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亚硫酸氢盐-基因组测序法在检测基因异常甲基化中的应用

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中国肿瘤临床 2006年第22期33卷 1280-1283页

作者：陈立军王玮于利人倪虹呼文亮中国人民武装警察部队医学院生化教研室天津市300162 南开大学医学院

目的:介绍一种准确、敏感的检测多个标本、多个CG二核苷酸甲基化状态的方法。即亚硫酸氢盐-基因组测序法(BisulfiteGenomicSequencing,BGS)。方法:单链DNA的胞嘧啶可被亚硫酸氢盐修饰转变成尿嘧啶,而5'甲基胞嘧啶仍保持不变。这种修饰... 详细信息

目的:介绍一种准确、敏感的检测多个标本、多个CG二核苷酸甲基化状态的方法。即亚硫酸氢盐-基因组测序法(BisulfiteGenomicSequencing,BGS)。方法:单链DNA的胞嘧啶可被亚硫酸氢盐修饰转变成尿嘧啶,而5'甲基胞嘧啶仍保持不变。这种修饰处理可在甲基化和非甲基化基因组DNA间产生DNA序列差异,而这种DNA序列差异可通过BGS法较为灵敏地筛查出。利用该原理检测肝癌细胞AFP基因启动子区CG二核苷酸甲基化状态。结果:在癌细胞中发现两种异常甲基化,即高度甲基化及部分甲基化。结论:BGS法在基因甲基化检测中将有很大的应用潜能,为探讨肿瘤发生机制提供了新的分子分析方向。

关键词：亚硫酸氢盐-基因组测序法甲基化甲胎蛋白

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辽宁大经贸战略

辽宁大经贸战略

RNAi沉默STAT3对结直肠癌SW480细胞的抑制作用及其机制

1993年

作者：于利人吴登庸

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中国肿瘤生物治疗杂志 2014年第1期21卷 44-48页

作者：史娜于利人陈立军靳秋月天津武警后勤学院临床医学系生物化学与分子生物学教研室天津300309 天津武警后勤学院训练部天津300309

目的:慢病毒介导siRNA沉默结直肠癌SW480细胞内信号转导和转录活化因子3(signal transducer and activators of transcription 3,STAT3)的表达,观察其对SW480细胞凋亡、侵袭、集落形成及下游信号分子Mcl-1、caspase3表达的影响。方法:... 详细信息

目的:慢病毒介导siRNA沉默结直肠癌SW480细胞内信号转导和转录活化因子3(signal transducer and activators of transcription 3,STAT3)的表达,观察其对SW480细胞凋亡、侵袭、集落形成及下游信号分子Mcl-1、caspase3表达的影响。方法:用携带针对STAT3的siRNA的慢病毒Lenti-STAT3-siRNA感染SW480细胞,Real-time PCR和Western blotting分别检测Lenti-STAT3-siRNA感染对SW480细胞内STAT3、Mcl-1及caspase3 mRNA和蛋白表达的影响,流式细胞术检测下调STAT3表达对SW480细胞凋亡的影响。Transwell实验检测下调STAT3表达对SW480细胞侵袭能力的影响。结果:Lenti-STAT3-siRNA组SW480细胞STAT3 mRNA和蛋白的相对表达量较Lenti-GFP组和对照组显著降低(均P<0.05)。Lenti-STAT3-siRNA组SW480细胞集落形成能力受到抑制,对照组、Lenti-GFP组和Lenti-STAT3-siRNA组SW480细胞凋亡率分别为1.32%、4.92%及11.9%,Lenti-STAT3-siRNA组SW480细胞穿膜细胞数较对照组和Lenti-GFP组显著下降[(178.49±15.42)vs(340.20±41.31)、(320.61±13.30)个,均P<0.05]。Lenti-STAT3-siRNA组Mcl-1 mRNA和蛋白的相对表达量显著降低(均P<0.05),caspase3 mRNA和蛋白的相对表达量显著增加(均P<0.05)。结论:慢病毒Lenti-STAT3-siRNA感染能够有效下调结直肠癌细胞SW480内STAT3基因的表达,促进其凋亡并抑制其侵袭、集落形成能力,其机制可能与降低Mcl-1、提高caspase3的表达有关。

