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过表达miRNA-424-5p靶向AKT3对奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡的影响

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中国畜牧兽医 2024年第8期51卷 3635-3642页

作者：姚伟佳罗春海刘佳金王薇李丹阳刘炳琦付世新黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319

[目的]本试验通过过表达miRNA-424-5p,明确miRNA-424-5p与其靶基因丝氨酸/苏氨酸激酶3(AKT serine/threonine kinase 3,AKT3)对奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡影响的机制,为阐明miRNA-424-5p在奶牛胎盘分离过程中的作用机制提供试验基础和理... 详细信息

[目的]本试验通过过表达miRNA-424-5p,明确miRNA-424-5p与其靶基因丝氨酸/苏氨酸激酶3(AKT serine/threonine kinase 3,AKT3)对奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡影响的机制,为阐明miRNA-424-5p在奶牛胎盘分离过程中的作用机制提供试验基础和理论依据。[方法]试验分为3组:空白对照组(Control)、阴性对照组(miRNA-424-5p mimics NC)和过表达组(miRNA-424-5p mimics)。采用茎环法实时荧光定量PCR检测转染miRNA-424-5p mimics后奶牛子宫内膜上皮细胞miRNA-424-5p的表达变化;采用Western blotting及实时荧光定量PCR检测过表达后AKT3和凋亡相关因子的表达变化,采用Annexin V-FITC/PI法检测奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡情况。[结果]与空白对照及阴性对照组相比,转染miRNA-424-5p mimics后子宫内膜上皮细胞miRNA-424-5p mRNA的表达量极显著升高(P<0.01),B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Caspase3)和Caspase9的mRNA表达量极显著升高(P<0.01),AKT3和Bcl-2的mRNA表达量极显著降低(P<0.01);Bax和Caspase3蛋白表达量极显著升高(P<0.01),Caspase9蛋白表达量显著升高(P<0.05),AKT3和Bcl-2蛋白表达量极显著降低(P<0.01);细胞凋亡率极显著升高(P<0.01)。[结论]过表达miRNA-424-5p可通过靶向调控AKT3使奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡因子Bax、Caspase3和Caspase9的表达量增加,使Bcl-2的表达量降低,进而促进细胞凋亡。

关键词：奶牛 miRNA-424-5p AKT3 子宫内膜上皮细胞凋亡

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母猫子宫蓄脓继发急性肾衰竭的诊治

中国兽医杂志 2022年第4期58卷 115-117页

作者：罗春海李冉王哲郝丹丹周鑫付世新黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163316

子宫蓄脓是宠物临床危害性比较严重的常见疾病,多是由于体内激素代谢紊乱、微生物感染等因素所引发,引起子宫内膜增生、炎症,后期导致子宫内大量蓄脓[1]。按子宫颈开放与否可分为闭锁型和开放型2种类型。闭锁型是脓汁液体在子宫内蓄积,... 详细信息

子宫蓄脓是宠物临床危害性比较严重的常见疾病,多是由于体内激素代谢紊乱、微生物感染等因素所引发,引起子宫内膜增生、炎症,后期导致子宫内大量蓄脓[1]。按子宫颈开放与否可分为闭锁型和开放型2种类型。闭锁型是脓汁液体在子宫内蓄积,没有脓汁液体外漏,不易被发现;开放型有脓汁液体外漏,容易被发现[2]。母犬的子宫蓄脓疾病发病率较高,临床症状较多,宠物医生对该病的诊断率较高,很少出现漏诊。但猫子宫蓄脓较为罕见,尤其是猫子宫蓄脓继发急性肾衰竭在临床上更为罕见,又因母猫患子宫蓄脓时,临床症状表现较少,诊断较为困难,容易出现漏诊和误诊,准确的诊断对有效治疗该病尤为重要。本文主要对1例母猫子宫蓄脓继发急性肾衰竭病例进行临床检查及病因分析,总结归纳该病的诊断治疗关键环节,为今后其他类似病例的诊断与治疗提供参考。

关键词：子宫蓄脓急性肾衰竭母犬闭锁型临床症状病因分析疾病发病率微生物感染

ROS对PA诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡的影响

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中国兽医学报 2023年第9期43卷 1918-1923页

作者：曹一鸣温小庆付世新黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

为了探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)在棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡中的作用,本试验采用体外培养奶牛子宫内膜上皮细胞,分别添加不同浓度的PA(0,0.2,0.4,0.6mmol/L)刺激奶牛子宫内膜上皮细胞12h,... 详细信息

