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草酸与草酸钙晶体损伤肾脏的机制研究进展

中华实验外科杂志 2007年第12期24卷 1616-1618页

作者：黎承杨邓耀良广西医科大学第一附属医院泌尿外科南宁530021

尿石症以肾结石多见，是一种严重影响人类健康的常见病和多发病，其中，80％以上的结石成分是草酸钙（CaOx）晶体。近年发现，暴露于高浓度草酸（0x）或CaOx晶体的肾脏上皮细胞会产生活性氧簇（ROS），导致自身损伤，细胞损伤的程度与... 详细信息

尿石症以肾结石多见，是一种严重影响人类健康的常见病和多发病，其中，80％以上的结石成分是草酸钙（CaOx）晶体。近年发现，暴露于高浓度草酸（0x）或CaOx晶体的肾脏上皮细胞会产生活性氧簇（ROS），导致自身损伤，细胞损伤的程度与晶体的浓度和接触晶体的时间成正比，

关键词：晶体损伤草酸钙肾脏人类健康结石成分活性氧簇上皮细胞细胞损伤

草酸钙晶体诱导人肾小管上皮细胞铁死亡的机制

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中华泌尿外科杂志 2023年第8期44卷 622-629页

作者：周凯赵嘉闻黎承杨金华市人民医院肾内科金华321000 广西医科大学第一附属医院泌尿外科南宁530021

目的探讨草酸钙(CaOx)晶体诱导人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)发生铁死亡的机制。方法2021年3—9月使用CaOx晶体悬浊液干预HK-2细胞,构建HK-2-CaOx反应模型。设置CaOx晶体浓度分别为0、0.***.0.5、1.0、2.0、4.0、8.0mmol/L,干预HK-2细胞24h... 详细信息

目的探讨草酸钙(CaOx)晶体诱导人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)发生铁死亡的机制。方法2021年3—9月使用CaOx晶体悬浊液干预HK-2细胞,构建HK-2-CaOx反应模型。设置CaOx晶体浓度分别为0、0.***.0.5、1.0、2.0、4.0、8.0mmol/L,干预HK-2细胞24h,干预完成后提取HK-2细胞蛋白。采用最佳干预浓度的CaOx晶体干预HK-2细胞,分别于干预后0、3、6、9、12、24、48h提取细胞蛋白。蛋白质印迹法检测细胞内铁死亡标志蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达情况。用铁死亡诱导剂爱拉斯汀(Erastin)和铁死亡抑制剂3-氨基4-环已基氨基苯甲酸乙酯(Fer-1)干预HK-2细胞以调控细胞内铁死亡水平。将HK-2细胞分为4组:正常对照组(NC组),无干预处理,单纯使用完全培养基培养;CaOx晶体刺激组(CaOx组),使用含4.0mmol/LCaOx晶体的完全培养基培养;CaOx晶体+Erastin处理组(CaOx+Erastin组),使用含10.0μmol/LErastin和4.0mmol/LCaOx晶体的完全培养基培养;CaOx晶体+Fer-1处理组(CaOx+Fer-1组),使用含1.0μmol/LFer-1和4.0mmol/LCaOx晶体的完全培养基培养。培养24h后,采用蛋白质印迹法和免疫荧光技术检测GPX4、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)和溶质载体家族7成员11(SLC7A11)在HK-2细胞内的表达情况;检测HK-2细胞内谷胱甘肽含量;采用DCFH-DA荧光染色法观察HK-2细胞活性氧(ROS)表达情况。通过光学显微镜观察各组HK-2细胞内CaOx黏附情况,DAPI染色检测HK-2细胞核损伤情况。结果采用0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.08.0mmol/L浓度CaOx晶体干预24h后,细胞中CPX4的表达量分别为5.67±1.05、5.60±0.02、4.99±0.94、4.82±0.93、4.50±0.70、4.14±0.53、0.97±0.53,4.0mmol/L组与0mmol/L组相比差异有统计学意义(P=0.026)。选用4.0mmol/L作为最佳浓度干预细胞,干预0、3、6、9、12、24、48h后细胞中CPX4的表达量分别为11.73±1.29、11.68±1.32、11.72±1.30、10.97±1.28、10.63±1.21、8.79±1.10、8.03±1.06,24 h组与Oh组相比差异有统计学意义(P=0.090)。CaOx+Erastin组与NC组相比,ACSL4表达量(9.71±0.68与3.96±0.17,P<0.01)升高;SLC7A11(5.76±1.31与9.18±1.54,P=0.001)和GPX4(3.61±0.25与9.26±0.13,P<0.01)表达量降低;CaOx+Fer-1组与CaOx组相比,GPX4(7.52±0.23与3.61±0.25,P<0.01)、SLC7A11(7.85±1.34与5.76±1.31,P=0.012)表达量升高,ACSL4(5.84±0.62与9.71±0.68,P=0.002)表达量显著降低。Ca0x+Erastin组与CaOx组相比,GPX4(2.71±0.18与3.61±0.25,P=0.001)、SLC7A11(3.82±1.60与5.75±1.31,P=0.017)表达量显著降低,ACSL4(11.15±0.44与9.71±0.68,P<0.01)表达量升高。NC组、CaOx组、CaOx+Fer-1组、CaOx+Erastin组的谷胱甘肽含量分别为(81.88±4.02)、(53.38±3.53)、(68.26±4.55)、(38.22±2.95)mmol/L;DCFH-DA荧光染色强度分别为(22.72±3.73)、(63.36±5.17)、(82.38±6.25)、(45.32±4.33);免疫荧光强度分别为(50.36±4.23)、(31.63±2.86)、(23.36±3.74)、(39.89±3.35),Ca0x组与NC组、CaOx+Fer-1组、CaOx+Erastin组相比差异均有统计意义(P<0.05)。DAPI染色计算NC组、CaOx组、CaOx+Fer-1组、CaOx+Erastin组细胞核损伤比例分别为2.85%、11.96%、8.76%、16.27%。结论CaOx晶体可以通过增加HK-2细胞内氧化应激水平进而诱导HK-2细胞发生铁死亡.

