检索结果-南通市图书馆

作者：于花山西医科大学

学位级别：硕士

目的在不添加饲养层细胞的条件下对新西兰兔(New-Zealand Rabbit)角膜缘干细胞进行培养,观察胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)浓度和种植密度对其生物学特性的影响,确定角膜缘干细胞培养适宜的血清浓度和种植密度,据此建立兔角膜缘干... 详细信息

目的在不添加饲养层细胞的条件下对新西兰兔(New-Zealand Rabbit)角膜缘干细胞进行培养,观察胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)浓度和种植密度对其生物学特性的影响,确定角膜缘干细胞培养适宜的血清浓度和种植密度,据此建立兔角膜缘干细胞体外无饲养层培养体系,为构建组织工程化角膜及角膜基础研究积累实验资料。方法(1)先用DispaseⅡ酶将新西兰兔角膜缘组织消化成单个细胞,再用含5%,10%和20%胎牛血清的培养液制成等密度的细胞悬液,不添加饲养层细胞,直接种植于底物,观察原代培养时不同血清浓度下角膜缘干细胞的生长状况、检测48h贴壁率;MTT法检测其增殖活性;原代培养第5d行p63和角蛋白K3免疫荧光染色分别检测角膜缘干细胞和分化细胞含量。(2)第2代细胞以2.5×10～4个细胞/ml和5×10～4个细胞/ml两种密度种植,观察细胞生长情况并于第1d、第3d和第5d行p63和角蛋白K3免疫荧光染色检测角膜缘干细胞含量及其原始细胞特性的维持状况。结果(1)在不添加饲养层细胞的培养条件下,5%FBS组48h小时贴壁率最低,与10%FBS组和20%FBS组比较差异均具有统计学意义(P＜0.001),随着培养时间的延长,悬浮细胞逐渐老化死亡,且贴壁细胞不能融合形成单层;10%FBS组和20%FBS组细胞贴壁后状态良好,生长旺盛,分别于接种8.00±0.75d和7.08±0.52d形成单层,两组间贴壁率和融合时间比较差异无统计学意义(P＞0.05)。MTT生长曲线显示,5%FBS组细胞增殖速度较慢,不能形成对数增殖期。10%FBS组和20%FBS组角膜缘干细胞的对数增殖期大约在第4～7d,之后增殖缓慢,进入生长平台期。免疫荧光染色5%FBS组、10%FBS组大部分细胞p63阳性角蛋白K3阴性,相比之下20%FBS组p63阳性率较低,角蛋白K3阳性率较高,5%FBS组和10%FBS组与20%FBS组p63和角蛋白K3阳性表达率比较差异均具有统计学意义(P＜0.001)。(2)传代后以不同密度种植,低密度组p63和角蛋白K3阳性率随着培养时间的变化较小;高密度组细胞在传代第3d已接近融合,p63阳性率显著下降,角蛋白K3表达明显增多,第5d p63阳性率进一步下降,高密度组第3d和第5d p63和角蛋白K3阳性率与第1d比较差异均具有统计学意义(P＜0.001)。结论(1)采用细胞悬液法在体外无饲养层条件下可以成功分离和培养出具有高增殖能力的新西兰兔角膜缘干细胞;(2)在培养体系中加入10%胎牛血清,既可以保证原代培养的新西兰兔角膜缘干细胞有较高的贴壁率,同时又能抑制其分化;(3)在进行传代培养时,采用低密度种植更有利于角膜缘干细胞特性的维持。

关键词：干细胞角膜缘细胞培养饲养层细胞

一种快速动态电压调整的单电感双输出DC-DC变换器设计

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一种快速动态电压调整的单电感双输出DC-DC变换器设计

作者：于花东南大学

学位级别：硕士

随着手持智能设备的爆发式发展,对电子产品的集成度和处理能力提出了新的要求。SoC技术以其集成度高、处理速度快等优点,得到广泛应用。因满足SoC系统对电源芯片小体积、低重量、片外电路简单、多电压输出的要求,单电感双输出开关电源电... 详细信息

