检索结果-南通市图书馆

RNAi沉默ADAMs家族基因对肿瘤细胞生物学活性的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

RNAi沉默ADAMs家族基因对肿瘤细胞生物学活性的影响

作者：丰菁华中科技大学

学位级别：硕士

研究背景肿瘤细胞的微环境在肿瘤的发生和发展中占有至关重要的作用。解整合素金属蛋白酶ADAMs(A Disintegrin and Metalloproteases)是一类Zn2+依赖性的胞外肽酶,在肿瘤细胞微环境的调节中有着一定的作用。由于这类蛋白质分子都含有... 详细信息

研究背景肿瘤细胞的微环境在肿瘤的发生和发展中占有至关重要的作用。解整合素金属蛋白酶ADAMs(A Disintegrin and Metalloproteases)是一类Zn2+依赖性的胞外肽酶,在肿瘤细胞微环境的调节中有着一定的作用。由于这类蛋白质分子都含有金属蛋白水解区及解整合素区,因此将这类蛋白称为ADAMs[1]。它们在生物的发育、生存过程中的作用是多方面的,包括细胞的融合与迁移、生物活性因子的附着、释放、受精、以及细胞内信号传导等[2]。本课题组一直致力于以ADAM17为代表的炎症方面的研究并取得了一定的进展,如对三类TACE(ADAM17)抑制剂作用机理的探讨[3]。有研究表明ADAM17可定位于人脑的神经元,AD(Alzheimer’s disease)患者的ADAM17表达水平虽然没有变化,但在老年斑和神经原纤维缠结中也发现了ADAM17。同时ADAM10与APP的体内加工有密切关系,由此级联到其上游前体蛋白加工酶PC7,从而探讨其在转基因后的生物学效应成为本课题组研究的新靶点。ADAMs在淀粉样蛋白前体加工中起重要作用,目前证实,一些因淀粉样蛋白前体沉积造成的神经系统疾病,与ADAMs的蛋白水解活性降低有密切关系[4]。后来又新奇的发现这类家族基因在肿瘤细胞中高表达。并且已有研究表明有些分泌型ADAMs,如ADAM11和ADAMTS-1,在某些肿瘤细胞系表达,表明它们可能与肿瘤形成有关。文献中已有相关报道[5,6,7],ADAM17高表达于肿瘤组织中,它主要以前体的方式定位于肿瘤细胞表面其中包括乳腺癌、卵巢癌、肾癌、结肠癌和前列腺癌等,ADAM10在神经细胞瘤中过度表达。既然ADAMs家族基因已经被报道在动物模型和癌症患者中肿瘤的形成、侵袭和转移中占有重要的一席之地。设想我们敲除ADAMs家族基因将会抑制肿瘤信息的复制与传递,由此这类基因将会成为癌症治疗不错的新靶标。 RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种由双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)诱发同源基因的表达沉默,该技术因其高效且特异的靶基因抑制而在基因肿瘤功能研究以及肿瘤等疾病的基因治疗中显示出巨大的潜在应用价值,尤其是小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)[8]。在较早的哺乳动物实验中,siRNA是通过化学合成法合成的,但它虽可高效特异性地抑制外源性和内源性基因的表达,但同时存在操作费时费力,价格昂贵,抑制效果维持时间短等缺点。为了能够在哺乳动物中高效、持续表达siRNA,克服上述困难,拓展RNAi技术的应用。使用质粒DNA构建的shRNA表达载体,可以在细胞内生成小干扰性RNA,抑制目的基因的表达,使得哺乳动物细胞内基因表达长期沉默成为可能[9,10]。本研究以ADAM17,ADAM10和PC7基因为研究重点,采用小发夹结构RNA(short hairpin RNA,shRNA)介导的RNA干扰技术和转基因技术,来探讨ADAMs与肿瘤的密切关系,即抑制该基因的表达可能对肿瘤细胞的生物学效应会有重要的影响。通过研究其对肿瘤细胞的发生发展所发挥的干扰作用,以阐明其在基因治疗中的潜在意义,从而为研究这些特定基因在肿瘤治疗中的机制奠定了基础,同时也为探索基因治疗对抗肿瘤的新策略、新靶点提供了一定的理论基础和实验依据。第一部分RNAi沉默ADAM17基因对多种肿瘤细胞增殖和凋亡的影响目的:探讨RNA干扰技术沉默ADAM17基因表达在肿瘤细胞增殖和凋亡中的影响,以其为研究靶标,为对抗肿瘤的基因治疗提供潜在的依据和手段。方法:采用小发夹结构RNA ( shRNA)介导的RNA干扰技术,利用本实验室已构建好的ADAM17干扰载体pGensil-1-TACE,用脂质体介导重组真核干扰载体转染四株肿瘤细胞(Hela,HepG2,SGC-7901,MCF-7),建立瞬时转录系统,观察转染后绿色荧光蛋白EGFP的表达情况评估转染效率。培养一周并观察其对肿瘤细胞生长状态的影响,采用Annexin-V-PI双染法流式细胞术(FACS)检测转染重组干扰质粒后细胞的凋亡状况。MTT比色法测定细胞增殖的抑制,观察转染前后各组肿瘤细胞增殖能力的变化。结果:干扰真核表达载体成功转入四株肿瘤细胞,荧光显微镜观察其转染效率,其在24h时转染率高达80%。MTT检测显示,沉默细胞增殖能力与阴性质粒对照组和空白对照组相比显著降低(P<0.01或0.05);细胞凋亡百分率在48h时shRNA干扰组(43.68±0.62%)明显高于阴性质粒对照组(21.56±0.96)%和空白对照组(20.66±0.70)%,差异有统计学意义(P<0.01)。可见ADAM17基因沉默后,各组肿瘤细胞增殖能力明显降低并诱

