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G-CSF对局灶脑缺血再灌注大鼠脂质过氧化及神经细胞凋亡的影响

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中风与神经疾病杂志 2015年第8期32卷 726-729页

作者：龚筱弦范佳付希佳赵阳宋磊浙江中医药大学第二临床医学院浙江杭州310053 吉林大学白求恩第二医院神经内科吉林长春130033 吉林大学白求恩第一医院神经内科吉林长春130021 吉林大学白求恩第一医院呼吸科吉林长春130021

目的研究G-CSF对局灶脑缺血再灌注大鼠缺血区域脑组织脂质过氧化及神经细胞凋亡的影响,为G-CSF应用于缺血性脑血管病的治疗提供进一步的理论依据。方法 18只成年雄性Wistar大鼠随机分成3组:假手术组、盐水对照组和G-CSF治疗组,每组各6... 详细信息

目的研究G-CSF对局灶脑缺血再灌注大鼠缺血区域脑组织脂质过氧化及神经细胞凋亡的影响,为G-CSF应用于缺血性脑血管病的治疗提供进一步的理论依据。方法 18只成年雄性Wistar大鼠随机分成3组:假手术组、盐水对照组和G-CSF治疗组,每组各6只大鼠。改良线栓法建立右侧大脑中动脉阻塞模型(t MCAO)。再灌注2 h后,G-CSF治疗组给予50μg/kg粒细胞集落刺激因子皮下注射一次;盐水对照组注入等量生理盐水;假手术组不作任何处理。再灌注24 h后处死大鼠取脑,化学比色法检测缺血区域SOD、GSH-PX、MDA、NO的含量;免疫组化染色计数p-JNK、p-p38MAPK阳性细胞;Tunel染色检测神经细胞凋亡情况。结果再灌注24 h后,G-CSF治疗组缺血区域SOD、GSH-PX的含量高于盐水对照组而低于假手术组(P<0.05),MDA、NO的含量低于盐水对照组而高于假手术组(P<0.05);G-CSF治疗组p-JNK、p-p38MAPK阳性细胞明显少于盐水对照组(P<0.05),tunel染色可见凋亡细胞数较盐水对照组减少。结论 G-CSF可以显著增加大鼠局灶脑缺血再灌注后SOD、GSH-PX的水平,减轻脂质过氧化反应程度,并且可以通过拮抗JNK、p38MAPK途径减轻神经细胞凋亡,发挥神经保护作用。

关键词：脑梗死粒细胞集落刺激因子脂质过氧化一氧化氮凋亡

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布氏杆菌感染导致急性脊髓炎1例报告

中风与神经疾病杂志 2016年第2期33卷 183-184页

作者：王乙涵赵阳解文菁付希佳董杉杉刘群吉林大学白求恩第一医院神经内科和神经科学中心吉林长春132001

布氏杆菌病（Brucellosis）是由布氏杆菌引起的人兽共患的传染性变态反应性疾病。其临床表现复杂,可导致肌肉、关节、淋巴结、肝脾、生殖、神经等多系统病变。其中以神经系统症状为主要表现的神经型布氏杆菌病仅占1.7%~10%[1],多表现为... 详细信息

布氏杆菌病（Brucellosis）是由布氏杆菌引起的人兽共患的传染性变态反应性疾病。其临床表现复杂,可导致肌肉、关节、淋巴结、肝脾、生殖、神经等多系统病变。其中以神经系统症状为主要表现的神经型布氏杆菌病仅占1.7%~10%[1],多表现为脑膜炎、多发性神经根炎;而听神经受损、脊髓炎、脑血管内膜炎等罕见。现就我院收治的1例布氏杆菌感染引起的急性脊髓炎报道如下。

关键词：布氏杆菌感染急性脊髓炎多发性神经根炎 Brucellosis 神经型系统病变脊髓病左下肢麻木椎体水平变态反应性疾病

miR-155通过抑制SMAD5调控成骨细胞骨分化

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中国组织工程研究 2017年第4期21卷 538-544页

