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2012中国器官移植大会

作者：郑凯孙良学吴卫真付云烽金中谭建明南京军区福州总医院泌尿外科全军器官移植研究所

【目的】观察人脐带间充质干细胞(uMSCs)对大鼠严重肺冲击伤的治疗作用。【方法】采用贴壁选择法分离培养人脐带来源MSCs。将80只雄性SD大鼠随机分为对照组(T0)与uMSCs治疗组(Tumsc),采用BST-1型生物激波管造成大鼠严重肺冲击伤。Tumsc...

【目的】观察人脐带间充质干细胞(uMSCs)对大鼠严重肺冲击伤的治疗作用。【方法】采用贴壁选择法分离培养人脐带来源MSCs。将80只雄性SD大鼠随机分为对照组(T0)与uMSCs治疗组(Tumsc),采用BST-1型生物激波管造成大鼠严重肺冲击伤。Tumsc组伤后1小时给予尾静脉注射含2×10MSCs的PBS1 ml,T0组仅给予PBS 1ml。留20只大鼠观察伤后24h死亡率。并于致伤后0.5h、24h、72h、1w、2w每组每次处死6只大鼠,收集动脉血与肺组织,分别行动脉血气分析、肺组织病理检查,并计算肺体指数。

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人脐带MSCs移植促进猪肢体软组织火器伤修复的实验研究

人脐带MSCs移植促进猪肢体软组织火器伤修复的实验研究

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2012中国器官移植大会

作者：郑凯金中吴卫真付云烽孙良学谭建明南京军区福州总医院泌尿外科全军器官移植研究所

【目的】观察人脐带间充质干细胞(uMSCs)对猪后肢软组织火器伤的治疗作用。【方法】采用贴壁选择法分离培养人脐带来源MSCs。将20只中国长白猪随机分为对照组(T0)与uMSCs治疗组(Tumsc),采用"五六"式弹道枪发射制式子弹(直径7.62mm,质量7...

【目的】观察人脐带间充质干细胞(uMSCs)对猪后肢软组织火器伤的治疗作用。【方法】采用贴壁选择法分离培养人脐带来源MSCs。将20只中国长白猪随机分为对照组(T0)与uMSCs治疗组(Tumsc),采用"五六"式弹道枪发射制式子弹(直径7.62mm,质量7.90g)对动物后肢进行致伤,弹着点为股中段肌肉丰满处,避开股骨干、股动静脉及坐骨神经,射击距离为5米。Tumsc组分别伤后6小时与1周于伤道周围局部注射含1×10

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年龄对人骨髓间充质干细胞分离培养的影响

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实用医学杂志 2010年第20期26卷 3694-3697页

作者：陈津马予洁黄梁浒王庆华付云烽谭建明南京军区福州总医院全军器官移植中心福建省移植生物学重点实验室福州市350025

目的:探讨年龄对骨髓间充质干细胞分离培养的影响以及在临床治疗中的意义。方法:通过分析183例人骨髓间充质干细胞分离培养情况,对比不同年龄段骨髓单个核细胞数、原代间充质干细胞数量、细胞增殖速度、细胞形态等方面的差异。结果:不... 详细信息

目的:探讨年龄对骨髓间充质干细胞分离培养的影响以及在临床治疗中的意义。方法:通过分析183例人骨髓间充质干细胞分离培养情况,对比不同年龄段骨髓单个核细胞数、原代间充质干细胞数量、细胞增殖速度、细胞形态等方面的差异。结果:不同年龄段骨髓有核细胞、间充质干细胞免疫表型没有明显差异,单个核细胞数随年龄增长逐渐减少,但没有统计学差异。不同年龄段收获原代间充质干细胞数量、细胞增殖速度有明显差异(P<0.01)。年轻组、中年组收获原代MSC细胞明显多于年老组,增殖能力明显强于年老组。结论:随着年龄的增长,骨髓中间充质干细胞的数量减少,增殖能力衰退,在干细胞临床治疗中,不适宜从老年患者中获取骨髓来源的间充质干细胞。

关键词：间充质干细胞年龄细胞培养

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频繁开关培养箱对大规模培养脐带间充质干细胞的影响

频繁开关培养箱对大规模培养脐带间充质干细胞的影响

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2012中国器官移植大会

作者：林娜陈津付云烽施小华王庆华谭建明南京军区福州总医院全军器官移植研究所福建省移植生物学重点实验室全军组织修复和器官重建重点实验室

【目的】探讨频繁开关培养箱开箱时间和开箱次数对大规模培养脐带间充质干细胞的影响。【方法】取新鲜足月产新生儿脐带,在37℃、5%CO培养条件下分离培养至P3代,取P3代脐带间充质干细胞,以2×10/75cm的密度接种,并且分成7组,每组6瓶细胞...

