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基于“胞络系肾”“胎茎系脾”研究寿胎丸、举元煎逆转蜕膜自然流产病理环节的安胎差异网络机制

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中国实验方剂学杂志 2022年第20期28卷 186-200页

作者：周航郑小艳王欢曾倩邓琳雯丁维俊成都中医药大学基础医学院成都611137 成都中医药大学针灸推拿学院成都611137 四川中医药高等专科学校四川绵阳621000 成都中医药大学附属医院成都610072

目的:通过整合药理学方法研究补肾安胎法代表方寿胎丸、健脾安胎法代表方举元煎调控自然流产(SA)蜕膜病理环节靶点逆转妊娠结局的安胎机制差异,初步阐释“胞络系肾”“胎茎系脾”生殖理论科学内涵。方法:运用GeneCards数据库筛选SA的调... 详细信息

目的:通过整合药理学方法研究补肾安胎法代表方寿胎丸、健脾安胎法代表方举元煎调控自然流产(SA)蜕膜病理环节靶点逆转妊娠结局的安胎机制差异,初步阐释“胞络系肾”“胎茎系脾”生殖理论科学内涵。方法:运用GeneCards数据库筛选SA的调控靶点进行基因本体-生物学过程(GO-BP)富集分析,结合Cytoscape网络分析、文献引证筛选主要病理环节及核心靶点;利用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)筛选并获取寿胎丸、举元煎的潜在活性成分,构建其调控差异网络预测;复制SA大鼠模型进行同单位寿胎丸、举元煎干预,采用苏木素-伊红(HE)染色、透射电镜(TEM)、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)等方法进行安胎病理调控机制验证。结果:细胞黏附、炎症反应、细胞死亡、血管生成的调控失常是SA核心病理环节;分别获取寿胎丸潜在特异活性成分13个及举元煎活性成分14个,预测调控网络提示寿胎丸与举元煎的潜在活性成分均能调控血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL)-2、雌激素受体(ESR)-1、基质金属蛋白酶(MMP)-9等靶点从而调控SA病理环节;实验研究提示寿胎丸和举元煎可显著提高SA大鼠妊娠率、蜕膜细胞完整率及血供、有效控制细胞凋亡形态及雌激素(E2)、孕激素(P)及其受体表达,下调SA大鼠蜕膜组织MMP-2、MMP-9、IL-2、IL-6表达,同时上调抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)及IL-4表达。寿胎丸可显著上调VEGF表达,举元煎可显著下调E-钙黏蛋白(E-Cad)表达。结论:寿胎丸、举元煎均可通过调控SA核心病理过程以安胎,同条件干预下寿胎丸总体疗效优于举元煎,寿胎丸在调控血管生成途径优于举元煎,举元煎在细胞黏附途径优于寿胎丸,该结论可部分阐释“同病异治”生物学基础,为安胎中药质量标志物(Q-marker)识别、进一步方-证代谢组研究提供客观数据参考。

关键词：寿胎丸举元煎生物信息学分析蜕膜自然流产差异机制

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古今中医安胎法的时间医学体系探微

中华中医药杂志 2023年第2期38卷 479-483页

作者：周航林春巧曾倩丁维俊成都中医药大学基础医学院成都611137 成都中医药大学附属医院成都610032 成都中医药大学基础医学院中医证候与精准医学中心 611137

中医时间医学最早追溯至《黄帝内经》时期,以其理论为基础,强调了“整体观”“节律性”和“因时治宜”等基本原则,被运用于疾病诊断、治疗及预防养生等方面。历代医家与近、现代医家的理论,均鲜明涵盖了女性孕、胎的节律性与时间医学概... 详细信息

中医时间医学最早追溯至《黄帝内经》时期,以其理论为基础,强调了“整体观”“节律性”和“因时治宜”等基本原则,被运用于疾病诊断、治疗及预防养生等方面。历代医家与近、现代医家的理论,均鲜明涵盖了女性孕、胎的节律性与时间医学概念。文章从各家著作溯源考证、古今治法体系总结、现代化技术进展,推动中医安胎最佳介入时机及关键节点研究发展,为中医药安胎现代化探索——时空组学技术的应用提供关键理论依据。

关键词：中医时间医学安胎学术思想时空组学技术

限时进食调节光诱导超重/肥胖大鼠摄食、体温及瘦素昼夜节律的研究

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现代预防医学 2023年第2期50卷 340-347页

作者：王欢唐英周航丁维俊四川中医药高等专科学校成都中医药大学临床医学院成都中医药大学基础医学院

目的探讨限时进食（time-restricted feeding, TRF）对光诱导超重/肥胖大鼠进食、体温、褪黑素及瘦素昼夜节律的影响。方法将65只SD雄性大鼠随机分为正常光照LD组（light/dark:12 h/12 h,20只）、24 h光照LL组（light/dark:24 h/0 h,4... 详细信息

