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膜蛋白研究中Triton X-100的置换

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生物化学与生物物理进展 1991年第1期18卷 71-72页

作者：丰美福中国科学院北京动物研究所北京100080

在生物膜结构与功能的研究中,经常会用到Triton X-100,它是一种强的表面活性剂,其疏水端能插入膜脂内,把膜脂与膜蛋白隔离开来,其亲水端能与膜蛋白结合,从而使膜蛋白增溶溶解,提取效果很好。但是,Triton X-100本身很难除尽,尤其是与膜... 详细信息

在生物膜结构与功能的研究中,经常会用到Triton X-100,它是一种强的表面活性剂,其疏水端能插入膜脂内,把膜脂与膜蛋白隔离开来,其亲水端能与膜蛋白结合,从而使膜蛋白增溶溶解,提取效果很好。但是,Triton X-100本身很难除尽,尤其是与膜蛋白紧密结合之后。它残存在样品中,会给下一步试验带来不良的影响。本文介绍用易透析的胆酸钠盐从吸附膜蛋白的层析柱上,逐步置换掉Triton X-100的方法,并经红血球凝血试验证明此法是简易有效的。

关键词：膜蛋白新和层析 Triton X-100

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空间生物工程:现状与展望

生物工程进展 1989年第2期9卷 42-46页

作者：丰美福

在微重力下所具有的获得更纯净更均一的物质的潜力,首先吸引了生物技术学家去探索空间生物加工。但这仅是微重力的一方面的益处。这篇综述讨论了空间生物技术的独特的良机,以及达到微重力条件的各种方法。

关键词：空间生物工程现状展望

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人β2微球蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2006年第7期34卷 87-90页

作者：张劲郭霭光丰美福西北农林科技大学生命科学学院陕西杨凌712100 中国科学院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100080

β2微球蛋白(β2m)是主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ类分子的轻链部分,该蛋白的原核表达与纯化是制备MHC-Ⅰ类分子的首要条件。利用已经构建好的β2m原核表达载体pET 23a+β2m,在大肠杆菌(E.coli)中获得稳定表达。原核表达的β2m大部分... 详细信息

β2微球蛋白(β2m)是主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ类分子的轻链部分,该蛋白的原核表达与纯化是制备MHC-Ⅰ类分子的首要条件。利用已经构建好的β2m原核表达载体pET 23a+β2m,在大肠杆菌(E.coli)中获得稳定表达。原核表达的β2m大部分在包涵体中,包涵体蛋白经充分洗涤、变性(尿素溶解)和复性,并以强阴离子交换柱层析(Q-Sepharose)纯化,获得SDS-PAGE纯的人重组β2m,W estern印迹法分析表明,该蛋白具有与抗人天然β2m抗体反应的特性。

关键词： β2微球蛋白重组蛋白包涵体复性

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原代小鼠肝实质细胞三维培养

科学通报 2000年第11期45卷 1173-1178页

作者：何继满丰美福中国科学院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100080

小鼠原代肝实质细胞和同种小鼠肝成纤维细胞在无血清混合共培养条件下，形成了复杂的三维结构，而且维持良好的功能状态：白蛋白分泌水平在第７天时仍维持１０μｇ／１０＾６细胞以上，尿素合成水平平均达２５μｇ／１０＾６细胞，通过... 详细信息

小鼠原代肝实质细胞和同种小鼠肝成纤维细胞在无血清混合共培养条件下，形成了复杂的三维结构，而且维持良好的功能状态：白蛋白分泌水平在第７天时仍维持１０μｇ／１０＾６细胞以上，尿素合成水平平均达２５μｇ／１０＾６细胞，通过无血清的培养方式，可避开血清中复杂成分的作用，研究肝成纤维细胞对肝实质细胞的活性、功能和三维结构形成的作用，表明间质成分对肝实质细胞活性和功能的影响中。

关键词：肝实质细胞原代培养三维结构细胞功能

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人肝癌组织细胞的激光光镊拉曼光谱研究

光谱学与光谱分析 2009年第7期29卷 1881-1883页

作者：王雁军姚辉璐王桂文汪蕴丰美福中国科学院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100101 广西科学院生物物理实验室广西南宁530003

