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哌柏西利胶囊的人体生物等效性研究

中国药房 2023年第12期34卷 1498-1502页

作者：王彦超王倩董继宁郝颖翠刘秀娟龙春梅赵可新河北中石油中心医院药物Ⅰ期临床试验研究室河北廊坊065000

目的评价健康受试者空腹或餐后单次口服2种哌柏西利制剂的生物等效性。方法分别纳入24例(空腹试验)和20例(餐后试验)健康受试者,均分为2组。采用单中心、开放、单剂量、两制剂、两周期、两序列、交叉试验设计,两组受试者分别空腹或餐后... 详细信息

目的评价健康受试者空腹或餐后单次口服2种哌柏西利制剂的生物等效性。方法分别纳入24例(空腹试验)和20例(餐后试验)健康受试者,均分为2组。采用单中心、开放、单剂量、两制剂、两周期、两序列、交叉试验设计,两组受试者分别空腹或餐后口服受试制剂(国产哌柏西利胶囊)或参比制剂(原研哌柏西利胶囊),清洗期为14 d。分别于用药前后不同时间点采集血样,经前处理后,以哌柏西利-d8为内标,采用高效液相色谱-串联质谱法测定其体内哌柏西利的质量浓度,采用SAS V9.4软件计算药动学参数并进行生物等效性评价。结果在空腹状态下,受试制剂和参比制剂的c_(max)分别为(71.4±18.1)、(73.8±19.0)ng/mL,AUC_(0-t)分别为(1754±412)、(1793±448)h·ng/mL,AUC_(0-∞)分别为(1851±456)、(1887±478)h·ng/mL;在餐后状态下,受试制剂和参比制剂的c_(max)分别为(78.4±18.3)、(81.9±21.7)ng/mL,AUC_(0-t)分别为(1905±375)、(1932±318)h·ng/mL,AUC_(0-∞)分别为(2027±411)、(2050±342)h·ng/mL;两项试验上述参数几何均值比的90%置信区间均在可接受范围(80.00%~125.00%)内。空腹、餐后状态下,分别有9、8例受试者发生20、16次不良事件,但均未见严重不良事件发生。结论在空腹、餐后状态下,哌柏西利胶囊受试制剂与参比制剂生物等效,且安全性相当。

关键词：哌柏西利生物等效性安全性服药时间

有甲状腺大的先天性甲状腺功能减退症患儿双氧化酶成熟因子1基因突变研究

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中华实用儿科临床杂志 2016年第16期31卷 1259-1261页

作者：董丽萍臧红伟韩文秀臧玉翠阎胜利刘世国葛银林淄博市妇幼保健院新生儿筛查中心 255000 青岛大学医学院生物化学与分子生物学教研室 266021 青岛大学附属医院产前诊断中心 266003 青岛大学附属医院内分泌科 266003

目的对山东地区有甲状腺大的先天性甲状腺功能减退症（congenital hypothyroidism，CH）患儿双氧化酶成熟因子1（DUOXA1）基因进行突变筛查，阐明DUOXA1基因突变类型及特点，为CH的基因诊断及治疗提供理论依据。方法通过山东省新生儿筛... 详细信息

目的对山东地区有甲状腺大的先天性甲状腺功能减退症（congenital hypothyroidism，CH）患儿双氧化酶成熟因子1（DUOXA1）基因进行突变筛查，阐明DUOXA1基因突变类型及特点，为CH的基因诊断及治疗提供理论依据。方法通过山东省新生儿筛查系统选取山东省52例有甲状腺大的CH患儿及100例健康对照者，抽取外周静脉血，提取白细胞全基因组DNA，采用8对序列特异性引物，运用PCR扩增与直接测序法对DUOXA1基因的全部编码序列（codingsequence，CDS）进行突变筛查。测序结果与DUOXA1基因的美国国立生物技术信息中心参考序列：ng_033105．1进行比对，并对发现的单核苷酸多态性（single nucleotide polymor—phisms，SNP）位点的基因频率进行，检验。结果在52例有甲状腺大的CH患儿及100例健康对照CDS区序列中均未发现突变，但在9例患儿及11例健康对照中的第7外显子发现1个SNP位点（rs75981505，c．398G〉T）为错义突变，导致密码子由CGC突变为CTC，相应133位氨基酸由精氨酸变为组氨酸（***133His）。2组SNP基因频率比较，差异无统计学意义（17．3％比11．0％,x^2=1．24，P〉0．05）。结论DUOXA1基因在山东地区有甲状腺大CH患儿突变率低，可能不是该地区伴甲状腺大CH患儿的主要病因。

