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热加工破坏大豆球蛋白G1A1a致敏表位的定位

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热加工破坏大豆球蛋白G1A1a致敏表位的定位

作者：付杨河南工业大学

学位级别：硕士

大豆因其较高的油脂含量和优质蛋白质被广泛种植,制作成饲料及各类副产品。但是大豆也是联合国粮农组织认定的八大过敏原之一,极大的影响着敏感人群的生命健康。因此深入探究大豆蛋白的致敏机理,精确定位出致敏位点可以为低致敏性产品... 详细信息

大豆因其较高的油脂含量和优质蛋白质被广泛种植,制作成饲料及各类副产品。但是大豆也是联合国粮农组织认定的八大过敏原之一,极大的影响着敏感人群的生命健康。因此深入探究大豆蛋白的致敏机理,精确定位出致敏位点可以为低致敏性产品的研发提供依据,同时研究降低大豆致敏性的加工方法,对于大豆过敏患者具有深远意义。本文以大豆球蛋白G1亚基A1a酸性多肽链(以下称为G1A1a)为研究对象,通过数据库索引获得氨基酸序列,以G1A1a的同源蛋白质为依据建立其三维结构模型,并对该模型的线性表位和构象表位进行预测,结合亲水性、表面可及性和抗原性等性质预测出了10个线性表位和部分构象表位。10个可能性较高的线性表位为:EQPQ QN、KPDNRI、NPNNK、RRPSYTNG、PQQPQQRGQS、QEQGG HQSQKGKHQQEEENE、NEGED、PPTDEQQQRP、DEKPQCKGK、RPRGS。预测结果分析:β-折叠和无规则卷曲位置有较大的可能性成为抗原表位。结合预测表位,采用重叠分段(overlapping)的方法将G1A1a的氨基酸序列分为A1a-1、A1a-2和A1a-3三段,并设计每条分段的引物。将PCR扩增后的G1A1a基因和重叠片段基因进行胶回收,回收片段与T载体连接构建成克隆载体,转化后挑选阳性菌扩大培养提取质粒,质粒双酶切后与T7噬菌体臂连接,将连接后的载体经过体外包装侵染大肠杆菌,使得目的基因能够正常表达。富集纯化表达的噬菌体蛋白,为后续免疫学检测实验做准备。将足量的热加工处理大豆球蛋白与兔源大豆球蛋白多克隆抗体混合吸收,制备热加工蛋白的特异性抗体。特异性抗体与噬菌体表达蛋白进行ELISA反应,定位出热加工破坏的优势抗原表位位于片段A1a-2上。将片段A1a-2进行重叠分段,分为A1a-2-A、A1a-2-B、A1a-2-C三段,对重叠分段再次进行PCR扩增,克隆载体、表达载体的构建,得到噬菌体表达蛋白,免疫反应结果显示片段A1a-2-B含有热加工破坏抗原优势表位。为进一步缩小热加工破坏抗原优势表位所在区域,进行最终一轮的重叠分段,将片段A1a-2-B分为片段A1a-2-B-Ⅰ、A1a-2-B-Ⅱ、A1a-2-B-Ⅲ。结果显示热加工破坏抗原优势表位位于片段A1a-2-B-Ⅰ,该片段氨基酸序列为SLENQLDQMPRRFYLAGNQEQEFLKYQQEQG。将三次overlapping分段筛选出的优势抗原表位与大豆过敏患者Ig E抗体进行ELISA反应鉴定致敏性,结果显示:三段抗原优势表位噬菌体表达蛋白均与大豆过敏患者Ig E抗体产生阳性反应,即确定片段A1a-2-B-Ⅰ为G1A1a的优势致敏表位区域。通过在线软件分析,显示该片段含有51.61%的无规则卷曲,其结构分布符合表位预测时所得出的结论。对确定出的热加工破坏致敏优势表位区域进行精确定位:将片段A1a-2-B-Ⅰ分为重叠的三段进行多肽合成,经过斑点印记(Dot-blot)实验,结果表明只有肽2能够与兔源大豆球蛋白多克隆抗体呈阳性反应,即证明肽2中含有对应的线性表位,肽1与肽3中不含有相关线性表位,ELISA反应结果同Dot-blot实验结果一致。而热加工破坏的特异性抗体与三条多肽均不反应,则表明热加工处理对多肽中的线性表位没有产生破坏。而片段A1a-2-B-Ⅰ噬菌体表达蛋白能与热加工破坏特异性抗体结合反应,则证明片段A1a-2-B-Ⅰ中含有热加工破坏的构象表位。将合成多肽与大豆过敏患者Ig E抗体反应结果显示只有肽2呈阳性,表明肽2具有致敏表位。将肽2中的氨基酸逐个使用丙氨酸进行替换合成突变多肽,氨基酸突变后的多肽与BSA偶联,经过Dot-blot和ELISA实验,结果显示D、Q、M、Y是影响大豆球蛋白G1A1a抗原性的关键氨基酸。而Q、M、R、N是影响大豆球蛋白G1A1a致敏性的关键氨基酸。

