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岩藻黄素-油酸-蛋白自组装微粒制备及肠吸收特性研究

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岩藻黄素-油酸-蛋白自组装微粒制备及肠吸收特性研究

作者：乔子纯集美大学

学位级别：硕士

岩藻黄素是来源于海洋褐藻的一种叶黄素物质,具有抗氧化、减肥、视力保护等多种生理活性。但是,由于其稳定性差、在亲水环境下难以溶解和吸收,限制了岩藻黄素在食品工业中的应用。蛋白质是活性成分递送体系的重要载体,研究岩藻黄素与蛋... 详细信息

岩藻黄素是来源于海洋褐藻的一种叶黄素物质,具有抗氧化、减肥、视力保护等多种生理活性。但是,由于其稳定性差、在亲水环境下难以溶解和吸收,限制了岩藻黄素在食品工业中的应用。蛋白质是活性成分递送体系的重要载体,研究岩藻黄素与蛋白质的相互作用,改善其在亲水环境下的分散特性及肠吸收效果,对开发以岩藻黄素为核心功效成分的保健食品、营养强化食品具有重要意义。本研究探讨了岩藻黄素的加工稳定性及其在不同膳食形态下的吸收效果;构建了具有强吸收特性的水分散型岩藻黄素-油酸(Oleic acid,OA)-蛋白自组装微粒;进一步分析了岩藻黄素与蛋白质的组装机制,并初步探讨了岩藻黄素-油酸-蛋白微粒的体内抗氧化活性及视力保护功能。研究结果如下:1.以岩藻黄素特征光谱变化为指标,探讨了岩藻黄素加工稳定性,结果发现,岩藻黄素对高压热处理、高温、光照、酸性pH等加工条件十分敏感,降解率高达50%-76%,但在碱性环境下较为稳定。通过HPLC检测岩藻黄素在4 h的小鼠血清响应值,对比观察了岩藻黄素的3种膳食形态(直接口服、常规蛋白包埋、油脂递送)的肠吸收差异。结果表明,岩藻黄素直接口服的吸收利用率低,其血清响应值仅为65.6 pmol/mL;与牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)组装后,其血清响应值提高到94.5 pmol/mL,但与食用大豆油递送效果的369.2 pmol/mL相比,常规蛋白包埋对改善岩藻黄素的肠吸收效果仍然十分有限。此外,研究还发现,灌胃大豆油溶解的岩藻黄素4h后,小鼠血清中的岩藻黄醇、墨角藻黄质A(Amarouciaxanthin A)和岩藻黄素比例分别为26.43%、50.35%、23.21%;岩藻黄素经蛋白包埋后,这3种血清成分比例则变为26.03%、18.83%、55.13%。结果说明,递送介质能有效调控岩藻黄素的吸收形式,从而影响其生理功能。2.采用pH-驱动法构建强吸收特性的水分散型岩藻黄素-油酸-蛋白自组装微粒。以小鼠血清岩藻黄素响应值为评价指标,系统研究了油酸浓度、蛋白浓度、蛋白结构、初始碱性pH等反应条件对包埋颗粒形态、岩藻黄素包埋率及肠吸收效果的影响。动态光散射检测结果表明,以BSA、酪蛋白酸钠(Sodium caseinate,NaCas)、玉米醇溶蛋白(zein)、酪蛋白酸钠-玉米醇溶蛋白复合物为载体制备的微粒粒径分别为211.93 nm、480.70 nm、292.77 nm和236.97 nm,包埋率分别为83.70%、79.00%、88.70%、80.15%;与其他3种蛋白载体相比,BSA更有利于岩藻黄素的消化吸收;当油酸与BSA摩尔比为4:1,反应初始pH为1 1,BSA浓度为1%时,制备得到的岩藻黄素-油酸-BSA微粒的吸收效果最好,其在4h的血清响应值为336.9 pmol/mL,达到了油脂递送效果的91.2%;与传统蛋白包埋及油脂递送相比,本研究所构建的油酸-BSA递送体系能够促使岩藻黄素主要以其原始形态被肠道吸收(岩藻黄素占86.99%);该包埋微粒的水溶液透光率(700nm)达到95%,显示了良好的水分散性与稳定性。3.荧光光谱分析结果显示,油酸的介入不会影响岩藻黄素对蛋白荧光的猝灭;进一步通过Stern-Volmer方程分析,表明岩藻黄素与蛋白以静态模式通过疏水作用力进行结合,岩藻黄素与蛋白的理论结合比可以达到2:1,且BSA与岩藻黄素之间的结合力最大。通过BSA对不同浓度岩藻黄素的包埋能力实验结果表明,油酸的介入使BSA与岩藻黄素的结合能力提高5倍。分子对接(Molecular Docking,MD)结果显示油酸、岩藻黄素分别结合在 BSA 的不同区域。傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)结果表明,油酸的存在对4种蛋白有效包埋岩藻黄素没有明显影响。连续15天给小鼠灌胃岩藻黄素-油酸-BSA微粒后,利用HPLC分析,在小鼠眼睛组织中仅检测到了岩藻黄醇的积累,表明岩藻黄素的视力保护功能主要通过其消化产物岩藻黄醇来发挥作用。此外,体内总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)测定结果显示,直接灌胃岩藻黄素组的小鼠血清及眼睛总抗氧化能力分别提高了 21.9%和21.14%;岩藻黄素-油酸-BSA微粒组的小鼠血清及眼睛总抗氧化能力则提高了 55.90%和39.27%,说明本研究所构建的水分散型岩藻黄素-油酸-BSA自组装微粒具有良好的视力保护功能。

