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前体破骨细胞和成熟破骨细胞外泌体对成骨细胞分化的作用研究

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解放军医学院学报 2024年第6期45卷 618-623,630页

作者：王中奇于海宽李然陈俊宇常非凡程栋梁李毅尹鹏滨刘玉杰解放军医学院北京100853 解放军总医院第四医学中心骨科医学部国家骨科与运动康复临床医学研究中心北京100048 联勤保障部队第927医院云南普洱665000 解放军总医院海南医院骨科海南三亚572013

背景破骨细胞外泌体参与细胞间通讯,在骨重塑中起重要作用。前体破骨细胞(precursor osteoclast,pOC)外泌体和成熟破骨细胞(mature osteoclast,mOC)外泌体对成骨细胞分化的作用是否存在差异,仍待进一步研究。目的探究前体破骨细胞和成... 详细信息

背景破骨细胞外泌体参与细胞间通讯,在骨重塑中起重要作用。前体破骨细胞(precursor osteoclast,pOC)外泌体和成熟破骨细胞(mature osteoclast,mOC)外泌体对成骨细胞分化的作用是否存在差异,仍待进一步研究。目的探究前体破骨细胞和成熟破骨细胞外泌体对成骨细胞分化的作用。方法利用核因子κB配体受体活化因子和巨噬细胞集落刺激因子刺激骨髓单核/巨噬细胞,诱导破骨细胞分化成熟。提取pOC和mOC分泌的外泌体,对两种外泌体进行表征。分别用两种外泌体干预原代乳鼠颅骨成骨细胞并进行成骨诱导分化,利用荧光标记观察外泌体摄取情况;使用茜素红S(alizarin red S,ARS)染色、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和RT-qPCR评价两种外泌体对成骨分化能力的影响。结果mOC相较于pOC具有更典型的多核融合结构;两种细胞外泌体粒径均为100 nm左右,呈圆形盘状,表达外泌体标志性蛋白,均可被原代成骨细胞摄取。mOC外泌体干预组ARS染色钙结节数量与ALP染色深度均高于pOC外泌体干预组(P<0.05);mOC外泌体干预组成骨相关基因的表达高于pOC组和对照组(P<0.05)。结论成熟破骨细胞外泌体相较于前体破骨细胞外泌体,促成骨细胞分化能力可能更强。

关键词：前体破骨细胞成熟破骨细胞外泌体成骨细胞骨质疏松

壁画制作工艺和材料光谱分析——以北京延庆花盆关帝庙壁画为例

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光谱学与光谱分析 2023年第4期43卷 1147-1154页

作者：金翠郭宏于海宽李博杨健都张遥北京科技大学科技史与文化遗产研究院北京100083 北京市延庆区博物馆(北京市延庆区文物管理所) 北京102100 北京国文琰文物保护发展有限公司北京100029 淮安市文物保护和考古研究所江苏淮安223001

光谱学是利用光与物质的相互作用,展示物质微观结构,提供不同化学分析方式,从而实现对物质的定量和定性分析。壁画制作工艺分析中运用了大量的光谱分析技术,该研究以北京延庆花盆关帝庙为例,通过光谱及其他技术分析壁画的制作材料和工... 详细信息

光谱学是利用光与物质的相互作用,展示物质微观结构,提供不同化学分析方式,从而实现对物质的定量和定性分析。壁画制作工艺分析中运用了大量的光谱分析技术,该研究以北京延庆花盆关帝庙为例,通过光谱及其他技术分析壁画的制作材料和工艺。花盆关帝庙位于北京延庆区花盆村,始建于清雍正四年(1726年),是当时祭祀的重要场所,也是延庆地区关帝庙的典型代表之一。运用X射线衍射、拉曼光谱和激光粒度分析仪等一系列光谱技术发现关帝庙壁画的地仗层成分为石英、方解石和钠长石,白粉层成分为石膏,颜料层中红色颜料为铁红、铅丹和朱砂,蓝色颜色为蓝铜矿,黄色颜色为铬黄,黑色颜色为炭黑,白色颜料为石膏,绿色颜色为巴黎绿、绿土和铬绿。沥粉贴金工艺的胶结物为熟桐油和松香树脂,金箔采用含金量86.1%的赤金。拉曼光谱不仅可以辨析壁画颜料,还能通过颜料历史研究佐证和丰富壁画修复历史信息。结合文物光谱分析数据与文献资料,充分挖掘文物背后的信息,对研究和保护古代壁画有着重要意义。通过花盆关帝庙壁画同面墙不同位置的壁画地仗层制作工艺的差异,说明壁画制作材料和工艺受位置影响。期待日后研究者通过研究壁画制作材料和工艺差异,发现符合规制的典型壁画案例,通过梳理壁画不同位置制作材料与工艺,总结历代壁画制作规制。