为了探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)在棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡中的作用,本试验采用体外培养奶牛子宫内膜上皮细胞,分别添加不同浓度的PA(0,0.2,0.4,0.6mmol/L)刺激奶牛子宫内膜上皮细胞12h,运用流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞内ROS含量。添加ROS清除剂NAC及0.6mmol/L的PA将试验分为对照组、PA组、NAC+PA组和NAC组,检测氧化和抗氧化指标、ROS含量及凋亡率。结果显示,随着PA浓度增加细胞内ROS含量及凋亡率都会增加,最佳添加浓度及时间为0.6mmol/L、12h。与对照组相比,PA组SOD和GSH的活性极显著降低,MDA的含量极显著增加。与PA组相比添加NAC预孵育后能极显著缓解PA造成的SOD和GSH的活性降低,并能极显著缓解MDA含量的增加。与对照组相比,PA组ROS含量及上皮细胞凋亡率显著升高,而添加NAC预孵育后能够极显著降低PA引起的ROS含量及上皮细胞凋亡率。结果表明,PA能够造成奶牛子宫内膜上皮细胞发生氧化应激(oxidative stress,OS)并导致细胞凋亡,ROS在PA导致的奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡中发挥着重要作用。

关键词：活性氧氧化应激棕榈酸细胞凋亡

以眼部病变为首发表现的2型糖尿病56例分析

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临床荟萃 2007年第4期22卷 256-257页

作者：付世新邢台市眼科医院内科河北邢台054001

部分糖尿病患者以眼部病变为首发表现,首诊于眼科,因未出现多食、多饮、多尿、消瘦('三多一少')的典型临床表现,易导致误诊和漏诊,有的甚至造成严重后果.我院2000年1月至2005年3月共收治56例以眼部病变为首发表现的糖尿病患者,现分析报... 详细信息

部分糖尿病患者以眼部病变为首发表现,首诊于眼科,因未出现多食、多饮、多尿、消瘦('三多一少')的典型临床表现,易导致误诊和漏诊,有的甚至造成严重后果.我院2000年1月至2005年3月共收治56例以眼部病变为首发表现的糖尿病患者,现分析报道如下.

关键词：糖尿病 2型眼表现误诊

竞争RT-PCR方法检测Ctr1基因mRNA变化的内参构建

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中国兽医科技 2003年第8期33卷 39-41页

作者：付世新王玮王哲中国人民解放军军需大学军事兽医系黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江密山158308

构建定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)的内参标准 ,用以检测铜代谢过程中Ctr1基因mRNA表达的变化情况。采用双引物 ,经 2次克隆将 4 0 0bp左右的外源基因片段插入到 5 30bp目的片段的单酶切位点中 ,构建成突变型DNA阳性竞争重组质粒... 详细信息

构建定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)的内参标准 ,用以检测铜代谢过程中Ctr1基因mRNA表达的变化情况。采用双引物 ,经 2次克隆将 4 0 0bp左右的外源基因片段插入到 5 30bp目的片段的单酶切位点中 ,构建成突变型DNA阳性竞争重组质粒。结果 ,成功构建了 930bp左右的竞争模板重组质粒。

关键词：铜代谢 Ctrl基因 mRNA表达定量逆转录-聚合酶链反应 RT—PCR 竞争重组质粒

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番茄红素缓解酮病奶牛氧化应激的作用

中国兽医学报 2022年第7期42卷 1476-1480页

作者：罗胜缤姜春晖唐燕徐闯孙旭东付世新黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

利用血酮仪选取40头临床型酮病奶牛作为试验组,一共分成4组。Ⅰ组为酮病对照组,Ⅱ组为饲喂番茄红素低剂量组(0.6 g/d),Ⅲ组为饲喂番茄红素中剂量组(1.2 g/d),Ⅳ组为饲喂番茄红素高剂量组(2.4 g/d),每组10头奶牛灌服7 d,另选取10头饲养... 详细信息

利用血酮仪选取40头临床型酮病奶牛作为试验组,一共分成4组。Ⅰ组为酮病对照组,Ⅱ组为饲喂番茄红素低剂量组(0.6 g/d),Ⅲ组为饲喂番茄红素中剂量组(1.2 g/d),Ⅳ组为饲喂番茄红素高剂量组(2.4 g/d),每组10头奶牛灌服7 d,另选取10头饲养条件相同的奶牛作为健康对照组。用试剂盒对各组奶牛血清中的氧化应激、肝功能以及能量代谢指标进行检测。结果显示,与酮病对照组相比,番茄红素低、中、高剂量组中,T-AOC、GSH-Px、CAT和SOD活性显著增长,MDA含量显著减少;GLU含量显著升高,而BHBA、BUN、ALP、ALT、AST、DBil含量显著降低。结果表明,番茄红素可以缓解酮病奶牛的氧化应激、能量负平衡以及肝脏损伤,为缓解奶牛酮病提供一条新的思路。