关键词：岩藻黄素蛋白质岩藻黄素-蛋白微粒肠吸收抗氧化活性

外源油菜素内酯对‘美乐’葡萄生理生化特性和果实品质的影响

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外源油菜素内酯对‘美乐’葡萄生理生化特性和果实品质的影响

作者：乔子纯宁夏大学

学位级别：硕士

本研究以11a生‘美乐’（Vitis vinfera L.cv.Merlot）葡萄为试材,于果实膨大期前（花后30 d）和转色前（花后53d）分别喷施0.2、0.4和0.6 mg/L的2,4-表油菜素内酯（2,4-Epibrassinolide,EBR,纯度＞90%）,以此来研究不同浓度EBR处理对... 详细信息

本研究以11a生‘美乐’（Vitis vinfera L.cv.Merlot）葡萄为试材,于果实膨大期前（花后30 d）和转色前（花后53d）分别喷施0.2、0.4和0.6 mg/L的2,4-表油菜素内酯（2,4-Epibrassinolide,EBR,纯度＞90%）,以此来研究不同浓度EBR处理对‘美乐’葡萄成熟过程中生理生化特性和果实品质的影响,为实际生产中进一步应用EBR调控酿酒葡萄生长、光合和果实品质提供一定的理论依据。本研究结果如下:1.EBR对‘美乐’葡萄不同生育期光合特性日变化的影响。各处理在果实膨大期、转色期和成熟期均可以提高Tr和Gs,0.4 mg/L EBR处理的提高效果较好。在果实膨大期前进行EBR处理,0.2 mg/L EBR处理在果实膨大期和转色期对美乐葡萄Pn的提高效果较好,0.4 mg/L EBR处理在成熟期对Pn的提高效果较好,0.6 mg/L EBR处理在果实膨大期会降低植物的Pn;在转色期前进行EBR处理,各处理在转色期和成熟期均可以提高Pn。2.EBR对‘美乐’葡萄叶片光合色素和Rubisco酶活性的影响。在果实膨大期前进行EBR处理,0.6 mg/L EBR处理在处理前期会抑制Rubisco酶活性;在转色期前进行EBR处理,各个处理均可以提高Rubisco酶活性,0.4 mg/LEBR处理在转色期可提高各个光合色素的含量。两种处理下,0.4mg/LEBR处理均可提高Pn与各个光合色素的相关性,呈显著正相关,0.6 mg/L EBR处理均可以提高Pn和类胡萝卜素的相关性,且0.6 mg/L EBR处理的Pn与Rubisco的相关性均呈显著正相关。3.EBR对‘美乐’葡萄叶片荧光参数的影响。各处理从花后60d到90d会降低叶片的Fo,在成熟过程中提高Fv/Fm,0.4mg/LEBR处理对Yield、qP和ETR的提高效果较好,对照组的NPQ先呈稳定趋势之后逐渐下降,可能是由于植物衰老而导致的热耗散受阻,EBR处理可提高NPQ,说明EBR处理可以缓解这一现象,0.2 mg/LEBR处理对NPQ的提高效果较好。4.EBR对‘美乐’葡萄叶片抗氧化特性和果实品质的影响。两种处理下,0.4mg/LEBR处理在处理前期减少了 Pro和MDA的含量,提高了 SOD和POD的酶活性,提高了果树的抗逆性,在成熟期效果不显著,0.4 mg/L EBR处理均可使葡萄果实提前完成转色,0.4和0.6 mg/L EBR处理在转色期均显著降低了单宁和总酚的含量,0.2和0.4 mg/L EBR处理可促进总糖、蔗糖和还原糖的积累,提高果实品质。

