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人类基因遗传标志物（STR，HLA）与男性长寿关联性的研究

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人类基因遗传标志物（STR，HLA）与男性长寿关联性的研究

作者：于卫建大连医科大学

学位级别：硕士

目的一般认为长寿的机理是多种因素、综合作用的结果,不是单一因素所决定的。人类的长寿现象更多的是一个体与外界的生存环境相适应的结果。在与长寿有关的因素中,遗传因素无疑是最重要或最主要的因素之一。人类基因组计划的研究表明,... 详细信息

目的一般认为长寿的机理是多种因素、综合作用的结果,不是单一因素所决定的。人类的长寿现象更多的是一个体与外界的生存环境相适应的结果。在与长寿有关的因素中,遗传因素无疑是最重要或最主要的因素之一。人类基因组计划的研究表明,人类基因中99.9%的遗传密码DNA都是一样的,只有大约0.1%的基因不同,具有个体差异。因此,与人类长寿有关的遗传因素很可能与这0.1%个体差异相关。目前,人类最大的遗传多态性是人类白细胞抗原系统(Human Leukocyte Antigen, HLA)和微卫星DNA(short tandem repeat,STR)。因此本文选定HLA-I类基因和15个STR系统的等位基因,旨在研究与人类长寿相关的遗传因素。方法选取大连地区,年龄在90岁以上的男性老人18人,作为观察组。对照组随机选取大连地区无偿献血志愿者男性50名,身体健康,体检标准符合“全国采供血管理规范”。家族无遗传病史,年龄在18-55周岁。样本采集,采静脉血2ml,EDTA抗凝。HLA-A、B基因分型方法,采用SSO方法。首先,提取DNA,进行PCR扩增。然后,按试剂盒说明书进行变性与中和后再与磁珠杂交,用SAPE染色,洗涤后,读板,计算机自动按顺序读取数据并分析出A、B、DR的特异性。STR检测采用Identifiler PlusTM (ABI公司,美国)试剂盒,扩增位点为D8S1179、D21S11、D7S820、CSF1PO、D3S1358、THO1、D13S317、D16S539、D2S1338、D19S433、VWA、TPOX、D18S51、D5S818、FGA和Amelogenin性别位点;采用310型DNA

关键词：长寿 HLA 微卫星 DNA SSO

-40℃条件下储存不同时间的全血对提取DNA浓度的影响

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中国输血杂志 2011年第11期24卷 973-974页

作者：段莹于卫建大连市血液中心辽宁大连116001

目前为止中华造血干细胞志愿捐献者资料库已经建库多年，标本保存是采用低温冰箱全血保存法。对于分子生物学实验有时需要长时间的标本积攒，而长时间的低温保存会对这些全血提取后的DNA的浓度产生何种影响，目前国内还未见详细的报道... 详细信息

目前为止中华造血干细胞志愿捐献者资料库已经建库多年，标本保存是采用低温冰箱全血保存法。对于分子生物学实验有时需要长时间的标本积攒，而长时间的低温保存会对这些全血提取后的DNA的浓度产生何种影响，目前国内还未见详细的报道。本实验室就-40℃冰箱保存的人全血进行基因组DNA的提取，将保存时间为年，0—4年的全血提取的DNA浓度进行了比较。

关键词： -40℃条件 DNA提取分光光度法

医院输血科(血库)输血相容性检测室间质量评价分析

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中国输血杂志 2013年第4期26卷 369-370页

作者：毕晓琳高勇于卫建大连市血液中心辽宁大连116001

目的了解大连市医院输血科(血库)输血相容性检测现状,建立大连市医院输血相容性检测室间质量评价体系,保证临床输血安全。方法统一制备并发放室间质量比对标准品,对ABO正定型、ABO反定型、Rh(D)血型、受血者抗体筛选及交叉配血试验建立... 详细信息

目的了解大连市医院输血科(血库)输血相容性检测现状,建立大连市医院输血相容性检测室间质量评价体系,保证临床输血安全。方法统一制备并发放室间质量比对标准品,对ABO正定型、ABO反定型、Rh(D)血型、受血者抗体筛选及交叉配血试验建立实验室室间质量比对,对检测方法、试剂及结果进行评价。结果 2009～2011年参加输血相容性室间质量比对工作的医院数量(特别是未能参加卫生部临检中心输血相容性室间质量评价的二级及其以下级别医院)逐渐增加至全部参加,检测方法趋于规范,检测技术水平有所提高,避免了由红细胞血型免疫引起的输血不良反应发生。结论开展输血相容性检测室间质量比对评价活动,有助于发现在临床输血检验工作中存在的问题,使检测方法进一步规范化和标准化,检测结果更加准确可靠,为临床输血提供了安全保障。

