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骨髓间充质干细胞与内皮祖细胞对大鼠大部分肝切除合并缺血再灌注后损伤影响

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石河子大学学报（自然科学版） 2019年第4期37卷 498-506页

作者：雷振林芷伊于云宝杨雄峰郭炜张宏伟吴向未彭心宇石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科新疆石河子832002 石河子大学医学院第一附属医院肿瘤科新疆石河子832002

目的通过制造大鼠肝脏缺血再灌注损伤合并大范围肝切除模型,探讨将骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)与骨髓内皮前体细胞(BM-EPCs)分别经门静脉移植入模型肝内,观察其对于鼠肝脏缺血再灌注肝损伤修复和肝脏再生中的作用,以及将两种细胞联合移... 详细信息

目的通过制造大鼠肝脏缺血再灌注损伤合并大范围肝切除模型,探讨将骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)与骨髓内皮前体细胞(BM-EPCs)分别经门静脉移植入模型肝内,观察其对于鼠肝脏缺血再灌注肝损伤修复和肝脏再生中的作用,以及将两种细胞联合移植观察两种细胞是否存在协同作用促进肝脏缺血再灌注损伤修复和肝脏再生。方法通过细胞贴壁法从骨髓液中获得BM-MSCs和BM-EPCs。利用慢病毒携带绿色荧光蛋白(GFP)及红色荧光蛋白(RFP)分别对BM-MSCs及BM-EPCs进行细胞标记,为下一步将细胞移植入动物体内观察细胞的分布情况做准备。制作SD大鼠70%肝缺血再灌注损伤合并大范围肝切除手术模型,将SD大鼠随机分为四组:单独注射BM-MSCs(n=12)、单独BM-EPCs(n=12)、联合注射BM-MSCs+BM-EPCs组(n=12)、单独注射PBS空白对照组(n=12),按不同分组进行细胞移植,分别经大鼠门静脉注射GFP标记的BM-MSCs/200μL、RFP标记的BM-EPCs/200μL、BM-MSCs+BM-EPCs(BM-MSCs∶BM-EPCs=1∶1)/200μL、对照组注射PBS/200μL。以上四组分别在不同的时间段:术后第1天(n=4),第2天(n=4),第3天(n=4)各取腔静脉血检测血清AST、ALT及TNF-ɑ水平指标。肝脏组织做冰冻切片后利用免疫荧光方法动态观察BM-MSCs和BM-EPCs在肝脏内的分布。各组肝脏组织行常规病理切片观察肝脏病理损害及恢复的程度。最后各组取第3天的肝组织使用Tunnel法检测肝内细胞凋亡情况。结果与对照组比较,BM-MSCs组、BM-EPCs组、BM-MSCs+BM-EPCs组在肝缺血再灌注损伤合并大部分肝切除术后第1天、第2天、第3天大鼠血清AST及ALT、TNF-ɑ水平均明显下降(P<0.05),其中BM-MSCs组大鼠血清AST及ALT、TNF-ɑ水平均最低(P<0.05)。通过免疫荧光方法观察BM-MSCs及BM-EPCs可以特异性分布至肝脏损伤部位促进肝脏组织修复再生。肝组织HE染色病理及评分显示与对照组比较,BM-MSCs组、BM-EPCs组及BM-MSCs+BM-EPCs组肝内细胞损伤程度明显降低,然而与BM-MSCs+BM-EPCs组相比较,BM-MSCs组和BM-EPCs组肝内细胞损伤程度明显降低(P<0.05),BM-MSCs组与BM-EPCs组相比较肝内细胞损伤程度无统计学意义。与对照组比较BM-MSCs组、BM-EPCs组及BM-MSCs+BM-EPCs混合组均能降低肝内细胞的凋亡数量,但BM-MSCs组肝内凋亡细胞数量最少(P<0.05)。结论单独细胞移植组与联合移植组均对肝脏大部分切除合并缺血再灌注损伤起保护作用。但在本实验中联合移植组对肝功能以及肝内细胞的保护并未体现出协同作用。BM-MSCs和BM-EPCs可能通过降低血清TNF-ɑ水平抑制炎症反应从而在大部分肝切除合并肝缺血再灌注损伤后保护肝内细胞。

