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日粮添加蚕豆皮对湖羊空肠屏障相关基因表达、消化酶活性和微生物菌群的影响

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南京农业大学学报 2024年第1期47卷 142-150页

作者：刘静王钊于昊夏雨婷李鹏牛伟强万永杰茆达干南京农业大学动物科技学院江苏南京210095 启东瑞鹏牧业有限公司江苏南通226000

[目的]本试验旨在研究日粮添加蚕豆皮对湖羊空肠屏障相关基因表达、消化酶活性和微生物菌群的影响。[方法]30只4月龄体重相近[(27±2.0)kg]的雄性湖羊分为2组,分别饲喂基础日粮(对照组,CON)和添加30%蚕豆皮日粮(蚕豆皮组,BBS)。预饲期10... 详细信息

[目的]本试验旨在研究日粮添加蚕豆皮对湖羊空肠屏障相关基因表达、消化酶活性和微生物菌群的影响。[方法]30只4月龄体重相近[(27±2.0)kg]的雄性湖羊分为2组,分别饲喂基础日粮(对照组,CON)和添加30%蚕豆皮日粮(蚕豆皮组,BBS)。预饲期10 d,正式期50 d。试验结束后采集空肠组织及食糜(n=5),通过RT-qPCR检测黏膜屏障相关基因的表达,生化试剂盒检测消化酶活性,高通量测序分析食糜微生物菌群。[结果]与对照组相比,BBS组空肠黏膜细胞连接基因Claudin-1、Occludin、MUC-2和ZO-1,促炎因子IL-6、IL-10和TNF-α mRNA水平无显著变化(P>0.05),而IL-1β mRNA水平显著降低(P0.05)。BBS组食糜微生物Shannon、Chao1和Observed_otus指数显著降低(P<0.05);门水平上,BBS组变形菌门(Proteobacteria)相对丰度显著升高(P<0.05),厚壁菌门(Firmicutes)、髌骨细菌门(Patescibacteria)相对丰度和F/B值显著降低(P<0.05);属水平上,BBS组克里斯滕森氏菌R7菌群(Christensenellaceae_R-7_group)、未分类厚壁菌属(Firmicutes_unclassified)、糖单胞菌属(Candidatus_Saccharimonas)、糖酵解菌属(Saccharofermentans)、毛螺科NK3A20菌群(Lachnospiraceae_NK3A20_group)和聚乙酸菌属(Acetitomaculum)的相对丰度显著下降(P<0.05)。16S rDNA基因组的PICRUSt 2功能预测结果显示,空肠微生物差异菌群主要富集在三羧酸循环、脂肪酸β氧化、原儿茶酸降解和L-亮氨酸降解通路。[结论]日粮添加30%蚕豆皮可降低空肠黏膜炎症因子IL-1β mRNA表达量,改变空肠食糜微生物菌群多样性和相对丰度,调节肠道发酵环境。研究结果为蚕豆皮在养羊业发展中的应用提供参考。

关键词：蚕豆皮湖羊空肠屏障功能消化酶活性微生物菌群

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超低浊度测定方法的研究

中国仪器仪表 2024年第5期 46-51页

作者：周文杰邵晨佳许涛付聪万永杰郑先雷杭州泽天春来科技股份有限公司浙江杭州310052

饮用水水质检测有利于提高水质管理效率。作为水质重要指标,浊度的准确测定至关重要。根据标准HJ 1075-2019《水质浊度的测定浊度计法》,采用入射光为860nm±30nm光源,将检测器放置与入射光呈90°的位置上测定待测样品的浊度,该方法的... 详细信息

饮用水水质检测有利于提高水质管理效率。作为水质重要指标,浊度的准确测定至关重要。根据标准HJ 1075-2019《水质浊度的测定浊度计法》,采用入射光为860nm±30nm光源,将检测器放置与入射光呈90°的位置上测定待测样品的浊度,该方法的检出限只能达到0.3NTU,无法满足饮用水检测需求。为准确测定更低浓度的浊度,基于HJ 1075-2019和ISO 7027标准中浊度测量原理,本文研究出新型的浊度在线检测装置,创新型的设计光源调节系统,并将多个检测器固定在与入射光呈90°的平面上,形成一个检测圈,提高了信噪比,降低了测量检出限,将浊度的测定下限降低到0.02NTU,且具有较好的准确度与稳定性。该低量程浊度检测仪可较好的适用于饮用水中浊度测定,有利于推进饮用水浊度在线监测领域国产化设备的进程。值得一提的是,该装置为光学法检测设备信噪比提高和在线检测设备开发提供了参考价值。