关键词：输血科(血库) 输血相容性室间质量比对

鼻息肉与人类白细胞Ⅱ类抗原DR和DQ多态性的相关性研究

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中华耳鼻咽喉科杂志 2004年第9期39卷 569-570页

作者：翟立杰孙轶青刘辉汤凌浩于卫建大连医科大学第一附属医院耳鼻喉科 116011 大连医科大学检验学院大连市血液中心

近年来,主要组织相容性复合体(major histocompatibilitycomplex,MHC)基因编码的同种异体抗原引起了人们的极大关注.人类MHC编码的抗原称为人类白细胞抗原(humanleukocyte antigen,HLA).HLA基因的多态性与疾病的遗传易感性有明显关系.... 详细信息

近年来,主要组织相容性复合体(major histocompatibilitycomplex,MHC)基因编码的同种异体抗原引起了人们的极大关注.人类MHC编码的抗原称为人类白细胞抗原(humanleukocyte antigen,HLA).HLA基因的多态性与疾病的遗传易感性有明显关系.它在免疫应答和免疫调节中的作用使人们认识到,它与鼻息肉的发病可能有关.本实验对30例鼻息肉患者的血清进行HLA检测,探索HLA与鼻息肉发病的关联性.

关键词：鼻息肉白细胞 Ⅱ类抗原 DR DQ 基因多态性

利用孕妇血浆中游离DNA检测胎儿ABO基因型

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中国输血杂志 2016年第2期29卷 127-130页

作者：宋文倩周世航于卫建大连市血液中心辽宁大连116001

目的采用实时定量PCR(real-time PCR)通过孕妇血浆中的胎儿游离DNA(cff DNA)鉴定胎儿ABO血型基因型。方法静脉采集79名孕妇O型血液,提取血浆中的游离DNA。采用SYBR real-time PCR方法,利用261位点(nt261)和796位点(nt796)的多态性进行胎... 详细信息

目的采用实时定量PCR(real-time PCR)通过孕妇血浆中的胎儿游离DNA(cff DNA)鉴定胎儿ABO血型基因型。方法静脉采集79名孕妇O型血液,提取血浆中的游离DNA。采用SYBR real-time PCR方法,利用261位点(nt261)和796位点(nt796)的多态性进行胎儿ABO基因分型。nt261和nt796扩增反应阴性的血浆DNA经甲基化特异性酶消化后,用Taq Man real-time PCR方法检测高甲基化胎源RASSF1A基因,来确定血浆DNA中是否存在cff DNA。待胎儿分娩后,血清学检测新生儿ABO血型,与基因检测结果比对。结果 79例标本中59例nt261扩增反应为阳性,其中33例nt796引物扩增反应为阳性,26例为阴性。20例nt261和nt796扩增反应阴性的标本中均可检测到胎儿RASSF1A基因,证明存在cff DNA。参照血清学结果,9例胎儿ABO基因型与表型不符,胎儿ABO基因分型准确率为88.6%,其中OO型检测准确率为100%,OA型为76.9%,OB型为90.9%。结论利用孕妇血浆中cff DNA检测胎儿ABO基因型可以在孕早期确定胎儿血型,避免怀有O型胎儿的孕妇多次复查抗体效价,并提高新生儿溶血病诊断的准确性。

关键词：胎儿游离DNA ABO基因分型实时定量PCR

熔解曲线分析法用于HPA-15基因分型的研究

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中国输血杂志 2011年第9期24卷 760-763页

作者：周世航刘铭于卫建宫本兰大连市血液中心辽宁大连116001 大连医科大学细胞生物学教研室

目的探讨熔解曲线分析法用于HPA-15基因分型,了解大连地区汉族人群HPA-15基因多态性。方法设计合成HPA-15等位基因特异性引物和1条公共引物,其中在2条等位基因特异性引物的5'末端分别加入具有不同长度并富含GC碱基的序列。使用这3条引物... 详细信息

目的探讨熔解曲线分析法用于HPA-15基因分型,了解大连地区汉族人群HPA-15基因多态性。方法设计合成HPA-15等位基因特异性引物和1条公共引物,其中在2条等位基因特异性引物的5'末端分别加入具有不同长度并富含GC碱基的序列。使用这3条引物,进行实时PCR反应。在PCR反应后,进行熔解曲线分析,依据PCR产物熔解温度的差异,进行基因分型。应用熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法对100名大连地区汉族人群的血液标本进行HPA-15基因分型。此外对熔解曲线分析法的重复性进行评价。结果 100个血液标本的熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法的基因分型结果是完全一致的。10个血标本的2次熔解曲线分析结果是一致的。大连地区汉族人群HPA-15a、-15b基因频率分别为0.58和0.42。大连地区汉族人群与国内部分地区汉族人群相比,HPA-15等位基因频率的差异无统计学意义(P>0.05)。与新疆维吾尔族人群相比,HPA-15等位基因频率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HPA的熔解曲线基因分型方法具有快速、简单、准确、通量高、重复性好等优点,要优于常规的PCR-SSP法。在国内HPA-15等位基因分布存在着种族差异。

