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香烟暴露和戒烟大鼠支气管肺泡灌洗液及外周血调节性T细胞的表达及意义

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香烟暴露和戒烟大鼠支气管肺泡灌洗液及外周血调节性T细胞的表达...

作者：黄秋嫔广西医科大学

学位级别：硕士

目的观察香烟暴露和戒烟大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)及外周血中调节性T(Treg)细胞的表达与探讨其意义。方法将50只健康清洁级雄性Wistar大鼠随机分为五组:12周正常对照组(A组)、24周正常对照组(B组)、12周吸烟组(C组)、戒烟组(D组)、24... 详细信息

目的观察香烟暴露和戒烟大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)及外周血中调节性T(Treg)细胞的表达与探讨其意义。方法将50只健康清洁级雄性Wistar大鼠随机分为五组:12周正常对照组(A组)、24周正常对照组(B组)、12周吸烟组(C组)、戒烟组(D组)、24周吸烟组(E组)。用烟熏法复制大鼠气道炎症的动物模型。12周后,A组、C组处置取材;D组实行戒烟12周;E组继续烟熏12周。再次满12周后B组、D组和E组均处置取材。行病理学检查,HE染色下观察小气道病理改变,进行气道评分;收集BALF进行细胞学计数和分类;用酶联免疫吸附法(ELISA)法测出BALF中4种细胞因子的浓度: Th1/Th2型细胞因子IFN-γ、IL-4、促炎因子IL-8、TNF-α;用流式细胞术检测各组大鼠BALF及外周血中Foxp3+ Treg细胞的数量,用RT-PCR检测各组大鼠BALF及外周血中Foxp3 mRNA的表达。结果(1)与正常对照组比较,12周吸烟组、戒烟组、24周吸烟组气道炎症评分明显增高(P均0.05),24周吸烟组增高最明显(P0.05)。各组外周血中Foxp3+ Treg细胞比例无明显差别(P均>0.05)(4)与正常对照组相比,12周吸烟组、戒烟组、24周吸烟组BALF中Foxp3 mRNA表达升高(P0.05)。各组外周血中Foxp3 mRNA表达无明显差别(P均>0.05)。结论(1)香烟暴露致大鼠气道Th1/Tc1介导的炎症伴BALF中Treg细胞表达增高。(2)戒烟后大鼠气道炎症仍存在,但较持续香烟暴露大鼠减轻,BALF中Treg细胞表达未见下降。(3)气道内Treg细胞高表达可能与抑制气道炎症有关。

关键词：香烟暴露戒烟大鼠 CD4+CD25+ Treg细胞 Foxp3 BALF

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晚发老年支气管哮喘的临床特点

中国老年学杂志 2016年第12期36卷 2974-2975页

作者：林芃黄秋嫔谢正福广西医科大学第一附属医院老年病学科广西南宁530021

目的探讨晚发老年支气管哮喘(LOA)的临床特点。方法选择82例老年支气管哮喘患者为研究对象,其中早发老年哮喘40例,LOA 42例,以42例健康老年者作为对照组。对早发和晚发的老年性支气管哮喘患者的过敏史、夜间发作史、治疗前后的血常规、... 详细信息

目的探讨晚发老年支气管哮喘(LOA)的临床特点。方法选择82例老年支气管哮喘患者为研究对象,其中早发老年哮喘40例,LOA 42例,以42例健康老年者作为对照组。对早发和晚发的老年性支气管哮喘患者的过敏史、夜间发作史、治疗前后的血常规、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-5、IL-8、嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)和肺功能进行比较。结果与早发组比较,晚发组哮喘过敏史较少,患者症状多见于夜间发作。在急性发作期,晚发组主要表现为中性粒细胞计数、IL-8与CRP增高明显,早发组主要表现嗜酸性粒细胞计数、ECP增高明显。治疗3个月后随访显示,晚发组基础肺功能较早发组好,气流受限的可逆性好。治疗后晚发组在控制水平分级、哮喘控制测试(ACT)评分、哮喘生命质量问卷(AQLQ)评分和依从性均较早发组好。结论 LOA有一些临床特征区别于早发老年哮喘,应该积极诊断和治疗。

