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油酸对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达和胆固醇流出的影响

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第12期35卷 1077-1082页

作者：唐朝克杨峻浩易光辉王佐刘录山万载阳袁中华阮长耿杨永宗南华大学心血管病研究所南华大学心血管病研究所衡阳421001

以THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象 ,观察油酸对THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的影响 ,以探讨油酸对动脉粥样硬化发生发展的影响。用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出 ,高效液相... 详细信息

以THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象 ,观察油酸对THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的影响 ,以探讨油酸对动脉粥样硬化发生发展的影响。用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出 ,高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量 ,运用逆转录多聚酶链反应和Western印迹分别检测ABCA1mRNA与ABCA1蛋白的表达 ,采用流式细胞术检测细胞平均ABCA1荧光强度。实验显示油酸引起THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯呈时间依赖性增加 ,而ABCA1蛋白水平、细胞平均ABCA1荧光强度以及apoA I介导的胆固醇流出呈时间依赖性减少 ,细胞内胆固醇增多 ,但ABCA1mRNA没有明显变化。结果表明 ,油酸减少THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1蛋白水平 ,降低细胞内胆固醇流出 ,增加细胞内胆固醇聚积。

关键词：三磷酸腺苷结合盒转运体A1 流式细胞术胆固醇低密度脂蛋白

消斑肽加速氧化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞凋亡

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中国病理生理杂志 2001年第10期17卷 935-937,T001页

作者：袁中华杨永宗杨小毅谭健苗万载阳衡阳医学院心血管病研究所湖南衡阳421001

目的 :我们已经发现消斑肽能逆转平滑肌源性的泡沫细胞 ,阻抑C5 7BL/6J小鼠动脉粥样硬化斑块的形成 ,对已形成的斑块有消退作用。本文主要探讨消斑肽的作用机制。方法 :体外培养的猪主动脉平滑肌细胞 ,先与 15mg/L的氧化低密度脂蛋白孵... 详细信息

目的 :我们已经发现消斑肽能逆转平滑肌源性的泡沫细胞 ,阻抑C5 7BL/6J小鼠动脉粥样硬化斑块的形成 ,对已形成的斑块有消退作用。本文主要探讨消斑肽的作用机制。方法 :体外培养的猪主动脉平滑肌细胞 ,先与 15mg/L的氧化低密度脂蛋白孵育 72h ,再与 0 1mg/L消斑肽孵育 2 4h ,应用荧光染色技术、激光共聚焦显微技术和流式细胞术 ,观察消斑肽对平滑肌细胞的作用。结果 :氧化低密度脂蛋白能诱导血管平滑肌细胞发生凋亡 ;消斑肽能加速氧化低密度脂蛋白诱导的细胞凋亡。结论 :综合以前的实验 ,消斑肽可能是通过加速斑块中细胞的凋亡发挥抗动脉粥样硬化效果。

关键词：肽类脂蛋白类 LDL 细胞凋亡血管平滑肌细胞 VSMC 消斑肽氯化低密度脂蛋白动脉粥样硬化

支气管哮喘豚鼠肺内γ谷氨酰半胱氨酸合成酶重链表达调控和地塞米松对其的影响

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中华结核和呼吸杂志 2004年第4期27卷 277-278页

作者：曹守冬戴爱国易光辉万载阳危当恒湖南省老年医院老年医学研究所长沙410001 南华大学附属第三医院呼吸疾病研究室

支气管哮喘(简称哮喘)是以慢性气道炎症和气道高反应性为特征的疾病.炎性细胞在气道局部产生大量活性氧/氮簇(ROS/RNS),造成氧化/抗氧化失衡,使病情进一步加重.呼吸道表面液体(RTLF)中丰富的还原型谷胱甘肽(GSH)是肺内抗氧化保护体系中... 详细信息

支气管哮喘(简称哮喘)是以慢性气道炎症和气道高反应性为特征的疾病.炎性细胞在气道局部产生大量活性氧/氮簇(ROS/RNS),造成氧化/抗氧化失衡,使病情进一步加重.呼吸道表面液体(RTLF)中丰富的还原型谷胱甘肽(GSH)是肺内抗氧化保护体系中最主要的成分.γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)是由重链(γ-GCSh)和轻链(γ-GCSL)构成的异二聚体,是GSH合成限速酶.糖皮质激素是哮喘治疗的一线药物.