关键词： G1A1a 表位预测重叠分段噬菌体展示

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九州转债融资动因和财务绩效分析

九州转债融资动因和财务绩效分析

作者：付杨钧华中科技大学

学位级别：硕士

可转换公司债券是一种混合型金融衍生品,赋予了投资者在一定期限内以规定的价格将债券转换成一定数量股票的权利。在转股之前可转换公司债券具有普通债券的性质,转股之后具有股票的性质。与传统的权益和债务融资相比,可转换公司债券这... 详细信息

可转换公司债券是一种混合型金融衍生品,赋予了投资者在一定期限内以规定的价格将债券转换成一定数量股票的权利。在转股之前可转换公司债券具有普通债券的性质,转股之后具有股票的性质。与传统的权益和债务融资相比,可转换公司债券这种股性和债性兼具的特点使得可转换公司债券融资具有巨大的吸引力。随着我国经济和市场的发展,近几年来通过可转换公司债券进行融资也越来越频繁,可转换公司债券融资已经成为我国上市公司融资手段中非常重要的一种。但是从国内的研究来看,对于可转换公司债券的研究还并不广泛,研究范围主要是集中在对可转换公司债券的动因和公告效应方面。为了给上市公司发行可转换公司债券融资提供更多的融资参考和依据,论文采用理论和案例相结合的方法,研究上市公司发行可转换公司债券的动因和发行后财务绩效的变化。在对国内外学者对可转换公司债券的融资动因和融资效应做概述和总结之后,具体以九州通集团发行“九州转债”为研究对象,通过模拟股票融资、普通债券融资和可转换公司债券融资,从股权稀释性、税盾效应、融资成本和每股收益方面研究九州通发行九州转债的动机。随后选择代表企业成长性和盈利性的财务指标,通过与医药流通行业九家上市公司对九州通集团发行九州转债做“反事实”研究,发现九州转债的发行使九州通集团的财务绩效得到一定的提升。最后采用因子分析的方法,计算十家医药公司在九州转债发行前后两年的因子综合得分,通过比较九州通集团因子得分排名发现九州通集团发行九州转债后财务绩效排名有所上升,为了剔除非经常性项目对排名的影响,使用“扣非”财务指标做因子分析,得出结论与之前一致。在此基础上对于可转换公司债券的发展提出相关建议。

关键词：可转换公司债券融资动因财务绩效

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太子参多糖口服液对脾虚大鼠肠道功能的影响

太子参多糖口服液对脾虚大鼠肠道功能的影响

作者：付杨西南大学

学位级别：硕士

目的:提取制备太子参多糖口服液并进行质量标准研究和稳定性考察;研究太子参多糖口服液对脾虚大鼠免疫功能、胃肠道生理功能、肠道菌群及其代谢产物的影响,同时从提取物、原药材和成方制剂三个层面研究其药理作用,对比探究太子参多糖是... 详细信息