关键词：壁画制作工艺和材料光谱分析花盆关帝庙壁画

负载双氯芬酸钠的间充质干细胞外泌体对类风湿关节炎小鼠治疗的研究

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解放军医学院学报 2023年第5期44卷 558-562,568页

作者：王喆于海宽孟佳琦文山张传杰梅晰凡锦州医科大学附属第三医院骨科辽宁锦州121002 辽宁省医学组织工程重点实验室辽宁锦州121002 解放军医学院北京100853 中国科学院大学北京100049

背景类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的临床干预措施以控制炎症为主,但一部分患者对常规治疗手段表现出低响应性,因此亟须探索新型治疗方式以满足治疗需求。目的探讨负载双氯芬酸钠(diclofenac sodium,DS)的间充质干细胞(mesench... 详细信息

背景类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的临床干预措施以控制炎症为主,但一部分患者对常规治疗手段表现出低响应性,因此亟须探索新型治疗方式以满足治疗需求。目的探讨负载双氯芬酸钠(diclofenac sodium,DS)的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)来源的外泌体(exosomes,EXs)对类风湿关节炎的治疗作用。方法从小鼠的骨髓中获取MSCs并进行体外培养,将收集的MSCs上清液通过超速离心法提取外泌体,并利用超声法将DS装载进EXs以构建纳米药物DS@EXs。通过透射电镜观察EXs和DS@EXs的形态,纳米颗粒追踪分析EXs和DS@EXs的粒径和电势,免疫印迹鉴定EXs和DS@EXs的标志蛋白CD9和CD63。通过关节冰冻切片和免疫荧光实验分析DS@EXs在小鼠体内的靶向递送能力。利用关节炎评分和炎症因子[白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)]水平评价DS@EXs的抗炎效果,使用micro-CT评价DS@EXs对关节的保护。结果透射电镜展示EXs和DS@EXs的形态均呈茶托样,DS@EXs的粒径保持在100 nm,电势保持在-12 mV,与EXs相似。另外,EXs和DS@EXs均表达CD9和CD63。与普通药物递送载体相比(如脂质体),激光共聚焦成像可以观察到较多DIO标记的DS@EXs聚集于发炎的关节中(P<0.05)。DS@EXs组的关节炎评分显著低于PBS组(P<0.05)。与PBS组相比,DS@EXs组中小鼠血清中IL-6、IL-1β和TNF的水平分别下降了52.8%、63.8%和52.5%(P<0.05)。与PBS组相比,DS@EXs减弱了关节表面的骨侵蚀,其骨密度值由921 mg/cm3升高至1195 mg/cm3(P<0.05)。结论DS@EXs可以减弱类风湿关节炎小鼠的炎性反应并且缓解骨质的侵蚀。

关键词：间充质干细胞外泌体类风湿关节炎药物递送双氯芬酸钠

大型超滤水厂预处理流程的除污效能及膜污染特性

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中国给水排水 2023年第13期39卷 54-59页

作者：于海宽李星周志伟续海洋李东来田希彬北京工业大学城市建设学部北京100124 中国人民武装警察部队后勤学院天津300309 青岛市交通规划设计有限公司山东青岛266000 东营市自来水公司山东东营257091

预处理流程是提高超滤组合工艺除污效能、控制膜污染的关键环节,在实际工程应用中具有重要作用。对比了长期运行的大型超滤水厂中两种预处理流程的除污效能和膜污染特性。结果表明,常规流程+超滤工艺和短流程/炭泥回流+超滤工艺都有较... 详细信息

预处理流程是提高超滤组合工艺除污效能、控制膜污染的关键环节,在实际工程应用中具有重要作用。对比了长期运行的大型超滤水厂中两种预处理流程的除污效能和膜污染特性。结果表明,常规流程+超滤工艺和短流程/炭泥回流+超滤工艺都有较好的有机物去除效果,出水以分子质量30 ku的DOC;分子质量100 ku和3~10 ku的DOC与类芳香族蛋白质、类芳香族蛋白质Ⅱ以及溶解性微生物代谢类蛋白质是造成滤饼层阻力的主要因素。