关键词：支气管哮喘过敏炎症因子肺功能

红霉素对香烟诱导的大鼠支气管肺泡灌洗液中调节性T细胞的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第5期30卷 493-494页

作者：陈慧钟小宁白晶黄秋嫔邱诗林张建全广西医科大学第一附属医院呼吸内科 530021

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonarydisease，COPD）是一种主要由吸烟诱发的以Th1为主的气道炎症，存在的Th1/Th2失衡介导的炎症反应和自身免疫反应是激活中性粒细胞和巨噬细胞等效应细胞发挥损害肺泡细胞和产生降解间质... 详细信息

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonarydisease，COPD）是一种主要由吸烟诱发的以Th1为主的气道炎症，存在的Th1/Th2失衡介导的炎症反应和自身免疫反应是激活中性粒细胞和巨噬细胞等效应细胞发挥损害肺泡细胞和产生降解间质成分作用并最终导致肺气肿的关键所在。

关键词：支气管肺泡灌洗液调节性T细胞 Th1/Th2失衡红霉素慢性阻塞性肺疾病大鼠香烟自身免疫反应

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糖皮质激素对大鼠急性肺损伤炎症反应的影响

广西医科大学学报 2006年第5期23卷 744-746页

作者：廖宁李健陈敏莉黄秋嫔赵华谢正福广西医科大学第一附属医院老年呼吸内科南宁530021

目的:通过构建大鼠急性肺损伤(ALI)模型,探讨糖皮质激素对ALI炎症反应的影响。方法:将64只雄性SD大鼠随机分为A、B、C、D、E、F、G和H组,每组8只,A组通过气管内滴入脂多糖建成ALI模型,B、C、D、E、F、G组大鼠也滴入等量脂多糖,但分别于... 详细信息

目的:通过构建大鼠急性肺损伤(ALI)模型,探讨糖皮质激素对ALI炎症反应的影响。方法:将64只雄性SD大鼠随机分为A、B、C、D、E、F、G和H组,每组8只,A组通过气管内滴入脂多糖建成ALI模型,B、C、D、E、F、G组大鼠也滴入等量脂多糖,但分别于滴入前120、30、0 min,滴入后30、60、120 min静脉注射地塞米松(2 mg/kg),H组为正常对照组。6 h后处死大鼠,并检测支气管肺泡灌洗液白细胞总数和分类计数、蛋白和磷脂含量,测量肺湿重系数,通过肺组织切片、HE染色进行组织病理学评分。结果:与A组大鼠相比,C组大鼠支气管肺泡灌洗液白细胞总数、中性粒细胞计数及肺组织病理学评分显著降低,分别为(0.436 3±0.200 4)×106/L、(0.402 6±0.204 8)×106/L、4.000 0±1.069 0(P<0.05);C、D两组蛋白含量显著下降[分别为(5.350 0±0.856 9)g/L和(5.500 0±0.691 2)g/L,(P<0.05)],而磷脂含量则显著增高[分别为(6.831 9±2.056 3)mol/L和6.973 9±2.202 4 mol/L,(P<0.05)],肺湿重系数显著下降[分别为0.154 0±0.030 4和0.154 4±0.058 8,(P<0.05)]。结论:在适当时机使用糖皮质激素进行干预可以抑制或减轻由脂多糖引起的ALI相关性炎症反应。

关键词：糖皮质激素脂多糖急性肺损伤炎症

终止香烟烟雾暴露后大鼠Th1/Tc1介导气道炎症及调节性T细胞的变化

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中华医学杂志 2010年第36期90卷 2552-2557页

作者：黄秋嫔钟小宁白晶邱诗林陈慧张建全广西医科大学第一附属医院呼吸内科南宁530021

目的观察香烟烟雾暴露和终止香烟烟雾暴露后大鼠Th1/Tc1介导气道炎症及支气管肺泡灌洗液（BALF）中调节性T细胞（Treg）的变化.方法将50只健康清洁级雄性Wistar大鼠随机分为5组：12周正常对照组（简称12周对照组）、24周正常对照组（... 详细信息