目的:提取制备太子参多糖口服液并进行质量标准研究和稳定性考察;研究太子参多糖口服液对脾虚大鼠免疫功能、胃肠道生理功能、肠道菌群及其代谢产物的影响,同时从提取物、原药材和成方制剂三个层面研究其药理作用,对比探究太子参多糖是否为太子参健脾功效的有效部位。方法:（1）太子参多糖口服液制备及质量标准研究。提取太子参多糖并制备太子参多糖口服液,参照2020版《中国药典》建立太子参多糖口服液质量标准,并进行太子参多糖口服液的稳定性考察。（2）太子参多糖口服液对脾虚大鼠免疫功能的影响。SD大鼠皮下注射利血平复制脾虚模型。造模成功后,以四君子合剂为阳性药,研究太子参多糖口服液、太子参原药材和健胃消食片对大鼠体重、饮食、大便情况、精神状态、皮毛色泽等临床体征的影响,并测定免疫器官指数和SIg A、Ig G、Ig M、IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α的含量。（3）太子参多糖口服液对脾虚大鼠胃肠道生理功能的影响。测定各组大鼠D-木糖排泄率和淀粉酶活性,胃肠道激素GAST、MTL、VIP水平。观察空肠组织病理损伤情况,测量肠绒毛长度、隐窝深度、肌层厚度,并计算绒隐比均值（V/C）。（4）太子参多糖口服液对脾虚大鼠肠道菌群及其代谢产物的影响。从大鼠粪便中提取DNA,采用16S r RNA测序方法检测肠道微生物,同时采用GC-MS测定粪便中短链脂肪酸含量。结果:（1）确定太子参多糖口服液的制备工艺并建立了质量标准,稳定性良好。所得太子参多糖口服液为淡黄色澄明液体,味淡,微甜;太子参多糖口服液相对密度应不低于1.02g/m L;p H值应在5.0-7.0范围内;每m L太子参多糖口服液中多糖（以葡萄糖计）含量不得少于20mg;薄层色谱结果表明,主要单糖组分为葡萄糖和半乳糖;HPLC结果表明,太子参多糖口服液中含有0.013%鼠李糖、0.067%葡萄糖醛酸、0.063%乳糖、0.490%葡萄糖、1.656%半乳糖以及0.006%木糖;其余各项试验结果均符合相关规定。（2）造模后,各组大鼠体重和采食量下降（P＜0.01）,出现眯眼弓背,神倦乏力,大便溏泄,毛色枯黄等情况,说明造模成功;各给药组大鼠恢复较模型对照组更快。模型对照组免疫器官指数低于正常对照组（P＜0.01）,给药后免疫器官指数均有所上升,但除成方制剂组外,各组胸腺指数无统计学意义。模型对照组SIg A水平低于正常对照组（P＜0.05）,给药后除高剂量组外其余各组SIg A水平不同程度升高（P＜0.01）,说明太子参多糖的摄入可上调脾虚大鼠肠黏膜免疫功能。模型对照组Ig G、Ig M水平低于正常对照组（P＜0.01）,给药后中、高剂量组Ig G水平上升（P＜0.01）,除低剂量组外其余各给药组Ig M水平上升（P＜0.01）,说明太子参多糖的摄入可上调脾虚大鼠体液免疫功能。模型对照组IL-2、IL-6和IFN-γ水平低于正常对照组（P＜0.01）;给药后,各组IL-2水平上升（P＜0.01）,低、中、高剂量组和原药材组IL-6水平上升（P＜0.01）,阳性对照和低、中剂量组IFN-γ水平上升（P＜0.01）,高剂量组TNF-α水平上升（P＜0.05）,说明太子参多糖的摄入可上调脾虚大鼠细胞免疫功能。（3）模型对照组D-木糖排泄率和淀粉酶活性低于正常对照组（P＜0.05）,给药后中、高剂量组、原药材组和成方制剂组D-木糖排泄率升高（P＜0.05）,成方制剂组淀粉酶活性升高（P＜0.05）,说明太子参多糖的摄入可明显改善脾虚大鼠的肠道吸收功能,健胃消食片可以明显改善脾虚大鼠的消化功能。与正常对照组相比,模型对照组GAST、MTL水平降低（P＜0.01）,VIP水平升高（P＜0.01）;与模型对照组比,各给药组GAST、MTL水平均有所升高（P＜0.05）,各给药组VIP水平均降低（P＜0.01）,说明太子参多糖的摄入可调节脾虚大鼠胃肠道激素水平。正常对照组空肠粘膜结构完整,未见明显病理损伤,模型对照组空肠粘膜上皮细胞坏死脱落,形成轻微糜烂,各给药组空肠状态明显改善;与正常对照组比,模型对照组空肠组织学评分升高（P＜0.01）;与模型对照组比,除低、中剂量组外,其余各给药组评分降低（P＜0.05）。模型对照组绒毛长度和肌层厚度低于正常对照组（P＜0.01和p＜0.05）,给药后有所改善,与模型对照组比,高剂量组和成方制剂组的V/C均值升高（P＜0.01）,说明太子参多糖具有一定肠粘膜保护作用,且健胃消食片效果最为明显。（4）每个样品平均得到有效焦磷酸序列95768条,按照97%的一致性聚类分析得到4054个OTUs,鉴定了279种微生物。与正常对照比,模型对照组肠道微生物多样性显著降低,肠道菌群紊乱,其中伊氏乳杆菌、约式乳杆菌、艾克曼菌、嗜酸乳杆菌、罗姆布茨菌、肠乳酸杆菌丰度降低（P＜0.05）

