检索结果-南通市图书馆

轻金属 2001年第9期 37-39页

作者：乔贵林平果铝业公司广西平果531400

介绍 16 0kA电解槽 ,内衬扎固工艺采用八层铺糊扎固易出现过扎、剥层 ,通过改进后的扎固工艺即解决了过扎、剥层的问题 ,还缩短了扎固时间 ,并根据引进技术研究了扎固密度的检测方法。

关键词：预焙阳极电解槽扎固工艺改进检测铝电解槽

用鼻咽相对特异性调控区建立N-LMP1转基因小鼠

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第12期35卷 1072-1076页

作者：张玲蓝轲冯湘玲乔贵林沈新民石益民李虹姚开泰中南大学湘雅医学院肿瘤研究所长沙410078 中南大学湘雅医学院肿瘤研究所第一军医大学病理教研室广州510515

为了研究EBV LMP1在鼻咽癌发生发展中的作用 ,构建了EDL 2、PLUNC p双启动子调控鼻咽癌来源的LMP1(latentmembraneprotein 1,潜伏膜蛋白 1)的表达载体 ,采用受精卵前核显微注射法构建转基因小鼠。结果表明 ,在所获得的 5 8只转基因首建... 详细信息

为了研究EBV LMP1在鼻咽癌发生发展中的作用 ,构建了EDL 2、PLUNC p双启动子调控鼻咽癌来源的LMP1(latentmembraneprotein 1,潜伏膜蛋白 1)的表达载体 ,采用受精卵前核显微注射法构建转基因小鼠。结果表明 ,在所获得的 5 8只转基因首建鼠中 ,4只整合阳性 ,其中的一只转基因小鼠在鼻咽、前胃、舌根等部位检测到了外源基因的表达。

关键词：组织相对特异性调控区 N-LMP1 转基因小鼠

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日本曲霉和顶青霉的毒性试验

中国兽医学报 1999年第6期19卷 563-565页

作者：齐桂凤王度林乔贵林范泉水唐安建成都军区军事医学研究所云南昆明650032

对从云南省盘溪和剑川地区发霉稻草中分离出的日本曲霉(Aspergillus japonicusSaito),从盘溪发霉稻草和剑川马匹粪便中分离出的顶青霉(Penicillium corylophilum Dierckx)分别进行了荧光检测、脂肪分解2 项理化学特性鉴定。将2 株菌的... 详细信息

对从云南省盘溪和剑川地区发霉稻草中分离出的日本曲霉(Aspergillus japonicusSaito),从盘溪发霉稻草和剑川马匹粪便中分离出的顶青霉(Penicillium corylophilum Dierckx)分别进行了荧光检测、脂肪分解2 项理化学特性鉴定。将2 株菌的固体和液体培养物,置室温产毒再经杀菌等方法处理后,进行了家兔皮肤涂抹试验,雏鸭和家兔的菌粮饲喂试验,小鼠皮下、腹腔注射试验,家兔耳缘静脉注射试验。日本曲霉能产生荧光,分解脂肪,使家兔皮肤增厚和引起红肿、结痂,能引起部分试验雏鸭、全部试验小鼠、部分试验家兔死亡;顶青霉能产生荧光,使家兔皮肤增厚和出现轻微红肿反应,能引起全部试验小鼠死亡。剖检试验动物均见程度不同的病理学改变。以上结果表明,日本曲霉和顶青霉对小动物均具有一定的毒力。

关键词：日本曲霉顶青霉雏鸭小鼠家兔毒性试验

牛BLG/tPA和牛as1酪蛋白/tPA基因在家兔乳腺中的暂时表达

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中国兽医学报 2001年第6期21卷 576-578页

作者：乔贵林赵君赖良学金鼎李银聚扈荣良殷震解放军军需大学军事兽医研究所吉林长春130062

为鉴定和筛选用于制备 t PA转基因动物乳腺生物反应器的高效表达载体 ,试验分别以 1.1kb牛 b-乳球蛋白(BL G)基因、1.0 kb牛 as1酪蛋白基因 5′端侧翼调控序列与 1.7kb经过改造的人组织纤溶酶原激活剂 (t PA) c DNA融合 ,构建了 p BL G-... 详细信息

