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花生籽仁花青素含量近红外模型的构建及应用

中国粮油学报 2024年

作者：李鑫刘潇洋于复欣任建军周材周贤涛邓立苗唐艳艳王晶珊乔利仙青岛农业大学农学院山东省教育厅作物种质创新与应用特色实验室香港中文大学(深圳)数据科学学院青岛农业大学理学与信息科学学院

花生(Arachis hypogaeaL.)籽仁营养丰富，深色种皮富含花青素，具有较高的保健功能。选育富含高花青素含量的花生品种需要建立花青素含量的快速检测方法。本研究选用粉色种皮花生品种“宇花91号”(花青素含量182.33mg/g)与深红色种皮品... 详细信息

花生(Arachis hypogaeaL.)籽仁营养丰富，深色种皮富含花青素，具有较高的保健功能。选育富含高花青素含量的花生品种需要建立花青素含量的快速检测方法。本研究选用粉色种皮花生品种“宇花91号”(花青素含量182.33mg/g)与深红色种皮品种“冀花甜1号”(花青素含量270.69mg/g)杂交构建的F2群体为建模材料，使用Antaris II型傅立叶变换近红外光谱分析仪(美国Thermo公司)对 194 份样品籽仁进行光谱采集，并测定其种皮花青素含量。利用偏最小二乘法(partial least squares，PLS)构建非损伤性的花青素含量近红外检测模型。该模型的内部验证均方差(root mean square error of cross validation， RMSECV)为10.3，相关系数R2=0.9903。选用未参与建模的24份花生材料对该模型进行外部验证，模型预测值和化学测定值的决定系数R2=0.9781。利用该模型对“宇花91号”与“冀花甜1号”杂交后代群体进行筛选，获得高油酸及高花青素含量种质14份，高糖及高花青素含量种质16份。

关键词：花生籽仁花青素含量近红外模型偏最小二乘法

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高油酸花生萌发期和苗期耐盐碱性鉴定及评价

中国农学通报 2024年第15期40卷 44-52页

作者：李晶晶王金秀曹议丹任建军许少辉唐艳艳王晶珊乔利仙青岛农业大学农学院中美花生品质改良国际合作联合实验室青岛市滩涂盐碱地特色植物种质创制与利用重点实验室山东青岛266109 青岛农业大学盐碱地高效农业技术产业研究院山东东营257091

为了筛选耐盐碱高油酸花生,扩展花生在盐碱地的种植面积,缓解食用油供给不足的矛盾。以NaCl:Na_(2)SO_(4):NaHCO_(3):Na_(2)CO_(3)盐碱混合溶液模拟盐碱地条件,对6个高油酸品种萌发期种子发芽率及盐害率,以及苗期幼苗干重及耐盐系数进... 详细信息

为了筛选耐盐碱高油酸花生,扩展花生在盐碱地的种植面积,缓解食用油供给不足的矛盾。以NaCl:Na_(2)SO_(4):NaHCO_(3):Na_(2)CO_(3)盐碱混合溶液模拟盐碱地条件,对6个高油酸品种萌发期种子发芽率及盐害率,以及苗期幼苗干重及耐盐系数进行比较分析。结果表明:随着盐碱混合液浓度升高,花生种子发芽率以及幼苗干重明显下降。参试花生品种芽期与苗期的最适筛选浓度有所差别,芽期与苗期耐盐碱性亦并不完全一致。结合芽期和苗期指标,利用隶属函数值进行评价,确定供试品种的耐盐碱程度为‘宇花33’>‘宇花208’>‘宇花18’>‘宇花625’>‘宇花169’>‘宇花91’。100 mmol/L Na^(+)浓度为萌发期耐盐碱筛选的理想浓度,150 mmol/L Na+浓度为苗期耐盐碱筛选的最适浓度,在此条件下筛选出高度耐盐碱品种‘宇花33号’。

关键词：花生耐盐碱萌发期苗期盐害率耐盐系数

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高油酸花生品种耐碱性评价

山东农业科学 2023年

作者：鲁成凯卢家毅宋晓峰董晓娜于田利付春任建军于复欣乔利仙潍坊市农业科学院青岛农业大学盐碱地高效农业技术产业研究院

以8个高油酸花生品种(系)为材料，采用水培方法，测定不同浓度NaHCO3胁迫下种子萌发特性。结果表明：随NaHCO3浓度的升高，供试品种(系)发芽势(率、指数)均呈降低趋势，碱害率升高。综合相对发芽势(率、指数)差异性分析和相对发芽势(率... 详细信息

以8个高油酸花生品种(系)为材料，采用水培方法，测定不同浓度NaHCO3胁迫下种子萌发特性。结果表明：随NaHCO3浓度的升高，供试品种(系)发芽势(率、指数)均呈降低趋势，碱害率升高。综合相对发芽势(率、指数)差异性分析和相对发芽势(率、指数)平均值的差异性分析，确定0.5%NaHCO3为本试验所设浓度梯度下鉴定高油酸花生品种(系)萌发期耐碱性的最适浓度。采用隶属函数法对0.5% NaHCO3胁迫下8个供试品种(系)的种子相对发芽率(势、指数)和碱害率4个指标进行耐碱性综合评价，耐碱性由高到低排序为：宇花33>宇花208>宇花61>宇花18>宇花91>宇花625>宇花169>宇花32。本试验为高油酸花生耐碱品种的鉴定和盐碱地开发利用提供了理论依据。

