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原发性胆汁性肝硬化患者血清中自身抗体的检测

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原发性胆汁性肝硬化患者血清中自身抗体的检测

全国自身免疫性疾病专题研讨会暨第十一次全国风湿病学学术年会

作者：徐明丛贤滋黄烽解放军总医院风湿科

目的:分析原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血清中自身抗体谱的特点及其临床意义。方法:选择符合2000年美国肝病学会对PBC诊断指导建议的患者23例。采用间接免疫荧光法 (德国EuroImmun公司试剂)检测其血清中抗核抗体(ANA)、抗中性粒细胞胞...

目的:分析原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血清中自身抗体谱的特点及其临床意义。方法:选择符合2000年美国肝病学会对PBC诊断指导建议的患者23例。采用间接免疫荧光法 (德国EuroImmun公司试剂)检测其血清中抗核抗体(ANA)、抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)、抗线粒体抗体(AMA)、抗平滑肌抗体(SMA)和抗着丝点抗体(ACA);采用酶免疫斑点法(美国ImmunoDot公司试剂)检测ENA抗体6项;对AMA阳性血清采用免疫印迹法(德国Eurolmmun公司试剂)进行AMA

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Farr法检测抗ds-DNA抗体的特异性及敏感性

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Farr法检测抗ds-DNA抗体的特异性及敏感性

中华医学会全国风湿病学年会

作者：丁玉珍丛贤滋解放军总医院风湿科

目的:检测抗ds-DNA抗体经典的方法是I125标记的Farr法,本室采用此法已有20余年,为临床提供了大量的诊断参考数据,但时有测定结果与临床不符的情况,是操作方法问题,还是患者体内的真实反应,本文仅就该法的诊断特异性及敏感性探讨之。方法...

目的:检测抗ds-DNA抗体经典的方法是I125标记的Farr法,本室采用此法已有20余年,为临床提供了大量的诊断参考数据,但时有测定结果与临床不符的情况,是操作方法问题,还是患者体内的真实反应,本文仅就该法的诊断特异性及敏感性探讨之。方法:采用I125标记的Farr法(北京401所提供试剂

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抗核周因子与抗角蛋白抗体相关性的探讨

抗核周因子与抗角蛋白抗体相关性的探讨

中华医学会全国风湿病学年会

作者：丁玉珍丛贤滋解放军总医院风湿科

本文旨在对抗核周因子(APF)与抗角蛋白(AKA)的相关性做进一步探讨。方法:(1)病例选择:本院风湿科临床近2年送检的患者血清标本,总计275例,性别不计;年龄6-79岁,平均年龄(42±6)岁;其中类风湿关节炎(RA)120例、骨关节炎(OA)28例、其它85...

本文旨在对抗核周因子(APF)与抗角蛋白(AKA)的相关性做进一步探讨。方法:(1)病例选择:本院风湿科临床近2年送检的患者血清标本,总计275例,性别不计;年龄6-79岁,平均年龄(42±6)岁;其中类风湿关节炎(RA)120例、骨关节炎(OA)28例、其它85例、待诊42例。(2)所有标本均同时用间接免疫检荧光法检测APF及AKA:底物片均为本室自制,荧光抗体为异硫氰酸荧光磺标记的羊抗人IgG (外购),检测程序相同:底物片加受试血清后,置湿盒34-37℃温箱孵育45分钟,缓冲液流洗及泡洗足 1分钟,加荧光血清同样温箱孵育30分钟,再缓冲液流洗及泡洗1分钟以上,封片荧光镜检。(3)将结果的等级资料转变为计量资料计算其关系数(r值),转变为计数资料进行卡方(χ2)检验,分析APF与AKA 的相关性及关联程度。结果:(1)APF与AKA检测结果r值为0．64,属中度相关;(2)在98例APF阳性及61例AKA阳性的血清标本中,二者共同阳性54例,而177例APF阴性及214例AKA阴性中,共同阴性者170例,符合率为81％(224／275),独APF阳性者44例,独AKA阳性者仅7例(χ2=95．6,P< 0．005),可以认为APF与AKA有内在关联,列联系数(C)=0．5078(C的意义相当于r值,其值亦在0-1 之间,越近1,表示二者的关联程度越密切),说明二者关联程度中等。结论:本文结果显示APF与AKA 有内在关联,相关程度中等,AKA阳性的病例中,88％(54／61)APF亦阳性,而APF阳性者仅55％(54／98)

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间接免疫荧光法检测抗核周因子方法的简化

间接免疫荧光法检测抗核周因子方法的简化

中华医学会全国风湿病学年会

作者：丛贤滋丁玉珍张江林解放军总医院风湿科

目的:文献报道的间接免疫荧光法检测抗核周因子,各操做步骤较费时,为更方便于临床检验,作用将其加以简化,并测定与原法的一致性。方法:(1)将本院风湿科临床就诊并送检的患者血清标本总计 117例[性别不计,年龄10-76岁,平均年龄(40±16)岁...

