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丙型肝炎病毒RNA打点杂交检测方法同RT－PCR方法的比较

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病毒学报 1994年第3期10卷 257-262页

作者：杨永平丛勉尔夏宁邵曹经瑗刘崇柏中国预防医学科学院病毒学研究所

采用ＨＣＶ基因组结构区Ｃ区ｃＤＮＡ探针和非结构区ＮＳ３－４区ｃＤＮＡ探针，建立了用打点杂交（ｄｏｔｂｌｏｔｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）检测血清中ＨＣＶＲＮＡ的方法，同采用ＨＣＶ基因组５’端非编码区的一对寡核苷酸引物通... 详细信息

采用ＨＣＶ基因组结构区Ｃ区ｃＤＮＡ探针和非结构区ＮＳ３－４区ｃＤＮＡ探针，建立了用打点杂交（ｄｏｔｂｌｏｔｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）检测血清中ＨＣＶＲＮＡ的方法，同采用ＨＣＶ基因组５’端非编码区的一对寡核苷酸引物通过逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测血清中ＨＣＶＲＮＡ的方法相比较，发现两种方法都能快速早期和特异地检出血清中ＨＣＶＲＮＡ，但ＲＴ－ＰＣＲ法敏感性优于ＲＮＡ打点杂交法。对于无血清学指标的慢性ＮＡＮＢ肝炎病人的诊断，可采用这两种方法。这两种方法的敏感性在很大程度上依赖于引物和探针的敏感性，以及ＲＮＡ提取方法。ＲＴ－ＰＣＲ法适用于诊断病毒血症和复制，打点杂交法适用于研究ＨＣＶＲＮＡ量的变化，对治疗的评价，以及为实验筛选较高滴度的ＨＣＶＲＮＡ阳性样本。

关键词：丙型肝炎病毒打点杂交检测 RNA

从中国病人克隆丙型肝炎病毒基因组C区基因及其在大肠杆菌中的表达

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病毒学报 1994年第2期10卷 108-117页

作者：杨永平刘崇柏夏宁邵丛勉尔汤权曹经缓中国预防医学科学院病毒学研究所

本文通过逆转录（ＲＴ）－聚合酶链式反应（ＰＣＲ），从两份分别来自湖南省娄底地区丙型肝炎病人和河北省秦皇岛市职业献血员丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ打点杂交阳性的血清中，扩增并克隆到１段５６３ｂｐ的ＨＣＶ基因组Ｃ区抗原基... 详细信息

本文通过逆转录（ＲＴ）－聚合酶链式反应（ＰＣＲ），从两份分别来自湖南省娄底地区丙型肝炎病人和河北省秦皇岛市职业献血员丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ打点杂交阳性的血清中，扩增并克隆到１段５６３ｂｐ的ＨＣＶ基因组Ｃ区抗原基因Ｃ２６９／８３１，并通过ＰＣＲ得到了３个表达片段Ｃ８３１、Ｃ８０１和Ｃ５８７。测定Ｃ２６９／８３１基因的全序列后发现，中国人ＨＣＶ湖南分离株与ＨＣＶ－Ⅰ型株ＨＣＶ－ＵＳ和Ⅱ型株ＨＣＶ－ＢＫ在该基因区段的核苷酸／氨基酸序列的同源性，分别为９０．３％／９４．６％和９５．２％／９４．６％。利用原核高效表达载体ｐＢＶ２２０在大肠杆菌中有效地表达了非融合的Ｃ区抗原基因重组蛋白ＣＬ、ＣＭ和ＣＳ。通过免疫筛选法及Ｗｅｓｔｅｍ印迹法对约占菌体可溶性蛋白１１％的表达产物进行了鉴定。采用ＴｒｉｔｏｎＸ－１００和盐析处理表达产物，再进行离子交换层析纯化，得到可用于检测ＨＣＶ血清抗体的核壳蛋白（Ｃ）抗原。通过不同分子量抗原的表达，发现由Ｃ区Ｎ端８９个氨基酸组成的多肽ＣＳ其抗原性与由１５８或１６８个氨基酸组成的多肽ＣＭ或ＣＬ相同，但抗原的稳定性和表达量显著优于后两种抗原。本研究为研制ＨＣＶ抗体诊断试剂盒奠定了重要基础。

关键词： cDNA 克隆丙型肝炎病毒基因组

职业供血员中抗HCV（C100—3,AR—14）及HCVRNA分子...