关键词：先天性甲状腺功能减退症双氧化酶成熟因子1 甲状腺大突变

GLI-1参与表皮生长因子介导的前列腺癌ARCaP_E细胞体外侵袭活性强化的实验研究

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中华男科学杂志 2012年第1期18卷 16-22页

作者：朱国栋周建成曾津马振坤苏博兴王新阳贺大林西安交通大学第一附属医院泌尿外科陕西西安710061 西安交通大学第一附属医院环境和疾病相关基因教育部重点实验室陕西西安710061

目的:探讨Hedgehog(HH)信号通路效应蛋白GLI-1在表皮生长因子(EGF)介导的人前列腺癌AR-CaPE细胞系体外侵袭活性增强中的作用。方法:以人前列腺癌ARCaP细胞系作为研究模型,免疫荧光技术鉴定ARCaPE内EGF受体(EGFR)和GLI-1的表达情况;100 n... 详细信息

目的:探讨Hedgehog(HH)信号通路效应蛋白GLI-1在表皮生长因子(EGF)介导的人前列腺癌AR-CaPE细胞系体外侵袭活性增强中的作用。方法:以人前列腺癌ARCaP细胞系作为研究模型,免疫荧光技术鉴定ARCaPE内EGF受体(EGFR)和GLI-1的表达情况;100 ng/ml EGF体外作用于ARCaPE后,观察细胞的形态及体外侵袭能力的变化,采用Western印迹检测细胞内ERK信号通路成分和GLI-1蛋白的表达变化情况;Transwell侵袭实验检测EGF(100 ng/ml)与GLI-1拮抗剂GANT61(10μmol/L)单独或联合作用对ARCaPE细胞体外侵袭能力的影响。结果:ARCaPE细胞同时表达EGFR与GLI-1蛋白;EGF诱导上皮样外观的ARCaPE细胞向间质样外观的AR-CaPM转化,增强ARCaPE细胞的体外侵袭能力并显著上调细胞内p-ERK和GLI-1蛋白的表达水平(P<0.05);GANT61明显抑制ARCaPE细胞的体外侵袭能力且减弱EGF对细胞侵袭能力的增强效应(P<0.05)。结论:HH信号通路和EGF/ERK信号通路之间存在一定的相互作用,GLI-1可能在EGF介导的人前列腺癌ARCaPE细胞体外侵袭活性增强过程中发挥着重要作用。

关键词：神经胶质瘤致癌基因1 HH信号通路表皮生长因子前列腺癌细胞侵袭上皮-间质转化

妥洛特罗晶体贮库型透皮贴剂的制备与体内外评价

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中国药学杂志 2018年第15期53卷 1290-1295页

作者：檀华进文瑾张丹宋辉王喆乔培香张宇佳谭晓川董可张金兰郑稳生安徽中医药大学合肥230012 北京协和医学院中国医学科学院药物研究所药物传输技术及新型制剂北京市重点实验室北京100050 中国药学会北京100022 安庆医药高等专科学校安徽安庆246052

目的制备妥洛特罗晶体贮库型透皮贴剂;并进行贴剂内结晶形态与稳定性、结晶形成影响因素、黏附力、体外溶出与透皮特性及兔体内药动学考察。方法根据药物重结晶原理制备透皮贴剂。借助显微镜考察结晶的形态、稳定性及其形成影响因素;初... 详细信息

目的制备妥洛特罗晶体贮库型透皮贴剂;并进行贴剂内结晶形态与稳定性、结晶形成影响因素、黏附力、体外溶出与透皮特性及兔体内药动学考察。方法根据药物重结晶原理制备透皮贴剂。借助显微镜考察结晶的形态、稳定性及其形成影响因素;初黏力测定仪、持黏力测定仪、剥离试验机测定黏附力,并利用溶出试验仪、透皮试验仪评价体外溶出与透皮特性。以新西兰兔为试验动物,考察体内药动学行为。结果贴剂内药物结晶呈均匀分布的细丝状,平均宽度为(4.4±1.8)μm,在2~40℃稳定,结晶的形成受过饱和度及温度条件影响;黏附性适宜;体外溶出符合标准要求,且属Higuchi释放过程;体外扩散实验中,12 h内以零级动力学方式透过皮肤,24 h累积渗透率为92.04%,皮肤滞留量为10.36μg·cm^(-2);药物动力学表明,妥洛特罗在(6.67±3.06)h达峰的浓度为(3.08±1.32.ng·m L~(-1,血药浓度可维持24 h。结论控制重结晶条件可建立贴剂内药物晶体贮库系统,贴剂透皮性能良好,体内外释药具有明显的缓释特性,具有深入研究的实际意义。

关键词：妥洛特罗透皮贴剂晶体溶出度药物动力学

血清TNF-α与Npt和G-CSF对胎膜早破合并羊膜腔感染的诊断分析

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中华医院感染学杂志 2017年第19期27卷 4504-4506,4514页