关键词：超滤预处理流程除污效能溶解性有机物膜污染

混凝沉淀/超滤处理给水厂生产废水及回用可行性

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中国给水排水 2023年第15期39卷 45-50页

作者：张栋杰李星于海宽周志伟于淑花于洁陈清北京工业大学城市建设学部北京100124 中国人民武装警察部队后勤学院后勤保障系天津300309 东营自来水公司山东东营257091 苏州立升净水科技有限公司江苏苏州215000

以山东某大型给水厂的沉淀池排泥水、滤池反冲洗废水、活性炭池反冲洗废水和超滤膜池反冲洗废水组成的混合生产废水为研究对象,分别采用混凝沉淀、超滤、混凝沉淀/超滤3种工艺进行处理,考察了对有机物、三卤甲烷生成势(THMFP)的去除效... 详细信息

以山东某大型给水厂的沉淀池排泥水、滤池反冲洗废水、活性炭池反冲洗废水和超滤膜池反冲洗废水组成的混合生产废水为研究对象,分别采用混凝沉淀、超滤、混凝沉淀/超滤3种工艺进行处理,考察了对有机物、三卤甲烷生成势(THMFP)的去除效果以及膜污染特性,探究了3种处理工艺出水的回用可行性。结果表明,混凝沉淀工艺或超滤工艺均可不同程度地去除混合生产废水中的有机物和THMFP,而混凝沉淀/超滤组合工艺可显著提高有机物和THMFP的去除效果;混凝沉淀可有效去除不可逆膜污染物的主要组分即类溶解性蛋白质和类腐殖质,对分子质量(MW)>100 ku的DOC也有明显的去除效果,可使后续超滤单元的不可逆膜污染指数降低49.83%、膜比通量提高4.75倍;超滤可有效去除类溶解性蛋白质和类色氨酸芳香族蛋白质,并高效截留MW>100 ku的DOC;而混凝沉淀/超滤组合工艺可显著提高类色氨酸芳香族蛋白质的去除效果,使各个分子质量区间的有机物均可得到更高效的去除。直接混凝沉淀或直接超滤处理出水宜回流到给水厂进水端进行回用,混凝沉淀/超滤处理出水宜回流到给水厂超滤单元或炭滤单元进水端进行回用。

关键词：给水厂生产废水混凝沉淀超滤回用可行性

3D培养人脐带间充质干细胞来源的外泌体对成骨细胞分化的作用

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解放军医学杂志 2023年第4期48卷 411-419页

作者：陈瑞婧冯韬锦程实李上于海宽陈铭李毅尹鹏滨张里程唐佩福解放军医学院北京100853 解放军总医院第四医学中心骨科医学部北京100048 国家骨科与运动康复临床医学研究中心北京100048 哈尔滨医科大学附属第二医院骨科黑龙江哈尔滨150086

目的比较三维立体(3D)培养与传统贴壁培养(2D)人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)来源的外泌体促进成骨细胞分化能力的差异,探索前者在促进骨形成相关治疗中应用的可能性。方法将hUC-MSCs分为2D组与3D组分别进行培养,在普通光学显微镜下观察... 详细信息