关键词：结直肠癌 SW480细胞 STAT3 信号转导通路慢病毒表达载体 siRNA

大鼠脑组织总超氧化物歧化酶、锰超氧化物歧化酶和铜锌超氧化物歧化酶活性在不同训练条件下的变化

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中国康复医学杂志 2011年第6期26卷 546-549,554页

作者：于利人周蔚陈立军靳秋月史娜武警医学院训练部临床管理处天津300162 武警医学院生物化学教研室

目的:通过建立SD大鼠跑台运动模型,观察不同训练负荷条件下大鼠脑组织总超氧化物歧化酶(T-SOD),锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)和铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)活性的变化。方法:实验建立有氧、无氧、有氧和无氧交替运动SD大鼠跑台运动训练模... 详细信息

目的:通过建立SD大鼠跑台运动模型,观察不同训练负荷条件下大鼠脑组织总超氧化物歧化酶(T-SOD),锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)和铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)活性的变化。方法:实验建立有氧、无氧、有氧和无氧交替运动SD大鼠跑台运动训练模型,有氧运动组采用递增负荷训练,无氧运动组采用高速间歇训练,交替运动组采用有氧运动与无氧运动交替训练,每组24只大鼠,均训练6周,并设立正常对照组(8只大鼠)。各组大鼠每训练2周处死8只,然后用机器匀浆法提取大鼠脑组织匀浆介质,可见分光光度计检测大鼠脑组织T-SOD,Mn-SOD和CuZn-SOD活性。结果:训练2周后,无氧组大鼠脑组织T-SOD水平低于正常对照组(P0.05)。结论:无氧运动训练一定时间后可以增加大鼠脑组织T-SOD的活性,交替运动大鼠训练2周对提高脑组织T-SOD和Mn-SOD活性最佳,运动对大鼠脑组织CuZn-SOD活性并无显著影响。

关键词：跑台运动大鼠脑组织超氧化物歧化酶

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实用管理心理学

实用管理心理学

1989年

作者：于利人徐烈淦孔宪忱等

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槲皮素诱导K562细胞凋亡机制探讨

中国肿瘤临床 2005年第9期32卷 505-507页

作者：于利人张东昌王瑞珉靳秋月陈立军中国人民武装警察部队医学院训练部临床管理处天津市300162 武警医学院附属医院外一科武警医学院基础部生物化学教研室

目的:研究槲皮素(quercetin)作用于白血病K562细胞后,诱导K562细胞发生凋亡,并探讨此过程中Caspase-3酶活性的变化。方法:体外培养K562细胞,应用MTT比色试验测定IC50,观察槲皮素的细胞毒性作用;应用Hoechst33342/PI双荧光染色观察细胞... 详细信息

目的:研究槲皮素(quercetin)作用于白血病K562细胞后,诱导K562细胞发生凋亡,并探讨此过程中Caspase-3酶活性的变化。方法:体外培养K562细胞,应用MTT比色试验测定IC50,观察槲皮素的细胞毒性作用;应用Hoechst33342/PI双荧光染色观察细胞核形态变化;应用CaspACETM分析试剂检测槲皮素诱导K562细胞凋亡时Caspase-3酶活性变化。结果:quercetin浓度为2×10-5mol/L、4×10-5mol/L、8×10-5mol/L时,细胞生长受到显著抑制,并呈剂量依赖性;不同浓度quercetin处理K562细胞48h后,应用MTT比色试验计算IC50为4×10-5mol/L;Hoechst33342/PI双荧光染色可观察到明显核固缩、凝集等细胞凋亡的形态学改变;Caspase-3酶活性明显升高(P<0.05),且升高程度与给药剂量呈正相关。结论:quercetin通过诱导白血病细胞凋亡发挥其抗肿瘤作用,Caspase-3途径诱导白血病细胞凋亡是其作用机制之一。

关键词：槲皮素细胞凋亡 Caspase-3