作者：周斌梁菁苹丁仁波王甜甜刘冬霞郭书焕车艳红郑州市妇幼保健院产二病区河南郑州450000

目的探讨血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、新喋呤(Npt)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)用于胎膜早破合并羊膜腔感染诊断的临床价值。方法 2013年6月-2016年5月期间的68例胎膜早破患者作为观察组,同期70例正常孕妇作为对照组,对比两组血清TNF... 详细信息

目的探讨血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、新喋呤(Npt)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)用于胎膜早破合并羊膜腔感染诊断的临床价值。方法 2013年6月-2016年5月期间的68例胎膜早破患者作为观察组,同期70例正常孕妇作为对照组,对比两组血清TNF-α、Npt、G-CSF水平;根据是否合并羊膜腔感染将68例胎膜早破患者分为羊膜腔感染组36例与非羊膜腔感染组32例,对比两组患者血清TNF-α、Npt、G-CSF水平;对比羊膜腔感染患者不同严重程度患者的血清TNF-α、Npt、G-CSF水平。结果观察组血清TNF-α、Npt、G-CSF水平分别为(776.82±89.61)ng/L、(16.91±4.11)mmol/L、(109.33±21.71),均显著高于对照组的(478.53±90.10)ng/L、(7.24±4.02)mmol/L、(82.32±21.67)(P2±85.10)ng/L、(18.74±1.51)mmol/L、(115.36±22.01)显著高于无羊膜腔感染组(492.61±84.98)ng/L、(9.82±1.48)mmol/L、(93.22±21.89)(P<0.01);胎膜早破合并羊膜腔感染患者中,血清TNF-α、Npt、GCSF水平随羊膜腔感染程度的加重表现出显著增高趋势(P<0.01)。结论胎膜早破合并羊膜腔感染患者血清TNF-α、Npt、G-CSF水平明显增高,且随羊膜腔感染严重程度的加重而显著上升,可在一定程度上对胎膜早破合并羊膜腔感染起到有效的预测和早期诊断作用。

关键词： TNF-α Npt G-CSF 胎膜早破羊膜腔感染

脂肪组织源性干细胞分步诱导分化为神经元样细胞

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南方医科大学学报 2011年第3期31卷 512-517页

作者：陈盼盼张丽华董为人刘杰明张易乔伟光陈英华赵姝郭家松南方医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室广东广州510515 佛山市科学技术学院基础医学院广东佛山528305 南方医科大学附属顺德区人民医院神经外科广东顺德528300

目的探讨脂肪组织源性干细胞(ADSCs)诱导分化为神经元样细胞的可行性。方法 ADSCs分离自雄性SD大鼠附睾脂肪垫,差速贴壁法纯化ADSCs,传至第3代培养细胞行流式细胞术行表型鉴定(CD106,CD11b,CD45,CD90,CD29,CD49d),并进行成脂诱导。取鉴... 详细信息

目的探讨脂肪组织源性干细胞(ADSCs)诱导分化为神经元样细胞的可行性。方法 ADSCs分离自雄性SD大鼠附睾脂肪垫,差速贴壁法纯化ADSCs,传至第3代培养细胞行流式细胞术行表型鉴定(CD106,CD11b,CD45,CD90,CD29,CD49d),并进行成脂诱导。取鉴定后的ADSCs用分步诱导法,即先用含10 ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、2.ng/ml表皮生长因子(EGF)、2%B27的DMEM/F12培养基I培养,诱导其向神经干细胞转分化,再用含10 ng/ml胶质细胞源性神经营养因子(GDNF),10 ng/ml脑源性神经营养因子(BDNF),1μmol/L维甲酸(RA)的培养基II诱导分化为神经元样细胞(NLCs),免疫细胞化学法鉴定细胞表面标记物巢蛋白(nestin),神经细胞特异性标志微管相关蛋白(MAP2),神经元核蛋白(NeuN)。结果分离纯化的ADSCs CD90、CD29表达强阳性;成脂诱导分化后细胞油红O染色阳性;ADSCs经培养基I培养7 d后聚集成球样细胞团悬浮于培养液中,表达nestin;继而用培养基II诱导分化4 h后细胞球逐渐贴壁,球周边少数细胞向外发出突起,形似神经元,MAP2、NeuN均呈阳性。结论特定条件下,ADSCs在体外可被逐步诱导分化为NLCs。

关键词：脂肪组织源性干细胞分化神经干细胞神经元

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中舒尼替尼及其活性代谢产物SU12662的浓度

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中国临床药理学杂志 2015年第23期31卷 2348-2351页