关键词：番茄红素氧化应激能量负平衡奶牛

胰岛素强化治疗对原发性开角型青光眼合并2型糖尿病患者视野的保护作用研究

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中国全科医学 2010年第36期13卷 4063-4065页

作者：付世新河北省邢台市眼科医院内科 054001

目的观察胰岛素强化降糖对原发性开角型青光眼(POAG)合并2型糖尿病(T2DM)患者视野的保护作用。方法将66例眼压控制稳定的伴T2DM的POAG患者随机分为胰岛素强化治疗组(观察组,33例,46眼)和常规治疗组(对照组,33例,50眼)。观察组给予胰岛... 详细信息

目的观察胰岛素强化降糖对原发性开角型青光眼(POAG)合并2型糖尿病(T2DM)患者视野的保护作用。方法将66例眼压控制稳定的伴T2DM的POAG患者随机分为胰岛素强化治疗组(观察组,33例,46眼)和常规治疗组(对照组,33例,50眼)。观察组给予胰岛素强化治疗,对照组给予口服降糖药治疗,均治疗12周。观察治疗前后两组患者空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)及视野的变化。结果 (1)治疗前观察组及对照组患者的FBG〔分别为(8.0±2.2)mmol/L、(8.1±2.8)mmol/L〕、HbA1c〔分别为(7.6±1.2)%、(7.7±1.2)%〕、视野平均缺损(MD)〔分别为(12.0±7.1)dB、(11.8±6.2)dB〕、平均光敏感度(MS)〔分别为(15.1±7.5)dB、(15.2±8.1)dB〕比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)治疗后观察组FBG〔(6.1±1.8)mmol/L〕、HbA1c〔(6.3±0.6)%〕、MD〔(10.5±6.2)dB〕均较对照组〔分别为(7.4±1.6)mmol/L、(7.1±1.3)%、(12.0±7.2)dB〕显著降低,MS〔(17.1±6.1)dB〕较对照组〔(14.8±7.9)dB〕显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论胰岛素强化降糖可改善POAG合并T2DM患者的视野损害,保护视功能。

关键词：青光眼,开角型糖尿病,2型视野胰岛素强化治疗

IL-6、FGF21和ANGPTL8与能量负平衡奶牛卵巢静止的关系

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中国兽医杂志 2023年第1期59卷 36-42页

作者：于航程佳鑫张锋宋玉锡白云龙夏成付世新黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

为了确定组织细胞因子在奶牛产后能量负平衡(NEB)诱导的卵巢静止(IO)发生中的作用。本试验根据产后21 d血浆β-羟丁酸(BHBA)和葡萄糖(Glu)的水平,从100头奶牛中选取能量正平衡(PEB)组和NEB组各30头。随后,根据产后50~60 d是否发情及卵... 详细信息

为了确定组织细胞因子在奶牛产后能量负平衡(NEB)诱导的卵巢静止(IO)发生中的作用。本试验根据产后21 d血浆β-羟丁酸(BHBA)和葡萄糖(Glu)的水平,从100头奶牛中选取能量正平衡(PEB)组和NEB组各30头。随后,根据产后50~60 d是否发情及卵泡发育状况,选取NEB组中IO奶牛(NEB-IO)和PEB组中发情奶牛(PEB-E)各6头进行采样。利用生化和ELISA方法分别检测血浆中代谢指标和细胞因子的水平;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和ELISA方法检测组织中细胞因子的水平。结果显示:与PEB组奶牛相比,NEB组奶牛产后21 d血浆中白细胞介素6(IL-6)极显著升高(P0.05)。结果表明,奶牛产后NEB可通过调节细胞因子的变化在奶牛IO发生中发挥作用。

关键词：能量负平衡卵巢静止细胞因子

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铜离子转运蛋白及分子伴侣蛋白的研究进展

黑龙江畜牧兽医 2010年第4期 43-44页

作者：付世新张丽罗春海黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

铜是动物体生长发育所必需的微量元素之一,在生物体内发挥着重要的作用。铜离子转运蛋白是铜离子吸收和利用的重要纽带。文章对铜离子转运蛋白及铜离子伴侣蛋白的分类在机体内的生物学作用进行了综述。

关键词：铜转运铜离子转运蛋白调控