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视网膜色素上皮细胞间通讯功能激光损伤的防护

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中华眼科杂志 1999年第3期35卷 216-218页

作者：何守志王凤翔顾峥黄靖香李楠中国人民解放军总医院眼科

目的观察在激光照射下，不同浓度的地塞米松及维拉帕米（ｖｅｒａｐａｍｉｌ）对视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ，ＲＰＥ）细胞间通讯功能的保护作用。方法取１０只猪眼球分离其ＲＰＥ细胞行体外细... 详细信息

目的观察在激光照射下，不同浓度的地塞米松及维拉帕米（ｖｅｒａｐａｍｉｌ）对视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ，ＲＰＥ）细胞间通讯功能的保护作用。方法取１０只猪眼球分离其ＲＰＥ细胞行体外细胞培养，在激光照射前２ｈ，采用不同浓度的地塞米松及维拉帕米分别孵育其第４代传代细胞，然后测定激光照射后光凝斑周围细胞间通讯功能。结果１２５ｍｇ／Ｌ的地塞米松及２０ｍｇ／Ｌ的维拉帕米均能在激光照射的情况下保护ＲＰＥ细胞间通讯功能，而较高浓度的药物保护作用更大。结论地塞米松和维拉帕米均能在离体条件下保护激光损伤后的ＲＰＥ细胞间通讯功能，且其保护作用与用药浓度有关。

关键词：视网膜损伤激光损伤色素上皮细胞间通讯

骨髓基质细胞与关节软骨细胞生物学特性的比较研究

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中国修复重建外科杂志 2004年第1期18卷 53-57页

作者：张东黄靖香哈小琴赵斌余征卢世璧解放军总医院骨科研究所北京100853 解放军军事医学科学院

目的　观察兔骨髓基质细胞 (MSCs)诱导和基因修饰后的主要生物学特性 ,并与关节软骨细胞进行比较。　方法　抽取成年雄性新西兰大白兔髂骨骨髓 ,密度梯度离心获得骨髓基质细胞 ,培养传至第 5代 ,按处理方法分为常规培养液组 (A组 )、条... 详细信息

目的　观察兔骨髓基质细胞 (MSCs)诱导和基因修饰后的主要生物学特性 ,并与关节软骨细胞进行比较。　方法　抽取成年雄性新西兰大白兔髂骨骨髓 ,密度梯度离心获得骨髓基质细胞 ,培养传至第 5代 ,按处理方法分为常规培养液组 (A组 )、条件培养液组 (B组 )及重组缺陷型腺病毒携带肝细胞生长因子 c DNA转染组 (C组 )。条件培养液为常规培养液中含转化生长因子 - β1 (10 ng/ml)、碱性成纤维细胞生长因子 (2 5 ng/ml)和地塞米松 (10 - 7mol/L)。切取兔膝关节软骨 ,3mg/ml 型胶原酶消化传代培养至第 3代 (D组 )。观察原代 MSCs及第 5代 MSCs(体外培养 8～ 10周后 )细胞形态 ,对第 5代 MSCs及第 3代软骨细胞进行、型胶原免疫组织化学染色 ,MTT法检测细胞增殖情况。阿利新蓝法检测细胞培养上清液中糖胺多糖 (GAG)含量。提取各组培养细胞总 RNA,RT- PCR检测、型胶原表达。　结果　原代 MSCs为短梭形、簇状生长 ,传代细胞呈长梭形、旋涡样生长。A组细胞爬片型胶原免疫组织化学染色阳性 , 型胶原免疫组织化学染色阴性 ,GAG含量低 ,与 D组比较 ,差异有统计学意义 (P0 .0 5 ) ;C组转染后第

关键词：骨髓基质细胞关节软骨细胞生物学特性基因修饰兔组织工程

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玻璃化法保存血管异体移植的免疫反应

中华实验外科杂志 2005年第9期22卷 1100-1102页

作者：魏民张伯勋余征袁玫黄靖香解放军总医院骨科北京100853

目的评价玻璃化法保存异体血管移植后的免疫反应。方法对玻璃化法保存14d的新西兰兔股动脉进行异体移植,在4周时对移植动脉进行组织学观察,分别于0、2、4、6、8、12、16和24周采血测定血清抗体滴度和抗体细胞毒作用,并与新鲜新西兰兔股... 详细信息

目的评价玻璃化法保存异体血管移植后的免疫反应。方法对玻璃化法保存14d的新西兰兔股动脉进行异体移植,在4周时对移植动脉进行组织学观察,分别于0、2、4、6、8、12、16和24周采血测定血清抗体滴度和抗体细胞毒作用,并与新鲜新西兰兔股动脉和低温冷冻法保存的新西兰兔股动脉进行比较。结果异体血管移植后在局部和全身均产生了免疫排斥反应。血清抗体滴度的峰值出现于术后第4周,玻璃化法保存的异体血管组织匀浆抗体滴液为0.120±0.023,和新鲜异体血管(0.198±0.020)的差异有统计学意义(P0.05)。结论经玻璃化法和低温冷冻法保存的血管免疫原性降低。

关键词：组织保存冷冻免疫反应异体血管异体移植保存化法玻璃血清抗体滴度新西兰兔

人肺巨细胞癌PLA—801母系细胞系及其克隆化细胞株（A,C,D,E）...