为鉴定和筛选用于制备 t PA转基因动物乳腺生物反应器的高效表达载体 ,试验分别以 1.1kb牛 b-乳球蛋白(BL G)基因、1.0 kb牛 as1酪蛋白基因 5′端侧翼调控序列与 1.7kb经过改造的人组织纤溶酶原激活剂 (t PA) c DNA融合 ,构建了 p BL G- PA 2和 pas1- PA2 2个乳腺定位表达载体。载体经酶切鉴定正确后 ,用脂质体包裹 ,并用毛细玻璃管经乳头管导入妊娠中后期的家兔乳腺 ,进行暂时表达。分别于家兔分娩后 1～ 15 d采奶 ,采用琼脂糖平板溶圈法测定乳汁中 t PA的含量和活性。结果 2个载体均获得表达 ,且 p BL G- PA2表达水平高于 pas1- PA 2。 p BL G- PA2和 pas1-PA2在家兔乳汁中的含量分别为 2 0 0～ 85 0μg/L和 5 0～ 2 5 0μg/L。

关键词：牛BLG 牛asl酪蛋白转基因动物家兔乳腺

用曲细精管微注射法建立绿色荧光蛋白转基因小鼠

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第一军医大学学报 2002年第3期22卷 250-253页

作者：沈新明乔贵林张玲江培洲黄华姚开泰第一军医大学肿瘤研究所广东广州510515

目的研究曲细精管微注射法建立转基因小鼠的可行性。方法选取人巨细胞病毒启动子调控的增强型绿色荧光蛋白(pCMV-EGFP)表达载体,应用体视解剖镜和显微注射仪将不同剂量的被脂质体包裹的质粒DNA注射到不同年龄的KM小鼠曲细精管内。在注射... 详细信息

目的研究曲细精管微注射法建立转基因小鼠的可行性。方法选取人巨细胞病毒启动子调控的增强型绿色荧光蛋白(pCMV-EGFP)表达载体,应用体视解剖镜和显微注射仪将不同剂量的被脂质体包裹的质粒DNA注射到不同年龄的KM小鼠曲细精管内。在注射后40d左右,雄鼠与雌鼠合笼交配;分娩后3周,剪取仔鼠尾,提取基因组DNA,应用PCR、Southernblotting技术进行整合检测。处死2只首建小鼠,荧光显微镜观察组织冰冻切片中EGFP的表达。结果共注射41只雄性小鼠,存活34只,其中32只具有交配、受精能力,获得仔鼠382只。仔鼠经检测,PCR阳性133只,Southernblotting阳性15只。小鼠的年龄、注射剂量与EGFP的整合率没有明显关系,荧光显微镜观察下没有观察到组织冰冻切片中EGFP明显表达。结论曲细精管微注射法是动物基因转移的一条简便可行的新途径。

关键词：曲细精管微注射绿色荧光蛋白转基因小鼠

牛BLG/hEPO和大鼠WAP/hEPO基因在家兔乳腺中的表达

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中国兽医学报 2002年第3期22卷 238-240页

作者：乔贵林赵君岳军明宇丽赖良学张守峰王风阳扈荣良殷震解放军军需大学军事兽医研究所吉林长春130062

将人红细胞生成素 (h EPO)基因组 DNA(g DNA)与 1.1kb牛 β-乳球蛋白 (BL G)基因的 5′端上游调控序列融合 ,构建了 p CMV- BL G- EPO- b GH poly A(p CBEA)乳腺定位表达载体。该载体与已构建的大鼠乳清酸蛋白 (WAP)基因 5′端上游调控... 详细信息

将人红细胞生成素 (h EPO)基因组 DNA(g DNA)与 1.1kb牛 β-乳球蛋白 (BL G)基因的 5′端上游调控序列融合 ,构建了 p CMV- BL G- EPO- b GH poly A(p CBEA)乳腺定位表达载体。该载体与已构建的大鼠乳清酸蛋白 (WAP)基因 5′端上游调控序列和 h EPO融合基因 p WAP- EPO- WAP3′U TR(p WE3′)和 p CMV- WAP- EPO- b GH poly A (p CWEA )经脂质体包裹后 ,通过显微外科方法 ,经乳腺导管注入妊娠中后期家兔乳腺内 ,进行短暂表达。于家兔分娩后 1～ 2 5 d采奶 ,EL ISA检测乳汁中 EPO含量 ,3个载体均获得表达。表达水平从高到低依次为 p CWEA、p CBEA、p WE3′;表达量为 0 .116～ 0 .75 3μg/ L 。