随着手持智能设备的爆发式发展,对电子产品的集成度和处理能力提出了新的要求。SoC技术以其集成度高、处理速度快等优点,得到广泛应用。因满足SoC系统对电源芯片小体积、低重量、片外电路简单、多电压输出的要求,单电感双输出开关电源电路(Single Inductor Dual Output,SIDO)得到广泛关注。同时,SoC系统为了实现低功耗,要求电源芯片能够根据系统当前的工作状态对供电电压做出及时调整,因此快速动态电压调整能力成为SIDO变换器的核心性能指标之一为了实现快速动态电压调整,本文基于Chart 0.18μm CMOS工艺设计了一种采用最大电流充电和增加电荷泄放支路方案的SIDO变换器。本文首先对SIDO变换器建立了系统模型,随后基于完整的系统模型对SIDO变换器进行了详细设计。采用自适应共模电压的架构实现一路输出电压固定、另一路输出电压可调,有效抑制了交叉干扰;主级环路采用无补偿的误差放大器,提高了瞬态响应,次级环路采用比例积分补偿,增强了环路稳定性。在电路设计的基础上,对SIDO变换器进行了版图设计和后仿真。后仿真结果表明：SIDO变换器在输出电压Vo1=1.8V、Io1=200mA,Vo2从0.9V到1.2V的切换时间为11.6μs,切换速度为38.7μs/V;Vo2从1.2V到0.9V的切换时间为17.4μs,切换速度为58μs/V;重载时输出电压纹波小于20mV,轻载时输出电压纹波小于30mV。SIDO变换器正常工作时重载转换效率大于91%,轻载转换效率大于84%,基本达到了设计指标。

关键词： SIDO变换器动态电压调整最大电流充电电荷泄放支路

细胞因子对小鼠肌细胞免疫调节相关分子表达的影响

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细胞因子对小鼠肌细胞免疫调节相关分子表达的影响

作者：于花河北医科大学

学位级别：硕士

目的:在过去的几十年,有关疫苗的研发取得了很大的成绩,如经典的疫苗开发战略:减毒活疫苗、灭活疫苗、类毒素和亚单位疫苗。尽管这些战略已在多种细菌和病毒疫苗开发方面取得了很大成功,但在许多胞内寄生病原的疫苗开发上这些途径表现... 详细信息