【目的】探讨频繁开关培养箱开箱时间和开箱次数对大规模培养脐带间充质干细胞的影响。【方法】取新鲜足月产新生儿脐带,在37℃、5%CO培养条件下分离培养至P3代,取P3代脐带间充质干细胞,以2×10/75cm的密度接种,并且分成7组,每组6瓶细胞,置于7个37℃,5%CO的培养箱中培养,对照组培养过程中不开关培养箱,其它6组分别模拟培养操作中不同的开关培养箱次数(每天5次、10次),以及每次不同的开箱时间

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大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养纯化及生物学特性的鉴定

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医学临床研究 2009年第3期26卷 386-389页

作者：卓文利付云烽徐廷昭吴卫真杨顺良谭建明南京军区福州总医院泌尿外科福建福州350025

【目的】探讨大鼠骨髓间充质干细胞（rat bonemarrow—derived mesenchymal stem cells，rBMSCs）体外分离、培养和纯化方法，鉴定其生物学特性，为BMSCs应用奠定技术基础。【方法】采用密度梯度离心法结合贴壁分离法分离培养纯化SD大鼠... 详细信息

【目的】探讨大鼠骨髓间充质干细胞（rat bonemarrow—derived mesenchymal stem cells，rBMSCs）体外分离、培养和纯化方法，鉴定其生物学特性，为BMSCs应用奠定技术基础。【方法】采用密度梯度离心法结合贴壁分离法分离培养纯化SD大鼠BMSCs，观察其形态，测定细胞生长曲线，流式细胞仪检测细胞表面标记，成骨诱导试剂盒检测rBMSCs向成骨细胞分化的潜能。【结果】显微镜下rBMSCs呈梭形、多角形成纤维细胞样形态，大小均一，漩涡状生长。生长曲线分析rBMSCs贴壁2d基本无增殖，处于潜伏期，对数增殖期为3～7d，d8后进入平台期，细胞出现接触抑制现象。rBMSCs表面标志显示第3代rBMSCs纯度可达97％以上，CD44、CD90呈阳性表达，CD34呈阴性表达；向成骨诱导rBMSCs10d后细胞表现成骨细胞特性，碱性磷酸酶活性明显升高。【结论】本实验建立了一种理想的体外分离扩增纯化rBMSCs的培齐体系。实验结果表明所分离培养的rBMSCs纯度高、生物学特征稳定，适用于对BMSCs进一步的应用研究。

关键词：干细胞骨髓细胞/细胞学大鼠

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环孢素A引起C57/BL6小鼠肾组织内质网应激反应的实验研究

环孢素A引起C57/BL6小鼠肾组织内质网应激反应的实验研究

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2012中国器官移植大会

作者：施小华黄梁浒付云烽周浩陈津马予洁郑丰谭建明南京军区福州总医院全军器官移植研究所福建省移植生物学重点实验室全军组织修复和器官重建重点实验室

内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)参与了炎症、药物中毒等许多生理病理过程,作为临床广泛使用的免疫抑制剂——环孢素A(cyclosporine A,CsA)不仅使移植肾的1年存活率得到明显提高,而且长期使用也带来肾毒性等毒副作用。本...

内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)参与了炎症、药物中毒等许多生理病理过程,作为临床广泛使用的免疫抑制剂——环孢素A(cyclosporine A,CsA)不仅使移植肾的1年存活率得到明显提高,而且长期使用也带来肾毒性等毒副作用。本课题拟以C57/BL6小鼠作为实验对象,观察CsA与ERS间相互关系,探索CsA引起ERS的主要信号通路及其初步分子机制。共取72只雄性C57/BL6小鼠(12周龄),分3组,每组24只。其中组1和组2分别应用50 mg、

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骨髓间充质干细胞对移植肾缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

骨髓间充质干细胞对移植肾缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

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2012中国器官移植大会

作者：卓文利徐廷昭吴卫真杨顺良付云烽陈津谭建明南京军区福州总医院泌尿外科全军器官移植研究所

【目的】建立移植肾缺血再灌注损伤模型,观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)对移植肾缺血再灌注损伤修复的保护作用,探讨其保护作用机制,为移植肾缺血再灌注损伤治疗提供新的思路。【方法】①采用密度梯度离心法结合贴壁分离法分离培养纯化SD...

【目的】建立移植肾缺血再灌注损伤模型,观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)对移植肾缺血再灌注损伤修复的保护作用,探讨其保护作用机制,为移植肾缺血再灌注损伤治疗提供新的思路。【方法】①采用密度梯度离心法结合贴壁分离法分离培养纯化SD大鼠BMSCs,观察其形态,流式细胞仪检测细胞表面标记,检测BMSCs向成骨和成脂细胞分化的潜能。②成年雌性SD大鼠28只,随机分组,正常对照组(control group,

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不同配比消化液对人脐带间充质基质细胞的活性影响实验研究

不同配比消化液对人脐带间充质基质细胞的活性影响实验研究

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2012中国器官移植大会

作者：付云烽陈津林娜赵红州施小华马予洁黄梁浒谭建明南京军区福州总医院全军器官移植研究所福建省移植生物学重点实验室全军组织修复和器官重建重点实验室

【背景】间充质基质细胞(Mesenchymal Stromal Cells,MSCs)体外培养传代过程中,许多因素会影响该细胞的生物学特性,其中消化液是一个容易被忽视的环节之一。按照国家细胞体外治疗的相关要求,应用于临床实验研究的MSCs需要在无动物源性...