激光光镊与拉曼光谱相结合形成的激光光镊拉曼光谱系统(LTRS)已用于分析生物组织标本,可对单个活细胞进行操控和光谱收集。从拉曼光谱特征峰位置、强度和线宽可得到有关细胞的组成、结构及细胞内物质相互作用的信息。文章应用LTRS系统,... 详细信息

激光光镊与拉曼光谱相结合形成的激光光镊拉曼光谱系统(LTRS)已用于分析生物组织标本,可对单个活细胞进行操控和光谱收集。从拉曼光谱特征峰位置、强度和线宽可得到有关细胞的组成、结构及细胞内物质相互作用的信息。文章应用LTRS系统,分析了来自人的恶性肝癌组织的不同病变部位标本,包括肝癌组织细胞、肝癌癌旁细胞和远离肝癌组织的肝脏正常的组织细胞,观察到了随肝癌的病变部位变化所出现的一些有趣的拉曼光谱峰的变化。正常的肝组织细胞在1 070和1 266 cm-1处的峰很明显,而肝癌和肝癌癌旁组织细胞的这两个峰则不明显,肝正常组织细胞的1 445 cm-1峰明显高于肝癌和肝癌癌旁组织细胞。已知1 070 cm-1峰代表脂类和核酸,1 266和1 445 cm-1峰代表脂类和蛋白。引起这些峰变化的物质很可能参与了肝癌的发生。上述初步研究结果表明:单细胞激光光镊拉曼光谱可以区分肝癌的不同病变部位,将是检测和分析肝癌组织标本的一种很好的方法。

关键词：人肝癌细胞人肝正常细胞拉曼光谱

母胎界面MHC-Ⅰ类分子及其与蜕膜淋巴细胞的相互作用

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自然科学进展 2004年第3期14卷 262-267页

作者：鱼艳荣汪蕴丰美福中国科学院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100080

人类和哺乳动物的妊娠过程是自然界存在的同种半异体移植免疫耐受的天然模型,母体和胎儿的免疫学关系是双向的交流,一方面由胎儿提呈的抗原来决定,另一方面依赖于母体对这些抗原的识别和反应。母胎界面滋养层上的MHC-I类分子和蜕膜淋巴... 详细信息

人类和哺乳动物的妊娠过程是自然界存在的同种半异体移植免疫耐受的天然模型,母体和胎儿的免疫学关系是双向的交流,一方面由胎儿提呈的抗原来决定,另一方面依赖于母体对这些抗原的识别和反应。母胎界面滋养层上的MHC-I类分子和蜕膜淋巴细胞在这一过程中起重要作用。人胎盘滋养层细胞不表达经典的HLA-A和HLA-B,只表达少量的HLA-C分子,但高表达非经典的HLA-G和HLA-E,它们是主要的免疫耐受分子。蜕膜淋巴细胞群也趋向于天然免疫,主要由NK细胞组成。同时它们之间的相互作用为母胎免疫耐受的建立提供了重要的分子机制,对其机制的研冤和阐释必将会对生殖生物学、移植免疫学及肿瘤治疗学的发展提供一定的思路。

关键词：妊娠免疫滋养层MHC-I类分子 HLA-G 蜕膜淋巴细胞

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青霉酸对尼西鸡的毒性作用

Zoological Research 2002年第3期23卷 261-265页

作者：何祖平袁慧丰美福中国科学院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100080 湖南农业大学动物科学技术学院湖南长沙410128

采用人工染毒的方法 ,观察或检测了青霉酸 (penicillicacid)中毒 6 0d内尼西鸡的病理组织变化、血液生理生化指标、血清酶活性和青霉酸在脏器中的残留量。结果表明 :①青霉酸中毒尼西鸡的主要病理变化是肝细胞脂肪变性、肾小管上皮细胞... 详细信息