目的:在过去的几十年,有关疫苗的研发取得了很大的成绩,如经典的疫苗开发战略:减毒活疫苗、灭活疫苗、类毒素和亚单位疫苗。尽管这些战略已在多种细菌和病毒疫苗开发方面取得了很大成功,但在许多胞内寄生病原的疫苗开发上这些途径表现了很大的限制性。核酸疫苗的问世,以其多方面的优点如既可诱导体液免疫应答又能诱导细胞免疫应答;可编码多种抗原,从而构成多价疫苗;没有死疫苗灭活不全和活疫苗毒力恢复的风险;没有亚单位疫苗因蛋白纯化不够诱发异源性免疫应答的风险;设计简单,制备容易,花费较低;相对稳定,能耐受50℃温度,分送保存过程中不需冷冻系统等优点为疫苗的开发提供了一个新的途径。但是,经过10余年的研究,至今尚无临床可用的DNA疫苗可用于疾病的防治,重要原因在于DNA疫苗存在免疫保护作用不强的弱点。为克服DNA疫苗免疫保护差的弱点,我室和国内外众多研究者探索了多种措施包括采用不同的接种方式以提高宿主细胞的转染率;通过优化遗传密码或质粒的转录调节元件提高抗原的表达;与DNA疫苗接种同时应用编码树突状细胞特异性生长因子FLT3l、GM-CSF、MIP-1α的质粒以提高抗原提呈作用;同时应用编码IL-2、IL-12、IFN-γ等细胞因子增加T淋巴细胞的扩增以及应用不同的载体等以期提高其免疫保护作用,但均未达到预期效果。 DNA疫苗诱导机体发生免疫应答的机制尚未完全明了。一般认为,DNA疫苗接种后,树突状细胞等专职抗原提呈细胞由于自身被转染,或通过其摄取体细胞表达的抗原及死亡的抗原表达细胞,产生、处理、加工抗原,并经MHC-I类、MHC-II类及交叉抗原提呈途径将抗原肽提呈给免疫活性细胞是其诱导免疫应答的主要机制。肌肉组织作为常用的接种部位,在DNA疫苗接种后可高效表达靶抗原,但由于作为非专职抗原提呈细胞的肌细胞缺乏B7.1、B7.2等共刺激分子的表达,其在DNA疫苗免疫中的作用众说纷纭。有报道认为,肌细胞作为非专职抗原提呈细胞在DNA疫苗免疫过程中可诱导免疫应答的产生,但更多的研究表明,肌细胞在此过程中导致的是免疫耐受而非免疫刺激,其机理可能涉及PD-L1/PD-1负性免疫调节通路的活化。鉴于上述以提高DNA疫苗免疫原性为目标的尝试未能取得满意的免疫效果,我们认为,换一个角度思考问题,阻断负性调节信号转导通路,有可能是解决DNA疫苗免疫效果不高的可行途径。基于上述考量,本研究以小鼠NOR-10细胞为研究对象,用不同的细胞因子处理细胞以模拟DNA疫苗接种后活化的T细胞与肌细胞相互作用的微环境,通过RT-PCR和流式细胞术检测细胞免疫相关的MHC-I、共刺激分子B7及负性免疫调节分子PD-L1的表达。探讨DNA疫苗肌肉注射接种后,肌细胞在免疫效应诱导过程中的可能作用及通过阻断负性调节信号PD-L1/PD-1通路提高DNA疫苗免疫效果的可能性。方法:⑴体外刺激细胞:NOR-10细胞以5×105的密度传到新的100ml培养瓶,24小时后,分别以干扰素-γ(IFN-γ,500U/ml)、白介素-4 (IL-4,50ng/ml),干扰素-β(IFN-β,500U/ml)刺激细胞,未处理细胞加新鲜培养基作为正常对照组。⑵Trizol提取细胞总RNA:不同的细胞因子处理细胞后,分别在3小时、6小时、12小时、24小时,48小时后提取细胞总RNA,未处理组作为正常细胞对照组,进行RT-PCR。⑶流式细胞术检测细胞表面蛋白:细胞用不同的细胞因子处理后,分别在12小时、24小时、48小时后收集细胞,未处理组细胞作为正常对照。收集1×106个细胞/每个样本。按流式细胞仪样本准备操作规程进行,然后上机检测。结果:⑴共抑制分子PD-L1的表达:证实正常小鼠NOR-10有少量的PD-L1mRNA但无PD-L1蛋白的表达。IFN-γ(500U/ml)和IFN-β(500U/ml)刺激既可上调PD-L1的mRNA表达,也可上调其蛋白的表达。⑵共刺激分子MHC-I的表达:正常的NOR-10细胞有少量的MHC-I mRNA表达,给予IFN-γ和IFN-β处理后,细胞MHC-I的mRNA均可被上调。正常细胞表面无MHC-I蛋白,IFN-β可诱导MHC-I分子表达,但IFN-γ刺激对MHC-I分子的表达不起作用。⑶共刺激分子B7的表达:正常情况下,培养的NOR-10细胞有少量B7.1 mRNA表达,但无B7.2 mRNA的表达,给予IFN-γ和IFN-β刺激后,B7.1mRNA表达量均没有明显变化,B7.2 mRNA仍然阴性。通过流式细胞术检测,我们发现细胞表面无B7.1和B7.2表达,同样给予IFN-γ,IFN-β和IL-4刺激后,仍检测不到B7.1和B7.2的表达。⑷IL-4刺激细胞,对PD-L1与MHC-I和B7.1、B7.2均没有影响。结论:⑴正常小鼠NOR-10细胞构成性表达P