关键词： ADAM17基因 RNA干扰肿瘤细胞(Hela,HepG2,SGC-7901,MCF-7) 增殖凋亡短发夹状RNA ADAM10 N2a细胞株基因干扰

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

大数据时代大学生思想政治教育精准管理研究

大数据时代大学生思想政治教育精准管理研究

作者：丰菁献华东师范大学

学位级别：硕士

时代的车轮不断更迭,大数据技术获得史无前例的发展机遇,对于我们而言也迎来了以大数据为核心的发展时代。大数据时代的到来不仅为商业带来了新的契机,以新业态模式推动商业经济的蓬勃发展,同时以其低成本、高效率的特点深刻地影响着社... 详细信息

时代的车轮不断更迭,大数据技术获得史无前例的发展机遇,对于我们而言也迎来了以大数据为核心的发展时代。大数据时代的到来不仅为商业带来了新的契机,以新业态模式推动商业经济的蓬勃发展,同时以其低成本、高效率的特点深刻地影响着社会科学领域。高校大学生思想政治教育管理是思想政治教育实效性与价值性的重要体现。在社会与高校双重转型的形势下,运用大数据技术解决大学生思想政治教育管理存在的问题,提升大学生思想政治教育管理的精准性,其具有重要的理论意义与实践意义。创新引领发展。在理论层面,大数据的思维、方法与大学生思想政治教育精准管理存在了一定的契合关系,在实践层面大数据与大学生思想政治教育精准管理形成了初步架构。这为大数据时代的大学生思想政治教育精准管理创造了新的发展机遇。机遇背后也深藏挑战,面对技术力量的强势来袭,党与政府、高校以及辅导员三大主体迎来了大数据时代大学生思想政治教育精准管理的挑战。面对挑战、迎接挑战、化解挑战,才能实现大数据与大学生思想政治教育精准管理的准确对接。在党与政府角度通过消解数据隐私、完善硬件管理、契合管理角色三大措施应对管理挑战;高校运用科学管理规划、资源优化整合、主体功能强化三大手段推进大学生思想政治教育精准管理;辅导员主体以管理理念更新、学情掌握到位、管理能力提升作为有效方法,以此推进大学生思想政治教育精准管理的实效性。