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中华肿瘤杂志 1989年第1期11卷 3-7页

作者：陆应麟黄靖香中国人民解放军总医院

通过使用单个细胞克隆化技术，从人肺巨细胞癌母系细胞(PLA-801)中分出并建成四株亚系（A、C、D、E)。将以上各组癌细胞接种于裸小鼠皮下后，成瘤率与自发性肿瘤转移率以D株最高（5/6）、A株（1/4）、E株（2/5）居中，主要的转移器官是... 详细信息

通过使用单个细胞克隆化技术，从人肺巨细胞癌母系细胞(PLA-801)中分出并建成四株亚系（A、C、D、E)。将以上各组癌细胞接种于裸小鼠皮下后，成瘤率与自发性肿瘤转移率以D株最高（5/6）、A株（1/4）、E株（2/5）居中，主要的转移器官是肺和淋巴结。而C株在相同的条件下，既无成瘤又无转移（％）。形态学研究（光镜、电镜和免疫组织化学）发现；高转移株肿瘤细胞的胞浆富含微丝而且Vimentin染色阳性。本文结果有力地支持了关于肿瘤细胞异质性的理论。此外，指出今后围绕D株与C株的深入对比研究，对揭示肿瘤转移的本质将有重大意义。

关键词：巨细胞癌母细胞克隆株转移机理

人乙状结肠管状腺癌移植裸鼠模型的建立及应用

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肿瘤防治研究 1992年第1期19卷 3-5,F003页

作者：黄靖香纪小龙韩冰解放军总医院病理科解放军总医院单克隆室

本文报导用人乙状结肠原发部位的管状腺癌组织块移植到裸鼠体内荷瘤后,在生物学研究和临床诊断治疗方面的应用,建立了一个有实用价值的动物模型,该模型先后传代20余次、因各种实验需要接种裸鼠125只:其形态及生物学特征和组织的抗原性... 详细信息

本文报导用人乙状结肠原发部位的管状腺癌组织块移植到裸鼠体内荷瘤后,在生物学研究和临床诊断治疗方面的应用,建立了一个有实用价值的动物模型,该模型先后传代20余次、因各种实验需要接种裸鼠125只:其形态及生物学特征和组织的抗原性仍保持不变,用鼠间传代第1(?)代肿瘤组织做体外细胞培养,第5天就可见到单层细胞长出,呈腺样管状结构,在应用性实验中,用放射性核素标记的抗结肠癌单克隆抗体2C10在本模型裸鼠体内的放射免疫显象,为过渡到临床病人的定位诊断提供了必要的参数和依据,另外还用鼠间传代的肿瘤组织块,经液氮冻存28个月后再接种到裸鼠皮下肿瘤仍同样生长,并能传代,其形态特点与原发肿瘤基本一致,这对保持裸(?)肿瘤模型的延续性,减少鼠间传代的工作量和所需费用,为肿瘤实验研究工作的重复性,将有很明显的实际意义。

关键词：肠肿瘤腺癌移植

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恶性肿瘤细胞相互间生长的影响

肿瘤防治研究 1994年第2期21卷 78+85-78+85页

作者：纪小龙黄靖香顾峥解放军总医院病理科

恶性肿瘤细胞相互间生长的影响解放军总医院病理科纪小龙，黄靖香，顾峥恶性肿瘤的生物学行为上表现的明显的多样性（异质性，ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｓｉｔｙ）是一个长期引起人们关注的课题〔＂＇】．我们认为，ｔ此课题的研究中有一个... 详细信息

恶性肿瘤细胞相互间生长的影响解放军总医院病理科纪小龙，黄靖香，顾峥恶性肿瘤的生物学行为上表现的明显的多样性（异质性，ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｓｉｔｙ）是一个长期引起人们关注的课题〔＂＇】．我们认为，ｔ此课题的研究中有一个尚未引起人们足够重视的方面是影响肿...

关键词：恶性肿瘤细胞解放军病理科总医院黄靖癌细胞系

磨损颗粒对滑膜细胞系胞间通讯的影响及其在人工关节无菌性松动中的意义

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中华外科杂志 1999年第7期37卷 406-408页

作者：蔡谞王继芳胡永成卢世璧李楠黄靖香解放军总医院骨科

目的通过观察磨损颗粒作用下滑膜细胞系胞间通讯的改变，探讨无菌性松动人工关节假体骨界面纤维组织异常增生的生物学原因。方法体外培养获得正常髋关节滑膜细胞系，借助荧光光淬灭恢复技术（ＦＲＡＰ）及激光扫描共聚焦显微镜（ＣＬ... 详细信息