目的比较三维立体(3D)培养与传统贴壁培养(2D)人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)来源的外泌体促进成骨细胞分化能力的差异,探索前者在促进骨形成相关治疗中应用的可能性。方法将hUC-MSCs分为2D组与3D组分别进行培养,在普通光学显微镜下观察细胞的形态特征,同时应用钙黄绿素-AM/PI活死细胞双染法检测3D组细胞的活性;通过转录组测序筛选两组差异表达基因并进行GO富集分析。提取2D组与3D组细胞分泌的外泌体并分为2D外泌体(2D-Exo)组与3D外泌体(3D-Exo)组,通过透射电子显微镜、纳米颗粒跟踪分析及Western blotting对外泌体进行表征。在体外应用2D-Exo及3D-Exo干预乳鼠颅骨成骨细胞并进行成骨诱导分化,通过茜素红染色、碱性磷酸酶染色及RT-qPCR鉴定2D-Exo、3D-Exo对成骨分化能力的影响。结果与2D组比较,3D组细胞大小均等,聚拢成球形生长;钙黄绿素-AM/PI活死细胞双染可见3D培养的hUC-MSCs具有较高活性;转录组测序结果显示,与2D组比较,3D组上调基因富集于骨矿化、软骨发育、细胞外基质的组成、成骨细胞分化、血管生成、细胞增殖的正向调控及基因表达的正向调控等通路,下调基因富集于细胞增殖的负向调控、细胞迁移的负向调控、细胞凋亡等通路。透射电子显微镜观察可见两组外泌体的直径均为100 nm左右,呈现外泌体典型的杯状形貌特征,且均表达外泌体相关标志蛋白CD9、CD63和CD81。乳鼠颅骨成骨细胞染色结果显示,与2D-Exo组比较,3D-Exo组茜素红着色的钙结节数量及碱性磷酸酶染色强度均明显升高;RT-qPCR检测结果显示,与2D-Exo组比较,3D-Exo组成骨分化相关基因Bglap、Runx2、Alp、Col1a1、Spp1 mRNA相对表达量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论3D培养的hUC-MSCs来源的外泌体可上调成骨相关基因Bglap、Runx2、Alp、Col1a1、Spp1的表达,相较于2D培养来源的外泌体具有更强的促成骨细胞分化的能力。

关键词：三维立体培养人脐带间充质干细胞外泌体成骨分化

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长江常熟段水溶解性有机物分子质量分布特性

水利水电科技进展 2013年第1期33卷 41-44页

作者：刘慧于海宽王为木河海大学南方地区高效灌排与农业水土环境教育部重点实验室江苏南京210098 河海大学水利水电学院江苏南京210098

采用超滤膜法对水溶解性有机物进行物理分级,研究长江常熟段水源水中不同分子质量区间DOC和UV254分布的变化特征及其原因。结果表明,长江常熟段水源水总体水质较好,高锰酸盐指数、氨氮、总磷等指标均未超过地表Ⅲ类水体水质标准,符合饮... 详细信息

采用超滤膜法对水溶解性有机物进行物理分级,研究长江常熟段水源水中不同分子质量区间DOC和UV254分布的变化特征及其原因。结果表明,长江常熟段水源水总体水质较好,高锰酸盐指数、氨氮、总磷等指标均未超过地表Ⅲ类水体水质标准,符合饮用水源地卫生要求。2008年11月至2009年9月期间,水源水中分子质量小于1kDa的DOC所占比例平均为64.3%,分子质量小于1kDa的UV254所占比例平均为45.2%,表明长江水源水中水溶解性有机物主要以小分子质量的有机物为主,汛期水源水中分子质量在3～10 kDa区间的DOC和UV254比例较枯水期有显著提高。

关键词：水源水水溶解性有机物分子质量分布超滤膜法

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俄罗斯BPM-97边防警戒车

现代兵器 2000年第1期 25-26页

作者：于海宽

BPM-97边防警戒车是莫斯科鲍曼国立技术大学技术合作中心的工作人员和卡玛斯股份有限公司专用车辆设计师阿扎马托夫合作,在俄罗斯国防工业科学研究所专家的协助下,按照俄联邦边防勤务部门所提出的要求,于1997年研制成功的。该车在防护... 详细信息

BPM-97边防警戒车是莫斯科鲍曼国立技术大学技术合作中心的工作人员和卡玛斯股份有限公司专用车辆设计师阿扎马托夫合作,在俄罗斯国防工业科学研究所专家的协助下,按照俄联邦边防勤务部门所提出的要求,于1997年研制成功的。该车在防护性、机动性、车载武器威力、成本以及寿命周期费用等方面都具有其它同类轻型装甲车辆无与伦比的绝对优势。

关键词： BPM-97 轻型装甲车辆方向射界边防警戒边防武装警戒驾驶员俄罗斯自动榴弹发射器装甲人员输送车装甲输送车高低射界变型车边防勤务拖车挂车

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试论煤矿安全监察工作所处的外部和内部环境

煤矿安全 2003年第11期34卷 3-5页

作者：苑剑锋于海宽辽宁煤矿安全监察局铁法办事处辽宁调兵山112700

文章分析了煤矿安全监察工作所处的外部环境和内部环境,揭示了在煤矿安全监察行政执法过程中产生的问题及其原因,并根据实际情况提出了建设性的建议。

关键词：煤矿安全监察外部环境内部环境