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趋化因子受体CXCR4及CCR5真核表达载体的构建及其在卵巢癌细胞中的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第12期26卷 1200-1202页

作者：谢婷婷魏莉宋辉于月成第四军医大学西京医院妇产科陕西西安710032

目的:构建人CXCR4及CCR5真核表达重组质粒,转染人卵巢癌细胞SKOV3,建立稳定转染细胞系并观察其表达效果。方法:从人外周血单个核细胞中提取RNA,采用反转录PCR技术扩增CXCR4及CCR5的基因编码序列,将序列克隆至真核表达载体pEGFP,经酶切... 详细信息

目的:构建人CXCR4及CCR5真核表达重组质粒,转染人卵巢癌细胞SKOV3,建立稳定转染细胞系并观察其表达效果。方法:从人外周血单个核细胞中提取RNA,采用反转录PCR技术扩增CXCR4及CCR5的基因编码序列,将序列克隆至真核表达载体pEGFP,经酶切和测序鉴定后,应用脂质体转染技术将质粒***-CXCR4和pEGFP-CCR5分别导入不表达CXCR4及CCR5蛋白的SKOV3细胞,经G418抗性筛选得到阳性细胞克隆并扩大培养成系。分别采用免疫荧光染色和流式细胞术方法(FCM)检测稳定转染细胞株CXCR4和CCR5的表达。结果:构建了真核表达载体pEG-FP-CXCR4和pEGFP-CCR5;得到了抗G418阳性细胞克隆;免疫荧光染色和FCM检测结果显示,转染质粒的SKOV3细胞表达CXCR4和CCR5。结论:成功建立稳定表达趋化因子受体CXCR4和CCR5的卵巢癌细胞株,为CXCR4和CCR5在卵巢癌中的研究工作提供依据及平台。

关键词： CXCR4 CCR5 转染 SKOV3细胞

多囊卵巢综合征患者促排卵周期血清AMH水平的变化

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山东医药 2009年第4期49卷 100-101页

作者：赵海波宋晖于月成第四军医大学西京医院陕西西安710032

月经周期2—3d及注射绒促性素（hCG）日抽取35例多囊卵巢综合征（PCOS）患者空腹静脉血，检测抗苗勒氏管激素（AMH）、雌激素（E）及雄激素（T）水平，分析促排卵周期中AMH水平的变化及与其他指标的关系。选择25例健康妇女作正常对照。... 详细信息

月经周期2—3d及注射绒促性素（hCG）日抽取35例多囊卵巢综合征（PCOS）患者空腹静脉血，检测抗苗勒氏管激素（AMH）、雌激素（E）及雄激素（T）水平，分析促排卵周期中AMH水平的变化及与其他指标的关系。选择25例健康妇女作正常对照。发现PCOS患者注射hCG日血清AMH水平明显高于月经周期2—3d，PCOS患者AMH与T水平呈正相关，而与E无相关性。认为PCOS患者促排卵周期血清AMH水平显著增加。

关键词：多囊卵巢综合征抗苗勒氏管激素雄激素促排卵

HOXA5通过调控Egr-1抑制体外培养卵巢癌细胞增殖和侵袭

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临床与实验病理学杂志 2019年第10期35卷 1189-1194页

作者：綦春蕾于月成空军军医大学第一附属医院妇产科

目的探讨HOXA5对卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的影响及相关机制。方法利用pcDNA.3.1质粒构建重组质粒pcDNA.3.1-HOXA5,转染卵巢癌细胞SKOV3和UACC-1598,过表达HOXA5;Egr-1 siRNA转染过表达HOXA5的卵巢癌细胞,干扰Egr-1表达;qRT-PCR法检测... 详细信息