关键词：支气管哮喘豚鼠肺 γ谷氨酰半胱氨酸合成酶重链表达调控地塞米松

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甘油三酯酶传感器的研制及应用

生物化学与生物物理进展 1999年第2期26卷 144-146页

作者：王永生李贵荣吕昌银万载阳刘传湘衡阳医学院化学教研室

将脂肪酶固定在ｐＨ玻璃电极上，制成甘油三酯酶传感器．对传感器的制作方法和响应性能进行了研究．在３７℃，选择ＴｒｉｓＨＣｌ缓冲溶液（ｐＨ８５）为测量介质，所制传感器对甘油三酯的响应线性范围为３０９×１０－６～１... 详细信息

将脂肪酶固定在ｐＨ玻璃电极上，制成甘油三酯酶传感器．对传感器的制作方法和响应性能进行了研究．在３７℃，选择ＴｒｉｓＨＣｌ缓冲溶液（ｐＨ８５）为测量介质，所制传感器对甘油三酯的响应线性范围为３０９×１０－６～１９１×１０－３ｍｏｌ／Ｌ，响应斜率为３２７ｍＶ／ｐＣ，响应时间为５～１０ｍｉｎ，使用寿命可达２５ｄ．用研制的传感器测定了人和兔血清中的甘油三酯含量，结果满意．

关键词：甘油三酯生物传感器脂肪酶血清检测

醛糖还原酶相似基因转染细胞对含碳酰基抗癌药物耐药的研究

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中华肝脏病杂志 2002年第6期10卷 445-448页

作者：王建万腊香吴孟津万载阳危当恒杨永宗湖南南华大学分子生物中心衡阳421001

目的研究醛糖还原酶相似蛋白(aldose reductase like prptein,ARL-1)在肝癌细胞中的功能及ARL-1基因高表达与肝癌耐药之间的关系。方法通过阳离子脂质体转染法将ARL-1基因导入HepG2细胞,建立稳定表达该基因的细胞株,采用MTT法检测细... 详细信息

目的研究醛糖还原酶相似蛋白(aldose reductase like prptein,ARL-1)在肝癌细胞中的功能及ARL-1基因高表达与肝癌耐药之间的关系。方法通过阳离子脂质体转染法将ARL-1基因导入HepG2细胞,建立稳定表达该基因的细胞株,采用MTT法检测细胞对含醛基药物的耐药变化情况。结果转染细胞与未转染细胞相比,对含醛基的抗肿瘤药物如阿霉素、丝裂霉素的耐药性明显增强,其半数抑制浓度(IC50)分别提高到2.6倍和3.1倍,ADM组t=6.39,P0.05)。结论 ARL-1的表达上调可能是肿瘤细胞对含醛基抗肿瘤药物耐药的主要原因之一。

关键词：碳酰基醛糖还原酶相似蛋白耐药肝癌细胞转染

反义adipophilin寡核苷酸降低ACAT活性(英文)

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生物化学与生物物理进展 2004年第10期31卷 930-935页

作者：袁中华杨永宗尹卫东易光辉万载阳南华大学心血管病研究所衡阳421001

已经发现 ,随着细胞内胆固醇酯的积聚 ,adipophilin的表达明显增加 .在此基础上 ,为了寻找adipophilin在细胞内胆固醇代谢的作用点 .小鼠腹腔巨噬细胞与 80mg/LOxLDL或 80mg/LOxLDL加 1mmol/Ladipophilin反义寡核苷酸共孵育 ,在不同的... 详细信息

已经发现 ,随着细胞内胆固醇酯的积聚 ,adipophilin的表达明显增加 .在此基础上 ,为了寻找adipophilin在细胞内胆固醇代谢的作用点 .小鼠腹腔巨噬细胞与 80mg/LOxLDL或 80mg/LOxLDL加 1mmol/Ladipophilin反义寡核苷酸共孵育 ,在不同的时间点取样 ,使用免疫荧光染色 ,流式细胞仪分析和细胞内胆固醇测定 .结果显示 ,72h后 ,反义寡核苷酸处理组细胞内胆固醇酯显著下降到 (19 9± 1 9)mg/g ,油红O染色显示 ,该组细胞质内红色脂滴明显减少 . 96h的观察期间内 ,两组细胞adipophilin蛋白的表达量都增加 .从 12h开始 ,未用反义寡核苷酸处理组adipophilin蛋白的表达量开始大于反义寡核苷酸处理组 .在 96h时间点 ,统计学处理 ,未用反义寡核苷酸处理组明显高于反义寡核苷酸处理组 ,差别有显著性 .使用Ox r [CL 3 H]LDL观察两组细胞摄入OxLDL的量 ,实验发现 ,两组细胞摄入Ox r [CL 3 H]LDL的量逐渐增加 .但是 ,反义寡核苷酸处理组摄入Ox r [CL 3 H]LDL的量从 2 4h后明显低于未用反义寡核苷酸处理组 ,在 4 8h和96h时间点 ,统计学处理 ,两组差别有显著性 .观察ACAT的活性发现 ,ACAT相对活性从 6h到 4 8h表现为增加 ,但从4 8h到 96h ,ACAT相对活性趋于稳定 .在 4 8h时间点 ,两组比较差别有显著性。