作者：邱诗阳付希佳白晓雪杨军中国医科大学附属盛京医院南湖院区创伤骨科辽宁省沈阳市110004 朝阳市中心医院神经内科辽宁省朝阳市122000 吉林大学第一医院干部病房吉林省长春市130021

背景:诱导成骨细胞分化为骨细胞是组织工程中的研究热点,但分化过程中的调节机制尚未完全阐明。MicroR NA是一类内源性小RNA分子,可通过与靶基因mR NA的3’端非编码区结合在转录后水平调控基因表达。研究证实,microR NA在骨细胞分化过... 详细信息

背景:诱导成骨细胞分化为骨细胞是组织工程中的研究热点,但分化过程中的调节机制尚未完全阐明。MicroR NA是一类内源性小RNA分子,可通过与靶基因mR NA的3’端非编码区结合在转录后水平调控基因表达。研究证实,microR NA在骨细胞分化过程中起到重要的调节作用。目的:研究mi R-155对成骨细胞骨分化的调节作用以及作用机制。方法:取小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞,加入小鼠骨形态发生蛋白2(200μg/L)进行成骨诱导,并与诱导第1,3,7,14天,通过qR T-PCR检测mi R-155 m RNA的表达。并将MC3T3-E1细胞分为对照组、诱导组、miR-155组和mi R-155 inhibitor组,对照组用α-MEM培养基培养,诱导组在培养基中加入骨形态发生蛋白2进行成骨诱导,mi R-155组和miR-155 inhibitor组在成骨诱导之前分别转染miR-155和mi R-155拮抗剂,诱导2周。结果与结论:(1)茜素红染色及碱性磷酸酶活性测定:经骨形态发生蛋白2诱导后,mi R-155 mR NA表达呈时间依赖性下调。诱导组MC3T3-E1细胞茜素红着色强度、碱性磷酸酶活性和mR NA表达也显著高于对照组(P<0.01);mi R-155组茜素红着色强度明显低于诱导组,碱性磷酸酶活性和mR NA也明显低于对照组(P<0.01),而mi R-155 inhibitor组则呈反向变化(P<0.05);(2)荧光报告基因检测和western blot检测:miR-155可与SMAD5 mR NA 3’非编码区结合,并明显降低MC3T3-E1细胞中SMAD5蛋白和mR NA表达(P<0.01)。结果表明,mi R-155可通过负性调控SMAD5表达,抑制MC3T3-E1细胞的成骨分化。

关键词：组织工程碱性磷酸酶骨形态发生蛋白质类组织构建骨细胞成骨细胞 microRNA 分化小鼠 SMAD5 细胞 qRT-PCR mRNA 国家自然科学基金

脂必泰胶囊对高脂血症合并颈动脉斑块病人肠道菌群的影响

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中西医结合心脑血管病杂志 2024年第15期22卷 2861-2864页

作者：付希佳左效衢王凤志辽宁省人民医院沈阳110067

目的:观察脂必泰胶囊对高脂血症合并颈动脉粥样硬化病人肠道菌群的影响。方法:选取2022年8月—2023年3月辽宁省人民医院门诊及病房收治的80例高脂血症合并颈动脉粥样斑块病人,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组40例。对照组给予... 详细信息