【背景】间充质基质细胞(Mesenchymal Stromal Cells,MSCs)体外培养传代过程中,许多因素会影响该细胞的生物学特性,其中消化液是一个容易被忽视的环节之一。按照国家细胞体外治疗的相关要求,应用于临床实验研究的MSCs需要在无动物源性血清或无血清培养体系中进行培养,这使得用于MSCs消化传代的商品化消化液(0.25%胰酶+0.02%乙二胺四乙酸(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid,EDTA))已不适合MSCs传代消化要求,需摸索出胰酶与EDTA的最佳配比浓度及其最佳作用时间。

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低剂量免疫抑制剂诱导人脐带间充质干细胞自噬并促进CXCR4的分泌

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中华器官移植杂志 2017年第1期38卷 39-44页

作者：雷艳赵红州李荣春付云烽施小华林娜陈津詹世淮谭建明黄梁浒福州总医院福建省移植生物学重点实验室 350025

目的分析低剂量免疫抑制剂诱导人脐带间充质干细胞（hUC-MSC）产生自噬,并对趋化因子受体CXCR4分泌的影响.方法低剂量的免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司分别处理MSC后,流式细胞术检测hUC-MSC细胞表面标志物变化,WST-1法检测hUC-MSC细胞... 详细信息

目的分析低剂量免疫抑制剂诱导人脐带间充质干细胞（hUC-MSC）产生自噬,并对趋化因子受体CXCR4分泌的影响.方法低剂量的免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司分别处理MSC后,流式细胞术检测hUC-MSC细胞表面标志物变化,WST-1法检测hUC-MSC细胞增殖的影响;并通过qRT-实时聚合酶链反应（PCR）检测自噬基因LC3B、Atg5、Beclin1 mRNA水平的变化,及Western blot检测他克莫司和西罗莫司诱导的自噬相关蛋白LC3B、Atg5、Beclin1和p-ULK1的表达;同时流式细胞术也分析了在hUC-MSC产生细胞自噬的状态下趋化因子受体CXCR4的分泌.结果低剂量的免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司并不引起hUC-MSC细胞表面标志物分子的表达明显改变,且低剂量的他克莫司对hUC-MSC完全没有细胞毒性作用,而西罗莫司对hUC-MSC的细胞增殖有一定的抑制作用,24 h和48 h的存活率分别为73.66％或68.81％,P＜O.05具有统计学意义.他克莫司和西罗莫司都能通过抑制PI3K/AKt/mTOR信号通路激活hUC-MSC自噬,自噬相关蛋白LC3B、Atg5和Beclin1表达显著上调,并诱导CXCR4分泌上调.结论低剂量免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司能诱导人脐带间充质干细胞hUC-MSC产生自噬并促进CXCR4的分泌.

关键词：他克莫司西罗莫司间充质干细胞细胞自噬 CXCR4

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链脲佐菌素致ICR和C57/BL6小鼠I型糖尿病模型的比较

链脲佐菌素致ICR和C57/BL6小鼠I型糖尿病模型的比较

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2012中国器官移植大会

作者：李荣春黄梁浒陈宗峰朱贤鑫凌志杰付云烽郑丰谭建明南京军区福州总医院全军器官移植研究所福建省移植生物学重点实验室全军组织修复和器官重建重点实验室

实验性糖尿病动物模型是研究糖尿病的重要基础之一,应用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)选择性破坏实验动物(大鼠、小鼠等)胰岛β细胞使其血糖升高,形成Ⅰ型糖尿病模型,是一种应用较为广泛、简便的造模方法,大多研究显示,应用STZ腹腔注...

实验性糖尿病动物模型是研究糖尿病的重要基础之一,应用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)选择性破坏实验动物(大鼠、小鼠等)胰岛β细胞使其血糖升高,形成Ⅰ型糖尿病模型,是一种应用较为广泛、简便的造模方法,大多研究显示,应用STZ腹腔注射不同品系小鼠并未发现耐受性的不同。本研究小组应用STZ,对2种常见实验小鼠(ICR、C57/BL6,均为雌性,3月龄),低剂量(40 mg/kg.bw)、多次腹腔注射后发现,ICR小鼠比C57/BL6小鼠更容易出现高血糖,其STZ注射次数为6.7±1.0;C57/BL6小鼠的STZ注射次数达11.9±1.1,几乎为ICR小鼠的2倍。造模成功

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