关键词：水质饮用水超低浊度环形检测在线监测信噪比

新农科背景下农业高校专业课程产教融合建设实践与思考——以南京农业大学动物繁殖学课程为例

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黑龙江动物繁殖 2024年第2期32卷 50-53页

作者：茆达干王子玉魏全伟万永杰张艳丽杭苏琴王锋南京农业大学南京210095

高等学校新农科专业建设旨在培养知农爱农的新型农业技术人才,产教融合在教育教学、人才培养、产业发展和创新创业等方面发挥重要作用。动物繁殖学是动物科学专业必修课程,主要研究动物生殖规律和技术,内容更新快,实践性强,是学习动物... 详细信息

高等学校新农科专业建设旨在培养知农爱农的新型农业技术人才,产教融合在教育教学、人才培养、产业发展和创新创业等方面发挥重要作用。动物繁殖学是动物科学专业必修课程,主要研究动物生殖规律和技术,内容更新快,实践性强,是学习动物生产学各论的基础课程,在专业人才培养中占有重要地位。文章以南京农业大学国家一流课程动物繁殖学为例,探讨了产教融合建设的必要性,重设教学目标、重建教学体系、优化考核方式的实践成效,在此基础上创新课程改革思路,以期为我国高等农业院校专业课程建设提供借鉴。

关键词：新农科产教融合教学改革专业课程动物繁殖学

玉米赤霉烯酮对湖羊睾丸间质细胞毒性及m6A甲基化修饰相关基因表达的影响

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南京农业大学学报 2022年

作者：苏晓彤李慧贤胡康瑶刘亮万永杰南京农业大学动物科技学院羊业科学研究所

[目的]本文旨在探究玉米赤霉烯酮(zearalenone， ZEA)对湖羊睾丸间质细胞(Leydig cells， LCs)的毒性作用。[方法]试验采用湖羊LCs为试验材料，用200 μmol·LZEA 处理8 h，通过Edu法检测细胞增殖情况，qRT-PCR 和Western blot分别检测...

[目的]本文旨在探究玉米赤霉烯酮(zearalenone， ZEA)对湖羊睾丸间质细胞(Leydig cells， LCs)的毒性作用。[方法]试验采用湖羊LCs为试验材料，用200 μmol·LZEA 处理8 h，通过Edu法检测细胞增殖情况，qRT-PCR 和Western blot分别检测与细胞增殖和凋亡、氧化应激、mA甲基化修饰相关基因和蛋白的表达变化。[结果]与对照组相比，ZEA处理组LCs细胞活性和细胞增殖数量极显著下降(P＜0.01)；细胞增殖相关基因pcna相对表达量及其相关蛋白表达水平极显著下降(P＜0.01)；促凋亡基因相对表达量升高(bax、caspase3，P＜0.01；tp53、caspase9，P＜0.05)，其相关蛋白表达水平升高(TP53、CASPASE9，P＜0.01)；抗凋亡基因bcl-2相对表达量及其相关蛋白表达水平显著降低(P＜0.05)；氧化应激相关基因相对表达量上升(cat，P＜0.05；gsh-px、sod2，P＜0.01)，其相关蛋白表达水平上升(SOD2，P＜0.01)；mA相关基因的相对表达量alkbh5显著降低(P＜0.05)、mettl3和ythdc1极显著升高(P＜0.01)、 ythdf3显著升高(P＜0.05)。[结论]ZEA可抑制湖羊LCs增殖、促进湖羊LCs凋亡，导致LCs发生氧化损伤，产生毒性作用，且其毒性作用可能跟mA甲基化修饰变化相关。

关键词：

日粮添加酵母硒对夏季湖羊血液指标和睾丸发育及基因表达的影响

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南京农业大学学报 2022年第4期45卷 752-760页

作者：夏雨婷万永杰姜志洋陈琪茆达干南京农业大学动物科技学院江苏南京210095

[目的]本研究旨在探究夏季日粮添加酵母硒对湖羊血液指标和睾丸发育的影响,解析酵母硒影响睾丸功能的潜在分子机制。[方法]将96只4月龄雄性湖羊按体重相近原则分为对照组(Con,基础日粮)和酵母硒组(Se,基础日粮+酵母硒0.4 g·kg^(-1))。... 详细信息

