检索结果-南通市图书馆

JSRV-Env诱导转染TC-1、TC-1-Hyal2细胞后对AKT和ERK表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

病毒学报 2016年第3期32卷 283-291页

作者：么宏强孙丽红骆爽纪秀红内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

为了探索JSRV与其受体相互作用后靶细胞的致瘤机制,本研究应用JSRV Env真核表达质粒分别诱导转染小鼠肺上皮细胞(TC-1)和稳定表达绵羊Hyal-2的小鼠肺上皮细胞(TC-1-Hyal2),而后检测细胞信号转导通路上AKT(丝氨酸/苏氨酸激酶)和ERK(细胞... 详细信息

为了探索JSRV与其受体相互作用后靶细胞的致瘤机制,本研究应用JSRV Env真核表达质粒分别诱导转染小鼠肺上皮细胞(TC-1)和稳定表达绵羊Hyal-2的小鼠肺上皮细胞(TC-1-Hyal2),而后检测细胞信号转导通路上AKT(丝氨酸/苏氨酸激酶)和ERK(细胞外信号调节激酶)在mRNA及蛋白水平上的表达变化,并分析绵羊Hyal-2在JSRV Env诱导TC-1细胞转化过程中的作用。首先体外培养TC-1和TC-1-Hyal2两种细胞,并分别设立pEGFP-C1-env转染组、pEGFP-C1转染组及未转染质粒组。通过实时荧光定量PCR和Western blot方法检测两关键酶在不同水平上的表达变化。qPCR结果显示:与未转染质粒细胞组比较,转染pEGFP-C1-env的两细胞组中AKT和ERK1/2mRNA表达均显著升高(P0.05)。JSRV Env在诱导上述细胞系转化过程中,Ras-Raf-MAPK和PI3K-Akt两条细胞信号转导通路被激活;实验检测得知,转染pEGFP-C1-env的两细胞组中AKT、ERK表达量均升高;相比之下,在TC-1-Hyal2细胞组中其表达量升高更显著。研究结果推测绵羊Hyal-2在JSRV Env诱导TC-1细胞转化过程中起促进作用。

关键词： JSRV-Env真核表达质粒 TC-1细胞 TC-1-Hyal2细胞 AKT ERK

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

金黄色葡萄球菌表面烯醇化酶的研究进展

黑龙江畜牧兽医 2017年第2期 72-74页

作者：何静乌云额尔敦么宏强玉斯日古楞内蒙古农业大学食品工程学院乳品生物技术与工程教育部重点实验室呼和浩特010018 内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

金黄色葡萄球菌是人和动物重要致病菌,常引起肺炎、脑膜炎、败血症、食物中毒等多种疾病。目前的研究发现,金黄色葡萄球菌有许多致病机理,因此迫切需要寻找一种替代预防或治疗金黄色葡萄球菌的试剂。近年来,人们对金黄色葡萄球菌表面烯... 详细信息

金黄色葡萄球菌是人和动物重要致病菌,常引起肺炎、脑膜炎、败血症、食物中毒等多种疾病。目前的研究发现,金黄色葡萄球菌有许多致病机理,因此迫切需要寻找一种替代预防或治疗金黄色葡萄球菌的试剂。近年来,人们对金黄色葡萄球菌表面烯醇化酶参与侵染过程的研究日益重视。烯醇化酶可以作为纤溶酶原和层黏连蛋白来调节细菌黏附和侵袭作用。文章就金黄色葡萄球菌表面烯醇化酶的研究进展做一简单的综述。

关键词：烯醇化酶纤溶酶原层黏连蛋白金黄色葡萄球菌作用

寄生性双翅目昆虫侵袭对荷斯坦奶牛血液免疫的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

饲料研究 2010年第11期33卷 52-54页

作者：李倩敖日格乐王纯洁幺宏强内蒙古农业大学动物科学与医学学院

为了解寄生性双翅目昆虫侵袭对奶牛血液免疫的影响,2009年6月—11月在内蒙古呼和浩特地区随机选取基本状况一致的15头荷斯坦奶牛,观测昆虫侵袭奶牛的情况,采集寄生性双翅目昆虫并记录侵袭奶牛的昆虫数。同时尾静脉采血,采用红细胞黏附... 详细信息

为了解寄生性双翅目昆虫侵袭对奶牛血液免疫的影响,2009年6月—11月在内蒙古呼和浩特地区随机选取基本状况一致的15头荷斯坦奶牛,观测昆虫侵袭奶牛的情况,采集寄生性双翅目昆虫并记录侵袭奶牛的昆虫数。同时尾静脉采血,采用红细胞黏附免疫功能检测、流式细胞术测定红细胞和T淋巴细胞免疫功能,测定指标包括,C3bRR、ICR及T淋巴细胞数。结果表明:在寄生性双翅目昆虫侵袭期间,奶牛的红细胞黏附免疫功能和T淋巴细胞数明显下降,导致奶牛红细胞的免疫黏附活性和清除体内循环免疫复合物(CIC)的能力下降,T淋巴细胞免疫功能减弱。