目的探讨限时进食（time-restricted feeding, TRF）对光诱导超重/肥胖大鼠进食、体温、褪黑素及瘦素昼夜节律的影响。方法将65只SD雄性大鼠随机分为正常光照LD组（light/dark:12 h/12 h,20只）、24 h光照LL组（light/dark:24 h/0 h,45只），自由进食普通饲料，34 d后在LL组筛选出高于LD组体重均值10%以上的样本为模型LL组（20只），再将正常光照LD组随机分为LD+自由进食组（LD+ALF组）、LD+TRF组；LL组随机分为LL+自由进食组（LL+ALF组）、LL+TRF组，TRF进食窗为10 h(ZT 14-ZT 24)，每日记录饲料摄入量，隔日记录体重变化。饲养3周后分别时序记录体温、留取尾尖血，于第24 d采集空腹血后处死大鼠，采用ELISA法检测血清褪黑素、瘦素的含量变化，利用Matlab软件进行时序指标余弦拟合。结果模型组体重增加、褪黑素均值降低，与正常光照组比较差异有统计学意义（P0.05）。LD+ALF瘦素振幅显著低于LD+TRF、LL+TRF组（P0.05）。结论持续光照可以引起大鼠摄食量、体重增加，进食、褪黑素节律异常，体温节律消失，10 h TRF可以降低持续光照大鼠摄食量、体重，恢复进食、体温节律，增强瘦素昼夜节律。

关键词：限时进食持续光照体温瘦素昼夜节律

“胎茎系于脾”安胎机理时-空演绎及“证-方-药”体系现代化研究

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世界科学技术(中医药现代化) 2023年第6期25卷 1914-1926页

作者：周航郑小艳邓琳雯曾倩丁维俊成都中医药大学基础医学院成都611137 成都中医药大学针灸推拿学院成都611137 成都中医药大学附属医院成都610032

近年中医各家论治“胎漏”、“胎动不安”、“滑胎”等病多从“肾”切入,强调补肾或脾肾同治权重核心。然,溯源古中医安胎历史沿革,与近现代不同在于明、清年代之前众家高度重视“脾胃气血”论,而鲜有补肾安胎相关条文。“胎茎系于脾”... 详细信息

近年中医各家论治“胎漏”、“胎动不安”、“滑胎”等病多从“肾”切入,强调补肾或脾肾同治权重核心。然,溯源古中医安胎历史沿革,与近现代不同在于明、清年代之前众家高度重视“脾胃气血”论,而鲜有补肾安胎相关条文。“胎茎系于脾”一词出自明代浙派医家赵献可《邯郸遗稿》,该著作应用取象比类思维对“脾”在安胎的作用进行了高度概括。与“肾主生殖”相对比,目前单纯关于“脾”与安胎的相关研究报道均呈碎片化展示,未将理论溯源、临床效应、实验研究融合系统性探讨,因此难以明晰健脾、补肾客观生物学差异、权重争议及协同机理。本文基于上述问题,从“胎茎系脾”切入,通过整合式研究,以古、今中医妇科诸家理论争议为“经”,以“证-方-药”现代化研究进展为“纬”,初步揭示安胎治法时(历史沿革)空(地域流派)演绎关键拐点,系统探讨脾“主卫气”、“主运化”、“主升清”和“主肌肉”相关安胎证治客观化进展与研究瓶颈,进而提出中医方-证代谢与时空组学是未来解决安胎思路权重争议与难点的重要应用趋势,为现代中医生殖理论的传承、创新、突破及精准化探索提供崭新的参考思路。

关键词：胎茎系脾安胎古今融合研究趋势传承创新

“病-证-治”结合自然流产模型研究进展及在单细胞多模态组学的应用趋势

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中国实验方剂学杂志 2023年第14期29卷 191-203页

作者：邓琳雯唐英杨翼张曙光丁维俊周航成都中医药大学附属医院成都610072 成都中医药大学基础医学院成都611137 成都中医药大学中医证候与精准医学中心成都611137

自然流产发病率逐年递增,其病因繁杂,治疗手段有限,对社会稳定性危害严重。“病-证-治”结合研究模式能显著指导中医安胎临床疗效的提高,但一直缺乏关键且公认的诊治评价标记物,待进一步探索建立科学统一的评价标准体系。拟通过收集现... 详细信息