目的:文献报道的间接免疫荧光法检测抗核周因子,各操做步骤较费时,为更方便于临床检验,作用将其加以简化,并测定与原法的一致性。方法:(1)将本院风湿科临床就诊并送检的患者血清标本总计 117例[性别不计,年龄10-76岁,平均年龄(40±16)岁;其中RA 47例、OA 11例、其它38例,待诊21 例)。同时采用文献报道法(下称原法)与简化后的方法(下称简法)检测抗核周因子(APF),结果经统计学方法测定两法的一致性及符合率;(2)原法与简法使用同样批次自制底物片,原法主要操作步骤:底物片加受试血清后,置湿盒室湿孵育90分钟,缓冲液浸泡洗3次,每次5分钟,吹干、加荧光血清同样室温孵育30分钟,同上缓冲液浸泡洗3次,每次5分钟,封片荧光镜检,测完每份标本全程需时2小时40分钟。简法:底物片加受试血清后,置湿盒34-37℃温箱孵育45分钟,缓冲液流洗及泡洗1分钟以上即可,加荧光血清同样温箱孵育30分钟,缓冲液流洗及泡洗1分钟以上,封片荧光镜检,测完每份标本全程只需1小时20分钟。结果:原法测定每份标本全程需时为2小时40分钟,而简法只需1小时20分钟,是原法需时的1／2。两法测定结果中共同阳性48例(阳性率41％),共同阴性69例,符合率为100％ (117／117);但两法均有个别阳性病例在荧光强度上互有差别,将测定结果的等级资料转变为计量资料计算相关系数(r为0．96),两法检测结果高度一致。结论:使用本文的简法检测APF省时,简便、更便于临床较多样本检测,且测定结果与原法基本一致。推荐采用之。

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微量淋巴细胞毒技术与核酸扩增荧光技术检测HLA-B27的对比

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解放军医学院学报 2014年第3期35卷 280-282页

作者：丛贤滋李晓峰黄烽解放军总医院风湿科实验室北京100853

目的通过比较核酸扩增荧光技术(PCR-染料法)和微量淋巴细胞毒技术在检测HLA-B27中的符合率,分析两种方法的优势与不足,探讨核酸扩增荧光技术(PCR-染料法)在HLA-B27检测中的临床应用价值。方法随机选取197例来我科就诊的疑似强直性脊柱炎... 详细信息

目的通过比较核酸扩增荧光技术(PCR-染料法)和微量淋巴细胞毒技术在检测HLA-B27中的符合率,分析两种方法的优势与不足,探讨核酸扩增荧光技术(PCR-染料法)在HLA-B27检测中的临床应用价值。方法随机选取197例来我科就诊的疑似强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者的样本,分别使用微量淋巴细胞毒法和PCR-染料法检测。并对两种方法检测结果不符的样本进行测序复核。结果 197例样本中,微量淋巴细胞毒法检出HLA-B27阳性150例,阴性47例;PCR-染料法检出阳性135例,阴性62例;两种方法检测结果有统计学差异(P<0.01)。15例差异样本,两种方法与测序法相比较的符合率,微量淋巴细胞毒法为13.3%,PCR-染料法为86.7%。结论核酸扩增荧光技术(PCR-染料法)和微量淋巴细胞毒法比较,前者具有更高的临床准确性。在样本处理上PCR-染料法也更具优势,操作简单方便,有很强的临床应用价值。

关键词： HLA-B27 强直性脊柱炎微量淋巴细胞毒试验法核酸扩增(荧光PCR-染料法)

洛伐他汀治疗大鼠胶原诱导性关节炎的实验研究

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洛伐他汀治疗大鼠胶原诱导性关节炎的实验研究

第十二届全国风湿病学学术会议

作者：赵征黄烽王炎焱王莉莎张亚美丛贤滋解放军总医院

为了研究洛伐他汀对大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)的治疗作用,在牛Ⅱ型胶原尾根部及背部多点注射清洁级雌、雄性 Wistar 大鼠,建立 CIA 动物模型。CIA 大鼠被分为3 组,正常对照组、CIA 模型组、洛伐他汀治疗组各9只。洛伐他汀每只1．8mg/kg...

为了研究洛伐他汀对大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)的治疗作用,在牛Ⅱ型胶原尾根部及背部多点注射清洁级雌、雄性 Wistar 大鼠,建立 CIA 动物模型。CIA 大鼠被分为3 组,正常对照组、CIA 模型组、洛伐他汀治疗组各9只。洛伐他汀每只1．8mg/kg 灌胃,每日1次,共24d。CIA 模型组蒸馏水灌胃,每日1次,共24d。观察大鼠踝周径及足容积、

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甘露糖结合凝集素在系统性红斑狼疮发病机制中的初步研究

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中华医学杂志 2006年第7期86卷 463-467页

作者：李胜光黄烽刘湘源邓心新徐明丛贤滋丁玉珍郭军华邓小虎赵绵松解放军总医院风湿科北京100853 解放军总医院生化科北京100853 首都医科大学宣武医院风湿免疫科