关键词：应激双翅目昆虫红细胞黏附免疫 T淋巴细胞

绵羊肺腺瘤病毒人工感染羔羊淋巴细胞动态变化的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

黑龙江畜牧兽医 2007年第12期 69-71页

作者：么宏强斯日古楞马学恩于立新内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018

绵羊肺腺瘤病(sheep pulmonary adenomatosis,SPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(sheep pulmonary adenomatosis virus,SPAV)所致绵羊的一种慢性、进行性、接触传染性肺脏肿瘤性疾病,实际是一种低度肺癌,又称绵羊肺癌(ovine pulmonary carcinoma,O... 详细信息

关键词：绵羊肺腺瘤病毒 T淋巴细胞亚群动态变化规律人工感染羔羊免疫抑制作用肿瘤性疾病 T细胞亚群

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

绵羊透明质酸酶2的基因分子克隆及序列分析

内蒙古农业大学学报（自然科学版） 2012年第Z1期33卷 5-9页

作者：张月梅么宏强斯日古楞马学恩内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

根据已发表的绵羊透明质酸酶2(Hyal2)(GenBank中登陆的NM_001009754)基因序列设计两对引物,运用重叠PCR(overlapping PCR)方法,扩增出透明质酸酶2基因,将其亚克隆于PMD19-T载体中,并进行序列测定与分析。该基因包含一个由1431bp组成的... 详细信息

根据已发表的绵羊透明质酸酶2(Hyal2)(GenBank中登陆的NM_001009754)基因序列设计两对引物,运用重叠PCR(overlapping PCR)方法,扩增出透明质酸酶2基因,将其亚克隆于PMD19-T载体中,并进行序列测定与分析。该基因包含一个由1431bp组成的完整开放阅读框(ORF),编码476个氨基酸。序列比较显示:该基因与模板核苷酸同源性为99.8%,氨基酸同源性99%。系统进化分析,显示目的基因与牛的基因亲缘关系较近。生物信息学分析表明,该基因编码的蛋白质为亲水性蛋白。

关键词：透明质酸酶2 分子克隆序列分析生物信息学分析重叠PCR

绵羊肺腺瘤病毒内蒙毒株囊膜蛋白基因在大肠杆菌中的分段表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

黑龙江畜牧兽医 2007年第10期 7-10页

作者：斯日古楞么宏强马学恩王升启内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018 中国军事医学科学院北京100850

为了建立原核高效表达体系,从自然感染绵羊肺腺瘤病毒内蒙毒株的肺肿瘤组织中提取基因组DNA,应用PCR技术分别扩增编码囊膜蛋白(env)基因的表面蛋白(surface protein,SU)和跨膜蛋白(transmembrane protein,TM)区域基因,通过T-A克隆的方... 详细信息

为了建立原核高效表达体系,从自然感染绵羊肺腺瘤病毒内蒙毒株的肺肿瘤组织中提取基因组DNA,应用PCR技术分别扩增编码囊膜蛋白(env)基因的表面蛋白(surface protein,SU)和跨膜蛋白(transmembrane protein,TM)区域基因,通过T-A克隆的方法分别克隆入pGEM-TEasy载体中,然后利用设计的起始密码、终止密码以及相应酶切位点的引物,把env基因的SU区和TM区基因亚克隆到表达载体pGEX-4T-1中,分别构建SU和TM的重组表达质粒,经酶切、PCR及DNA测序鉴定后,将阳性质粒转化入大肠杆菌BL21 CodonPlus中并在IPTG的诱导下表达,表达产物用SDS-PAGE分析鉴定。结果表明,该基因可以在大肠杆菌中以稳定的包涵体形式高效表达,表达的SU和TM融合蛋白表观分子质量约为68 ku和46 ku,表达量分别占全菌蛋白的25%和30%,并且从包涵体分离纯化得到的表达蛋白具有较高纯度,是一种理想的免疫原。

关键词：绵羊肺腺瘤病绵羊肺腺瘤病毒内蒙毒株囊膜蛋白基因克隆表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

绵羊肺腺瘤病毒衣壳蛋白杂交瘤细胞系的建立

中国畜牧兽医 2013年第1期40卷 28-32页

作者：斯日古楞么宏强马学恩内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

为了制备特异性的抗绵羊肺腺瘤病毒(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)内蒙株衣壳蛋白(CA)的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系,以原核表达CA蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,经4次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞经杂交瘤技术进行融合,同时... 详细信息

为了制备特异性的抗绵羊肺腺瘤病毒(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)内蒙株衣壳蛋白(CA)的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系,以原核表达CA蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,经4次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞经杂交瘤技术进行融合,同时以表达蛋白作为包被抗原进行特异性ELISA检测,共筛选到6株阳性杂交瘤细胞株。经过3次亚克隆后,最终得到了5株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株;再利用CA真核表达蛋白以间接免疫荧光法,对此5株杂交瘤细胞进行进一步的特异性鉴定。结果显示,有3株具有特异性强荧光反应,也能检测到目的基因的表达产物。本试验获得了3株稳定分泌抗JSRV-NM株CA蛋白McAb的杂交瘤细胞系,为建立检测病原的特异性诊断方法、分析JSRV-NM株CA蛋白的功能及鉴定B细胞抗原表位等奠定基础。