目的观察香烟烟雾暴露和终止香烟烟雾暴露后大鼠Th1/Tc1介导气道炎症及支气管肺泡灌洗液（BALF）中调节性T细胞（Treg）的变化.方法将50只健康清洁级雄性Wistar大鼠随机分为5组：12周正常对照组（简称12周对照组）、24周正常对照组（简称24周对照组）、12周香烟烟雾暴露组（简称12周暴露组）、24周香烟烟雾暴露组（简称24周暴露组）、终止香烟烟雾暴露组（简称终止暴露组）.烟熏法复制大鼠气道炎症的动物模型.12周后,12周对照组、12周暴露组处置取材,24周暴露组继续烟熏12周,终止暴露组终止烟雾暴露12周,将后2组及24周对照组处置取材.HE染色观察小气道病理改变,进行气道评分收集BALF进行细胞学计数和分类计数酶联免疫吸附法（ELISA）法测BALF中4种细胞因子：Th1/Th2型细胞因子干扰素（IFN）γ、白细胞介素（IL）4及促炎因子IL-8、肿瘤坏死因子（TNF）α的浓度流式细胞术检测各组大鼠BALF中Treg细胞的比例,RT-PCR检测各组大鼠BALF中Foxp3 mRNA的表达.结果（1）12周暴露组、24周暴露组、终止暴露组气道炎症评分较12周对照组、24周对照组明显高（均P＜0.01）.24周暴露组、终止暴露组气道炎症评分均较12周暴露组高（均P＜0.01）.（2）与12周对照组、24周对照组相比,12周暴露组、24周暴露组、终止暴露组BALF中IFN-γ、TNF-α和IL-8高,IL-4低（均P＜0.01）.与12周暴露组相比,终止暴露组IFN-γ、IL-4、TNF-α差异均无统计学意义（均P＞0.05）,IL-8较高（P＜0.01）,24周暴露组IFN-γ、TNF-α和IL-8明显高（均P＜0.01）.（3）BALF中Treg细胞比例,12周暴露组（7.4%±0.8%）、24周暴露组（7.8%±1.7%）、终止暴露组（7.0%±1.4%）较12周对照组（4.8%±1.2%）、24周对照组（4.7%±1.2%）高（均P＜0.01）,前3组之间BALF中Treg细胞比例差异均无统计学意义（均P＞0.05）.（4）12周暴露组（0.22±0.02）、24周暴露组（0.23±0.03）、终止暴露组（0.20±0.04）BALF中Foxp3 mRNA表达较12周暴露组（0.13±0.01）、24周暴露组（0.11±0.02）高（均P＜0.01）.前3者之间BALF中Foxp3 mRNA表达差异均无统计学意义（均P＞0.05）.结论香烟暴露致大鼠气道Th1/Tc1介导炎症伴Treg细胞表达增高,终止香烟烟雾暴露后其炎症及Treg细胞高表达仍持续存在,提示该免疫失衡可能是导致终止香烟暴露后Th1/Tc1气道炎症仍持续进展的原因之一.

关键词： T淋巴细胞,调节性叉头转录因子类终止香烟烟雾暴露气道炎症

烟草烟雾暴露大鼠中CD4^＋白细胞介素-17^＋T细胞与CD4^＋Foxp3^＋调节性T细胞的变化及意义

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中华结核和呼吸杂志 2012年第1期35卷 55-60页

作者：蒙菁菁钟小宁白晶何志义张建全黄秋嫔广西医科大学第一附属医院呼吸内科南宁530021

目的观察烟草烟雾暴露大鼠外周血与BALF中CD4白细胞介素（IL）-17^＋T细胞（Th17细胞）与CO4^＋Foxp^3＋调节性T细胞（Treg细胞）及相关因子的水平变化，探讨Th17和Treg细胞在烟草诱导气道炎症和COPD的发生与发展中的作用。方法将40只... 详细信息