目的探讨HOXA5对卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的影响及相关机制。方法利用pcDNA.3.1质粒构建重组质粒pcDNA.3.1-HOXA5,转染卵巢癌细胞SKOV3和UACC-1598,过表达HOXA5;Egr-1 siRNA转染过表达HOXA5的卵巢癌细胞,干扰Egr-1表达;qRT-PCR法检测卵巢癌细胞中HOXA5和Egr-1 mRNA的表达量;Western blot法检测卵巢癌细胞中HOXA5和Egr-1的蛋白表达量;BrdU法检测卵巢癌细胞的增殖能力;Transwell侵袭实验检测卵巢癌细胞的侵袭能力。结果HOXA5 mRNA(P<0.01)和蛋白表达量(P SKOV3<0.01,P UACC-1598<0.05)在卵巢癌细胞中的表达量降低;pcDNA.3.1-HOXA5转染卵巢癌细胞,HOXA5 mRNA和蛋白表达量显著升高(P<0.01);过表达HOXA5显著抑制卵巢癌细胞的增殖(P<0.01)和侵袭能力(P<0.01);过表达HOXA5且干扰Egr-1,细胞增殖(P<0.01)和侵袭能力(P SKOV3<0.01,P UACC-1598<0.05)显著提升,抑制了HOXA5过表达时对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响。结论过表达HOXA5可通过调控Egr-1的表达量有效抑制卵巢癌细胞的增殖和侵袭能力,为卵巢癌的治疗提供一定的理论基础。

关键词：卵巢肿瘤 HOXA5 Egr-1 增殖侵袭

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胰岛素对滋养层细胞凋亡的调节作用及机制

细胞与分子免疫学杂志 2003年第5期19卷 496-498页

作者：于月成辛晓燕张峰马向东王德堂郭惠玲第四军医大学西京医院妇产科陕西西安710032 第四军医大学药理教研室陕西西安710032

目的 :探讨胰岛素对培养的滋养细胞凋亡的影响及可能的机制。方法 :将培养的妊娠早期滋养层细胞 ,分为正常对照组(细胞 +培养液 )、H2 O2 组 (细胞 +培养液 +H2 O2 )和胰岛素 +H2 O2 组 (细胞 +H2 O2 +胰岛素 )。采用透射电镜观察及流... 详细信息

目的 :探讨胰岛素对培养的滋养细胞凋亡的影响及可能的机制。方法 :将培养的妊娠早期滋养层细胞 ,分为正常对照组(细胞 +培养液 )、H2 O2 组 (细胞 +培养液 +H2 O2 )和胰岛素 +H2 O2 组 (细胞 +H2 O2 +胰岛素 )。采用透射电镜观察及流式细胞术 ,观察H2 O2 诱导的细胞凋亡及胰岛素对H2 O2 诱导的细胞凋亡的抑制作用。并检测胰岛素对滋养细胞caspase 3的活性及Bcl 2蛋白表达的影响。结果 :H2 O2 可诱导培养的滋养细胞凋亡 ,透射电镜下可见特征性的细胞核改变。胰岛素可显著抑制H2 O2 诱导的细胞凋亡 ,流式细胞仪检测其凋亡率较H2 O2 组显著下降 (P <0 .0 1)。H2 O2 组滋养细胞中caspase 3的活性较对照组显著增高 (P <0 .0 1) ,而Bcl 2蛋白的表达则较对照组显著下降 (P <0 .0 1)。结论 :胰岛素可明显抑制H2 O2诱导的滋养细胞凋亡 ,其机制可能与降低caspase 3的活性和促进Bcl

关键词：滋养细胞胰岛素细胞凋亡半胱天冬酶-3 Bcl-2 调节作用

IGF-Ⅱ在早期胚胎发育终止蜕膜组织中的表达

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西安交通大学学报（医学版） 2004年第5期25卷 472-474页

作者：于月成辛晓燕高晓康陈必良赵海波第四军医大学西京医院妇产科陕西西安710032 第四军医大学西京医院泌尿外科陕西西安710032

目的　研究胰岛素样生长因子 Ⅱ (IGF Ⅱ )在早期胚胎发育终止中的表达以及母体血中IGF Ⅱ水平的改变与胚胎发育终止的关系。方法　采用免疫组织化学SP法检测早期胚胎发育终止蜕膜中IGF Ⅱ蛋白的表达 ;采用原位杂交法检测早期胚胎发育... 详细信息