关键词： EBR 美乐生理特性果实品质

外源6-BA对‘美乐’葡萄花色苷合成的影响

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果树学报 2020年第5期37卷 668-676页

作者：乔子纯柳巧禛代红军宁夏大学农学院银川750021

【目的】探究6-BA对葡萄花色苷合成的影响。【方法】以酿酒葡萄’美乐’为试材,喷施不同浓度的6-BA,以喷施清水为对照,研究6-BA对花色苷含量、组分及其生物合成途径相关基因表达的影响。【结果】100和200 mg·L^-16-BA处理提高了果实着... 详细信息

【目的】探究6-BA对葡萄花色苷合成的影响。【方法】以酿酒葡萄’美乐’为试材,喷施不同浓度的6-BA,以喷施清水为对照,研究6-BA对花色苷含量、组分及其生物合成途径相关基因表达的影响。【结果】100和200 mg·L^-16-BA处理提高了果实着色百分率和内源激素ABA的含量,其中200 mg·L^-1处理促进了花青素的积累,其含量是对照组的4.82倍,相关性分析表明200 mg·L^-1处理组的蔗糖与花色苷含量呈显著正相关。100和200 mg·L^-16-BA处理组的葡萄果实CHS1、F3’H、F3’5’H和UFGT基因的表达量在花后90 d显著提高,6-BA处理组通过影响F3’H和F3’5’H基因的表达量来影响不同花色苷的含量,从而影响果皮色泽。【结论】在果实着色后期,低质量浓度的6-BA通过提高内源激素ABA、可溶性总糖的含量以及相关基因的表达量,促进了花色苷的积累,其中200 mg·L^-16-BA处理效果更佳。

关键词： '美乐’葡萄 6-BA 花色苷基因表达

外源油菜素内酯对美乐葡萄叶片光合特性和果实品质的影响

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农业科学研究 2023年第1期44卷 27-33页

作者：刘妍乔子纯殷梦婷郭学良汪月宁贺琰代红军王振平宁夏大学农学院宁夏银川750021

研究了外源油菜素内酯(EBR)对美乐葡萄叶片光合特性和果实品质的影响。试材选用12年生美乐葡萄,在转色期前(花后53 d),用不同质量浓度的EBR溶液(0、0.2、0.4、0.6 mg/L)均匀喷施果树至叶片滴水,对照组处理选用蒸馏水,测定葡萄叶片光合... 详细信息

研究了外源油菜素内酯(EBR)对美乐葡萄叶片光合特性和果实品质的影响。试材选用12年生美乐葡萄,在转色期前(花后53 d),用不同质量浓度的EBR溶液(0、0.2、0.4、0.6 mg/L)均匀喷施果树至叶片滴水,对照组处理选用蒸馏水,测定葡萄叶片光合性能和果实品质相关指标。结果表明:与CK相比,0.4 mg/L EBR处理组光合速率提高了12.26%,蒸腾速率、气孔导度分别提高了58.82%和34.96%,变化趋势均为单峰曲线;最大光化学效率提高了11.11%;果实可滴定酸在0.2 mg/L EBR处理下明显降低;总酚、单宁和花色苷在0.4 mg/L EBR处理下分别提高11.48%、8.32%和28.38%。因此,喷施0.4 mg/L EBR对提高美乐葡萄叶片光合特性和果实品质效果最佳。

