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γ拟钉螺等位基因的研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1999年第2期17卷 84-86页

作者：曾肖芃陈翠娥丁建祖 GEORGE M.DAVIS 浙江省医学科学院寄生虫病研究所美国费城自然科学院

关键词：钉螺宋氏γ拟钉螺中国γ拟钉螺等位基因酶谱

快速检测血吸虫抗体的乳胶微球层析法(DLIA)的建立和应用

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第1期28卷 30-33页

作者：丁建祖俞丽玲楼涤严晓岚闻礼永浙江省医学科学院寄生虫病研究所杭州310013

目的建立一种快速、简便、敏感、特异的血吸虫病免疫诊断方法。方法用可溶性血吸虫虫卵抗原作为包被抗原,红色乳胶微球标记鼠抗人单克隆抗体为显色剂,建立一种快速检测血吸虫病患者血清抗体的乳胶微球层析法(DLIA),以该法分别检测血吸... 详细信息

目的建立一种快速、简便、敏感、特异的血吸虫病免疫诊断方法。方法用可溶性血吸虫虫卵抗原作为包被抗原,红色乳胶微球标记鼠抗人单克隆抗体为显色剂,建立一种快速检测血吸虫病患者血清抗体的乳胶微球层析法(DLIA),以该法分别检测血吸虫虫卵阳性者血清69份,健康人血清264份,华支睾吸虫病患者血清15份,广州管圆线虫病患者血清8份,钩虫、蛔虫、鞭虫混合感染者血清11份和卫氏并殖吸虫病患者血清19份,用ELISA平行检测作为对照。结果DLIA和ELISA法检测血吸虫虫卵阳性患者血清的敏感性分别为94.2%(65/69)和95.7%(66/69),检测健康人血清的特异性分别为97.4%(257/264)和94.7%(250/264),差异均无统计学意义(χ2=0.15和2.43,P>0.05);两法检测华支睾吸虫病和广州管圆线虫病患者血清,钩虫、蛔虫、鞭虫混合感染者血清,均无交叉反应;两法与卫氏并殖吸虫病患者血清的交叉反应率分别为42.1%(8/19)和47.4%(9/19),差异无统计学意义(χ2=0.11,P>0.05)。结论乳胶微球层析法检测血吸虫抗体具有比较敏感、特异、简便、快速和稳定的特点。

关键词：血吸虫病诊断乳胶微球免疫层析

金标免疫渗滤法(DIGFA)快速检测血吸虫循环抗原的研究

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中国人兽共患病杂志 2000年第1期16卷 12-14页

作者：沈丽英干小仙丁建祖沈慧英樊晋江浙江省医学科学院寄生虫病研究所杭州310013

目的　建立一种简便、快速的血吸虫病诊断方法。方法　在已建立的检测血吸虫抗体的ＤＩＧＦＡ基础上，以抗血吸虫重组蛋白ＳＶＬＢＰ多抗为捕捉抗体，金标抗ＳＥＡ多抗为覆盖抗体，建立快速检测病人血清中血吸虫循环抗原的双夹心ＤＩＧ... 详细信息

目的　建立一种简便、快速的血吸虫病诊断方法。方法　在已建立的检测血吸虫抗体的ＤＩＧＦＡ基础上，以抗血吸虫重组蛋白ＳＶＬＢＰ多抗为捕捉抗体，金标抗ＳＥＡ多抗为覆盖抗体，建立快速检测病人血清中血吸虫循环抗原的双夹心ＤＩＧＦＡ。结果　用该法检测了急性血吸病人血清３０人份和慢性血吸病人血清３８人份，其阳性检出率分别为１００％和５２－６％；１２０人份流行区健康人血清全为阴性；１００人份非流行区健康人群血清的阴性符合率为１００％，与１０例华支睾病人血清无交叉反应；１５例肺吸虫病人血清有１例阳性，交叉反应率为６－７％；与双夹心ＥＬＩＳＡ的符合率为９７－４％，经χ２检验表明两法检测效果无显著性差异。结论　用ＤＩＧＦＡ检测血吸虫循环抗原具有较高的敏感性和特异性，并且方法简便、快速、不需特殊仪器设备，有广阔的应用前景。