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武汉市医学科研 1991年第2期13卷 11-14页

作者：马为民丛勉尔

中国人丙型肝炎病毒基因组的一级结构及其变异

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病毒学报 1993年第2期9卷 114-127页

作者：毕胜利白宪鹤丛勉尔田厚文孙得贵 H.S.Margolis 刘崇柏中国预防医学科学院病毒学研究所北京100052 广西壮族自治区卫生防疫站河北省固安县卫生防疫站美国疾病控制中心

自河北省固安县和上海市的两份急性丙型肝炎病人血清分离丙型肝炎病毒RNA,纯化后经反转录和聚合酶链反应(PCR)获得覆盖病毒基因组全长的cDNA片段。通过对河北株丙型肝炎病毒基因全部cDNA序列的分析,以及对上海株丙型肝炎病毒部分重要区... 详细信息

自河北省固安县和上海市的两份急性丙型肝炎病人血清分离丙型肝炎病毒RNA,纯化后经反转录和聚合酶链反应(PCR)获得覆盖病毒基因组全长的cDNA片段。通过对河北株丙型肝炎病毒基因全部cDNA序列的分析,以及对上海株丙型肝炎病毒部分重要区域cDNA序列的分析,确定了中国人丙型肝炎病毒基因cDNA的一级结构和变异趋势。实验结果表明,中国人丙型肝炎病毒的基因结构同日本与美国研究人员最初分离的丙型肝炎病毒基因结构相似。以中国河北株与日本HCV-J株比较,病毒基因有771个核苷酸不同,两者同源性为91.8％;氨基酸残基有174个不同,其同源性为94.3％。与美国HCV-1株相比,中国河北株有2011个棱苷酸发生变化,同源性为78.6％;氨基酸残基有458个发生变化,同源性为84.9％。河北与上海两株比较的结果发现,各区域变异程度大小不同,以E2基因区最高,NS3—NS4,NS5高度保守。总体水平上分析,我国的两株丙型肝炎病毒基因虽有变异,但总变异率很低,并且变异主要发生在结构基因区域。而与国外丙型肝炎病毒相比,变异则贯穿于全基因。表明中国丙型肝炎病毒基因组在核苷酸水平上有一定的共同特征。

关键词：丙型肝炎病毒聚合酶链反应结构

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甲型肝炎病毒结构蛋白在大肠杆菌中的表达

病毒学报 1989年第4期5卷 312-317页

作者：贾希瑜丛勉尔李景源刘崇柏中国预防医学科学院病毒学研究所

利用甲型肝炎病毒cDNA,将编码病毒主要结构蛋白基因的不同区段插入到pUC19和pUR290(或pUR292),组建成一系列表达质粒,使甲肝病毒结构蛋白与β-半乳糖苷酶形成融合蛋白,在大肠杆菌中得到表达。表达克隆pHABB-290含部分VP3的羟基端及VP1... 详细信息

利用甲型肝炎病毒cDNA,将编码病毒主要结构蛋白基因的不同区段插入到pUC19和pUR290(或pUR292),组建成一系列表达质粒,使甲肝病毒结构蛋白与β-半乳糖苷酶形成融合蛋白,在大肠杆菌中得到表达。表达克隆pHABB-290含部分VP3的羟基端及VP1氨基端的一半;pHABP-290含VP1的中间一段;pHABSR1-19含小部分VP3和近完整的VP1;pHAPH292含VP2羟基端的约2/3和VP3的绝大部份。用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析上述克隆,蛋白染色后,在预计位置均可见到很浓的表达蛋白带,而且表达的融合蛋白均受IPTG诱导。Westernblot分析发现,只有pHABSR1-19表达的融合蛋白可与甲肝病人恢复期血清起免疫反应。这说明表达的融合蛋白含有甲肝病毒自然感染时所具有的抗原性。

关键词：甲肝病毒外壳蛋白基因表达

职业供血员丙型肝炎病毒抗体及病毒RNA分子杂交的检测

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中华内科杂志 1992年第5期31卷 302-302页

作者：马为民彭怡纯王火生冯彦文陈邦惠严晓波万涛丛勉尔刘崇柚武汉市传染病医院肝炎研究室广州军区后勤部供血站武汉市中心血站中国预防医学科学院病毒研究所

我们于1991年应用美国丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)(C100-3)及日本抗HCV(AR-14)酶联免疫试剂对160名职业供血员进行双重检测;阳性者再用我国研制的丙型肝炎病毒(HCV)cDNA探针作斑点杂交检测HCV RNA。现将结果报告如下。

关键词：供血员丙型肝炎病毒抗体病毒RNA分子杂交

考虑时变特性的车-桥耦合系统非平稳振动频域方法研究

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铁道科学与工程学报 2024年第5期21卷 1930-1941页