目的通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者甘露糖结合凝集素(MBL)的血清水平及其基因变异情况,探讨MBL在SLE发病机制中的作用。方法以30名健康献血员为对照,以40例SLE患者为研究对象。通过固相ELISA方法检测MBL的血清水平。根据MBL2*LXPA(... 详细信息

目的通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者甘露糖结合凝集素(MBL)的血清水平及其基因变异情况,探讨MBL在SLE发病机制中的作用。方法以30名健康献血员为对照,以40例SLE患者为研究对象。通过固相ELISA方法检测MBL的血清水平。根据MBL2*LXPA(基因库X15422)单倍体序列设计了MBL外显子1区和启动子区的引物和荧光标记的寡核苷酸杂交探针,通过L ight Cyc ler实时PCR技术检测2组标本的基因变异情况。结果(1)SLE患者的MBL血清水平显著低于健康献血员(107.2μg/L对290.2μg/L,P<0.01)。(2)MBL基因外显子1区的突变以第54位密码子的突变为主,其突变率在SLE患者为37.1%(15/40),对照组为13.3%(5/30),两组比较χ2=3.914,P<0.05。(3)健康献血员和SLE患者在H/L位点均存在多态性,两组的L频率相当。(3)发生第54位密码子突变的SLE患者血清MBL水平显著下降,发生突变者与未发生突变者分别为141.7μg/L,49.8μg/L,两者比较P<0.01;两者的SLE活动指数(DAI)积分分别为12.87和7.44,P<0.01,且SLEDAI积分与MBL血清水平呈负相关(r=-0.48),启动子区H/L多态性与SLEDAI无关。结论发生MBL基因第54位密码子突变可能是SLE发病的易感因素;MBL的血清水平可能是SLE疾病活动性的潜在生物标记。

关键词：系统性红斑狼疮甘露糖结合凝集素发病机理基因突变

血清高迁移率族蛋白1水平与皮肌炎/多肌炎的关系

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军医进修学院学报 2012年第6期33卷 565-566页

作者：丛贤滋赵征李晓峰张江林解放军总医院风湿科北京100853

目的检测皮肌炎/多肌炎(PM/DM)患者血清中高迁移率族蛋白1(high mobility group box chromosomal protein 1,HMGB1)的水平,探讨其在PM/DM中的发病机制及诊断价值。方法选取47例明确诊断PM/DM的患者,41例系统性红斑狼疮(SLE)患者,及其他... 详细信息

目的检测皮肌炎/多肌炎(PM/DM)患者血清中高迁移率族蛋白1(high mobility group box chromosomal protein 1,HMGB1)的水平,探讨其在PM/DM中的发病机制及诊断价值。方法选取47例明确诊断PM/DM的患者,41例系统性红斑狼疮(SLE)患者,及其他风湿免疫性疾病患者37例,同时选取健康志愿者50例,采用ELISA方法检测各组血清中HMGB1水平,分析其与PM/DM及其他风湿免疫性疾病的相关性。结果血清HMGB1在PM/DM及SLE患者中水平明显高于健康对照组(分别为22.65ng/ml、16.76ng/ml及7.24ng/ml)(P<0.01),在PM/DM患者中的表达明显高于SLE及其他风湿免疫性疾病组(分别为22.65ng/ml、16.76ng/ml及12.39ng/ml)(P<0.05),Logistic回归分析显示,HMGB1与PM/DM具有显著相关性。结论 PM/DM患者血清HMGB1水平明显升高,提示HMGB1可能作为促炎因子在PM/DM的发病中起重要作用,HMGB1或可做为诊断PM/DM的辅助检查之一。

关键词：高迁移率族蛋白1 皮肌炎多肌炎诊断

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2006年全国自身抗体检测质量控制总结

中华风湿病学杂志 2008年第6期12卷 382-385页

作者：黄烽丛贤滋李小峰张江林丁玉珍解放军总医院风湿科北京100853

目的了解我国自身抗体检测的现状，促进自身抗体检测水平的提高。方法以自愿报名的方法确定参与单位。质量控制项目包括抗核抗体（ANA）、抗双链DNA（dsDNA）抗体）、抗可提取核抗原（ENA）抗体、抗线粒体抗体（AMA），抗平滑肌抗体（... 详细信息

目的了解我国自身抗体检测的现状，促进自身抗体检测水平的提高。方法以自愿报名的方法确定参与单位。质量控制项目包括抗核抗体（ANA）、抗双链DNA（dsDNA）抗体）、抗可提取核抗原（ENA）抗体、抗线粒体抗体（AMA），抗平滑肌抗体（ASMA）、抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP）5项，共15份标本。标本发放及结果分析采用双盲操作。结果共55家医院，科室参加质量控制活动。本次ANA、抗dsDNA抗体、AMA／ASMA和CCP的正确率分别为92％、89％、96％、72％，抗ENA按抗RNP、Sm、SSA、SSB和Scl-70分别分析，正确率分别为98％、89％、92％、75％、77％。结论我国自身抗体检测情况与前3次质控相比，检测的项目逐年增多，检测水平逐步提高。

关键词：自身抗体免疫学试验质量控制