关键词：大数据时代大学生思想政治教育精准管理

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

特许经营——中国商业的世纪选择

中国商界 1999年第9期 53-55页

作者：菁丰

专家认为,下个世纪中国的商品流通方式将进一步与国际接轨,这将给国内大多数以分散、单体经营为主的商业企业带来严峻挑战,发展特许经营能给这类企业带来新的商业契机。

关键词：特许经营特许者加盟者连锁企业特许连锁经营特许加盟下个世纪流通企业经营模式连锁超市

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

探究读者心理,优化高校图书馆流通服务工作

科技信息 2013年第36期 280-281页

作者：丰菁南京信息工程大学图书馆

通过分析高校图书馆不同读者群体的阅读心理、阅读规律,对读者阅读兴趣、阅读动机及心理特征进行剖析,进一步了解读者的心理需求有针对性地改善图书馆流通服务工作,从而更好为读者服务。

关键词：高校图书馆分析读者心理改善流通服务

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

浅析特色馆藏建设对文献资源共享的影响

农业图书情报学刊 2013年第12期25卷 18-22页

作者：丰菁南京信息工程大学江苏南京210044

通过对"211工程"高校图书馆馆藏资源共建共享情况的调查,可知目前馆藏建设各地区发展极不平衡,建设经费严重短缺,特色馆藏资源的共建共享较为滞后,尚未形成专门的特色馆藏体系,资源重复建设比较严重。为此,高校图书馆特色馆藏资源建设... 详细信息

通过对"211工程"高校图书馆馆藏资源共建共享情况的调查,可知目前馆藏建设各地区发展极不平衡,建设经费严重短缺,特色馆藏资源的共建共享较为滞后,尚未形成专门的特色馆藏体系,资源重复建设比较严重。为此,高校图书馆特色馆藏资源建设可以采用省内联盟与地区协作模式、区域性跨系统共建共享模式、突出馆藏主题的馆际互借模式,建立特色数据库和信息共享平台建设以及人员专业化带动信息共享资源建设等,从而更好地实现文献资源的共建共享。

关键词： “211工程”高校高校图书馆特色馆藏建设文献资源共建共享

学生组织在高校生态文明教育中的主要功能及实现路径探析

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

无锡职业技术学院学报 2021年第2期20卷 72-77页

作者：丰菁献华东师范大学马克思主义学院上海200241

当前,中国特色社会主义进入新时代,但是人与自然环境之间还是存在着诸多的矛盾,而高校是孕育国家新生力量的地方,大学生是未来中国的主力军,高校的生态文明教育对于中国经济的持续健康发展有着十分重要的意义。文章通过调查问卷的方法... 详细信息

当前,中国特色社会主义进入新时代,但是人与自然环境之间还是存在着诸多的矛盾,而高校是孕育国家新生力量的地方,大学生是未来中国的主力军,高校的生态文明教育对于中国经济的持续健康发展有着十分重要的意义。文章通过调查问卷的方法对石家庄市各高校开展调查,了解高校生态文明教育的现状:学生组织以其在高校中的特殊地位,成为高校学生在大学期间所接触最多、影响最大的组织机构。通过学生组织功能的发挥,提高大学生对于生态文明的重要意识,以马克思主义生态观和中国特色社会主义生态理念作指引,帮助大学生在生态文明方面树立正确的观念,推动我国生态文明教育步入一个新阶段。

关键词：学生组织生态文明教育高校

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

我国农村留守儿童问题及消解对策

现代商贸工业 2017年第25期38卷 122-123页

作者：杨启迪肖倩丰菁献河北师范大学河北石家庄050011

农村劳动力向城市流动是我国持续多年的一个社会现象,我国现在的社会经济结构和户籍制度决定了上亿的农村劳动力只能在城乡往返流动,无法固定的在同一个地方生活和工作,因此产生了农村留守儿童群体,这一群体因父母外出而无法得到完整的... 详细信息