关键词： adipophilin ACAT 巨噬细胞胆固醇

Rolipram对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和ABCA1表达的影响

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中国药理学通报 2003年第10期19卷 1177-1182页

作者：唐朝克王佐易光辉万载阳刘录山袁中华王燕危当恒阮长耿杨永宗南华大学心血管病研究所衡阳421001

目的　以THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象 ,探讨磷酸二酯酶抑制剂rolipram对THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达及细胞内胆固醇流出的影响。方法　用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出 ,运用逆转录 -多聚酶链反应和Westernblot... 详细信息

目的　以THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象 ,探讨磷酸二酯酶抑制剂rolipram对THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达及细胞内胆固醇流出的影响。方法　用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出 ,运用逆转录 -多聚酶链反应和Westernblot印迹分别检测ABCA1mRNA与ABCA1蛋白的表达 ,采用低pH值EIA法测定细胞内cAMP水平。结果　实验显示PDE4抑制剂rolipram能引起THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞cAMP水平、ABCA1表达和apoA 1介导的胆固醇流出成平衡增加 ,而细胞内总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯明显减少。结论　PDE4抑制剂rolipram增加THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达及细胞内胆固醇流出。

关键词： Rolipram 泡沫细胞 ATP结合盒转运体1 胆固醇流出低密度脂蛋白

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用酶标仪法测定细胞内胆固醇含量的研究

衡阳医学院学报 1996年第3期24卷 209-210页

作者：万载阳杨小毅衡阳医学院心血管病研究所

用酶标仪法测定细胞内胆固醇含量的研究万载阳，杨小毅（衡阳医学院心血管病研究所，衡阳，４２１００１）众所周知，高胆固醇血症是动脉粥样硬化的主要危险因素之一，而细胞内胆固醇浓度则具更重要意义。迄今为止，要确定细胞内胆固醇... 详细信息

用酶标仪法测定细胞内胆固醇含量的研究万载阳，杨小毅（衡阳医学院心血管病研究所，衡阳，４２１００１）众所周知，高胆固醇血症是动脉粥样硬化的主要危险因素之一，而细胞内胆固醇浓度则具更重要意义。迄今为止，要确定细胞内胆固醇含量，尚缺乏确实简便可行的方法，我...

关键词：动脉粥样硬化酶标仪法细胞胆固醇

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高效液相色谱法测定血清中海洛因

中国药房 1999年第6期10卷 266-267页

作者：阳波王佐万载阳衡阳医学院附属第一医院药剂科衡阳市421001 衡阳医学院心血管病研究所衡阳市421001

目的 :采用高效液相色谱法测定人体血清中海洛因的浓度。方法 :用反相C18 柱 ,0 12 %三氟乙酸水溶液 (A)和100 %甲醇 (B)为流动相 ,B :0 %～80 % ,6min ,流速 :1ml/min ,进行梯度洗脱 ,285nm检测。结果 :海洛因的线性范围为1 56～400ng/... 详细信息

目的 :采用高效液相色谱法测定人体血清中海洛因的浓度。方法 :用反相C18 柱 ,0 12 %三氟乙酸水溶液 (A)和100 %甲醇 (B)为流动相 ,B :0 %～80 % ,6min ,流速 :1ml/min ,进行梯度洗脱 ,285nm检测。结果 :海洛因的线性范围为1 56～400ng/μl,γ=0 9997 ,最低检测浓度为0 015ng/μl,平均回收率108 45 % ,RSD为7 29 % (n=5)。结论 :本法操作简单、快速。

关键词：高效液相色谱法海洛因血清浓度