自然流产发病率逐年递增,其病因繁杂,治疗手段有限,对社会稳定性危害严重。“病-证-治”结合研究模式能显著指导中医安胎临床疗效的提高,但一直缺乏关键且公认的诊治评价标记物,待进一步探索建立科学统一的评价标准体系。拟通过收集现有“病-证-治”结合自然流产动物模型,移植完善模型赋值评价指标,评判自然流产动物模型与中、西医临床病证特点的吻合程度,比较不同自然流产动物模型之构建方式、选择对象及评价指标等的优劣;此外,探索中医药实验研究前沿趋势,针对自然流产中医动物模型分子生物学标志物研究现状及相关瓶颈,提出单细胞多模态组学研究思路突破自然流产“病-证-治”的相关评价缺陷,从单个细胞水平分析母胎界面组织中各种细胞类型、细胞亚群、时空轨迹及基因表达的差异性等因素。为病-证模型、藏象生物学、新型靶向药物的深入研究提供精准指导及模型动物平台支撑,对建立具有稳定性和重复性的病证结合自然流产动物模型与评价指标体系提供依据,有利于中医妇科生殖领域动物模型研究的长远发展。

关键词：自然流产病证结合动物模型研究进展发展趋势

银甲片通过纠正外周血Th17/Treg平衡改善慢性输卵管炎大鼠不孕

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中国现代应用药学 2023年第19期40卷 2635-2642页

作者：黄叶芳朱博玉王妍丁维俊黄淑洁成都中医药大学附属医院成都610072 成都中医药大学基础医学院成都610072

目的探讨银甲片是否通过纠正外周血Th17/Treg平衡改善慢性输卵管炎大鼠不孕。方法100只雌性Wistar大鼠,其中82只构建慢性输卵管炎大鼠模型,造模成功后,取80只随机分为模型组、左旋氧氟沙星组(20 mg·kg^(-1))、银甲片低剂量组(0.38 g·k... 详细信息

目的探讨银甲片是否通过纠正外周血Th17/Treg平衡改善慢性输卵管炎大鼠不孕。方法100只雌性Wistar大鼠,其中82只构建慢性输卵管炎大鼠模型,造模成功后,取80只随机分为模型组、左旋氧氟沙星组(20 mg·kg^(-1))、银甲片低剂量组(0.38 g·kg^(-1)·d^(-1))、银甲片中剂量组(0.76 g·kg^(-1)·d^(-1))、银甲片高剂量组(1.52 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组16只,另取16只设为空白对照组。治疗组分别按不同剂量灌胃给药,模型组与空白对照组灌服等量生理盐水(20 mL·kg^(-1)·d^(-1)),每日1次,灌胃7 d后停药1 d,7 d为1个周期,共灌胃3个周期。给药结束后,观察大鼠受孕情况,采集血样和输卵管组织。采用HE染色观察输卵管组织病理变化;透射电镜观察输卵管组织超微结构变化;ELISA检测血清中TNF-α、IL-6含量;流式细胞术检测外周血Treg、Th17细胞比例;RT-qPCR和Western blotting检测输卵管组织IL-17、IL-10、Foxp3、RORγt mRNA及蛋白表达。结果与空白对照组相比,模型组大鼠输卵管纤毛、微绒毛稀疏,线粒体肿胀;且TNF-α、IL-6含量、Th17细胞比例及输卵管组织IL-17、RORγt mRNA和蛋白表达明显升高,大鼠受孕率、IL-10、Treg细胞比例及Foxp3 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05)。与模型组比较,银甲片高剂量组改善大鼠输卵管结构;明显降低模型大鼠TNF-α、IL-6含量、Th17细胞比例及输卵管组织IL-17、RORγt mRNA和蛋白表达;明显升高大鼠受孕率及IL-10、Treg细胞比例和Foxp3 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论银甲片可有效地调节Th17/Treg平衡,进而调节Treg和Th17细胞介导的炎性反应,提高慢性输卵管模型大鼠受孕率。

关键词：慢性输卵管炎银甲片 Th17/Treg平衡受孕率

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半夏-附子药对拮抗冠心病分子机制研究

现代中医药 2022年第2期42卷 54-62页

作者：杨杰彭启伦郭步伐丁维俊毕节医学高等专科学校基础医学系贵州毕节551700 成都中医药大学基础医学院四川成都610075

目的通过网络药理学与分子对接方法探讨半夏-附子同方配伍拮抗冠心病的分子机制。方法基于TCMSP、DisGeNET和OMIM等多个数据库查询半夏-附子药对活性成分和冠心病相关靶点。采用STRING数据库构建半夏-附子药对活性成分拮抗冠心病相关靶... 详细信息