关键词：牛 BLG hEPO 大鼠 WAP 家兔乳腺基因表达

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犬瘟热病毒抗体检测方法的比较研究

中国兽医学报 1997年第1期17卷 26-29页

作者：乔贵林夏咸柱王度林贾补年袁书智林庆年王允海解放军农牧大学军事兽医研究所

用犬瘟热（ＣＤ）弱毒和自制的高免犬血清，建立了检测犬瘟热病毒（ＣＤＶ）抗体的中和（ＳＮ）试验、间接荧光抗体技术（ＩＦＡＴ）和间接免疫酶染色法。这３种方法对３８份ＣＤ弱毒疫苗免疫犬血清抗体效价的测定结果表明，当被检血清... 详细信息

用犬瘟热（ＣＤ）弱毒和自制的高免犬血清，建立了检测犬瘟热病毒（ＣＤＶ）抗体的中和（ＳＮ）试验、间接荧光抗体技术（ＩＦＡＴ）和间接免疫酶染色法。这３种方法对３８份ＣＤ弱毒疫苗免疫犬血清抗体效价的测定结果表明，当被检血清稀释度为１∶１００时，ＳＮ试验、ＩＦＡＴ和间接免疫酶染色法测定时的阳性血清数分别为２９，７和３１份，ＩＦＡＴ和间接免疫酶染色法测定结果相对于ＳＮ试验结果的符合率分别为４２．１％和９４．７％。同时发现，当ＳＮ试验测定的血清效价在１∶１００以上时，ＩＦＡＴ测定结果总是在１∶２５以上，间接免疫酶染色法测定结果总是在１∶１００以上。３种方法以各自初步确定的ＣＤＶ血清抗体效价完全保护值指标计算所测血清的完全保护率，ＳＮ试验为７６．３％，ＩＦＡＴ为７８．９％，间接免疫酶染色法为８１．６％。据此认为，ＩＦＡＴ和间接免疫酶染色法均可部分代替ＳＮ试验用于ＣＤ疫苗免疫效果的评价。

关键词：犬瘟热病毒抗体间接荧光抗体间接免疫酶染色

人红细胞生成素转基因小鼠乳腺生物反应器的建立

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中国兽医学报 1999年第4期19卷 344-347页

作者：乔贵林岳军明梅柱中阎喜军赖良学黄伟民赵君殷震解放军农牧大学军事兽医研究所长春130062

将２．４ｋｂ的人红细胞生成素（ｈＥＰＯ）基因组基因（ｇＤＮＡ）ｍｉｎｉｇｅｎｅ克隆于０．９７７ｋｂ大鼠乳清酸蛋白（ＷＡＰ）５′调控序列下游和０．８５ｋｂＷＡＰ３′侧翼序列上游，构建了ｈＥＰ ... 详细信息

将２．４ｋｂ的人红细胞生成素（ｈＥＰＯ）基因组基因（ｇＤＮＡ）ｍｉｎｉｇｅｎｅ克隆于０．９７７ｋｂ大鼠乳清酸蛋白（ＷＡＰ）５′调控序列下游和０．８５ｋｂＷＡＰ３′侧翼序列上游，构建了ｈＥＰＯ乳腺定位表达载体ｐＷＡＰ ＥＰＯ ＷＡＰ３′ ＵＴＲ（ｐＷＥ３′）。载体经ＳａｃＩＩ酶切、回收并纯化后作为目的基因，通过显微注射方法导入小鼠受精卵的雄原核，共注射５００枚卵，移植３００枚卵至２９只假孕母鼠输卵管内，获得仔鼠５５只。采取鼠尾，提取基因组。经ＰＣＲ检测，阳性鼠２２只；Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ检测，阳性鼠１６只，其中９只母鼠，７只公鼠。将１６只首建者小鼠分别与非转基因鼠交配，共获得Ｆ１代仔鼠１５７只。应用ＰＣＲ方法对Ｆ１代小鼠进行检测，结果首建者１号母鼠所生的６只仔鼠中有３只为阳性。与此同时，于９只雌性首建者分娩后第１０天采奶，应用ＥＬＩＳＡ方法对乳汁中的ＥＰＯ进行检测，结果６只母鼠获得表达，表达量为０．１２～１．５９ μｇ／Ｌ。