目的　研究胰岛素样生长因子 Ⅱ (IGF Ⅱ )在早期胚胎发育终止中的表达以及母体血中IGF Ⅱ水平的改变与胚胎发育终止的关系。方法　采用免疫组织化学SP法检测早期胚胎发育终止蜕膜中IGF Ⅱ蛋白的表达 ;采用原位杂交法检测早期胚胎发育终止蜕膜中IGF ⅡmRNA的表达 ;采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测正常妊娠及早期胚胎发育终止孕妇血中IGF Ⅱ水平的变化。结果　正常妊娠的蜕膜组织中IGF Ⅱ的表达明显高于胚胎发育终止组 (P<0 .0 1) ;正常妊娠组蜕膜中IGF ⅡmRNA的表达明显高于胚胎发育终止组 (P <0 .0 1) ;正常妊娠组母血中IGF Ⅱ水平也明显高于胚胎发育终止组 (P <0 .0 1)。结论　IGF Ⅱ在蜕膜组织中的表达水平与胚胎发育密切相关 ,其含量的减少可能是导致胚胎死亡的原因之一。

关键词：胰岛素样生长因子-Ⅱ 早孕胚胎发育终止蜕膜

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剖宫产术后子宫切口坏死裂开出血的超声诊断

中国实用妇科与产科杂志 1997年第4期13卷 223-224页

作者：王健辛晓燕于月成郑维国李贵容第四军医大学附属西京医院妇产科

剖宫产术后子宫切口坏死裂开出血属手术严重并发症，诊断有一定困难。采用Ｂ型超声技术，成功诊断１２例，并结合术后大体标本、病理检查，对切口声像图进行分析。同期观察２８６例剖宫产术后子宫切口声像图，总结出正常、异常子宫切口... 详细信息

剖宫产术后子宫切口坏死裂开出血属手术严重并发症，诊断有一定困难。采用Ｂ型超声技术，成功诊断１２例，并结合术后大体标本、病理检查，对切口声像图进行分析。同期观察２８６例剖宫产术后子宫切口声像图，总结出正常、异常子宫切口声像图特征，为该并发症的临床诊断。

关键词：超声诊断子宫出血术后并发症剖腹产

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早产危险因素病例对照研究

第四军医大学学报 2004年第11期25卷 1022-1024页

作者：杨李梅陈必良辛晓燕王波于月成第四军医大学西京医院妇产科陕西西安710033 第四军医大学预防医学系流行病学教研室陕西西安710033

目的 :了解早产的危险因素 ,为制定预防策略和措施提供科学依据 .方法 :采用成组病例对照研究 ,针对早产的5 5项可疑危险因素 ,对 95例早产产妇和 1 1 6例足月产产妇进行问卷调查 .结果 :单因素分析 ,得到 1 7项早产危险因素 ,经进一步... 详细信息

目的 :了解早产的危险因素 ,为制定预防策略和措施提供科学依据 .方法 :采用成组病例对照研究 ,针对早产的5 5项可疑危险因素 ,对 95例早产产妇和 1 1 6例足月产产妇进行问卷调查 .结果 :单因素分析 ,得到 1 7项早产危险因素 ,经进一步多因素logistic回归分析发现产检次数过少 (OR =1 1 .8,95 %CI=3.7～ 37.4 )、暴露视频终端 (VDT)每日 >2 .5h (OR=4 .6 ,95 %CI=1 .6～ 1 3.2 )、孕期接触有毒化学物 (OR =76 .6 ,95 %CI=5 .7～ 1 0 32 .1 )、负性事件 (OR =2 0 .5 ,95 %CI=2 .5～ 1 70 .4 )、妊高征 (OR =7.6 ,95 %CI =2 .0～ 2 8.7)、妊娠合并贫血 (OR =4 .3,95 %CI=1 .4～ 1 3.4 )是早产的主要危险因素 .结论 :产前检查次数过少 ,孕期暴露VDT时间较长 ,孕期接触有毒化学物、负性事件、妊高征和妊娠合并贫血是早产的主要危险因素 .