关键词：间充质干细胞肝脏缺血再灌注内皮祖细胞大鼠

内皮前体细胞促骨髓间充质干细胞向肝样细胞转化中的VEGF-Notch信号通路

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中国组织工程研究 2022年第31期26卷 4946-4953页

作者：于云宝陈琳伍希雅闫乐蓉苗章满洋荆仁一雷振褚志强张宏伟石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科新疆维吾尔自治区石河子市832008 成都京东方医院四川省成都市610000 石河子大学医学院新疆维吾尔自治区石河子市832008 国家卫生健康委中亚高发病防治重点实验室新疆维吾尔自治区石河子市832008

背景:在前期研究中发现骨髓血管内皮前体细胞在体外培养过程中通过旁分泌的方式产生了能够促进骨髓间充质干细胞分化的因子,血管内皮生长因子是其中之一。目的:探讨骨髓血管内皮前体细胞促进骨髓间充质干细胞向肝样细胞转化中是否有VEGF... 详细信息

背景:在前期研究中发现骨髓血管内皮前体细胞在体外培养过程中通过旁分泌的方式产生了能够促进骨髓间充质干细胞分化的因子,血管内皮生长因子是其中之一。目的:探讨骨髓血管内皮前体细胞促进骨髓间充质干细胞向肝样细胞转化中是否有VEGF-Notch信号通路参与。方法:①分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞和骨髓血管内皮前体细胞,将第3代骨髓间充质干细胞分为3组:实验组使用培养骨髓血管内皮前体细胞的不含血清及因子的上清液,按照体积1∶1的比例与肝细胞转化培养基混合;模型对照组使用无血清的α-MEM培养基,按照体积1∶1比例与肝细胞转化培养基混合;空白对照组使用正常α-MEM培养基。在培养3,5,7,9 d,应用免疫荧光检测白蛋白、甲胎蛋白的表达。②取第3代骨髓间充质干细胞向肝样细胞转化分组培养,在肝细胞转化培养基中按体积1∶1比例分别加入培养骨髓血管内皮前体细胞的无血清及因子的上清液、血管内皮生长因子、培养血管内皮生长因子干扰质粒转染骨髓血管内皮前体细胞的无血清及因子的上清液;对照组使用肝细胞转化培养基培养。培养48 h后,使用实时定量RT-PCR和Western blot方法检测骨髓间充质干细胞中Notch下游基因Dll4、Hes1及Hey1的表达变化。结果与结论:①空白对照组骨髓间充质干细胞中未见白蛋白、甲胎蛋白的表达,实验组和模型对照组骨髓间充质干细胞中甲胎蛋白、白蛋白表达水平均增高(P<0.05),其中实验组甲胎蛋白、白蛋白表达水平高于模型对照组(P<0.05);②肝细胞转化培养基中加入培养过骨髓血管内皮前体细胞的无血清及因子的上清液或血管内皮生长因子诱导骨髓间充质干细胞,Hey1、Dll4蛋白和mRNA表达均增高(P<0.05),Hes1蛋白和mRNA表达均降低(P<0.05);而在肝细胞转化培养基中加入血管内皮生长因子干扰质粒转染骨髓血管内皮前体细胞的无血清及因子的上清液诱导骨髓间充质干细胞,Dll4、Hey1蛋白和mRNA的表达均降低,Hes1蛋白和mRNA表达均增高(P<0.05);③结果表明,骨髓血管内皮前体细胞在骨髓间充质干细胞向肝样细胞转化中可能起一定促进作用,在此过程中可能有VEGF-Notch信号通路参与。

关键词：骨髓间充质干细胞内皮前体细胞血管内皮生长因子 Notch信号通路肝样细胞

单孔加一孔腹腔镜手术与传统腹腔镜手术治疗乙状结肠癌的疗效与分析

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中华普外科手术学杂志（电子版） 2024年第3期18卷 330-333页