关键词：太子参多糖脾虚免疫功能胃肠道生理功能肠道微生物

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瘦素在阿尔茨海默病中的研究进展

生理科学进展 2024年

作者：付杨洋李晔昆明理工大学基础医学院

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease， AD）是一种复杂的神经退行性大脑疾病，导致严重的认知障碍，特别是记忆功能受损，影响全球数千万人，目前尚无有效疗法能够阻止或减缓其病程。不良的饮食习惯和生活方式是罹患AD的主要危险因素... 详细信息

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease， AD）是一种复杂的神经退行性大脑疾病，导致严重的认知障碍，特别是记忆功能受损，影响全球数千万人，目前尚无有效疗法能够阻止或减缓其病程。不良的饮食习惯和生活方式是罹患AD的主要危险因素，且代谢紊乱在AD患者中很常见。瘦素（leptin）是一种重要的代谢激素，具有增强认知的特性，越来越多证据表明，瘦素水平不足及其功能障碍与AD患病风险增加有关。瘦素不仅能够改善AD病理特征，还显著影响海马突触功能，发挥神经保护作用。此外，瘦素在AD治疗中也展现出良好的临床前景，有望成为一种新的治疗方法和诊断工具。

关键词：阿尔茨海默病瘦素代谢紊乱

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应用有限元法验证重组竹材料在家具中的应用

竹子学报 2016年第4期35卷 48-54页

作者：付杨方海广东工业大学艺术设计学院广东广州510090

重组竹是一种物理性能优异,突破了传统加工模式,可全面代替木材应用于家具制造的新型竹材料。以经典靠背椅为例,应用有限元软件ANSYS做仿真分析,对比重组竹、花梨木、榆木3种材料在受力状态时的应力和形变,研究重组竹材料在家具制造上... 详细信息

重组竹是一种物理性能优异,突破了传统加工模式,可全面代替木材应用于家具制造的新型竹材料。以经典靠背椅为例,应用有限元软件ANSYS做仿真分析,对比重组竹、花梨木、榆木3种材料在受力状态时的应力和形变,研究重组竹材料在家具制造上的应用价值。

关键词：重组竹靠背椅 ANSYS有限元分析

视频素材在对外汉语综合课中的应用研究 ——以《新阶梯—中级汉语教程·上》为例

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视频素材在对外汉语综合课中的应用研究 ——以《新阶梯—中级汉...

作者：刘付杨黑龙江大学

学位级别：硕士

汉语综合课是汉语学习者进行汉语学习的主要课程,以训练学生听、说、读、写技能为目的来培养学生语言运用的能力。视频素材应用在汉语综合课中不仅可以带来更好的教学效果还可以提升学生学习兴趣,为汉语教学带来新思路。本文利用了总结... 详细信息

汉语综合课是汉语学习者进行汉语学习的主要课程,以训练学生听、说、读、写技能为目的来培养学生语言运用的能力。视频素材应用在汉语综合课中不仅可以带来更好的教学效果还可以提升学生学习兴趣,为汉语教学带来新思路。本文利用了总结归纳法、实践法和访谈法对视频素材在汉语综合课的应用进行研究。先是对视频的应用所依托的输入理论、索绪尔语言学理论以及内容教学法、视听法进行阐述,分析了视频素材在汉语综合课中应用存在一定价值。再以汉语教材《新阶梯——中级汉语教程·上》为例,说明视频素材在课堂中的应用需要采取相应的策略,要遵循视频素材的选用原则在课堂中合理运用。同时针对本教材的语言内容和文化内容上,提出视频素材在课堂不同环节如何应用以及可以怎样与不同教学法相结合。然后以第四课《祝你生日快乐》为例进行教学设计,对视频素材在课堂中的应用进行详细论述。分别在课前导入环节、课中语言点讲解运用部分、文化拓展环节进行了视频素材应用的教学设计,罗列出了所应用的视频素材主要内容及教学方式。在实践过后,通过学生对课堂的反馈进行教学反思,说明课堂教学达到的积极效果、总结遇到的困难与存在的问题,在此基础上对视频素材在汉语综合课中的应用提出一些建议。