关键词：活性氧铁铁死亡细胞损伤草酸钙晶体人肾小管上皮细胞

左卡尼汀对草酸钙诱导肾小管上皮细胞铁死亡的影响

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中华泌尿外科杂志 2023年第4期44卷 292-300页

作者：黄默然赵嘉闻黎承杨广西医科大学第一附属医院泌尿外科南宁530021

目的探讨左卡尼汀对草酸钙诱导肾小管上皮细胞(HK-2)铁死亡的影响。方法采用蛋白质印迹法检测不同浓度(0、2、4、8 mmol/L)草酸钙对HK-2细胞铁死亡相关蛋白长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、胱氨酸转运蛋白系统(XCT)和谷胱甘肽过氧化物酶4(... 详细信息

目的探讨左卡尼汀对草酸钙诱导肾小管上皮细胞(HK-2)铁死亡的影响。方法采用蛋白质印迹法检测不同浓度(0、2、4、8 mmol/L)草酸钙对HK-2细胞铁死亡相关蛋白长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、胱氨酸转运蛋白系统(XCT)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达的影响, 筛选实验最适的草酸钙浓度。将HK-2细胞分为4组:①对照组, 细胞贴壁后用正常培养基培养12 h, 然后继续用正常培养基;②左卡尼汀组, 细胞贴壁后用含5 mmol/L左卡尼汀的培养基预处理12 h, 然后更换为含有5 mmol/L左卡尼汀的培养基;③草酸钙组, 细胞贴壁后用正常培养基培养12 h, 然后更换为含有最适浓度草酸钙的培养基;④草酸钙+左卡尼汀组, 细胞贴壁后用含5 mmol/L左卡尼汀的培养基预处理12 h, 然后更换为含有5 mmol/L左卡尼汀和最适浓度草酸钙的培养基。4组更换培养基后继续培养24 h, 收集细胞或上清液, 采用蛋白质印迹法检测铁死亡相关蛋白醌氧化还原酶(NQO1)、ACSL4、XCT、GPX4蛋白表达水平。采用相应试剂盒分别检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛水平;活性氧试剂盒检测细胞活性氧水平;二价铁离子探针检测细胞内铁离子蓄积情况。采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞损伤程度。采用透射电镜观察线粒体损伤情况。对细胞行DAPI染色观察细胞核损伤情况;行苏木素染色观察草酸钙晶体黏附情况。结果蛋白质印迹法检测结果显示, 0、2、4、8 mmol/L草酸钙组的ACSL4蛋白表达分别为0.37±0.16、0.68±0.16、0.73±0.09、0.89±0.03, XCT蛋白表达分别为1.11±0.10、0.91±0.14、0.83±0.09、0.80±0.07, GPX4蛋白表达分别为1.23±0.13、0.99±0.17、0.81±0.05、0.72±0.06, 与0 mmol/L组相比, 2、4、8 mmol/L组ACSL4蛋白表达升高, XCT、GPX4蛋白表达降低, 差异均有统计学意义(P0.05), 草酸钙组与对照组比较差异有统计学意义(P0.05), 草酸钙组与对照组比较差异有统计学意义(P0.05), 草酸钙组与对照组比较差异有统计学意义