关键词：花生高油酸萌发期耐碱性鉴定

以木糖异构酶基因作为选择标记的花生遗传转化

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核农学报 2012年第3期26卷 444-448,483页

作者：丁霄隋炯明王晶珊乔利仙青岛农业大学生命科学学院/山东省高校植物生物技术重点实验室山东青岛266109

用木糖异构酶基因xylA替换掉pCAMBIA1301中的潮霉素磷酸转移酶基因(hygromycin-B-phosphotransferase,Hpt),构建了植物表达载体pCAMBIA1301-xylA。再利用农杆菌介导法将pCAMBIA1301-xylA导入花生,转移到添加蔗糖(5g/L)和不同浓度木糖(5,10,20,30g/L)的体胚诱导及体胚萌发培养基上培养。对外植体成苗率及转基因阳性率进行统计,结果表明,当木糖浓度为10g/L时,诱导成苗率为15.25%,再生植株生长健壮,且转基因阳性率高达77.27%,最终确定10g/L为最适木糖筛选浓度。该筛选方法利用木糖作为筛选剂,可以避免利用抗生素筛选可能造成的安全隐患,转化效率高,是一种安全、高效的筛选方法。

关键词：花生木糖异构酶基因农杆菌介导法遗传转化

花生小GTP结合蛋白基因AhRabG3f启动子的盐胁迫响应元件分析

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生物工程学报 2022年第8期38卷 2989-2998页

作者：杜国宁相杰林顺钰孔祥远武秀玲管学东朱虹王晶珊乔利仙隋炯明赵春梅青岛农业大学农学院山东省花生产业协同创新中心山东省旱作重点实验室山东青岛266109 诸城市农业农村局山东诸城262200 青岛农业大学生命科学学院山东青岛266109

为研究花生小GTP结合蛋白基因AhRabG3f对盐胁迫响应的分子机制,文中克隆了花生AhRabG3f基因起始密码子上游1914 bp的启动子片段(3f-P)。将该启动子5'末端截短获得5个片段(3f-P1-3f-P5),长度分别为1729、1379、666、510、179 bp。构建了... 详细信息

为研究花生小GTP结合蛋白基因AhRabG3f对盐胁迫响应的分子机制,文中克隆了花生AhRabG3f基因起始密码子上游1914 bp的启动子片段(3f-P)。将该启动子5'末端截短获得5个片段(3f-P1-3f-P5),长度分别为1729、1379、666、510、179 bp。构建了将这6个启动子片段与gus基因融合的植物表达载体,利用农杆菌介导法转化烟草。对转基因烟草进行GUS表达分析和酶活性检测,结果表明,在转入各启动子片段的烟草中,都能检测到gus基因的表达,其中全长启动子3f-P的驱动活性最弱,而截短片段3f-P3的驱动活性最强。对转基因烟草进行盐胁迫处理后,3f-P、3f-P1、3f-P2和3f-P3所驱动GUS酶活性是未经盐诱导的3.3、1.2、1.9、1.2倍,表明AhRabG3f启动子是盐诱导型的,在3f-P至3f-P3之间可能存在对盐响应的正调控元件。通过对盐胁迫处理后各启动子片段驱动的GUS活性分析,推测在AhRabG3f启动子上游1930–1745 bp、682–526 bp之间存在可能对盐响应的正调控元件MYB、GT1和富含TC的重复序列,1395–682 bp之间存在可能对盐响应的负调控元件MYC。研究结果可为利用诱导型启动子调控花生的耐盐性提供指导。

关键词：花生小GTP结合蛋白启动子盐胁迫响应元件

利用FAD2分子标记构建花生荚果大小RIL群体

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分子植物育种 2022年

作者：胡畅丽李鑫李晶晶纪红昌唐艳艳邹晓霞姜德锋郭宝太王晶珊乔利仙青岛农业大学农学院山东省花生产业协同创新中心

遗传群体是作物遗传图谱构建、新基因挖掘以及种质资源利用的基础。本研究为花生荚果大小基因定位构建重组近交系(recombinant inbred line， RIL)遗传群体，首先利用AhFAD2基因型为aaBB的大果花生品种鲁花11和基因型为aabb的小果花生品...