关键词：血吸虫病循环抗原金标免疫渗滤法

三种抗原检测抗幽门螺杆菌抗体的临床意义评价

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中国免疫学杂志 1999年第2期15卷 68-70页

作者：干小仙丁建祖沈慧英沈丽英陈一平浙江省医学科学院浙江省德清市第二人民医院

目的：寻求敏感性高、特异性强的ＨＰ抗原和简便、可靠的检测ＨＰ抗体的方法，用于诊断ＨＰ感染。方法：分别以ＨＰ尿素酶、全菌破碎物、培养上清液为抗原。采用斑点金标免疫渗滤法（ＤＩＧＦＡ）检测ＨＰ培养、病理组织学检查、尿素酶... 详细信息

目的：寻求敏感性高、特异性强的ＨＰ抗原和简便、可靠的检测ＨＰ抗体的方法，用于诊断ＨＰ感染。方法：分别以ＨＰ尿素酶、全菌破碎物、培养上清液为抗原。采用斑点金标免疫渗滤法（ＤＩＧＦＡ）检测ＨＰ培养、病理组织学检查、尿素酶试验均阳性和均阴性的血清各５０份；胃镜检查各类胃病患者血清２５８份，并以ＥＬＩＳＡ试剂盒做平行检测对照。结果：三种抗原的敏感性分别为１００％、９６％和７６％；５０份阴性血清的阴性符合率分别为９８％、９２％和６４％；２５８份各类胃病的抗体检出率分别为６１％、６２％和５２％；与ＥＬＩＳＡ符合率各为９８８％、９６５％和５８９％。将抗原浓度稀释至００５ｍｇ／ｍｌ时，尿素酶抗原和全菌破碎物抗原的特异性抗体检出率仍达８５％和７５％。培养上清液抗原的敏感性和特异性明显低于前二种抗原（Ｐ＜００１）。尿素酶抗原和全菌破碎抗原的敏感性和特异性明显低于前二种抗原（Ｐ＞００５）。结论：提示该全菌破碎物抗原用于ＤＩＧＦＡ检测ＨＰ抗体、敏感性高、特异性强，且简便、快速、无需任何仪器设备。适合于临床和流行病学调查应用。

关键词：幽门螺杆菌抗原 DIGFA法

金标渗滤法快速检测血吸虫循环抗原的现场应用研究

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中国人兽共患病杂志 2000年第2期16卷 19-20页

作者：干小仙沈丽英丁建祖沈慧英浙江省医学科学院寄生虫病研究所杭州310013

将抗重组蛋白SVLBP-IgG用于DIGFA检测2221例血清中血吸虫循环抗原，其中急性血吸虫病人血清70份，慢性血吸虫病人血清307份，循环抗原检出率分别为100％和68．4％。非流行区健康人血清200份，未见阳性反应。除肺吸虫外，与其它寄生虫成... 详细信息

将抗重组蛋白SVLBP-IgG用于DIGFA检测2221例血清中血吸虫循环抗原，其中急性血吸虫病人血清70份，慢性血吸虫病人血清307份，循环抗原检出率分别为100％和68．4％。非流行区健康人血清200份，未见阳性反应。除肺吸虫外，与其它寄生虫成非寄生虫感染病人血清无明显交叉反应。用DIGFA单盲法检测2批血清，结果显示对急性血吸虫病人的敏感性均为100％；对慢性血吸虫病人的敏感性分别为69．4％和68．9％，非流行区体检人群血清的阴性率为99％和98．9％。检测血吸虫病流行区人群血清508份，阳性检出率为20．9％（106／508）；粪检阳性65例，与粪检符合率为70．8％。上述结果提示，该法用于植测循环抗原具有较高的敏感性和特异性，可用于现场查病和流行病学调查。

关键词：血吸虫病金标渗滤法循环抗原快速检测

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斑点金免疫渗滤法检测肺吸虫抗体的评价

中国人兽共患病杂志 2003年第1期19卷 89-90页

作者：丁建祖王越陈军虎干小仙沈慧英沈丽英闻礼永浙江省医学科学院杭州310013

目的　为寻求简便、可靠的方法 ,用于诊断肺吸虫感染。方法　采用肺吸虫成虫可溶性抗原 ,金标记兔抗人IgG显色 ,建立检测肺吸虫抗体的DIGFA。用该法检测痰检肺吸虫虫卵阳性血清 82份 ,其他各类血清 2 0 1份 ,并与ELISA平行对照。结果　... 详细信息