目的通过网络药理学与分子对接方法探讨半夏-附子同方配伍拮抗冠心病的分子机制。方法基于TCMSP、DisGeNET和OMIM等多个数据库查询半夏-附子药对活性成分和冠心病相关靶点。采用STRING数据库构建半夏-附子药对活性成分拮抗冠心病相关靶点PPI网络,运用Cytoscape3.7.1软件构建“半夏-附子药对活性成分-冠心病-靶点-通络”网络,随后使用R语言脚本进行GO和KEGG通路富集分析,最后进行分子对接验证。结果半夏-附子药对活性成分16个,与半夏-附子同方配伍拮抗冠心病的相关靶点有35个,35个靶点富集在57个GO term上,同时富集在75条KEGG信号转导通路上;KEGG富集P值最显著的信号转导通路为Lipid and atherosclerosis;进一步分析提示了,半夏-附子药对活性成分拮抗冠心病的核心靶点可能为AKT1、FOS、MMP9和PTGS2,其关键有效成分为baicalein、cavidine和deltoin。结论本研究初步揭示了半夏-附子药对活性成分通过调控Lipid and atherosclerosis信号转导通路而拮抗冠心病,为半夏-附子药对抗冠心病的物质基础及分子机制的进一步研究奠定了理论基础。

关键词：网络药理学半夏-附子药对冠心病成分-靶点-通路分子机制

复发性口腔溃疡微生物及免疫学机制与中医相关性探讨

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中国实验方剂学杂志 2016年第13期22卷 202-207页

作者：陈杰丁维俊成都中医药大学基础医学院成都610075

复发性口腔溃疡(ROU)为口腔黏膜常见疾病,发病率高,发病原因复杂。目前多认为与口腔菌群紊乱、免疫功能异常、微循环障碍、感染、微量元素缺乏、内分泌失调,胃肠功能失调等多种因素有关,其确切病因及发病机制至今不明。微生物群失调及... 详细信息

复发性口腔溃疡(ROU)为口腔黏膜常见疾病,发病率高,发病原因复杂。目前多认为与口腔菌群紊乱、免疫功能异常、微循环障碍、感染、微量元素缺乏、内分泌失调,胃肠功能失调等多种因素有关,其确切病因及发病机制至今不明。微生物群失调及免疫学相关病因是目前研究热点。口腔微生态失调越来越受到国内外学者的重视,其中口腔菌群已有一定进展,而作为口腔微生物群落中最为丰富的成员-病毒群的研究尚未有深入。病毒宏基因组学在医学领域显示的巨大优越性,高通量测序法在病毒组学研究领域的迅速推广,他们已成为解释病毒-宿主之间相互作用的强大工具,使口腔病毒群也有了进一步深入的技术支撑。中医学认为ROU属于中医复发性"口疮"范畴,其病因病机以"火"为主,其中脾胃伏火较为常见。脾胃伏火与口腔微生物群失调,特别是病毒群失调及相关免疫功能异常密切相关。微生态调控是中医药优势手段,故以口腔病毒群为研究切入点,从中药治疗ROU的作用机制着手,运用病毒宏基因组学,通过高通量测序等方法,探讨ROU患者的核心分子病理学机制,可望动态观察中药的口腔病毒群调控模式,深入揭示中药达成临床疗效的微生态学内涵,全面弄清ROU的发病机制,从而更好地指导临床治疗。

关键词：复发性口腔溃疡微生物群落免疫中医

从伏邪理论探讨复发性口腔溃疡的中医病因病机

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中国中医基础医学杂志 2018年第2期24卷 164-165,212页

作者：陈杰丁维俊成都中医药大学基础医学院成都610075

复发性口腔溃疡是发病率较高的口腔黏膜疾病,其病因复杂多样,发病机制目前尚不完全明确,西医缺乏有效防止其反复发作的治疗方法。中医认为本病病机以"火"为主,与脏腑功能失调特别是脾胃功能失调密切相关。其反复发作则因伏邪留伏体内遇... 详细信息

复发性口腔溃疡是发病率较高的口腔黏膜疾病,其病因复杂多样,发病机制目前尚不完全明确,西医缺乏有效防止其反复发作的治疗方法。中医认为本病病机以"火"为主,与脏腑功能失调特别是脾胃功能失调密切相关。其反复发作则因伏邪留伏体内遇诱因而发,脾胃伏火被认为是其重要的病因病机之一。因此着眼于脾胃,从伏邪理论分析复发性口腔溃疡的病因病机,治疗从清泻伏火兼调理脾胃、扶助正气着手,有着较为重要的临床指导意义。

关键词：复发性口腔溃疡脾胃失调伏火