目的:观察脂必泰胶囊对高脂血症合并颈动脉粥样硬化病人肠道菌群的影响。方法:选取2022年8月—2023年3月辽宁省人民医院门诊及病房收治的80例高脂血症合并颈动脉粥样斑块病人,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组40例。对照组给予阿托伐他汀钙片治疗,观察组给予脂必泰胶囊治疗,两组均治疗6个月。比较两组治疗前后血脂[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]、白介素6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平变化;比较两组颈动脉内-中膜厚度(IMT)、颈动脉斑块面积大小;同时检测两组病人粪便中肠道菌群的变化。结果:治疗后,两组TC、TG、LDL-C、hs-CRP、IL-6水平均较治疗前下降,HDL-C较治疗前升高,颈动脉IMT、颈动脉斑块面积较治疗前缩小,差异均有统计学意义(P0.05);而观察组治疗后乳酸菌属数量、双歧杆菌属数量较治疗前增加(P<0.05),拟杆菌门和厚壁菌门比值较治疗前增大(P<0.05)。结论:脂必泰胶囊具有降脂、抗氧化、抗炎等多重作用,能有效改善血脂代谢。此外,脂必泰胶囊可能通过增加肠道有益菌的数量,使特定菌属或菌种的相对丰度发生改变,对抗氧化应激反应,抑制血管内膜增厚。

关键词：高脂血症颈动脉粥样硬化脂必泰胶囊肠道菌群颈动脉斑块

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双侧颈内动脉缺如并发动脉瘤1例报告

中风与神经疾病杂志 2015年第6期32卷 560-560页

作者：付希佳宋磊王乙涵董杉杉刘群吉林大学白求恩第一医院神经内科吉林长春130021 吉林大学白求恩第一医院呼吸内科吉林长春130021

颈内动脉（ICA）缺如是一种先天性血管发育异常,由Tode于1787年首次报道,其发病率不足0.01%[1,2]。多数情况下这种颈内动脉缺如以单侧为主,双侧同时缺如的病例极为少见,目前已报道的患者不足30例。本文报道1例以蛛网膜下腔出血（SAH）... 详细信息

颈内动脉（ICA）缺如是一种先天性血管发育异常,由Tode于1787年首次报道,其发病率不足0.01%[1,2]。多数情况下这种颈内动脉缺如以单侧为主,双侧同时缺如的病例极为少见,目前已报道的患者不足30例。本文报道1例以蛛网膜下腔出血（SAH）就诊的61岁女患,三维计算机断层血管造影（3D-CTA）示双侧ICA缺如及2个位于异常Willis环的动脉瘤。1临床资料患者,女性,61岁,因剧烈头痛入院。入院途中呕吐两次,短暂性意识丧失数分钟。入院后患者神清合作。

关键词：颈内动脉缺如动脉瘤破裂血管发育异常短暂性意识丧失蛛网膜下腔出血 Willis 剧烈头痛临床资料大脑前动脉

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我国家庭电视图书馆现状及发展策略研究

图书馆学研究 2014年第16期 36-41页

作者：付希金田丽君张小男倪煜佳东北师范大学图书馆东北师范大学档案馆

家庭电视图书馆是一种便捷、亲民的数字图书馆服务形式,是公共文化服务体系建设的重要组成部分,对于满足居民文化教育需求具有重要意义。家庭电视图书馆建设模式分为两种:独立建设模式和联合建设模式,其中,联合建设模式兼顾公共图书馆... 详细信息

家庭电视图书馆是一种便捷、亲民的数字图书馆服务形式,是公共文化服务体系建设的重要组成部分,对于满足居民文化教育需求具有重要意义。家庭电视图书馆建设模式分为两种:独立建设模式和联合建设模式,其中,联合建设模式兼顾公共图书馆的资源、服务优势和传媒公司的网络优势。我国各省区文化主管部门应做好顶层设计,由省级公共图书馆或图书馆联盟牵头,通过建立试点,逐步建设城乡一体化的家庭电视图书馆服务平台。

关键词：家庭电视图书馆公共文化服务体系电视服务数字电视

事件相关电位在脑梗死伴2型糖尿病认知障碍治疗中的应用

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中国临床康复 2005年第5期9卷 20-21页

作者：付希久沈阳医学院附属中心医院神经内科辽宁省沈阳市110024

目的:探讨事件相关电位(event-relatedpotentials,ERPs)用于脑梗死伴2型糖尿病认知障碍的药物疗效评价。方法:将沈阳医学院附属中心医院1996-05/2003-06收治的42例有认知障碍的脑梗死伴2型糖尿病患者随机分为对照组和干预组各21例,对照... 详细信息

