA片段,并插入pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG... 详细信息

目的获取人源脂肪细胞SH2B1β基因序列,构建SH2B1β-pET28a(+)重组表达质粒,在大肠杆菌中对其进行表达。方法利用RT-PCR方法从人源分化成熟的脂肪细胞RNA中扩增出SH2B1β的cDNA片段,并插入pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG诱导表达带6×His标签的融合蛋白。结果PCR和酶切电泳鉴定结果显示SH2B1β基因克隆入载体中,测序结果证实克隆的基因序列与GenBank中的人源SH2B1β序列相符,SDS-PAGE电泳结果表明获得相对分子质量约75000的目的蛋白。结论成功获取了人源脂肪细胞的SH2B1β基因,并在BL21(DE3)中高效表达目的蛋白,为下一步表达纯化SH2B1β重组蛋白及蛋白的初步功能研究奠定基础。

关键词： SH2B1β 克隆原核表达

人IgE重链3-4区蛋白的表达、纯化及功能分析

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热带医学杂志 2009年第4期9卷 349-353页

作者：付琛颖曲戎梅邱国真魏威林志斌王萍王文敬李珍董文其南方医科大学生物技术学院生物制药系广州510515

目的通过基因重组的方法表达IgE Cε3-Cε4区,鉴定重组蛋白与天然细胞表面受体FcεRⅠ之间的相互作用,并用重组蛋白免疫小鼠制备血清。方法用RT-PCR方法从过敏性疾病病人外周血淋巴细胞调取IgE Cε3-Cε4cDNA片段,克隆至pET28a(+)构建... 详细信息

目的通过基因重组的方法表达IgE Cε3-Cε4区,鉴定重组蛋白与天然细胞表面受体FcεRⅠ之间的相互作用,并用重组蛋白免疫小鼠制备血清。方法用RT-PCR方法从过敏性疾病病人外周血淋巴细胞调取IgE Cε3-Cε4cDNA片段,克隆至pET28a(+)构建原核表达载体IgE Cε3-Cε4-pET28a(+),将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达IgE Cε3-Cε4区蛋白,通过Ni-NTA亲和层析纯化融合蛋白后,用免疫荧光方法鉴定重组蛋白与天然细胞表面受体FcεRⅠ之间的结合能力,并用UniCAP 100全自动分析检测仪对重组抗原进行定量检测与鉴定;用表达蛋白免疫BALB/c小鼠,制备抗鼠血清,用Western-blot法对多克隆抗体进行鉴定。结果成功调取的人IgE Cε3-Cε4区基因与已报道的序列相一致;获得的IgECε3-Cε4区蛋白相对分子质量(Mr)同预期的结果相一致;IgE Cε3-Cε4能特异性结合人嗜碱性粒细胞表面的FcεRⅠ受体;通过UniCAP 100全自动分析检测仪能够检测到重组抗原并精确到国际单位;免疫鼠血清多抗能特异性结合天然人血清IgE。结论成功构建了IgE Cε3-Cε4-pET28a(+)表达载体,获得了能被人嗜碱性粒细胞表面的FcεRⅠα亚基特异性识别的IgE Cε3-Cε4区蛋白,并用天然人血清IgE鉴定了多克隆抗体,为下一步单克隆抗体的制备打下了基础。

关键词： IgE Cε3-Cε4 表达鉴定

质子型双菲啰啉的特异性抗肿瘤活性及其机制研究

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药学学报 2022年第5期57卷 1344-1351页

作者：赵梓圳付琛崔志鸿李晓荣张颖颖张雨萍杨晓茜付爱玲西南大学药学院重庆400716

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是常见的恶性肿瘤,其发病率高且极易转移复发,严重影响人类健康。传统药物治疗存在不良反应大、多药耐药等问题,因此亟须寻找新的药物和作用靶点。本研究合成了质子型的双菲啰啉(protonic bis-ph... 详细信息

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是常见的恶性肿瘤,其发病率高且极易转移复发,严重影响人类健康。传统药物治疗存在不良反应大、多药耐药等问题,因此亟须寻找新的药物和作用靶点。本研究合成了质子型的双菲啰啉(protonic bis-phenanthroline,H-BP),结果显示H-BP可选择性地抑制肿瘤细胞增殖,引起肝癌细胞凋亡;在HCC荷瘤小鼠体内,H-BP能够有效阻止瘤块的生长,在中剂量(5 mg·kg^(-1))和高剂量(10 mg·kg^(-1))时甚至可完全消除肿瘤,并对小鼠体重没有明显影响。实验方案由西南大学动物实验伦理委员会批准,严格按照动物使用和护理的伦理原则进行实验操作。机制研究表明,H-BP引起HCC凋亡的原因与H-BP降低了原癌基因转录因子多形性腺瘤基因样蛋白2(pleomorphic adenoma gene like-2,PLAGL2)的表达有关,造成PLAGL2下游蛋白缺氧诱导因子和β连环蛋白的下调,从而引发癌细胞死亡。本研究不仅使用氢键二聚化方法合成化合物,为药物的设计提供新的思路,而且实验结果表明PLAGL2可能是肿瘤治疗中的一个有效靶标。

关键词：肝细胞癌质子型双菲啰啉多形性腺瘤基因样蛋白2 凋亡氢键