作者：聂彬赵铁军于云宝李欢谢林峻成都京东方医院普外科四川成都610000

目的探讨单孔加一孔腹腔镜手术(SILS+1)与传统腹腔镜手术治疗乙状结肠癌的疗效。方法回顾性分析2019年3月至2021年5月86例乙状结肠癌患者资料,根据术式不同分为两组。研究组(n=40,采用SILS+1术式)和对照组(n=46,采用传统5孔法腹腔镜术式... 详细信息

目的探讨单孔加一孔腹腔镜手术(SILS+1)与传统腹腔镜手术治疗乙状结肠癌的疗效。方法回顾性分析2019年3月至2021年5月86例乙状结肠癌患者资料,根据术式不同分为两组。研究组(n=40,采用SILS+1术式)和对照组(n=46,采用传统5孔法腹腔镜术式)。用SPSS 19.0软件进行统计学分析。围手术期指标、术后标本病理的差异情况和手术前后炎性指标等计量资料用(x±s)表示,组间比较采用独立样本t检验。结果研究组患者总切口长度、首次下床时间、首次排便时间及术后住院时间均优于对照组(P0.05);所有患者术后C反应蛋白和肿瘤坏死因子α均较术前升高,但对照组升高更为显著(P0.05)。结论单孔加一孔腹腔镜手术不仅可达到传统腹腔镜手术同样的根治效果,同时还可减轻机体的炎性反应,从而加快患者的康复速度,且不影响患者的预后,值得临床推广应用。

关键词：乙状结肠癌乙状结肠癌根治术腹腔镜单孔加一孔炎性指标预后

胆汁对体外培养人细粒棘球蚴原头蚴生长发育的影响

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石河子大学学报（自然科学版） 2018年第2期36卷 259-264页

作者：郭炜王朝阳于云宝雷振朱东阳刘国生吴向未彭心宇张宏伟石河子大学医学院新疆石河子832002 石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科新疆石河子832002

目的探讨胆汁对体外培养人细粒棘球蚴原头蚴生长发育的影响。方法将人细粒棘球蚴原头蚴分别加入纯胆囊胆汁组(Ⅰ组)、RPMI-1640+肝内胆汁(2:1)组(Ⅱ组)及RPMI-1640组(Ⅲ组)中体外孵育。0.1%伊红染色在倒置显微镜下观察原头蚴的形态变化... 详细信息

目的探讨胆汁对体外培养人细粒棘球蚴原头蚴生长发育的影响。方法将人细粒棘球蚴原头蚴分别加入纯胆囊胆汁组(Ⅰ组)、RPMI-1640+肝内胆汁(2:1)组(Ⅱ组)及RPMI-1640组(Ⅲ组)中体外孵育。0.1%伊红染色在倒置显微镜下观察原头蚴的形态变化、活动度、顶泡形成情况、头节外翻及成囊发育等生长情况。结果Ⅰ组中95%原头蚴在第9天其外观及内部结构完全破坏;其在胆汁的刺激下第1天活动度达60%,约过半数的头节外翻,随着作用时间的延长,在第7天活动度逐渐降低,原头蚴在第6天后其头节外翻处于停滞状态,大部分原头蚴死亡。Ⅱ组中80%原头蚴在第14天仍能观察到清晰的外观及内部结构;该组原头蚴的活动度在第7天开始下降;头节外翻率随培养时间的增加逐渐增加。Ⅲ组中的原头蚴第14天仍可观察到具有较好的外观及清晰的内部结构;活动度随培养时间的延长而逐渐增加;该组中的原头蚴在第4天开始出现顶泡并随时间的延长出现顶泡的原头蚴数量逐渐增加;头节外翻率逐渐增加。通过连续培养观察,Ⅰ组中的原头蚴无成囊发育;Ⅱ组培养的大部分原头蚴体积缩小,头节内陷,仅少量培养的原头蚴成囊发育,大部分原头蚴随培养时间的延长走向死亡;Ⅲ组中原头蚴逐渐向囊方向发育,且数量逐渐增多。结论 (1)纯胆汁不能在短时间内灭活原头蚴,但随着作用时间的延长原头蚴的活性降低;(2)胆汁可以抑制原头蚴的成囊发育,但在胆汁存在环境下仍有原头蚴成囊。