目的观察烟草烟雾暴露大鼠外周血与BALF中CD4白细胞介素（IL）-17^＋T细胞（Th17细胞）与CO4^＋Foxp^3＋调节性T细胞（Treg细胞）及相关因子的水平变化，探讨Th17和Treg细胞在烟草诱导气道炎症和COPD的发生与发展中的作用。方法将40只健康清洁级雄性Wistar大鼠分为暴露12周组和24周组、对照12周组和24周组，每组10只。用烟熏法复制大鼠气道炎症的动物模型。收集BALF进行细胞学计数和分类，采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清和BALF上清液中IL-17和IL-6水平，用流式细胞术检测Th17和Treg细胞比例，用实时荧光定量PCR法检测IL-17和Foxp3mRNA的表达。多组间比较采用单因素方差分析，组内两两比较采用SNK法和Games—Howell法。结果暴露12周组和24周组大鼠外周血IL-17浓度分别为（52．6±1．8）ng／L和（75．4±6．0）mg／L，BALF中IL-17浓度分别为（78．1±5．8）ng／L和（95．0±6．8）ng／L，均显著高于对照12周组[（40．0±3．2）,lg／L和（54．5±4．6）．g／L]及24周组[（36．7±3．2）ng／L和（53．9±3．7）ng／L]，暴露24周组与其他3组比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。暴露24周组大鼠外周血中IL-6浓度为（31．4±2．1）,lg／L，显著高于对照24周组[（11．5±0．5）ng／L]；暴露12周组和24周组大鼠BALF中IL-6浓度分别为（33．3±2．3）ng／L和（44．6±3．0）ng／L，显著高于对照12周组和24周组[（15．6±1．8）ng／L和（18．0±1．9）ng／L]。暴露12周组和24周组大鼠外周血中Th17细胞比例分别为（1．81±0．19）％和（3．74±0．55）％，BALF中Th17细胞比例分别为（7．84±0．28）％和（8．01±0．39）％，均显著高于对照12周组[（0．97±0．08）％和（5．64±0．54）％]及24周组[（1．08±0．10）％和（5．95±0．48）％]，暴露24周组与其他3组比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。暴露12周组和24周组大鼠BALF中Treg细胞比例分别为（8．81±0．49）％和（11．98±0．72）％，均显著高于对照12周组和24周组[（4．344-0．28）％和（5．21±0．42）％]。暴露12周组和24周组大鼠外周血中IL一17mRNA表达量分别为25．7±2．0和33．9±1．5，BALF中IL一17mRNA表达量分别为22．2±1．8和34．7±4．2，均显著高于对照12周组（11．3±2．6和11．6±2．4）及24周组（11．1±2．0和13．5±3．4）；暴露12周组和24周组大鼠BALF中Foxp3mRNA表达量分别为24．4±2．7和30．3±2．7，显著高于对照12周组和24周组（12．7±2．7和14．6±3．8）。暴露组大鼠BALF中Th17细胞与其BALF中细胞总数和巨噬细胞数呈正相关（r值分别为0．512和0．543，均P〈0．05）。结论烟草暴露可导致大鼠气道炎症模型的Th17细胞和Treg细胞及相关炎症因子水平升高，提示Treg细胞可能参与气道炎症的免疫调节，Th17细胞异常升高可能与大鼠气道炎症反应的发生及持续进展有关。

关键词： CD4 阳性T淋巴细胞 T淋巴细胞调节性烟草炎症

CD4^＋Foxp3^＋调节性T细胞对断烟大鼠肺部炎症及肺气肿的作用

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中华结核和呼吸杂志 2010年第9期33卷 688-692页

作者：邱诗林白晶钟小宁黄秋嫔陈慧柳广南广西医科大学第一附属医院呼吸内科南宁530021

目的观察香烟暴露及断烟后大鼠Treg细胞的变化，探讨Treg细胞与断烟后大鼠肺部炎症反应和肺气肿持续存在的关系。方法将50只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为5组：健康对照组、香烟暴露组和断烟组，其中健康对照组和香烟暴露组又分为1... 详细信息