目的　为寻求简便、可靠的方法 ,用于诊断肺吸虫感染。方法　采用肺吸虫成虫可溶性抗原 ,金标记兔抗人IgG显色 ,建立检测肺吸虫抗体的DIGFA。用该法检测痰检肺吸虫虫卵阳性血清 82份 ,其他各类血清 2 0 1份 ,并与ELISA平行对照。结果　两法检测肺吸虫抗体的敏感性分别达 98 8% (81/ 82 )和 97 6 % (80 / 82 ) ;特异性 92 % (185 / 2 0 1)和 93% (187/2 0 1) ;youden’s指数为 0 90 8和 0 90 6。两法差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　实验提示DIGFA的各项检测指标与ELISA相近 ,而且无需特殊设备 ,且快速、简便 ,适合临床查病和血清流行病学调查。

关键词：肺吸虫抗体斑点金免疫渗滤法

双抗原夹心胶体金免疫层析法快速检测结核分枝杆菌抗体的研究

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中华结核和呼吸杂志 2011年第5期34卷 356-358页

作者：范超明李伟樊德利郑小银丁建祖师范大学附属医院杭州市第二人民医院医学检验中心杭州310015 浙江省医学科学院寄生虫病研究所

目的建立一种简易、快速和准确的双抗原夹心胶体金免疫层析法，用于检测结核病患者血清中的抗MTB抗体。方法采用胶体金标记相对分子质量分别为6000、16000和38000的重组MTB早期分泌抗原靶蛋白（ESAT），成为重组MTB融合蛋白ESAT-6-16-3... 详细信息

目的建立一种简易、快速和准确的双抗原夹心胶体金免疫层析法，用于检测结核病患者血清中的抗MTB抗体。方法采用胶体金标记相对分子质量分别为6000、16000和38000的重组MTB早期分泌抗原靶蛋白（ESAT），成为重组MTB融合蛋白ESAT-6-16-38，研制出双抗原胶体金免疫层析检测卡，对浙江省德清县疾病预防控制中心2007--2009年临床确诊的结核病患者血清163份（其中肺结核痰MTB阳性57份、痰MTB阴性64份和肺外结核42份）和对照血清573份（其中体检者血清224份、急性肺炎和支气管炎患者血清217份、肺吸虫患者血清132份）样本进行检测，并与MTB蛋白芯片抗体法的检测结果进行比较。检出率的比较采用X。检验。结果双抗原法和蛋白芯片法检测结核病患者血清的阳性符合率分别为73．O％（120／163）和72．4％（118／163），差异无统计学意义（x。=0．062，P〉0．05）；检测对照血清的阴性检出率分别为93．9％（538／573）和92．0％（527／573），差异无统计学意义（x。=0．635，P〉0．05）；未见与肺吸虫患者血清有交叉反应，双抗原法对痰MTB阳性血清的检出率高达87．7％（50／57）。结论重组ESAT-6和ESAT．16双抗原胶体金免疫层析检测卡具有较高的敏感度和特异度，与蛋白芯片法的检测结果相似，且方法简便、快速，有很好的重现性和稳定性。

关键词：分枝杆菌结核胶体金双抗原夹心法免疫层析法

刚地弓形虫感染家猫及猫粪中弓形虫卵囊（oocyst）分离方法的介绍

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浙江医学情报 1990年第6期2卷 9-10页

作者：丁建祖袁行政

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弓形虫DNA的提纯及其性质的研究

中国兽医科技 1991年第7期21卷 37-38页

作者：干小仙沈丽英袁行政丁建祖宋昌存浙江医学科学院寄生虫病研究所

为建立提取弓形虫DNA的简便方法,我们于1989～1990年进行了本项研究。(一)材料和方法1.虫株:弓形虫(Toxoplasma gondii)ZA株,从浙江病猪体分离所得,由本所传代保存。2.弓形虫滋养体的纯化:取含滋养体的小鼠腹腔液,离心沉淀,经PBS洗涤2～... 详细信息

为建立提取弓形虫DNA的简便方法,我们于1989～1990年进行了本项研究。(一)材料和方法1.虫株:弓形虫(Toxoplasma gondii)ZA株,从浙江病猪体分离所得,由本所传代保存。2.弓形虫滋养体的纯化:取含滋养体的小鼠腹腔液,离心沉淀,经PBS洗涤2～3次后,加30～40倍体积的0.25％胰蛋白酶磷酸盐缓冲液,37℃水浴中消化20分钟;再用PBS离心洗涤4～5次,以除去胰蛋白酶液。最后在沉淀物中加少量PBS稀释,取少许涂片镜检纯化效果。3.弓形虫DNA的提取:将纯化的弓形虫滋养体悬液稀释至一定密度(OD值约为2.0)后,加入SDS使成2％终末浓度,混匀,置40℃水浴中作用1小时,充分裂解虫体。按Myers,W.T.等(1980)

关键词：弓形体 DNA 提纯