关键词：人细粒棘球蚴胆汁原头蚴体外培养生长发育

EPCs在MSCs向肝样细胞转化中作用的初步探讨

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南通大学学报（医学版） 2020年第3期40卷 235-239,F0003页

作者：于云宝林芷伊满洋苗章朱东阳张宏伟彭心宇石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科石河子832008 石河子大学医学院第一附属医院肿瘤科石河子832008

目的:探讨内皮前体细胞(endothelial precursor cells,EPCs)在间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向肝样细胞转化中的作用。方法:分离培养SD大鼠MSCs和EPCs,取第3代MSCs向肝样细胞转化培养,培养过EPCs的无血清及因子的培养基(en... 详细信息

目的:探讨内皮前体细胞(endothelial precursor cells,EPCs)在间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向肝样细胞转化中的作用。方法:分离培养SD大鼠MSCs和EPCs,取第3代MSCs向肝样细胞转化培养,培养过EPCs的无血清及因子的培养基(endothelial progenitor cell-conditioned medium,EPCs-CM)、无血清的α-最低必需培养基(alpha minimal essential medium,α-MEM)分别与肝细胞转化培养基按1∶1比例配置,作为实验组和模型对照组,正常α-MEM培养基为空白对照组,分别观察细胞形态及数量变化;在培养3、5、7、9d时应用免疫荧光检测甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)、清蛋白(albumin,ALB)的表达。结果:空白对照组MSCs形态无明显变化;实验组与模型对照组细胞均出现肝样细胞形态。空白对照组未见AFP、ALB表达,模型对照组和实验组在3、5、7、9d AFP、ALB表达水平均增高,其中实验组比模型对照组AFP、ALB水平增高明显。结论:EPCs在MSCs向肝样细胞转化中可能起一定的促进作用。

关键词：间充质干细胞内皮前体细胞肝样细胞细胞转化

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可调节负压在老年巨大肝囊肿穿刺中的应用

中国现代普通外科进展 2020年第7期23卷 550-551页

作者：林芷伊王冬伟于云宝刘桂生张永国郭炜张宏伟石河子大学医学院第一附属医院肿瘤科新疆石河子832008 石河子大学医学院第一附属医院影像科新疆石河子832008 石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科新疆石河子832008

探讨B超引导下应用可调节负压在老年巨大肝囊肿穿刺中的临床价值。对10例老年巨大肝囊肿患者行B超引导下可调节负压肝囊肿穿刺术,观察患者术中反应、穿刺时间、术中单次穿刺液量、术后平均住院时间、术后短期并发症等情况。负压值设置为... 详细信息

探讨B超引导下应用可调节负压在老年巨大肝囊肿穿刺中的临床价值。对10例老年巨大肝囊肿患者行B超引导下可调节负压肝囊肿穿刺术,观察患者术中反应、穿刺时间、术中单次穿刺液量、术后平均住院时间、术后短期并发症等情况。负压值设置为200 mm Hg。10例患者平均年龄(72.1±7.1)岁,囊肿平均直径(16.8±4.5)cm,术中1例出现胸闷不适,给予加强吸氧后,自行缓解,操作继续。单次穿刺最多吸出2800 mL液体,最少吸出900 mL液体,平均为(1910.0±563.1)ml。穿刺负压放液最短耗时3min,最长耗时25 min,平均(10.2±6.3)min。穿刺后均未出现血色素降低、胸闷气短、心慌、呼吸困难等,无患者出现疼痛等不适,穿刺后患者前述囊肿占位症状均有明显改善,生命体征较穿刺前无显著变化。8例穿刺后第1天出院,2例穿刺后第2天出院。B超引导下可调节负压穿刺在老年巨大肝囊肿中,有一定的临床应用价值。

关键词：可调节负压穿刺治疗巨大肝囊肿老年人

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根治性胆囊切除术治疗胆囊癌效果

临床医药文献电子杂志 2019年第56期6卷 67-67页

作者：于云宝石河子大学医学院第一附属医院

目的研究根治性胆囊切除术治疗胆囊癌应用价值。方法选取我科2015年收治76例胆囊癌患者,均采用根治性胆囊切除术治疗方案。结果患者的手术时间为(72.3±18.6)min,术中出血量为(91.2±20.3)mL,并发症发生率为9.21%,术后1年、3年的生存率... 详细信息