关键词：草酸钙左卡尼汀肾小管上皮细胞氧化应激铁死亡

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草酸钙肾结石的研究现状：问题与方向

中华外科杂志 2009年第4期47卷 241-243页

作者：邓耀良叶章群黎承杨广西医科大学第一附属医院泌尿外科南宁530021 华中科技大学同济医院泌尿外科

有5％～15％的人群一生中会罹患肾结石，其中大部分的结石成分是草酸钙（calcium oxalate，CaOx）。多数CaOx肾结石患者未发现伴有其他系统性疾病的存在，称之为特发性草酸钙结石（idiopathic calcium oxalate，iCaOx）；一些患者存在... 详细信息

有5％～15％的人群一生中会罹患肾结石，其中大部分的结石成分是草酸钙（calcium oxalate，CaOx）。多数CaOx肾结石患者未发现伴有其他系统性疾病的存在，称之为特发性草酸钙结石（idiopathic calcium oxalate，iCaOx）；一些患者存在原发性甲状旁腺功能亢进或其他钙代谢异常疾病；一些患者的主要表现为高草酸尿症，其中因肠道疾病导致草酸吸收增多而引起的称为肠源性高草酸尿症，

关键词：草酸钙肾结石原发性甲状旁腺功能亢进系统性疾病高草酸尿草酸钙结石钙代谢异常结石成分结石患者

血管紧张素Ⅱ刺激高草酸尿症大鼠肾脏NADPH氧化酶的表达

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中国病理生理杂志 2009年第11期25卷 2131-2135页

作者：邓耀良黎承杨孙丙华广西医科大学第一附属医院泌尿外科广西南宁530021

目的:观察肾素-血管紧张素系统(RAS)和NADPH氧化酶在高草酸尿症大鼠肾脏氧化应激(OS)形成中的相互作用。方法:采用0.8%乙二醇饮水法诱导建立高草酸尿症大鼠模型。动物分6个组(n=8),A组:空白组;B组:高草酸尿症组;C组:高草酸尿症+apocyni... 详细信息

目的:观察肾素-血管紧张素系统(RAS)和NADPH氧化酶在高草酸尿症大鼠肾脏氧化应激(OS)形成中的相互作用。方法:采用0.8%乙二醇饮水法诱导建立高草酸尿症大鼠模型。动物分6个组(n=8),A组:空白组;B组:高草酸尿症组;C组:高草酸尿症+apocynin治疗组;D组:单纯apocynin治疗组;E组:高草酸尿症+losartan治疗组;F组:单纯losartan治疗组。后4组分别灌胃给予apocynin(0.2g·kg-1.d-1)或losartan(30mg·kg-1.d-1)。4周后检测大鼠尿液、肾组织中的OS指标(尿8-IP和肾组织SOD活性),放免法检测肾组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量,免疫组化法观察NADPH氧化酶亚单位P47phox蛋白在肾脏中的表达位置,RT-PCR法检测肾组织p47phox mRNA的表达水平。结果:p47phox在各组大鼠肾脏中都有广泛表达,表达部位包括肾皮质、内髓、外髓。与A组比较,B组尿液8-IP明显增多,肾组织SOD活性降低,肾组织AngⅡ含量增多,p47phox mRNA在肾组织中的表达水平也明显增多。使用apocynin(C组)和losartan(E组)均可抑制肾组织p47phox mRNA的表达,同时肾脏的OS程度减轻。结论:在高草酸尿症大鼠模型中,肾脏p47phox mRNA表达增多,导致肾脏OS;同时肾脏RAS也被激活,后者可通过刺激p47phox mRNA的表达而促进肾脏OS程度增加。