关键词：绵羊肺腺瘤病毒衣壳蛋白杂交瘤技术酶联免疫吸附试验间接免疫荧光方法

维普期刊数据库博看期刊

人工感染绵羊肺腺瘤病毒内蒙株羔羊的临床病理学研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国畜牧兽医 2009年第8期36卷 172-178页

作者：武志红么宏强马学恩内蒙古农业大学动物科学与医学学院呼和浩特010018

试验旨在探讨试验性感染绵羊肺腺瘤病毒内蒙株(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV-NM)对羊的淋巴细胞亚群、淋巴细胞凋亡、血气指标的影响。用含JSRV-NM株的病毒悬液1 mL气管内接种1日龄羔羊,对人工感染羊进行了临床症状观察、血液学检... 详细信息

试验旨在探讨试验性感染绵羊肺腺瘤病毒内蒙株(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV-NM)对羊的淋巴细胞亚群、淋巴细胞凋亡、血气指标的影响。用含JSRV-NM株的病毒悬液1 mL气管内接种1日龄羔羊,对人工感染羊进行了临床症状观察、血液学检查、病理生理学的系统病理学研究。在不同时段用流式细胞仪检测外周血中淋巴细胞及其亚群的动态变化及淋巴细胞凋亡情况。同时,对血液做血气分析和血清酶的检测。人工感染羔羊均出现了一些轻微的绵羊肺腺瘤病(sheep pul-monary adenomatosis,SPA)临床症状。SPA攻毒组感染JSRV-NM株后前60 d,外周血中CD4+、CD8+T细胞保持较高水平;到感染后90 d呈现下降趋势。对淋巴细胞凋亡检测的结果显示,在感染JSRV-NM株前60 d,凋亡细胞都保持较高水平;而感染第90天后,晚期细胞凋亡显著低于对照组。血气分析结果显示,阴离子隙(AnGap)、细胞外液碱剩余(BE(ecf))、氯离子浓度(Cl-)、氧分压p(O2)、实际碳酸氢根(HCO3act)、标准碳酸氢根(HCO3std)、二氧化碳总量(TCO2)、氧饱和度(O2SAT)、氧含量(O2CT)9项在不同时期与对照组存在显著差异。接毒羔羊尚未发生SPA的典型症状,但试验羔羊的病情已经出现,处于SPA疾病的早期表现;病羊在感染JSRV-NM病毒株后,在一定时期内,血液中CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的变化是SPA病羊在疾病过程中细胞免疫和淋巴细胞受损的重要表现之一;外周血淋巴细胞会呈现不同程度的凋亡,JSRV-NM株诱导机体免疫细胞凋亡是一种重要的临床表现;本试验结果初步证明,血气分析方法在临床诊断绵羊肺腺瘤病时有一定的参考价值。

关键词：绵羊肺腺瘤病绵羊肺腺瘤病病毒人工感染血气分析流式细胞术

维普期刊数据库博看期刊

JSRV-Env重组质粒诱导转染TC-1、TC-1-Hyal2细胞后对TGF-α及VEGF因子表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国畜牧兽医 2016年第9期43卷 2215-2222页

作者：骆爽孙丽红斯日古楞么宏强内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

通过脂质体法将JSRV-Env重组质粒瞬时转染小鼠肺上皮细胞(TC-1)和表达绵羊Hyal-2的小鼠肺上皮细胞(TC-1-Hyal2),而后探讨两细胞中转化生长因子-α(TGF-α)及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白表达的变化,以此分析TGF-α、VEGF与绵羊肺... 详细信息

通过脂质体法将JSRV-Env重组质粒瞬时转染小鼠肺上皮细胞(TC-1)和表达绵羊Hyal-2的小鼠肺上皮细胞(TC-1-Hyal2),而后探讨两细胞中转化生长因子-α(TGF-α)及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白表达的变化,以此分析TGF-α、VEGF与绵羊肺腺瘤病(ovine pulmonary adenomatosis,OPA)发生的关联性及其在细胞癌变过程中的作用。体外培养TC-1和TC-1-Hyal2细胞,按照不同质粒可将TC-1和TC-1-Hyal2细胞分别设为pEGFP-C1-env转染组、pEGFP-C1转染组和未转染组。利用实时荧光定量PCR和ELISA方法对TGF-α、VEGF的表达水平进行检测。实时荧光定量PCR检测结果表明,相比对照组(pEGFP-C1转染组及未转染组),在转染pEGFP-C1-env的两细胞组中VEGF mRNA的表达量均显著升高(P0.05)。本研究发现,通过实时荧光定量PCR和ELISA方法检测经JSRV-Env诱导转染上述两细胞系后TGF-α、VEGF的mRNA和蛋白表达量均升高,结果提示JSRV-Env可能上调两细胞因子,进而可推测TGF-α、VEGF的表达变化与OPA发病存在一定的关联性,由此为衍生出的OPA针对二者进行基因靶向治疗方案提供重要的理论依据。

关键词： JSRV-Env重组质粒 TC-1细胞 TC-1-Hyal2细胞 TGF-α因子 VEGF因子