关键词：汉语综合课视频素材应用对外汉语教学

多源流理论视角下广西—东盟矿产资源合作开发政策过程研究

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多源流理论视角下广西—东盟矿产资源合作开发政策过程研究

作者：付杨冉广西大学

学位级别：硕士

矿产资源对经济及社会发展产生着重要影响,随着经济全球化步伐的继续发展,矿产资源的配置也日益呈现全球化趋势。广西壮族自治区作为矿产资源大省,一方面,矿产资源种类比较丰富、经济矿种储量较大,但另一方面由于找矿难度及成本相对较高... 详细信息

矿产资源对经济及社会发展产生着重要影响,随着经济全球化步伐的继续发展,矿产资源的配置也日益呈现全球化趋势。广西壮族自治区作为矿产资源大省,一方面,矿产资源种类比较丰富、经济矿种储量较大,但另一方面由于找矿难度及成本相对较高,使得广西矿产资源的综合开发难度不断提升;广西是中国-东盟合作的桥头堡,拥有多种合作平台和渠道可以与东盟开展全方位的合作,而且由于广西、东盟矿业之间存在较强的互补性,双方合作拥有一定的基础,因此强化政府职能,进一步促进双方在矿产资源开发领域的合作是一种必然选择,广西要把立足区内开发与加强与东盟国家之间的合作相结合,更高效地利用国内外两个市场的两种资源,为实现打赢脱贫攻坚战,与全国同步全面建成小康社会提供物质保障。本文以多源流理论作为理论分析工具来研究广西-东盟矿产资源合作开发的政策过程,从而梳理出对外矿产资源合作开发政策制定机制的普适性规律,以期为相关政府部门制定对外矿产资源合作开发政策提供范式,并且本文结合广西-东盟矿产资源合作开发的实际情况提出了广西-东盟矿产资源合作开发政策过程优化的多源流路径选择。本文包括绪论及四个主体部分:在绪论部分简要的阐述了本文的选题缘由以及相关研究状况,并对国内外学者所做的研究进行评述,然后梳理本文的研究内容、研究方法、技术路线图以及可能的创新之处。第一个主体部分,对核心概念进行了界定并对相关理论进行综述。一方面,对公共政策、广西-东盟矿产资源合作开发政策以及广西-东盟矿产资源合作开发主体等核心概念进行界定,另一方面对矿产资源开发理论、多源流分析理论进行综述。第二个主体部分,对广西-东盟矿产资源合作开发及其政策现状进行分析。首先,探讨了广西-东盟矿产资源合作开发的现状,接着梳理了广西-东盟矿产资源合作开发政策存在的制定主体不明确、东盟各国之间矿业政策存在差异、政策顶层设计缺乏、政府部门之间协调机制不健全、政府引导与市场调节之间的关系尚不清晰等问题。第三个主体部分,基于多源流理论的广西-东盟矿产资源合作开发政策模型构建。以多源流理论为依据,结合广西东盟矿产资源合作开发及其政策现状完成对广西-东盟矿产资源合作开发政策模型的构建。第四个主体部分,提出了广西-东盟矿产资源合作开发政策过程优化的多源流路径选择。通过密切关注相关社情民意,确保关键问题进入政策议程、激发政治动力,提升相关政策的制定以及执行效率、广泛听取来自各方面的政策建议,确保政策的科学性、推动三源合流,适时打开政策之窗四个步骤来完成。

关键词：广西-东盟矿产资源合作政策制定多源流理论

DC-OFDM超宽带无线通信关键技术的研究

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DC-OFDM超宽带无线通信关键技术的研究

作者：付杨林东南大学

学位级别：硕士

近年来超宽带(UWB)无线通信技术作为目前室内短距离高速传输的一种重要的方式,已经受到学术界和工业界的广泛重视。UWB在过去主要应用在雷达和GPS定位设备中。由于UWB通信具有发射信号功率谱密度低,数据传输速率高,对信道衰落不敏感,抗... 详细信息