目的研究根治性胆囊切除术治疗胆囊癌应用价值。方法选取我科2015年收治76例胆囊癌患者,均采用根治性胆囊切除术治疗方案。结果患者的手术时间为(72.3±18.6)min,术中出血量为(91.2±20.3)mL,并发症发生率为9.21%,术后1年、3年的生存率分别为86.84%、52.63%,术后1年、3年生存质量评分分别为(82.24±5.22)分、(69.45±6.78)分。结论应用根治性胆囊切除术治疗胆囊癌,并发症较少,术后生存率高、生活质量良好,是一种值得推广的手术方案。

关键词：根治性胆囊切除术胆囊癌效生存质量生存率

结石性胆囊炎患者开腹及腹腔镜手术切除胆囊治疗效果比较

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中西医结合心血管病电子杂志 2019年第16期7卷 33-33页

作者：于云宝石河子大学医学院第一附属医院

目的对比研究开腹及腹腔镜手术在结石性胆囊炎治疗中的应用价值。方法选取88例结石胆囊炎患者,随机分为两组,对实验组(n=44)予以腹腔镜下胆囊切除术治疗,对参照组(n=44)予以开腹手术治疗,对比二组患者的手术指标与并发症发生率。结果实... 详细信息

目的对比研究开腹及腹腔镜手术在结石性胆囊炎治疗中的应用价值。方法选取88例结石胆囊炎患者,随机分为两组,对实验组(n=44)予以腹腔镜下胆囊切除术治疗,对参照组(n=44)予以开腹手术治疗,对比二组患者的手术指标与并发症发生率。结果实验组患者的手术时间、术中出血量少于参照组,肛门排气时间快于参照组,实验组的并发症发生率(4.55%)也明显低于参照组(25.00%),组间对比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在结石性胆囊炎的治疗中,腹腔镜手术较比开腹手术更具优势,值得推广。

关键词：结石性胆囊炎开腹手术腹腔镜胆囊切除并发症

腹腔镜内镜微创保胆取息肉术与腹腔镜胆囊切除术治疗胆囊息肉术式对比的Meta分析

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农垦医学 2020年第6期42卷 507-511,515页

作者：朱东阳杨凌志杨剑孙红杨婧于云宝刘国升彭心宇石河子大学医学院新疆石河子832002 石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科新疆石河子832008

目的:系统性评价腹腔镜内镜微创保胆取息肉术与腹腔镜胆囊切除术治疗胆囊息肉的疗效有无差异。方法:计算机检索国内外各大数据库:Pubmed、Cochrane Library、CNKI、万方、CBM及维普等,检索时间为各数据库始建日期至2019年6月,检索腹腔... 详细信息

目的:系统性评价腹腔镜内镜微创保胆取息肉术与腹腔镜胆囊切除术治疗胆囊息肉的疗效有无差异。方法:计算机检索国内外各大数据库:Pubmed、Cochrane Library、CNKI、万方、CBM及维普等,检索时间为各数据库始建日期至2019年6月,检索腹腔镜内镜微创保胆取息肉术(laparoscopic choledochoscopic gallbladder-preserving surgery,L-CGPS)与腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)治疗胆囊息肉的随机对照试验。比较两组患者短期疗效指标如手术时间、术中出血量、术后第一次排气时间、住院时间以及术后恶心、呕吐、腹泻、胆漏的发生率,应用RevMan 5.3统计学软件进行分析。结果:共纳入7篇研究,共计999例胆囊息肉患者;腹腔镜内镜微创保胆取息肉术组手术时间短,术中出血量少,术后第一次排气时间短,住院时间短,术后恶心、呕吐、腹泻发生率低,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05);两组之间胆漏发生率无统计学差异。结论:腹腔镜内镜微创保胆取息肉术对部分患者具有与腹腔镜胆囊切除术相同的疗效,且短期并发症发生率低。

关键词：胆囊息肉腹腔镜内镜微创保胆术胆囊切除术 Meta分析