作者：雷思勉葛耀君李奇同济大学土木工程学院上海200092 博洛尼亚大学土木工程学院意大利博洛尼亚40121

当列车行驶经过桥梁时,由于车辆在桥上的位置随时间不断变化,车-桥耦合系统具有时变特性,即使假设轨道不平顺为平稳激励,车辆和桥梁的振动仍然是一种非平稳的随机过程。本研究旨在提出一种非平稳频域分析方法,以高效分析受轨道不平顺激... 详细信息

当列车行驶经过桥梁时,由于车辆在桥上的位置随时间不断变化,车-桥耦合系统具有时变特性,即使假设轨道不平顺为平稳激励,车辆和桥梁的振动仍然是一种非平稳的随机过程。本研究旨在提出一种非平稳频域分析方法,以高效分析受轨道不平顺激励的车-桥耦合系统的非平稳随机振动问题。首先推导了单节列车通过单跨简支桥的耦合系统时变频响传递函数(FRF),据此描述线性时变系统的动力特性。该函数满足一组变系数微分方程,可采用摄动法求解该函数,从而提高计算效率。随后,结合PRIESTLEY的演化谱理论,推导非平稳随机响应的演化功率谱密度函数(EPSD)。基于非平稳频域分析方法,计算响应时变均值和方差,结合3σ准则来估计非平稳响应的极值。研究结果表明,由于轨道不平顺的影响,车辆振动表现出平稳随机过程的特性,但其方差较大,表现出更大的离散性;而桥梁的振动则呈现出明显的非平稳特性,但方差较小,响应具有较小的随机性。极值分析表明,轨道不平顺激励对车辆振动具有显著影响,其均方根对极值响应起主导作用。而轨道不平顺激励对桥梁振动的影响较小,桥梁振动则主要受移动质量影响,其响应的极值主要受均值的影响。此外,相较于系统位移响应,车速对加速度响应的影响更为显著,例如车身加速度响应最大值随车速的增加可增大至3倍左右。

关键词：车桥耦合轨道不平顺频域分析方法非平稳随机振动摄动法演化谱

企业数字化转型的就业效应——来自中国A股上市公司的证据

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学习与探索 2024年第09期 125-136页

作者：赖勉珊 A.菲利普深圳大学中国经济特区研究中心剑桥大学剑桥大学经济与公共政策中心

依托企业主体在实现数字化转型的同时扩大就业效应，有助于同步实现“数字化”和“稳就业”的双重目标。本文基于2007—2022年沪深A股企业面板数据，探究了企业数字化转型的就业效应。结果表明，企业数字化转型有助于提升企业就业水平... 详细信息

依托企业主体在实现数字化转型的同时扩大就业效应，有助于同步实现“数字化”和“稳就业”的双重目标。本文基于2007—2022年沪深A股企业面板数据，探究了企业数字化转型的就业效应。结果表明，企业数字化转型有助于提升企业就业水平。具体来说，企业数字化转型通过劳动力吸引效应、技术创新效应和生产规模扩张效应显著提升企业就业水平。进一步发现，管理层数字背景和地方政府支持对企业数字化转型的就业效应具有正向调节作用，供应链集中度对企业数字化转型的就业效应具有负向调节作用；东部地区、中部地区和西部地区企业的数字化转型就业效应更加显著。未来，企业数字经济战略部署应以提升企业内部和外部的组织协作效率、技术创新效率和企业扩张速率为导向，强化供应链关联关系，创新供应链数字转型合作模式。

关键词：数字经济企业数字化转型技术创新就业效应劳动力稳就业

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婚姻代际地位交换与多代教育传递

社会学评论 2024年第3期12卷 95-121页

作者：丛金洲华东师范大学社会发展学院

本文利用中国家庭追踪调查三期数据,以孙代早期认知能力为结果指标,检验了中国社会情境下婚姻代际地位交换对多代教育传递的影响。研究发现,无论父系还是母系,存在祖代与父代配偶的代际地位交换,进而传递了祖代教育成就对孙代早期认知... 详细信息

本文利用中国家庭追踪调查三期数据,以孙代早期认知能力为结果指标,检验了中国社会情境下婚姻代际地位交换对多代教育传递的影响。研究发现,无论父系还是母系,存在祖代与父代配偶的代际地位交换,进而传递了祖代教育成就对孙代早期认知能力的影响。另外,男性在婚姻交换中的代际地位交换程度要大于女性,由此在教育传递上带来的父系祖代间接效应也要大于母系祖代间接效应,婚姻代际地位交换对维系父系社会再生产更为有利。本文在教育获得视角下扩展了多代传递的马尔可夫过程,而经典的单系模式可视为多代不平等传递的约束线,其他或直接或间接的祖代影响路径值得继续探究。

关键词：婚姻代际地位交换多代教育传递祖代效应父代配偶扩展马尔可夫过程

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