关键词：疫苗免疫调节 NOR-10细胞细胞因子免疫耐受功能衰竭

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马克思主义的民族和谐理论及其实现途径

马克思主义的民族和谐理论及其实现途径

作者：于花兰西北大学

学位级别：硕士

自从党十六届四中全会论述加强党的执政能力建设问题时,提出要“构建社会主义和谐社会”这一重大命题以来,我国的主要任务之一,就是“构建社会主义和谐社会”,全面推进中国特色社会主义事业的顺利发展。和谐社会即是指社会的各种要素和... 详细信息

自从党十六届四中全会论述加强党的执政能力建设问题时,提出要“构建社会主义和谐社会”这一重大命题以来,我国的主要任务之一,就是“构建社会主义和谐社会”,全面推进中国特色社会主义事业的顺利发展。和谐社会即是指社会的各种要素和关系相互融洽的美好社会。国外学者菲利克斯·格罗斯曾在文中指出：“我们的地球无论在过去、现在还是将来,都是不同文化、不同语言、不同宗教和肤色的人们的栖息之地。从远古时代起,当不同部落或民族相遇之后,频繁战争和冲突就接踵而至,大大多于和平方式下的磨合、适应以及对差异的包容。不同的民族、部落、宗教和种族如何和睦地生活在同一个城市、同一个国家、甚至同一条街道,这是一个古老又非常现代的问题”。① 党的十六大报告强调要“全面贯彻党的民族政策,坚持和完善民族区域自治制度,巩固和发展平等、团结、互助的社会主义民族关系,促进各民族共同繁荣进步。”② 随着我国经济的迅猛发展,地区差距也进一步拉大,民族间存在着经济利益、政治利益、文化利益的矛盾,影响着我国的现代化进程。利益矛盾是现阶段我国人民内部矛盾的重要特点和突出表现。从内部来看,民族地区,尤其边疆民族地区因其自身经济基础薄弱,经济发展进程明显滞后,导致我国贫困人口的大部分仍然分布在西部民族地区。从外部来讲,西方敌对势力从没放弃对我国的“西化”、“分化”图谋,千方百计在意识形态方面对我国进行渗透。而我国民族地区正处在这种渗透的前沿,对民族地区的社会稳定造成了负面影响。此外,一些国际国内民族分裂主义分子,总是利用民族和宗教问题,迷惑人心,制造混乱。例如2009年7月5日,以民族分裂分子热比娅为首的“世界维吾尔代表大会”在新疆乌鲁木齐市发动了打砸抢烧严重暴力犯罪事件,不仅给新疆的经济带来了损失,而且损害了各民族之问的感情。因此,加强民族间的团结,实现民族和谐势在必行。而民族和谐又是社会整体和谐的重要内容,是它的必要条件,是我国构建社会主义和谐社会的重要基石。

关键词：马克思主义民族和谐实现途径现实意义

角膜缘干细胞生物学特性增龄性变化的实验研究

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中国实用眼科杂志 2008年第11期26卷 1281-1284页

作者：于花马蕾山西医科大学第二医院眼科太原030001

目的观察增龄对体外培养的新西兰兔角膜缘干细胞生物学特性的影响。方法随机选取2月龄，1．5年龄，3年龄新西兰兔各5只，取其角膜缘组织，用酶消化法制成细胞悬液，以相同的密度种植，观察体外培养的角膜缘干细胞的生长情况，细胞免疫... 详细信息

目的观察增龄对体外培养的新西兰兔角膜缘干细胞生物学特性的影响。方法随机选取2月龄，1．5年龄，3年龄新西兰兔各5只，取其角膜缘组织，用酶消化法制成细胞悬液，以相同的密度种植，观察体外培养的角膜缘干细胞的生长情况，细胞免疫荧光鉴定，噻唑蓝（MTT）比色法检测其增殖活性，流式细胞术测细胞周期和细胞大小。结果2月龄新西兰兔角膜缘干细胞较1．5年龄和3年龄增殖活性高，增殖期细胞和小细胞所占的比例大。结论角膜缘干细胞的增殖能力随着年龄的增加而降低，其在上皮细胞中所占比例随年龄的增加而减小。