采用人工染毒的方法 ,观察或检测了青霉酸 (penicillicacid)中毒 6 0d内尼西鸡的病理组织变化、血液生理生化指标、血清酶活性和青霉酸在脏器中的残留量。结果表明 :①青霉酸中毒尼西鸡的主要病理变化是肝细胞脂肪变性、肾小管上皮细胞浊肿、心肌细胞颗粒变性 ;②红细胞平均压积 (MCV)和红细胞平均血红蛋白浓度 (MCHC)显著低于对照组 ;而谷丙转氨酶 (SGPT)、乳酸脱氢酶 (LDH )和碱性磷酸酶 (AKP)等血清酶活性显著高于对照组 ;③青霉酸在各脏器中含量分布依次为肝 >肾 >心 ,表明青霉酸的分布与各脏器的病变程度具有相关性 ,肝脏是青霉酸作用的靶器官。其结果为家禽青霉酸中毒疾病的防治和青霉酸的中毒机理提供了科学依据。

关键词：青霉酸尼西鸡毒性作用病理组织血液饲料中毒霉变饲料

泡疹病毒特异性MHC限制的T辅助细胞杂交瘤的制备及其特性的初步研究

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动物学报 1991年第1期37卷 95-99页

作者：丰美福楚杰中国科学院动物研究所山东省科学院生物所

将HSV-I免疫过的小鼠淋巴结细胞在体外扩增,收集富集HSV-I抗原特异性的T细胞与BW 5147胸腺瘤细胞融合。对融合后产生的杂交瘤细胞进行抗原特异性及MHC识别限制选择。结果所得的T杂交瘤细胞具有在HSV-I特异刺激下,MHC一致时,有分泌IL-2... 详细信息

将HSV-I免疫过的小鼠淋巴结细胞在体外扩增,收集富集HSV-I抗原特异性的T细胞与BW 5147胸腺瘤细胞融合。对融合后产生的杂交瘤细胞进行抗原特异性及MHC识别限制选择。结果所得的T杂交瘤细胞具有在HSV-I特异刺激下,MHC一致时,有分泌IL-2的能力,并在体内耳廓病毒清除中发挥作用。它们是HSV-I抗原特异性,H-2~d限制的,具有辅助活性的T杂交瘤细胞。

关键词：泡疹病毒特异性 T细胞杂交瘤

雷公藤红素对培养的动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

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中国中西医结合杂志 1998年第S1期18卷 39-41,358页

作者：陈星丰美福朱国英北京医科大学第一医院中国科学院动物研究所

目的:动脉血管平滑肌细胞(VSMC)过度增殖是动脉粥样硬化及冠脉成形术(PTCA)后再狭窄形成的主要原因,为了探讨雷公藤红素预防再狭窄形成的可能,本研究观察了雷公藤红素对培养的大鼠胸主动脉 VSMC 增殖的影响。方法:采用大鼠传代培养的 VS... 详细信息

目的:动脉血管平滑肌细胞(VSMC)过度增殖是动脉粥样硬化及冠脉成形术(PTCA)后再狭窄形成的主要原因,为了探讨雷公藤红素预防再狭窄形成的可能,本研究观察了雷公藤红素对培养的大鼠胸主动脉 VSMC 增殖的影响。方法:采用大鼠传代培养的 VSMC(4～7代),将雷公藤红素(0.05～0.40mg/L)加入细胞培养基中,24h 和48h 后用中性红细胞染色法测定细胞总蛋白的方法做细胞计数并测定氚-胸腺嘧啶脱氧核苷(~3H-TdR)掺入的放射性强度每分计数(cpm)值,求各组均值及标准差,采用 q 检验做统计学处理。结果:各药物剂量组的雷公藤均可抑制 VSMC 增殖及对~3H-TdR 的掺入并呈药物剂量依赖性关系,与对照组比较P<0.05或 P<0.01。结论:雷公藤红素能够抑制大鼠 VSMC 的增殖,为该药物可能用于以VSMC 增殖为主的冠心病和再狭窄的形成提供了实验依据。

关键词：动脉平滑肌细胞增殖雷公藤红素氚-胸腺嘧啶脱氧核苷掺入