关键词：高草酸尿症氧化性应激 NADP氧化酶 Apocynin 洛沙坦肾

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肾上腺转移癌的临床特征和预后影响因素

中华泌尿外科杂志 2024年第4期45卷 314-319页

作者：关晓峰罗星梁海祺黎承杨刘德云广西医科大学第一附属医院泌尿外科南宁530021

目的探讨肾上腺转移癌的临床特征和预后影响因素。方法回顾性分析2015年5月至2022年8月广西医科大学第一附属医院收治的37例肾上腺转移癌患者的临床资料。男30例,女7例。中位年龄54(43,62)岁,其中≥60岁13例,6cm9例。同时转移(与原发肿... 详细信息

目的探讨肾上腺转移癌的临床特征和预后影响因素。方法回顾性分析2015年5月至2022年8月广西医科大学第一附属医院收治的37例肾上腺转移癌患者的临床资料。男30例,女7例。中位年龄54(43,62)岁,其中≥60岁13例,6cm9例。同时转移(与原发肿瘤同时确诊肾上腺转移癌)20例,异时转移(原发肿瘤确诊后发现肾上腺转移癌)17例。单纯肾上腺转移癌20例,除肾上腺转移癌外还合并其他远处转移17例。行肾上腺转移癌切除术16例,肾上腺转移癌切除术联合其他脏器切除术15例,超声引导下肾上腺转移癌穿刺活检术6例。仅行手术治疗18例,行综合治疗(手术、化疗、放疗、免疫、靶向、介入和粒子植入)19例。肾上腺转移癌术后病理为肝细胞癌12例,肾透明细胞癌8例,肺腺癌5例,结肠腺癌和神经母细胞瘤各2例,肾盂癌、胃腺癌、胆管细胞癌、肾乳头状细胞癌、结肠腺鳞癌、胸腺小细胞癌、子宫内膜癌、弥漫型大B细胞淋巴瘤各1例。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用log-rank检验分析患者的临床特征与总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的关系,采用Cox比例风险回归模型分析影响患者OS的因素。结果本研究37例,中位随访时间10(4.0,18.5)个月,6个月、1年、2年的总生存率分别为59.5%(22/37)、43.2%(16/37)、32.4%(12/37)。18例仅行手术治疗患者6个月、1年、2年的总生存率分别为66.7%(12/18)、44.4%(8/18)、27.8%(5/18);19例综合治疗患者6个月、1年、2年的总生存率分别为52.6%(10/19)42.1%(8/19)、36.8%(7/19),两组总生存率的差异无统计学意义(P=0.773)。Kaplan-Meier生存曲线显示转移癌侧别是OS(P=0.012)和PFS(P=0.013)的危险因素,转移癌发现时间是OS的危险因素(P=0.021)。单因素Cox回归分析结果显示,转移癌发现时间(HR=2.5,95%CI1.1~5.4,P=0.021)、转移癌侧别(HR=3.6,95%CI1.5~8.5,P=0.004)、肺源性转移癌(HR=3.6,95%CI1.1~11.0,P=0.032)、原发肿瘤病理为腺癌(HR=3.2,95%CI1.2~8.8,P=0.025)是影响OS的危险因素。多因素Cox回归分析结果显示,同时转移(HR=2.6,95%CI1.1~6.2,P=0.033)和转移癌位于左侧(HR=3.6,95%CI1.5~8.6,P=0.005)是影响0S的独立危险因素。结论本研究患者肾上腺转移癌最常见的病理类型为肝细胞癌,以手术为主的综合治疗可能使患者受益。肾上腺转移癌的发现时间、侧别、肿瘤来源和原发肿瘤病理类型是影响患者预后的危险因素。同时转移和转移癌位于左侧是肾上腺转移癌患者OS的独立危险因素。