农村劳动力向城市流动是我国持续多年的一个社会现象,我国现在的社会经济结构和户籍制度决定了上亿的农村劳动力只能在城乡往返流动,无法固定的在同一个地方生活和工作,因此产生了农村留守儿童群体,这一群体因父母外出而无法得到完整的教育,在生理和心理上都存在严重的缺陷。因此对我国留守儿童的概念、产生的背景、存在的问题及存在问题的原因进行综合分析,探讨解决这一社会现象的对策,为各界人士了解、解决留守儿童问题提供参考。

关键词：留守儿童存在问题消解对策

基于相间有源阻抗平衡单元的多相交错并联LLC谐振变换器均流策略研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国电机工程学报 2024年第3期44卷 1117-1132,I0022页

作者：董汉菁谢小高杭州电子科技大学浙江省杭州市310018

文中提出一种基于相间有源阻抗平衡单元的新型多相交错并联LLC谐振变换器均流拓扑。通过在相间构建有源阻抗平衡单元匹配相邻相的阻抗网络,从而平衡相邻相谐振元件因参数容差造成的输出电流不均衡。得益于相间有源阻抗平衡单元仅在相邻... 详细信息

文中提出一种基于相间有源阻抗平衡单元的新型多相交错并联LLC谐振变换器均流拓扑。通过在相间构建有源阻抗平衡单元匹配相邻相的阻抗网络,从而平衡相邻相谐振元件因参数容差造成的输出电流不均衡。得益于相间有源阻抗平衡单元仅在相邻相之间传递部分能量,其增加的损耗较小。比较几种可能的相间有源阻抗平衡单元结构,并提出一种以开关电感作为有源阻抗平衡单元的均流拓扑。详细分析所述方案的均流机理和设计过程,并对其控制策略和多相拓展进行探讨。最后,通过搭建一台12 V/40 A的两相交错并联LLC谐振变换器样机,验证所述均流方案的可行性。

关键词：交错并联LLC 相间有源阻抗平衡单元开关电感均流策略

维普期刊数据库博看期刊

油茶蒲总黄酮大孔吸附树脂纯化工艺优化及其体外抗氧化、抗炎活性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品工业科技 2024年

作者：叶佳丰马晶菁张雨瑞高霞李杨晨王春丽郭美珠华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海市新药设计重点实验室上海市宝山区中西医结合医院

目的：探究大孔吸附树脂纯化油茶蒲总黄酮机制及优化其工艺，并对其体外抗氧化、抗炎活性进行评价。方法：采用吸附动力学和热力学分析大孔吸附树脂吸附油茶蒲总黄酮的机制，并通过动态吸附对其工艺进行优化；通过DPPH、ABTS+自由基清除... 详细信息

目的：探究大孔吸附树脂纯化油茶蒲总黄酮机制及优化其工艺，并对其体外抗氧化、抗炎活性进行评价。方法：采用吸附动力学和热力学分析大孔吸附树脂吸附油茶蒲总黄酮的机制，并通过动态吸附对其工艺进行优化；通过DPPH、ABTS+自由基清除及5-脂氧合酶（5-lipoxygenase， 5-LOX）抑制实验评价油茶蒲总黄酮的抗氧化及抗炎活性。结果：筛选得到的HPD400大孔吸附树脂对油茶蒲总黄酮的吸附符合准二级动力学模型，同时表现为热力学有利的吸热过程。经优化确定最佳纯化条件为：总黄酮一次上样量144mg，上样体积120mL，以1 mL/min流速上样；80 mL 70%乙醇，以4 mL/min流速进行洗脱，纯化得到的油茶蒲总黄酮纯度由原来的19.62%±0.84%提升至39.16%±1.50%。纯化得到的油茶蒲总黄酮对DPPH、ABTS+自由基清除的EC50分别为7.025、5.361 μg/mL，对5-LOX抑制的IC50为6.217 μg/mL。结论：HPD400大孔吸附树脂对油茶蒲总黄酮纯化具有优势，纯化后的产物表现出良好的抗氧化及抗炎作用，为油茶蒲的进一步开发利用提供参考。

关键词：油茶蒲总黄酮大孔吸附树脂抗氧化抗炎