关键词：早产危险因素病例对照研究

miR-455-3p通过靶向调控转脂蛋白4抑制卵巢癌细胞SKOV-3的增殖、迁移及上皮间质转化

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中国肿瘤生物治疗杂志 2019年第3期26卷 306-311页

作者：谢婷婷苏瑛吴利英于月成空军军医大学附属西京医院妇产科陕西西安710032

目的:探讨miR-455-3p对卵巢癌细胞SKOV-3增殖、迁移能力及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,并研究其作用机制。方法:人卵巢上皮细胞株IOSE80、卵巢细胞系SKOV-3和A2780细胞培养完成后,将miR-455-3p mimic及其阴性对照分别瞬时转染至细胞中。qPCR实验检测IOSE80、SKOV-3和A2780细胞miR-455-3p和转脂蛋白4(fatty acid-binding protein 4,FABP4)mRNA表达水平,Wb检测FABP4和EMT相关蛋白的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖活性,Transwell实验用于评估细胞迁移能力,生物信息学预测miR-455-3p的靶基因,应用双荧光素酶报告基因验证miR-455-3p与FABP4的靶向关系。结果:与正常卵巢上皮细胞IOSE80相比,卵巢癌细胞SKOV-3和A2780中miR-455-3p低表达(均P成为卵巢癌新的潜在治疗靶点。

关键词：卵巢癌 SKOV-3细胞 miR-455-3p 转脂蛋白4 上皮间质转化增殖迁移

FAP-1反义寡核苷酸联合卡铂对卵巢癌细胞SKOV3凋亡的作用

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癌症 2004年第8期23卷 885-889页

作者：王滨郑维国辛晓燕齐荣义于月成曹云新中国人民解放军第254医院妇产科天津300142 第四军医大学附属西京医院妇产科陕西西安710032 第四军医大学免疫学教研室陕西西安710032

背景与目的实验已证明,Fas相关磷酸酯酶-1(FAP-1)在卵巢癌细胞SKOV3中有高表达,可能对卵巢癌的发病与耐药具有重要意义。本研究应用反义核酸技术探讨FAP-1反义寡核苷酸(FAP-1ASODN)联合卡铂对SKOV3细胞凋亡的作用。方法反义核苷酸技术将... 详细信息

背景与目的实验已证明,Fas相关磷酸酯酶-1(FAP-1)在卵巢癌细胞SKOV3中有高表达,可能对卵巢癌的发病与耐药具有重要意义。本研究应用反义核酸技术探讨FAP-1反义寡核苷酸(FAP-1ASODN)联合卡铂对SKOV3细胞凋亡的作用。方法反义核苷酸技术将FAP-1ASODN转染SKOV3细胞。采用逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)检测转染前后FAP-1mRNA的表达,采用流式细胞术(FCM)分析细胞周期与细胞凋亡率,噻唑蓝法(MTT法)测定FAP-1ASODN与40μg/ml卡铂共同作用后对SKOV3细胞生长的影响。结果经FAP-1ASODN处理24h后,与对照组及FAP-1正义寡核苷酸(SODN)组比较,反义组的FAP-1mRNA表达明显减弱。FCM结果显示,卡铂+FAP-1ASODN组在24～72h的细胞凋亡率明显高于单用ASODN组及单用卡铂组,差异有显著性(P0.05)。结论FAP-1ASODN转染可以有效抑制FAP-1基因的表达,同时可以增强卵巢癌细胞对卡铂诱导凋亡的敏感性。

关键词： Fas相关磷酸酯酶-1 反义寡核苷酸卵巢肿瘤卡铂凋亡