目的通过观察磨损颗粒作用下滑膜细胞系胞间通讯的改变，探讨无菌性松动人工关节假体骨界面纤维组织异常增生的生物学原因。方法体外培养获得正常髋关节滑膜细胞系，借助荧光光淬灭恢复技术（ＦＲＡＰ）及激光扫描共聚焦显微镜（ＣＬＳＭ）监测加入１５ｍｇ／ｍｌ（Ｗ／Ｖ）Ｔｉ合金、ＣｏＣｒ合金或ＵＨＭＷＰＥ颗粒悬液后滑膜细胞胞间通讯的改变。结果经三种颗粒刺激后滑膜细胞胞间通讯均显著下降（Ｐ＜００１），下降程度以ＵＨＭＷＰＥ颗粒组最明显，Ｔｉ合金颗粒组最小（Ｐ＜００１），而且胞间通讯程度以ＦＣｓ低于ＭＣｓ（Ｐ＜００５）。结论除促成纤维性细胞因子的作用外，与松动有关的人工关节假体骨界面纤维组织大量增生可能与磨损颗粒直接刺激下界面成纤维细胞胞间通讯减弱引起的活跃增殖有关。

关键词：人工关节滑膜细胞胞间通讯磨损颗粒

脱钙骨基质为骨组织工程支架修复骨缺损实验研究

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中国医学科学院学报 2003年第1期25卷 32-35,T006页

作者：孙明学卢世璧王继芳黄靖香余征赵斌中国人民解放军总医院骨科研究所北京100853

目的利用骨组织工程原理对节段性骨缺损进行修复,探讨脱钙骨基质(demineralizedbonematrix,DBM)在骨组织工程中的应用。方法从兔股骨分离骨髓间质干细胞(bonemesenchymalstemcells,BMSCs),经体外诱导分化、条件培养、5-溴-2'-脱氧尿嘧... 详细信息

目的利用骨组织工程原理对节段性骨缺损进行修复,探讨脱钙骨基质(demineralizedbonematrix,DBM)在骨组织工程中的应用。方法从兔股骨分离骨髓间质干细胞(bonemesenchymalstemcells,BMSCs),经体外诱导分化、条件培养、5-溴-2'-脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-2'-dexyouridine,5-BrdU)标记后,接种到兔海绵状脱钙骨基质(spongeofDBM,SDBM)支架上,然后分别植入兔背部肌肉内及兔桡骨中段10mm长的骨膜骨缺损内。对照组为缺损内单纯植入SDBM及空白组。术后观察6周。结果经条件培养的BMSCs可在体外表达Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶,并形成钙结节;体内异位植入组织工程骨块可形成软骨及骨组织;组织工程骨块及单纯SDBM在术后6周完全修复骨缺损(6/6);极限压缩强度测量显示,组织工程骨块植入组新生骨与正常桡骨段差异无显著性(P=0.623),单纯SDBM植入组新生骨在生物力学方面低于正常桡骨段(P=0.038)。结论脱钙骨基质在骨组织工程中是一种有效的生物活性支架材料。

关键词：脱钙骨基质干细胞组织工程

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骨软骨复合体修复软骨及软骨下骨缺损

中华骨科杂志 2005年第8期25卷 497-502页

作者：张东袁玫孙明学黄靖香赵斌卢世璧解放军总医院骨科研究所北京100853

目的探讨以诱导的兔骨髓基质细胞与双层PLGA支架构建组织工程骨软骨复合体,修复兔膝关节软骨及软骨下骨缺损的方法及结果。方法健康新西兰兔28只,分为三组。A组为常规培养MSCs(10只),B组为诱导培养MSCs(10只),C组为自体骨软骨块移植(8只... 详细信息

目的探讨以诱导的兔骨髓基质细胞与双层PLGA支架构建组织工程骨软骨复合体,修复兔膝关节软骨及软骨下骨缺损的方法及结果。方法健康新西兰兔28只,分为三组。A组为常规培养MSCs(10只),B组为诱导培养MSCs(10只),C组为自体骨软骨块移植(8只)。密度梯度离心法获得骨髓基质干细胞(marrow-derivedstromalcells,MSCs),分别使用常规培养液和成软骨诱导条件培养液进行体外扩增传代。提取MSCs及关节软骨细胞总RNA,RT-PCR检测Ⅰ、Ⅱ型胶原表达。扫描电镜观察MSCs在PLGA双层支架上的复合与分布情况。A、B组MSCs分别与PLGA双层支架构建直径3.5mm、高3.0mm的骨软骨复合体,植入股骨髁髌骨滑车同比例骨软骨缺损区,术后第4、8、16、24周取材,进行大体观察、组织学检查和评分。结果RT-PCR见常规培养MSCs表达Ⅰ型胶原,无Ⅱ型胶原表达;诱导后MSCs表达Ⅰ、Ⅱ型胶原。扫描电镜观察MSCs在PLGA支架黏附生长良好,孔隙深处可见细胞分布。B组标本术后24周大体观察与正常软骨无明显差别,组织学检查为成熟的类透明软骨组织(4/6),优于A组(1/4)。结论MSCs具有成骨和成软骨潜能,可在基于细胞的软骨修复中作为种子细胞与双层PLGA构建组织工程骨软骨复合体,该复合体在实验动物模型中可修复关节软骨和软骨下骨缺损。

关键词：软骨,关节细胞因子组织工程复合体修复骨缺损区骨软骨 RT-PCR检测 PLGA支架构建组织工程扫描电镜观察