关键词：干细胞角膜缘增龄细胞增殖

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精神家园的追寻与建构—张炜小说的流浪书写

精神家园的追寻与建构—张炜小说的流浪书写

作者：宋于花山东师范大学

学位级别：硕士

在中国当代文坛上,山东籍作家张炜及其作品无疑是一个绕不开的话题。四十多年来,张炜一直在文学创作的道路上默默耕耘,以文学的方式执着地坚守着自己的创作个性,坚守着知识分子内心的良知和责任。“流浪”是张炜小说中经常出现的一个重... 详细信息

在中国当代文坛上,山东籍作家张炜及其作品无疑是一个绕不开的话题。四十多年来,张炜一直在文学创作的道路上默默耕耘,以文学的方式执着地坚守着自己的创作个性,坚守着知识分子内心的良知和责任。“流浪”是张炜小说中经常出现的一个重要主题,也是张炜小说的重要情节支撑和叙事动力。“流浪”不仅表现为流浪者从一个地点到另一个地点的身体上的外在流浪,还表现为意识层面的精神上的内在流浪。通过对流浪者形象的刻画以及对流浪者流浪之途的展现,叙述者在小说中以人物外在和内在流浪的方式追寻和建构着理想的精神家园。因此,对其小说流浪书写的研究和探讨,可以从一个新的视角更加全面地理解张炜及其作品,同时也可以认识到张炜的小说在当下文化语境中所具有的深层的文化意蕴和强烈的现实指向意义。本文主要由引言、主体、结语三部分组成。引言部分主要介绍张炜的创作情况、有关张炜小说流浪书写的研究现状,指出本文的研究方法、创新之处和研究意义。主体部分主要分为四个章节:第一章主要从两个层面分析张炜小说“流浪”的表现形态以及张炜“流浪书写”形成的原因。首先分析张炜小说中流浪的表现形态,分为外在流浪和内在流浪;其次探讨流浪书写形成的原因,一方面是作家特殊的出身和经历,另一方面是新时期以来社会历史文化发展的影响。第二章主要分析流浪者的流浪之途。在张炜的小说中人物的流浪是一种普遍存在,无论是他们对大自然的向往、对爱情的渴求亦或是对家族血脉的追寻,作者都给我们展示了流浪途中人的情绪的起伏和他们命运的千回百转,并试图探索他们的精神世界,真切的观照隐藏在流浪背后的东西。第三章主要分析流浪者的精神意蕴。张炜笔下的流浪者不仅带有鲜明的时代印记和人文气息,更具有独特的意蕴和特质。这些人物或自由洒脱,体现着生命意志的激情张扬;或经由作者通过对动物、环境以及美好人物形象的刻画来赋予人物神性的光辉,以此来体现作者对美好人性的渴求;或通过对不同类型知识分子的描写来呈现出真正知识分子对责任和良知的坚守。第四章探讨张炜小说流浪书写的意义指向。张炜小说的流浪书写体现出他对现实的疏离和超越,对苦难的观照和救赎,以及在社会转型背景下对现代人精神的建构。结语部分总结论述张炜小说的流浪书写在当代文坛的独特意义,张炜对真、善、美的追求,使他的小说散发着理想主义的光芒,同时也体现出作家重建精神家园的道德理想,这对人们在物欲横流的当下生活中摆脱精神的困境有着重要的现实意义。

关键词：张炜流浪书写精神家园流浪者意义指向

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湖南沅陵“死客子”话语音研究

湖南沅陵“死客子”话语音研究

作者：蒋于花湖南师范大学

学位级别：硕士

沅陵县地处湖南西北部,沅江下游,隶属怀化市。沅陵境内,主要有沅陵官话和乡话等方言,还有一种叫“死客子”的话与沅陵官话、乡话差异很大,“死客子”话位于沅陵官话和乡话的中间地带,前人对它没有研究。本文对沅陵“死客子”话进行了深... 详细信息