[目的]本研究旨在探究夏季日粮添加酵母硒对湖羊血液指标和睾丸发育的影响,解析酵母硒影响睾丸功能的潜在分子机制。[方法]将96只4月龄雄性湖羊按体重相近原则分为对照组(Con,基础日粮)和酵母硒组(Se,基础日粮+酵母硒0.4 g·kg^(-1))。预试期1周,正试期4周,记录体重变化;收集血液检测生化、抗氧化与免疫相关指标;采集睾丸组织,测质量和大小及其硒浓度,HE染色观察组织学形态(HE),转录组测序(RNA-seq)分析差异基因。[结果]Se组平均日增重显著高于Con组(P0.05),但Se组睾丸中硒浓度极显著高于Con组(P<0.01)。与Con组相比,Se组血清游离脂肪酸(NEFA)浓度显著升高(P<0.05),血浆IgA、IgG和IgM浓度极显著升高(P<0.01),血清和睾丸组织中GSH-Px活性极显著升高(P<0.01)。HE结果显示生精小管中有精子出现,Se组生精细胞排列更紧密且生精上皮厚度极显著增加(P<0.01)。RNA-seq分析鉴定出2321个差异表达基因,包含671个上调基因和1650个下调基因,通过GO和KEGG功能分析,差异基因主要富集在电子转移链、呼吸链复合体、呼吸链、线粒体膜部分、NADH脱氢酶(泛醌)活性、NADH脱氢酶(醌)活性和产热等通路。[结论]夏季日粮添加酵母硒可促进湖羊的脂质代谢,改善其抗氧化能力和免疫功能,改变湖羊睾丸发育相关基因的表达,为进一步阐明酵母硒缓解夏季高温对湖羊睾丸损伤的分子机制提供科学依据。

关键词：酵母硒湖羊夏季高温血液指标睾丸转录组测序

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过表达Kdm4d对山羊孤雌胚胎基因组激活期Xist表达的影响

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南京农业大学学报 2022年第6期45卷 1227-1234页

作者：杨瑛楠蔡玉刘孜斐李东旭万永杰王锋邓明田南京农业大学动物科技学院江苏省家畜胚胎工程实验室江苏南京210095

[目的]本试验旨在探究过表达赖氨酸特异去甲基化酶4D(Kdm4d)对山羊孤雌胚胎基因组激活期(8细胞期)Xist表达的影响。[方法]通过构建Kdm4d-IRES-EGFP重组质粒,体外转录Kdm4d mRNA,再利用显微注射、免疫荧光和亚硫酸氢盐测序等方法,分析过... 详细信息

[目的]本试验旨在探究过表达赖氨酸特异去甲基化酶4D(Kdm4d)对山羊孤雌胚胎基因组激活期(8细胞期)Xist表达的影响。[方法]通过构建Kdm4d-IRES-EGFP重组质粒,体外转录Kdm4d mRNA,再利用显微注射、免疫荧光和亚硫酸氢盐测序等方法,分析过表达Kdm4d对山羊孤雌胚胎基因组激活期(8细胞期)Xist表达的影响。[结果]与对照组相比,组蛋白H3K9甲基化(H3K9me3)水平在2~8细胞期和囊胚期过表达Kdm4d的山羊孤雌胚胎中均显著降低,过表达Kdm4d山羊的4、8细胞期胚胎和囊胚的发育潜能无显著变化;Xist表达水平在过表达Kdm4d的山羊8细胞期孤雌胚胎中显著升高,但Xist启动子仍维持高甲基化,与对照组相比无显著变化。[结论]Kdm4d能有效移除孤雌胚胎中H3K9me3修饰,促进Xist表达,但不影响Xist启动子DNA甲基化水平和山羊孤雌胚胎发育潜能。本研究为深入理解Kdm4d调控山羊早期胚胎X染色体失活的机制奠定了基础。

关键词： Kdm4d Xist 孤雌胚胎胚胎基因组激活山羊

日粮添加蚕豆皮对湖羊生长性能、屠宰性能、器官发育和肉品质的影响

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草业学报 2023年第10期32卷 162-172页

作者：王钊刘静于昊李鹏牛伟强万永杰张艳丽茆达干南京农业大学动物科技学院江苏南京210095 启东瑞鹏牧业有限公司江苏启东226200

本试验旨在研究日粮添加蚕豆皮对湖羊生长性能、屠宰性能、器官发育及肉品质的影响。60只4月龄健康湖羊公羊[(27.00±2.00)kg]随机分为4组(n=15,每组3个重复,每个重复5只羊),分别饲喂含蚕豆皮0%(对照组C)、10%(组Ⅰ)、20%(组Ⅱ)和30%(组... 详细信息