作者：张媛媛郝光涛董瑞华陈学义程龙妹刘泽源曲恒燕安徽医科大学解放军307临床学院合肥230032 军事医学科学院附属医院临床药理室北京100071

目的建立HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中舒尼替尼及其活性代谢产物N-去乙基舒尼替尼（SU12662）的浓度。方法以氘代舒尼替尼为内标,用一步沉淀蛋白法对血浆中舒尼替尼及其活性代谢产物SU12662进行提取。色谱柱Agilent ZORBAX Extend C18... 详细信息

目的建立HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中舒尼替尼及其活性代谢产物N-去乙基舒尼替尼（SU12662）的浓度。方法以氘代舒尼替尼为内标,用一步沉淀蛋白法对血浆中舒尼替尼及其活性代谢产物SU12662进行提取。色谱柱Agilent ZORBAX Extend C18（2.1 mm×75 mm×3.5μm）,水相0.1%甲酸,有机相95%乙腈进行梯度洗脱,通过电喷雾离子源以正离子多反应监测模式进行检测。考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度和回收率、稳定性、基质效应。结果舒尼替尼在0.5~200 ng·m L-1内呈良好的线性关系（r=0.998 7）,定量下限为0.5 ng·m L-1,准确度为0.57%~2.87%,回收率在92.75%~98.62%,日内、日间精密度分别为0.91%~1.92%和5.40%~7.87%。SU12662在0.25~100 ng·m L-1内呈良好的线性关系（r=0.999 9）,定量下限为0.25 ng·m L-1,准确度为-2.08%~2.80%,回收率在96.23%~101.12%,日内、日间精密度分别为0.46%~2.46%和5.84%~9.75%。结论该方法简便快速,准确度高,灵敏度好,专属性强,适用于人血浆中舒尼替尼和N-去乙基舒尼替尼浓度的测定。

关键词： HPLC-MS/MS 舒尼替尼 N-去乙基舒尼替尼血药浓度

液相色谱法及液相色谱-串联质谱法测定山楂及其制品中展青霉素的结果比较与建议

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食品安全质量检测学报 2020年第19期11卷 6879-6885页

作者：何绍映李如栋陈宁周覃志高广西-东盟食品检验检测中心南宁530021 武警广西总队医院药局南宁530003

目的比较液相色谱法(liquidchromatography,LC)和液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)测定山楂及其制品中展青霉素的方法学指标。方法 LC法:山楂及固体制品经粉碎酶解后,用乙酸乙酯提取,Mycosep?228Aflapat净化柱净化浓缩,以乙腈和水作为流动相进行梯度洗脱,液相色谱仪被测定;LC-MS/MS法:样品处理方法同LC法(除加同位素外),以乙腈和水作为流动相进行梯度洗脱,外标法定量,采用电喷雾离子源负模式测定。结果 LC法和LC-MS/MS法展青霉素在10~200 ng/mL浓度内线性良好,相关系数均大于0.9999;LC法的回收率为96.12%~104.20%, RSD均小于2.5%,检出限为0.52~0.63μg/kg,定量限为1.7~2.0μg/kg;LC-MS/MS法的回收率为94.68%~103.59%, RSD均小于2.5%,检出限为0.12~0.39μg/kg,定量限为0.38~1.29μg/kg。结论 2种方法结果无显著差异,均可适用于山楂及山楂制品中展青霉素的测定。

关键词：山楂山楂制品展青霉素液相色谱法液相色谱-串联质谱法

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杏ISSR反应体系的优化和指纹图谱的构建

果树学报 2005年第6期22卷 626-629页

作者：刘威生冯晨静杨建民刘冬成张爱民李绍华中国农业大学农学与生物技术学院河北农业大学河北保定071001 中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100101 中国科学院植物研究所北京100093

以杏品种清密沙为试材,用引物UBC825〔序列为(AC)8T〕研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对杏ISSR扩增结果的影响。结果表明:Primer、Mg2+、Taq酶浓度对扩增效果有明显影响,而模板DNA和dNTPs含量对扩增结果影响不大。优化的反应体系... 详细信息

以杏品种清密沙为试材,用引物UBC825〔序列为(AC)8T〕研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对杏ISSR扩增结果的影响。结果表明:Primer、Mg2+、Taq酶浓度对扩增效果有明显影响,而模板DNA和dNTPs含量对扩增结果影响不大。优化的反应体系为:20μL的反应体系中含10ng模板DNA、0.1mmol/LdNTP、0.25μmol/LPrimer、2.5mmol/LMg2+,0.5UTaqPolymerase。适宜退火温度为50-52.1℃。用引物UBC825和UBC868〔序列为(GAA)5〕在优化的反应条件下建立了5个种12份杏材料的ISSR指纹图谱。

关键词：杏 ISSR(inter—simple sequence repeat) 反应体系退火温度优化