遗传群体是作物遗传图谱构建、新基因挖掘以及种质资源利用的基础。本研究为花生荚果大小基因定位构建重组近交系(recombinant inbred line， RIL)遗传群体，首先利用AhFAD2基因型为aaBB的大果花生品种鲁花11和基因型为aabb的小果花生品系BC54进行杂交获得F，利用KASP标记检测F基因型筛选真杂种aaBb，然后单粒播种杂种F，收获F株系。测量每个F株系荚果长度，选留荚果长度存在分离表现的株系。对于荚果长度无明显分离的株系，取F各单株叶片等量混合后提取DNA，利用KASP标记检测FAD2的基因型，保留出现FAD2b位点的杂合株系、淘汰基因型为aaBB的纯合株系。经二次筛选的真杂种后代通过连续自交选育出包含520个家系的RIL群体。本研究利用非目标性状FAD2分子标记进行F杂种鉴定，有效节约时间和成本，成功构建RIL群体，为花生荚果大小基因定位和新品种选育提供了定位群体及基因资源。

关键词：

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花生fw2.2基因的克隆及遗传转化

核农学报 2011年第6期25卷 1123-1128,1210页

作者：刘强王晶珊乔利仙赵春梅隋炯明青岛农业大学生命科学学院青岛市主要农作物创新与应用重点实验室山东青岛266109

fw2.2基因是影响番茄果重的一个重要数量性状基因,在心皮的细胞分裂中起负调控作用。本研究以番茄fw2.2基因的序列为探针,从花生EST数据库中筛选同源序列。根据花生的EST拼接序列设计引物对花生进行扩增,目标产物测序后,将推测的氨基酸... 详细信息

fw2.2基因是影响番茄果重的一个重要数量性状基因,在心皮的细胞分裂中起负调控作用。本研究以番茄fw2.2基因的序列为探针,从花生EST数据库中筛选同源序列。根据花生的EST拼接序列设计引物对花生进行扩增,目标产物测序后,将推测的氨基酸序列与其他植物fw2.2基因编码的氨基酸序列进行比对,同源性为34.78%～66.85%。半定量RT-PCR结果表明,该基因在野生种和栽培种中的表达存在差异。将fw2.2基因连接到植物表达载体,通过农杆菌介导法转化花生品种花育23号,获得了12个PCR阳性的独立转化子。

关键词：花生 fw2.2基因克隆转化

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花生萌发期耐盐性鉴定及耐盐种质筛选

花生学报 2022年第4期51卷 35-43页

作者：李晓婷胡畅丽李鑫朱虹隋炯明王晶珊乔利仙唐艳艳青岛农业大学农学院山东青岛266109

为加强黄河三角洲盐碱地的开发利用,扩大花生种植面积,提高花生产量,本研究以17份花生品种(系)为材料,利用水培方法,测定不同盐浓度下萌发期发芽率。确定0.7%NaCl浓度作为花生品种萌发期耐盐性鉴定的最适浓度,共筛选出5个耐盐品种(系)... 详细信息

为加强黄河三角洲盐碱地的开发利用,扩大花生种植面积,提高花生产量,本研究以17份花生品种(系)为材料,利用水培方法,测定不同盐浓度下萌发期发芽率。确定0.7%NaCl浓度作为花生品种萌发期耐盐性鉴定的最适浓度,共筛选出5个耐盐品种(系)。在山东平度非盐碱地和东营盐碱地分别种植5个耐盐和4个非耐盐品种(系),测定产量性状相关指标。结果表明,盐碱胁迫显著降低花生发芽率,明显抑制花生的生长发育和产量。高油酸品种宇花18号表现出较强的耐盐碱性,其次是化学诱变突变体品系ST24-1、ST24-8和ST24-11,均适于盐碱地种植,为耐盐碱花生品种的选育提供了新材料。本研究表明,萌发期耐盐性的鉴定可作为花生耐盐碱鉴定的基础指标之一。

关键词：盐碱地花生种质萌发期耐盐产量性状

花粉管通道法验证花生Oleosin基因启动子的特异性表达

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中国粮油学报 2013年第12期28卷 52-56页

作者：范乾程谭玲玲王亚乔利仙王晶珊隋炯明青岛农业大学生命科学学院山东省高校植物生物技术重点实验室青岛266109

油体蛋白(Oleosin)是一类覆盖在油体表面且仅在种子中特异表达的低分子质量蛋白,能维护油体的稳定性。研究利用花生Oleosin基因的启动子替换了pCAMBIA1301的35S启动子,构建了重组表达载体pCAMBIA1301-Oleosin-pro,并利用花粉管通道法导... 详细信息

油体蛋白(Oleosin)是一类覆盖在油体表面且仅在种子中特异表达的低分子质量蛋白,能维护油体的稳定性。研究利用花生Oleosin基因的启动子替换了pCAMBIA1301的35S启动子,构建了重组表达载体pCAMBIA1301-Oleosin-pro,并利用花粉管通道法导入花生。对T0代转基因植株进行了PCR鉴定和GUS组织化学染色,结果显示:50株转基因植株有9株能扩增出目的条带,阳性率为18%,9株阳性转基因植株中有5株的子叶能被GUS染色。对GUS染色成阳性的转基因植株的子叶进行切片观察,结果显示Oleosin基因启动子驱动的GUS基因在油体蛋白中能够表达。

关键词：花生 Oleosin基因特异性表达花粉管通道法遗传转化 GUS染色