本试验旨在研究日粮添加蚕豆皮对湖羊生长性能、屠宰性能、器官发育及肉品质的影响。60只4月龄健康湖羊公羊[(27.00±2.00)kg]随机分为4组(n=15,每组3个重复,每个重复5只羊),分别饲喂含蚕豆皮0%(对照组C)、10%(组Ⅰ)、20%(组Ⅱ)和30%(组Ⅲ)的日粮,试验期60 d。结果表明:与对照组相比,添加不同比例的蚕豆皮组湖羊体重、平均日采食量和平均日增重均极显著提高(P<0.01);蚕豆皮组Ⅲ的胴体重(19.62±0.73 vs 17.75±0.86)kg和宰前活重(37.22±1.01 vs 34.76±0.71)kg极显著提高(P<0.01),眼肌面积显著提高(35.84±2.47 vs 27.84±0.13 cm2,P<0.05);肝脏重量有提高趋势(670.00±73.37 vs 588.00±49.87 g,P=0.071),瘤胃重量(659.40±66.44 vs 548.00±75.48)g和小肠重量(1107.80±150.56 vs 901.00±41.32)g显著提高(P<0.05);肌纤维横截面积极显著降低(584.67±32.01 vs 832.90±53.48μm^(2),P<0.01),肌肉谷氨酸含量极显著提高(37.74±1.64 vs 13.19±3.38 mg·g^(-1),P<0.01),精氨酸含量(19.08±1.28 vs 11.25±2.39)mg·g^(-1)和非必需氨基酸总量(118.44±1.98 vs 90.59±9.56)mg·g^(-1)显著提高(P<0.05),缬氨酸含量(12.40±1.09 vs 7.98±1.61 mg·g^(-1),P=0.086)和必需氨基酸总量(135.25±3.51 vs 106.79±11.14 mg·g^(-1),P=0.071)有上升趋势。因此,日粮中添加蚕豆皮提高了湖羊的生长性能和屠宰性能,促进胃肠道发育,改善肌纤维特性和氨基酸组成,为蚕豆皮在湖羊生产中的合理应用提供科学依据。

关键词：蚕豆皮湖羊生长性能屠宰性能器官发育肉品质

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玉米赤霉烯酮对湖羊睾丸间质细胞毒性及m^(6)A甲基化修饰相关基因表达的影响

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南京农业大学学报 2023年第4期46卷 772-779页

作者：刘亮苏晓彤李慧贤胡康瑶陆宏辉许新松万永杰南京农业大学动物科技学院羊业科学研究所江苏南京210095 南通市海门区畜牧兽医站江苏南通226100

[目的]本文旨在探究玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEA)对湖羊睾丸间质细胞(leydig cells, LC)的毒性作用。[方法]用200μmol·L^(-1)ZEA处理湖羊LC 8 h,通过EdU法检测细胞增殖情况,RT-qPCR和Western blot分别检测与细胞增殖和凋亡、氧化... 详细信息

[目的]本文旨在探究玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEA)对湖羊睾丸间质细胞(leydig cells, LC)的毒性作用。[方法]用200μmol·L^(-1)ZEA处理湖羊LC 8 h,通过EdU法检测细胞增殖情况,RT-qPCR和Western blot分别检测与细胞增殖和凋亡、氧化应激、m^(6)A甲基化修饰相关基因和蛋白的表达变化。[结果]与对照组相比,ZEA处理组LC活性和增殖数量极显著下降(P<0.01);细胞增殖相关基因pcna及其蛋白表达水平均极显著下降(P<0.01);促凋亡基因表达水平(bax、caspase3,P<0.01;tp53、caspase9,P<0.05)均显著升高,相对应蛋白表达水平(TP53、CASPASE9,P<0.01)极显著升高;抗凋亡基因bcl-2及蛋白表达水平显著降低(P<0.05);氧化应激相关基因相对表达水平(cat,P<0.05;gsh-px、sod2,P<0.01)显著或极显著上升,其相关蛋白表达水平(SOD2,P<0.01)极显著上升;m^(6)A相关基因alkbh5的相对表达水平显著降低(P<0.05),mettl3和ythdc1水平极显著升高(P<0.01),ythdf3水平显著升高(P<0.05)。[结论]ZEA可抑制湖羊LC增殖,促进湖羊LC凋亡,导致LC发生氧化损伤,产生毒性作用,且其毒性作用可能跟m^(6)A甲基化修饰相关。

关键词：玉米赤霉烯酮湖羊睾丸间质细胞增殖凋亡氧化应激 m^(6)A甲基化修饰

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