目的观察香烟暴露及断烟后大鼠Treg细胞的变化，探讨Treg细胞与断烟后大鼠肺部炎症反应和肺气肿持续存在的关系。方法将50只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为5组：健康对照组、香烟暴露组和断烟组，其中健康对照组和香烟暴露组又分为12周组（对照1组和实验1组）和24周组（对照2组和实验2组）。香烟烟雾暴露法建立大鼠肺气肿模型。HE染色观察大鼠肺气肿的改变，酶联免疫吸附法检测大鼠BALF中白细胞介素（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平，流式细胞术检测大鼠外周血和肺实质中CD4^±Foxp3调节性T细胞（Treg细胞）比例，实时定量PCR法检测大鼠外周血和肺实质中Foxp3的mRNA表达。多组间比较采用单因素方差分析，组内两两比较采用SNK和Games—Howell检验。结果实验1组和实验2组平均内衬间隔（MLI）为（64．9±5．3）μm和（77．9±11．5）μm，均明显高于对照1组和对照2组的（39．0±3．8）μm和（40．3±2．7）μm，差异均有统计学意义（P〈0．01）；断烟组MLI[（71．5±5．8）μm]介于实验1组和实验2组之间，但肺气肿程度较实验1组明显加重，差异有统计学意义（P〈0．01）。实验1组和实验2组IL-8水平[（68±17）ng／L和（85±16）ng／L]及TNF-α水平[（14．1±1．8）ng／L和（20．1±8．7）ng／L]均明显高于对照1组和对照2组[（44±8）ng／L、（43±9）ng／L及（6．3±2．3）ng,／L、（5．8±1．6）ng／L]，差异均有统计学意义（P〈0．05）。实验1组和实验2组肺实质中CD4^＋Foxp3^＋Treg细胞[（6．6±0．8）％和（5．3±0．9）％]明显少于对照1组和对照2组[（9．0±1．0）％和（9．6±0．9）％]，差异均有统计学意义（P〈0．01）；断烟组肺实质中CD4^＋Foxp3^＋Treg细胞[（7．2±0．6）％]与实验1组比较虽无明显减少，但未能恢复至正常水平。实验1组和实验2组肺实质中Foxp3的mRNA表达量（17±7和9±7）明显低于对照1组和对照2组（39±6和42±7），差异均有统计学意义（P〈0．01）；断烟组肺实质中Foxp3的mRNA表达量（21±9）与实验1组比较未见明显减少，但未能恢复至正常水平。结论香烟暴露肺气肿大鼠肺内调节性T细胞下调可能导致大鼠肺内炎症反应放大，并在断烟后持续存在，提示调节性T细胞下调可能是大鼠肺气肿持续进展的原因之。

关键词： T淋巴细胞,调节性烟戒烟肺气肿

晚发老年支气管哮喘急性发作的呼吸道病原体分析

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实用老年医学 2015年第3期29卷 250-252页

作者：霍波林芃黄秋嫔谢正福广西医科大学第一附属医院老年病学科广西壮族自治区南宁市530021

老年性支气管哮喘（asthma in the elderly,AIE）是老年人常见的呼吸道疾病,哮喘急性发作常严重威胁患者的生命及生活质量,是急诊、住院病死的重要原因[1]。近年来随着哮喘发病机制研究的逐渐深入,哮喘急性发作已受到临床医生的重视。... 详细信息

老年性支气管哮喘（asthma in the elderly,AIE）是老年人常见的呼吸道疾病,哮喘急性发作常严重威胁患者的生命及生活质量,是急诊、住院病死的重要原因[1]。近年来随着哮喘发病机制研究的逐渐深入,哮喘急性发作已受到临床医生的重视。但目前研究比较多的是儿童急性发作期病原体分析,对于AIE急性发作期的病原体研究相对较少。本研究对晚发AIE患者急性发作期的常见病原体进行分析,旨在增加对AIE的认识,为临床合理用药提供依据。

关键词：急性发作期哮喘急性发作哮喘发病机制晚发常见病原体呼吸道病原体支气管哮喘病原体检测 asthma 呼吸道病毒

CD4+ CD25+淋巴细胞在急性肺损伤发病过程的表达及其意义

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CD4+ CD25+淋巴细胞在急性肺损伤发病过程的表达及其意义