近年来超宽带(UWB)无线通信技术作为目前室内短距离高速传输的一种重要的方式,已经受到学术界和工业界的广泛重视。UWB在过去主要应用在雷达和GPS定位设备中。由于UWB通信具有发射信号功率谱密度低,数据传输速率高,对信道衰落不敏感,抗截获能力好,定位精度高等优点,可有效解决企业、家庭、公共场所等高速数据传输和越来越拥挤的频率资源分配的矛盾。2002年2月14日,美国联邦通信委员会(FCC)在充分讨论和研究UWB系统对GPS、WLAN等现有系统的干扰、电磁干扰性、安全性等问题后,批准将UWB技术用于雷达测距、金属检测和通信等民用产品,从此掀起了UWB技术的研究热潮。本文以UWB信道模型和双载波(DC)OFDM UWB系统为侧重点进行研究工作。首先介绍了UWB的发展历史, FCC对UWB的定义,以及UWB当前的发展现况。接着详细讨论了脉冲方案,DS-CDMA方案和MB OFDM方案等三种UWB系统的工作原理。然后从常规无线信道入手,阐述了UWB信道模型,并对IEEE 802.15.3a信道模型进行了仿真,其结果证明了这个模型生成的信道与室内UWB信号实际测量的信道非常接近。接着介绍了双载波(DC)OFDM UWB系统,从系统的设计原理到系统的仿真及性能分析作了简要的说明。最后介绍了全球目前UWB标准的制定情况以及相关产品的开发情况。分析了UWB的应用前景以及UWB的存在的一些难点和研究方向。

关键词：超宽带工作原理信道模型双载波OFDM

集胞藻PCC 6803中外源合成虾青素的研究

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集胞藻PCC 6803中外源合成虾青素的研究

作者：付杨威天津大学

学位级别：硕士

虾青素因具有很强的抗氧化作用而被广泛应用于食品、医药、化妆品、水产养殖等行业。虾青素的生产主要来自于植物提取和化学合成两个方面。相对于人工合成虾青素,植物提取虾青素具有纯度高、异构体少、生物利用性好等优点,因此受到市场... 详细信息

虾青素因具有很强的抗氧化作用而被广泛应用于食品、医药、化妆品、水产养殖等行业。虾青素的生产主要来自于植物提取和化学合成两个方面。相对于人工合成虾青素,植物提取虾青素具有纯度高、异构体少、生物利用性好等优点,因此受到市场的广泛青睐。然而,目前采用植物提取得到的虾青素产量仍然较低,难以满足市场需求。而利用微生物细胞工厂生物合成虾青素提供了一个很好的选择。目前虾青素已经在大肠杆菌和酵母菌中成功合成,然而还未有利用集胞藻合成虾青素的报道。虾青素是类胡萝卜素衍生物的一种,其合成需要两个关键酶:β-胡萝卜素羟化酶和β-胡萝卜素酮化酶。许多细菌来源的β-胡萝卜素羟化酶和β-胡萝卜素酮化酶是双功能酶,可以以β-胡萝卜素以及羟基化或酮基化的β-胡萝卜素衍生物作为底物,因此可以合成多达8种中间产物。因此,选取合适的β-胡萝卜素羟化酶和β-胡萝卜素酮化酶组合十分关键。集胞藻PCC 6803具有类异戊二烯代谢通路,能够自然积累β-胡萝卜素和玉米黄质等虾青素前体。本研究中,我们选取了来自鱼腥藻PCC 7120的β-胡萝卜素酮化酶编码基因crtW,来自成团泛菌的β-胡萝卜素羟化酶编码基因crtZ来构建虾青素合成代谢通路。首先,我们通过在大肠杆菌中构建虾青素合成代谢通路,验证crtW,crtZ两个关键基因的表达特性。构建的*** BW-BWZ菌株中可以积累虾青素和玉米黄质,经过两天的培养,虾青素的积累量达到971.21μg/g dcw。其次,我们将crtW整合到pJA质粒上,以PsbA2作为启动子,在集胞藻PCC 6803中构建了虾青素合成代谢通路,实现虾青素在集胞藻PCC 6803中的生物合成,本研究首次利用光合蓝细菌Synechocystis *** 6803实现了由CO2和光能到虾青素的直接合成。经过四天的培养,构建的Synechocystis *** 6803-AX菌株中虾青素的积累量达到112.16μg/g dcw。构建的Synechocystis *** 6803-AX菌株中除了虾青素,还有β-胡萝卜素、玉米黄质等虾青素前体积累,说明以PsbA2作为启动子时,crtW的表达强度不够,可以进一步增强其表达来提高虾青素前体转化效率。此外,还可以通过过表达crt Z、crtB(番茄红素合成酶编码基因)等基因,敲除竞争代谢通路等策略来进一步提高虾青素积累量。

关键词：虾青素大肠杆菌蓝细菌集胞藻生物合成 β-胡萝卜素酮化酶 β-胡萝卜素羟化酶