关键词： EBR 美乐光合特性果实品质

离子色谱-脉冲安培法检测食品中功能性低聚异麦芽糖

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食品工业科技 2021年第13期42卷 262-267页

作者：徐佳佳刘玉峰孔凡华乔子纯崔亚娟徐锡媛郑晓玮李东北京市营养源研究所北京100069

目的:建立一种离子色谱-脉冲安培检测法测定食品中的异麦芽糖、异麦芽三糖、潘糖的方法。方法:样品经水溶解提取,酸沉淀蛋白后,过反相固相萃取柱净化,以赛默飞CarboPacTM PA20阴离子交换柱为分析柱,以水(A)、200 mmol/L氢氧化钠(B)为淋... 详细信息

目的:建立一种离子色谱-脉冲安培检测法测定食品中的异麦芽糖、异麦芽三糖、潘糖的方法。方法:样品经水溶解提取,酸沉淀蛋白后,过反相固相萃取柱净化,以赛默飞CarboPacTM PA20阴离子交换柱为分析柱,以水(A)、200 mmol/L氢氧化钠(B)为淋洗液梯度洗脱,离子色谱-脉冲安培检测器定量测定。结果:在0.8~16.0 mg/L范围内线性关系良好,相关系数r均大于0.999,异麦芽糖、异麦芽三糖、潘糖精密度RSD分别为3.42%、2.34%、1.11%,回收率在85.63%~105.22%之间,相对标准偏差在2.48%~4.49%之间。结论:该方法前处理简单,专一性强,结果准确度高,适用于多种食品中的低聚异麦芽糖的测定。

关键词：异麦芽糖异麦芽三糖潘糖离子色谱法

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功能性低聚糖和糖醇对酒类营养价值提升研究

中国食物与营养 2023年第8期29卷 17-21页

作者：孔凡华乔宗伟李明阳张淏惟白沙沙徐佳佳乔子纯田荣荣崔亚娟北京市营养源研究所有限公司北京100069 中国轻工业浓香型白酒固态发酵重点实验室四川宜宾644000 北京城市学院生物医药学部北京100083

目的:研究酒中功能性低聚糖和糖醇的营养价值。方法:采集30种白酒和10种黄酒、露酒、配制酒等酒样品,用离子色谱-脉冲安培法测定酒样品中低聚异麦芽糖和糖醇的含量。结果:白酒样品中含有的低聚异麦芽糖主要是异麦芽糖,同一香型,不同酒... 详细信息

目的:研究酒中功能性低聚糖和糖醇的营养价值。方法:采集30种白酒和10种黄酒、露酒、配制酒等酒样品,用离子色谱-脉冲安培法测定酒样品中低聚异麦芽糖和糖醇的含量。结果:白酒样品中含有的低聚异麦芽糖主要是异麦芽糖,同一香型,不同酒精度的浓香型白酒中异麦芽糖含量差异很大,其他香型的白酒中异麦芽糖含量很低或未检出。白酒样品中含量比较多的糖醇是甘露糖醇、山梨糖醇和木糖醇。4个酱香型白酒中甘露糖醇含量最高,浓酱兼香型、凤香型和董香型白酒中甘露糖醇次之,清香型白酒中甘露糖醇含量最低。浓香型白酒中山梨糖醇含量较高,酱香型、浓酱兼香型、凤香型和董香型白酒中山梨糖醇含量次之,清香型白酒中山梨糖醇含量最低。露酒和配制酒中含有的糖醇主要是甘露糖醇、山梨糖醇和木糖醇。果酒中低聚异麦芽糖和糖醇含量均较低。黄酒样品中低聚异麦芽糖含量很高,主要是异麦芽糖和异麦芽三糖。结论:30种白酒和10种黄酒、露酒、配制酒等酒样品中低聚异麦芽糖和糖醇类物质种类大致相同,但是含量差异很大,深入研究中国白酒中的功能因子,有利于中国白酒行业的发展,有助于弘扬中国白酒文化。