关键词：人红细胞生成素转基因小鼠乳腺表达

人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2基因的克隆与鉴定

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第一军医大学学报 2001年第4期21卷 248-250页

作者：陈政良张丽芸乔贵林卢晓第一军医大学免疫学教研室广东广州510515 第一军医大学病理教研室广东广州510515

目的获得人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶－２（ＭＡＳＰ－２）编码区基因。方法采用ＲＴ－巢式ＰＣＲ技术从人胎肝组织总ＲＮＡ扩增目的cＤＮＡ片段，克隆人ｐＧＥＭ－Ｔ载体，酶切图谱分析和测序鉴定。结果获得了编码合信号... 详细信息

目的获得人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶－２（ＭＡＳＰ－２）编码区基因。方法采用ＲＴ－巢式ＰＣＲ技术从人胎肝组织总ＲＮＡ扩增目的cＤＮＡ片段，克隆人ｐＧＥＭ－Ｔ载体，酶切图谱分析和测序鉴定。结果获得了编码合信号顺序的ＭＡＳＰ－２肽链全长cＤＮＡ，将其与pＧＥＭ－Ｔ载体连接，转化大肠杆菌ＴＧ１，建立了ＭＡＳＰ－２的重组克隆。酶切图谱与微机分析结果无异；序列分析表明，与报道的人ＭＡＳＰ－２ｃＤＮＡ序列一致。结论成功克隆了人ＭＡＳＰ－２基因，为深入研究补体凝集素途径的激活机制和甘露聚糖结合凝集素基因突变引起免疫缺损的发病机制奠定了基础。

关键词：甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2 聚合酶链反应基因克隆 MBL MASP-2

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人c-myc乳腺定位表达转基因小鼠的建立

中国兽医学报 2002年第6期22卷 587-589页

作者：赵君张守峰刘彬任文陟宇丽乔贵林扈荣良殷震解放军军需大学军事兽医研究所解放军基因工程重点实验室吉林长春130062 湖南大学生命科学院湖南长沙410000 暨南大学生命科学院广东广州510000

以含有 1.6 kb的小鼠乳清酸蛋白 (WAP)上游调序列的 p CAT- WAP和含有人 c- myc c DNA的 p WM为原始质粒 ,构建了 WAP启动子调控下的 c- myc乳腺定位表达载体 p WCS。载体用 Bgl +Bam H 酶切 ,回收 3.5 kb的基因片段 WAP- c- myc- SV40 ... 详细信息

以含有 1.6 kb的小鼠乳清酸蛋白 (WAP)上游调序列的 p CAT- WAP和含有人 c- myc c DNA的 p WM为原始质粒 ,构建了 WAP启动子调控下的 c- myc乳腺定位表达载体 p WCS。载体用 Bgl +Bam H 酶切 ,回收 3.5 kb的基因片段 WAP- c- myc- SV40 Poly A,通过显微注射方法导入 C5 7BL/ 6 J× DBA/ 2 JF1 代小鼠受精卵的雄原核内。共注射10 0 0枚卵 ,将存活的约 6 0 0枚卵分别移植至 2 9只假孕母鼠输卵管内 ,获得仔鼠 45只。PCR检测 ,阳性鼠 9只 ,South-ern blot检测 ,阳性鼠 3只 ,其中 1只母鼠 ,2只公鼠 ,在饲养过程中 ,1只母鼠意外死亡。对 2只转基因公鼠的 F1代PCR检测表明 ,仅 1只公鼠具有遗传性 ,在所生的 2 7只 F1代小鼠中有 13只为 PCR阳性。

关键词：转基因小鼠乳腺定位表达 c-myc原癌基因乳腺癌发病机制