沅陵县地处湖南西北部,沅江下游,隶属怀化市。沅陵境内,主要有沅陵官话和乡话等方言,还有一种叫“死客子”的话与沅陵官话、乡话差异很大,“死客子”话位于沅陵官话和乡话的中间地带,前人对它没有研究。本文对沅陵“死客子”话进行了深入的调查,对“死客子”话的语音进行了详细的描写,最后通过与湘语辰溆片、沅陵官话的比较探讨其归属,初步认为“死客子”话属于湘语辰溆片。全文共分四个部分：第一章概述。简要介绍了沅陵县的地理、历史和语言概况,并对“死客子”话及辰溆片湘语、沅陵官话、乡话的研究状况做了简要述评;同时还介绍了本文的研究意义、方法以及发音合作人的情况。第二章沅陵“死客子”话语音系统及音韵特点。归纳了沅陵“死客子”话的音系、声韵调配合表,详细总结了“死客子”话的音韵特点。第三章沅陵“死客子”话与相关方言的比较及归属问题探讨。通过“死客子”话与湘语辰溆片、沅陵官话的细致比较,得出“死客子”话属于湘语辰溆片的结论。第四章沅陵“死客子”话同音字表。

关键词：沅陵“死客子”话语音比较归属

多民族聚居地区语言协调发展研究——以武陵山片区为例

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贵州民族研究 2015年第6期36卷 238-241页

作者：蒋于花陈晖湖南医药学院湖南怀化418000 湖南师范大学湖南长沙410012

在民族关系中语言占有非常重要的地位,通过对武陵山片区进行田野调查,在获得武陵山片区少数民族语言多项具体数据指标的基础上,运用多种研究方法,客观地描述武陵山片区少数民族语言生活的真实面貌,分析语言与社会、文化环境之间的联系,... 详细信息

在民族关系中语言占有非常重要的地位,通过对武陵山片区进行田野调查,在获得武陵山片区少数民族语言多项具体数据指标的基础上,运用多种研究方法,客观地描述武陵山片区少数民族语言生活的真实面貌,分析语言与社会、文化环境之间的联系,对武陵山片区少数民族的语言面貌进行调查,分析其语言关系,对带有明显区域特征和文化特征的语言生活进行剖析,有利于武陵山片区民族文化资源的整理,有利于武陵山片区民族文化的保护和开发。探讨语言以自身价值获得活力的途径,并站在维护语言多样性和建设语言和谐的高度对现行的语言文字政策提出建议与对策。

关键词：武陵山片区少数民族语言协调发展

增龄对角膜基质载体培养的角膜缘干细胞生物学特性的影响

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中国实用眼科杂志 2009年第10期27卷 1200-1204页

作者：梁星马蕾于花山西医科大学第二医院眼科太原030001 延安大学附属医院眼科

目的观察增龄对新西兰兔角膜缘干细胞在同种异体角膜基质上生长、增殖的影响.方法用酶消化法将不同年龄新西兰兔角膜缘组织制成细胞悬液培养,以相同的细胞密度种植于不同年龄的新西兰兔的角膜基质上,观察角膜缘干细胞在角膜幕质上的... 详细信息

目的观察增龄对新西兰兔角膜缘干细胞在同种异体角膜基质上生长、增殖的影响.方法用酶消化法将不同年龄新西兰兔角膜缘组织制成细胞悬液培养,以相同的细胞密度种植于不同年龄的新西兰兔的角膜基质上,观察角膜缘干细胞在角膜幕质上的生长情况.原位杂交检测ABCG2、ANp63的表达,IPP5.1软件分析图像,流式细胞术测细胞周期,运用SPSS13.0软件对析因设计资料进行方差分析.结果角膜缘干细胞供体年龄各水平差异有统计学意义,相同时间内角膜基质培养的青年兔角膜缘干细胞在角膜基质单位面积卜的牛长总而积均较中年和老年高,增殖期细胞所占比例大;而角膜基质供体年龄各水平差异与角膜缘干细胞和角膜基质的交互作用均无统计学意义.结论在同种异体角膜基质载体上培养的角膜缘干细胞的增殖能力随着年龄的增加而降低.

关键词：角膜缘干细胞增龄角膜基质载体细胞增殖