关键词：肾上腺转移癌临床特征预后因素

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肾移植后高血压发病机理及治疗概况

右江民族医学院学报 2004年第5期26卷 735-737页

作者：黎承杨林芝广西百色市人民医院

肾移植后高血压(post transplant hypertension，PTH)定义为收缩压≥18．62kPa，或舒张压≥11．97kPa，或需要服用降压药来治疗。PTH是肾移植后最常见的并发症，大约超过70％的肾移植受者(renal transplant recipients，RTRs)会出现高... 详细信息

肾移植后高血压(post transplant hypertension，PTH)定义为收缩压≥18．62kPa，或舒张压≥11．97kPa，或需要服用降压药来治疗。PTH是肾移植后最常见的并发症，大约超过70％的肾移植受者(renal transplant recipients，RTRs)会出现高血压。而在以环孢菌素A(CsA)为主的免疫抑制治疗方案中，这一比例可高达90％之多。笔者就近年来有关PTH研究的一些进展综述如下。

关键词：肾移植治疗高血压 PTH 并发症发病机理受者比例定义

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睾丸及其细胞组织移植的研究进展

右江民族医学院学报 2004年第4期26卷 577-578页

作者：林芝黎承杨广西百色市人民医院

睾丸具有生精功能和分泌睾酮维持性征及性功能的作用。睾丸性不育症和内源性睾酮分泌不足症在临床上很常见 ,目前临床上主要通过各种辅助生殖方法和外源性激素替代疗法进行治疗。随着器官和细胞移植技术的发展 ,人们尝试通过睾丸及其细... 详细信息

睾丸具有生精功能和分泌睾酮维持性征及性功能的作用。睾丸性不育症和内源性睾酮分泌不足症在临床上很常见 ,目前临床上主要通过各种辅助生殖方法和外源性激素替代疗法进行治疗。随着器官和细胞移植技术的发展 ,人们尝试通过睾丸及其细胞和组织的移植 ,探寻治疗男性不育症和男性性功能障碍的新途径。目前 ,有关这一领域上的研究已取得了可喜的成果 ,展现出良好的临床应用前景。笔者就近年来国内外的相关研究综述如下。1　睾丸细胞移植根据细胞的功能 ,目前用于移植研究的睾丸组织细胞主要有精原细胞和Leydig细胞两种。1.1　精原细胞移植　睾丸组织中长期存在着生精细胞 ,包括可自我更新、复制的生精干细胞、扩增的精原细胞、已分化的精原细胞。获取睾丸后将其组织剪碎 ,通过DNA酶、透明质酸酶、胶原酶、胰蛋白酶等的消化处理 ,提取出精原细胞 ,应用显微外科技术将细胞注入受体的睾丸内 ,利用睾丸内的细胞微环境 ,能够诱导形成来源于供体精原细胞的精子 ,重建或恢复受体的生精功能[1] 。 1994年Brinster等[2 ] 首先报道了精原细胞移植实验研究 ,结果表明 :经注入不育症模型小鼠睾丸中的生精干细胞能够自行移到受体生精小管的基底膜上繁...

关键词：睾丸生殖细胞细胞移植组织移植

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酒精注射法治疗肾囊肿22例体会

右江医学 1997年第4期25卷 181-182页

作者：黎承杨林芝广西百色地区人民医院泌尿外科

酒精注射法治疗肾囊肿２２例体会广西百色地区人民医院泌尿外科（５３３０００）黎承杨林芝从１９９５年至今我们在Ｂ超定位引导下，对２２例肾囊肿患者采用经皮穿刺注射酒精方法治疗，疗效满意，现报告如下。临床资料本组２２例，均经... 详细信息

酒精注射法治疗肾囊肿２２例体会广西百色地区人民医院泌尿外科（５３３０００）黎承杨林芝从１９９５年至今我们在Ｂ超定位引导下，对２２例肾囊肿患者采用经皮穿刺注射酒精方法治疗，疗效满意，现报告如下。临床资料本组２２例，均经Ｂ超及静脉肾盂造影（ＩＶＰ）检查，...

关键词：肾囊肿酒精注射治疗