目的:探讨事件相关电位(event-relatedpotentials,ERPs)用于脑梗死伴2型糖尿病认知障碍的药物疗效评价。方法:将沈阳医学院附属中心医院1996-05/2003-06收治的42例有认知障碍的脑梗死伴2型糖尿病患者随机分为对照组和干预组各21例,对照组应用吡拉西担治疗,干预组应用尼莫地平治疗,治疗前后分别作ERPs检查。结果:两组治疗前ERPs波群的异常主要表现为N2及P3潜伏期显著延长,P3波幅降低,波形分化不良,治疗前组间比较差异无显著性意义(P>0.05)。对照组治疗后P3潜伏期平均缩短19ms,干预组治疗后P3潜伏期平均缩短34ms,治疗后两组间比较差异有显著性意义(P佳,Ps波幅有所提高。结论:ERPs能较客观地评价脑梗死伴2型糖尿病认知障碍的药物疗效。

关键词：脑梗塞糖尿病,非胰岛素依赖型事件相关电位,P300 尼莫地平认知障碍

脑梗死并糖尿病认知障碍患者脑脊液中tau蛋白和淀粉样β蛋白42水平的测定

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中国临床康复 2005年第9期9卷 92-94页

作者：付希久沈阳医学院附属中心医院神经内科辽宁省沈阳市110024

目的:探讨脑梗死并2型糖尿病认知障碍患者脑脊液中tau蛋白和淀粉样β蛋白42(Aβ42)水平测定的意义,以及2型糖尿病对脑梗死认知障碍患者脑脊液中tau蛋白和Aβ42水平的影响。方法:所有病例为1996-05/2003-06沈阳医学院附属中心医院收治患... 详细信息

目的:探讨脑梗死并2型糖尿病认知障碍患者脑脊液中tau蛋白和淀粉样β蛋白42(Aβ42)水平测定的意义,以及2型糖尿病对脑梗死认知障碍患者脑脊液中tau蛋白和Aβ42水平的影响。方法:所有病例为1996-05/2003-06沈阳医学院附属中心医院收治患者,病例组为入选的脑梗死并2型糖尿病组认知障碍患者21例,对照组1为脑梗死并糖尿病无认知障碍组21例,对照组2为脑梗死认知障碍无糖尿病患者21例。认知功能测定选用韦氏成人记忆量表(WMS)。用酶联免疫吸附法(ELISA)对各组患者的脑脊液中tau蛋白和Aβ42水平进行检测。结果:病例组脑脊液中tau蛋白水平明显升高,为(532.59±323.15)ng/L,Aβ42水平明显下降,为(289.00±70.91)ng/L,与对照组1犤(200.59±147.63),(493.80±83.29)ng/L犦和对照组2犤(312.11±289.56),(409.33±76.35)ng/L犦比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:检测脑脊液中tau蛋白,Aβ42水平有助于脑梗死并糖尿病认知障碍临床诊断,而且2型糖尿病进一步促进脑梗死认知障碍患者脑脊液中tau蛋白进一步释放,Aβ42水平进一步下降。

关键词：脑梗塞糖尿病认知障碍 tau蛋白质类淀粉样β蛋白

无乳链球菌cpsE基因的克隆、原核表达和多克隆抗体制备及其在原位PCR中的应用

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无乳链球菌cpsE基因的克隆、原核表达和多克隆抗体制备及其在原位...