关键词：熔解曲线分析血小板抗原基因分型 PCR-SSP 基因频率

辽宁汉族人群MICA、TNF基因微卫星多态性研究

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中国输血杂志 2011年第11期24卷 961-963页

作者：范亚欣于卫建段莹梁晓华大连市血液中心辽宁大连116001

目的探讨中国北方辽宁汉族人群HLA区域的MICA和TNF基因微卫星多态性分布。方法采用PCR-毛细管电泳方法检测197名正常无关个体的MICA基因第5外显子和TNF基因复合体TNFa微卫星的基因型。应用Arlequin和SPSS软件进行统计分析。结果辽宁汉... 详细信息

目的探讨中国北方辽宁汉族人群HLA区域的MICA和TNF基因微卫星多态性分布。方法采用PCR-毛细管电泳方法检测197名正常无关个体的MICA基因第5外显子和TNF基因复合体TNFa微卫星的基因型。应用Arlequin和SPSS软件进行统计分析。结果辽宁汉族人群MICA基因第5外显子存在5种等位基因,其中以A5.1最为常见(34.01%);TNFa位点存在13种等位基因,其中以a6最为常见(33.76%)。辽宁地区和南方部分地区汉族人群MICA基因第5外显子和TNFa位点的等位基因频率分布均具有统计学差异(P<0.01)。MICA基因第5外显子和TNFa位点间存在一定的连锁不平衡,如单体型A5-a6和A5.1-a7(P<0.05)。结论 MICA基因第5外显子和TNFa位点微卫星多态性分布在中国汉族人群中均存在地区差异。

关键词： MICA基因肿瘤坏死因子基因人类白细胞抗原微卫星多态性连锁不平衡

大连地区汉族人群血小板捐献者HPA基因多态性研究

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中国输血杂志 2011年第10期24卷 866-868页

作者：陈玫范亚欣于卫建勾玉彦大连市血液中心辽宁大连116001 大连医科大学检验系

目的对大连地区汉族人群血小板捐献者HPA-1～17基因多态性进行分析,建立本地化的血小板捐献者HPA分型资料库。方法应用PCR-SSP技术,对257名大连地区45岁以下的汉族无血缘关系的血小板捐献者HPA1～17系统基因进行分型。结果大连地区汉族... 详细信息

目的对大连地区汉族人群血小板捐献者HPA-1～17基因多态性进行分析,建立本地化的血小板捐献者HPA分型资料库。方法应用PCR-SSP技术,对257名大连地区45岁以下的汉族无血缘关系的血小板捐献者HPA1～17系统基因进行分型。结果大连地区汉族人群血小板捐献者的HPA基因频率如下:1a和1b分别为0.9728和0.0272;2a和2b分别为0.9475和0.0525;3a和3b分别为0.6615和0.3385;4a和4b分别为0.9942和0.0058;5a和5b分别为0.9805和0.0195;6a和6b分别为0.9767和0.0233;7a和7b分别为0.9981和0.0019;9a和9b分别为0.9961和0.0039;11a和11b分别为0.9805和0.0195;13a和13b分别为0.9961和0.0039;14a和14b分别为0.9981和0.0019;15a和15b分别为0.5584和0.4416;HPA-8、10、12、16、17只检测到a位点。经χ2检验,符合HW定律。结论 HPA基因多态性分布存在明显的种族和地域性差异。大连地区HPA基因分布有其独自的特点,其中HPA-3和HPA-15系统不配合率最高,在输血和免疫上具有重要的免疫学意义。

关键词： HPA 基因多态性 PCR-SSP

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病理性宽热幅高效价抗-I 1例

临床血液学杂志（输血与检验） 2020年第2期33卷 286-288,296页

作者：邵林楠张力王霓周世航于卫建大连市血液中心血型室辽宁大连116001

患者,女,36岁,患有非霍奇金淋巴瘤2年余,I V期B组,伴有腹痛、下颌痛15 d,有输血史及妊娠史,血红蛋白26g/L,血小板计数18×10^9/L。住院期间血型正反定型不符而转送我室。室温下ED TA抗凝血样管中可见红细胞凝集成果冻状,存在高效价冷凝... 详细信息

患者,女,36岁,患有非霍奇金淋巴瘤2年余,I V期B组,伴有腹痛、下颌痛15 d,有输血史及妊娠史,血红蛋白26g/L,血小板计数18×10^9/L。住院期间血型正反定型不符而转送我室。室温下ED TA抗凝血样管中可见红细胞凝集成果冻状,存在高效价冷凝集素。

关键词：抗-I 宽热幅病理性高效价