关键词：离子色谱-脉冲安培法白酒低聚异麦芽糖糖醇

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油菜素内酯对酿酒葡萄果实着色及品质的影响

农业科学研究 2021年第3期42卷 38-42页

作者：赵芳芳孙艳丽乔子纯贺琰代红军宁夏大学农学院宁夏银川750021

研究外源油菜素内酯(EBR)对酿酒葡萄美乐果实着色及品质的影响,以5年生美乐为试材,于转色期前,用不同质量浓度的EBR溶液(0、0.2、0.4、0.6 mg/L)处理葡萄果穗,测定葡萄果实着色率、花色苷含量及果实品质相关指标,分析糖含量与葡萄果皮... 详细信息

研究外源油菜素内酯(EBR)对酿酒葡萄美乐果实着色及品质的影响,以5年生美乐为试材,于转色期前,用不同质量浓度的EBR溶液(0、0.2、0.4、0.6 mg/L)处理葡萄果穗,测定葡萄果实着色率、花色苷含量及果实品质相关指标,分析糖含量与葡萄果皮花色苷的相关性。结果表明:EBR处理可提高果实着色率和花色苷含量,其中0.6 mg/L EBR处理的葡萄着色率和花色苷提高了13.03%和21.07%;0.6 mg/L处理可使果实中可溶性固形物和可溶性总糖的含量分别提高11.4%和12.5%,单宁及总酚含量分别提高27.5%和30.8%,果实总酸含量降低15.9%;相关性分析表明0.6 mg/L EBR处理的糖分与花色苷含量呈显著正相关。因此,EBR处理能够促进糖分积累,提高花色苷含量,改善果实着色,提高果实品质,其中以0.6 mg/L质量浓度表现最优。

关键词：油菜素内酯美乐葡萄花色苷果实品质

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加工过程中褐藻岩藻黄素的特征光谱变化

集美大学学报（自然科学版） 2018年第1期23卷 27-32页

作者：乔子纯刘光明曹敏杰刘翼翔孙乐常陈庆绸张亚平集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021 厦门市海洋功能食品重点实验室福建厦门361021 福建省海洋功能食品工程技术研究中心福建厦门361021 水产品深加工技术国家地方联合工程研究中心福建厦门361021

以岩藻黄素特征光谱变化为指标,研究了光照、pH值、高温、高压等加工条件对岩藻黄素稳定性的影响。结果表明,岩藻黄素不仅在高温高压下会发生快速降解,光照及酸性环境也会导致其结构的缓慢破坏;但在避光及碱性环境下岩藻黄素较稳定。

关键词：岩藻黄素褐藻加工稳定性光谱特征

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HPLC法测定不同种类水果中的花青素含量

中国食物与营养 2021年第3期27卷 45-49页

作者：白沙沙吕品鑫顾海华乔子纯孔凡华唐洪涛崔亚娟李东北京市营养源研究所北京100069 中国儿童中心儿童营养与健康研究中心北京100035

建立了水果中飞燕草色素、矢车菊色素、矮牵牛色素、天竺葵色素、芍药素和锦葵色素等6种花青素含量的高效液相色谱测定方法,并对该方法的线性、精密度、回收率、稳定性进行了方法学验证。利用本方法测定了10种水果中6种花青素含量,结果... 详细信息

建立了水果中飞燕草色素、矢车菊色素、矮牵牛色素、天竺葵色素、芍药素和锦葵色素等6种花青素含量的高效液相色谱测定方法,并对该方法的线性、精密度、回收率、稳定性进行了方法学验证。利用本方法测定了10种水果中6种花青素含量,结果表明:强酸溶液提取并水解得到花青素的处理方式稳定好、精密度高、回收率好,液相条件分离效果好,定量准确度高。10种水果测定结果表明,不同种类水果中花青素含量差异显著,花青素总量高的水果中6种花青素单体的含量差异显著,且不同种类水果中优势花青素单体不同。

关键词：水果花青素高效液相色谱法