作者：付希四川农业大学

学位级别：硕士

本研究以收集自海南文昌市多个养殖场感染无乳链球菌病的罗非鱼为研究对象,应用分子生物学手段研究了致病菌功能基因cpsE的分子特性、原核表达及其在间接原位PCR检测方法方面的应用,旨在为进一步开展无乳链球菌cpsE基因的功能等研究提... 详细信息

本研究以收集自海南文昌市多个养殖场感染无乳链球菌病的罗非鱼为研究对象,应用分子生物学手段研究了致病菌功能基因cpsE的分子特性、原核表达及其在间接原位PCR检测方法方面的应用,旨在为进一步开展无乳链球菌cpsE基因的功能等研究提供全面的基础实验数据,并为以无乳链球菌功能基因重组蛋白为主要抗原成分的新型渔用疫苗的研发奠定理论基础。 1.无乳链球菌cpsE基因的分子特性分析利用生物信息学软件对cpsE扩增序列进行分子特性分析。结果显示,无乳链球菌分离株cpsE基因推导氨基酸序列具有高度保守性,与人源、动物源无乳链球菌相似性达100%;序列中Lys和Val含量最高,分别为10.7%和10.1%;推导序列第56和第142个氨基酸残基之间含有1个糖基转移酶超家族的保守结构域,具有与蛋白翻译后修饰功能相关的磷酸化位点3个,编码多肽链中亲水区大于疏水区,含有跨膜区,无信号肽序列;二级结构中,α-螺旋占的比例最大,达40.94%,其次为β-折叠25.50%,p-转角5.37%和无规则卷曲28.19%。密码子偏爱性分析结果显示,无乳链球菌cpsE基因偏爱GCA等23个密码子,与大肠杆菌、酵母和人的密码子使用偏爱性差异较大的分别有20、18和24个;稀有密码子分析显示,cpsE基因开放阅读框的密码子利用情况与大肠杆菌无明显差异。 2.无乳链球菌cpsE基因的原核表达和多克隆抗体的制备构建重组表达质粒pET-32a（+）-cpsE,并转入大肠杆菌BL21（DE3）进行原核表达,再利用SDS-PAGE. Western-blot及琼脂扩散试验对重组蛋白的免疫原性进行研究。结果显示,使用IPTG为表达诱导剂,在菌体经超声波破碎处理的沉淀成分中可检测到一种大小约36KDa的蛋白,与cpsE基因表达产物的预期大小相吻合。对表达条件进行优化后显示,最佳表达条件为0.2mM的IPTG在37℃下诱导3h。利用重组表达蛋白所带的6×His标签使用亲和层析的方法对其进行纯化,能获取较高纯度的重组蛋白。将过柱纯化的重组蛋白免疫家兔,制备了兔的高免血清。经VVestern-blot和琼脂扩散试验检测结果表示,CpsE重组蛋白具有良好的免疫原性,制备的兔抗CpsE重组蛋白多克隆抗体的免疫效价达1：32。 3.基于cpsE基因的间接原位PCR方法的建立与应用通过腹腔注射无乳链球菌分离株活菌液、无乳链球菌标准菌株活菌液和生理盐水的方式,制备小鼠人工感染阳性对照样品、待检样品和阴性对照样品。以无乳链球菌cpsE基因为模板设计特异性引物和寡核苷酸探针,应用于已制备的阳性对照样品和阴性对照样品上进行间接原位PCR方法的构建,并以建立的间接原位PCR方法检测待检样品,研究无乳链球菌分离株在小鼠体内组织的分布规律。结果表明,人工感染4h时,在小鼠的肝脏和肾脏检测到少量的阳性信号;人工感染后8h时,在小鼠的脾脏和肺脏也开始检测到阳性信号;人工感染后12h时,在小鼠的胃和肠部位也检测到强阳性信号;人工感染后24h和36h时,在小鼠的肝脏、脾脏、肾脏、脑、肠和肺脏都可检测到大量阳性信号分布,但心肌中始终只有少量阳性信号分布。

关键词：无乳链球菌 cpsE基因克隆分子特性原核表达间接原位PCR