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具有TFCP2基因重排横纹肌肉瘤临床病理学特征

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中华病理学杂志 2022年第6期51卷 545-547页

作者：陈雪燕陈刚朱琼朱伟峰何诚黄榕芳福建医科大学附属肿瘤医院福建省肿瘤医院病理科福州350014 福建医科大学附属肿瘤医院福建省肿瘤医院分子病理研究室福州350014

目的探讨具有TFCP2基因重排横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcomas, RMS)的临床病理学特征。方法收集2例具有TFCP2基因重排RMS的临床病理及分子遗传学检测资料, 同时复习相关文献。结果例1女, 31岁, 肿物位于左上牙龈;例2女, 49岁, 肿物位于右... 详细信息

目的探讨具有TFCP2基因重排横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcomas, RMS)的临床病理学特征。方法收集2例具有TFCP2基因重排RMS的临床病理及分子遗传学检测资料, 同时复习相关文献。结果例1女, 31岁, 肿物位于左上牙龈;例2女, 49岁, 肿物位于右上颌后牙区。镜下形态:例1由条束状、旋涡状的短/胖梭形细胞构成;例2肿瘤与骨组织混杂生长, 长梭形细胞为主伴有少量上皮样细胞。免疫表型, 例1肿瘤细胞部分表达结蛋白及广谱细胞角蛋白, 例2肿瘤细胞弥漫表达结蛋白;2例均MyoD1弥漫阳性, Myogenin阴性, 间变性淋巴瘤激酶Ventana-D5F3部分阳性。间期荧光原位杂交(FISH)检测到TFCP2基因易位。二代测序检测到EWSR1-TFCP2融合基因。例1术后5个月左颈淋巴结转移, 例2术后32个月前腭部肿瘤复发。结论具有TFCP2基因重排RMS是RMS的一组特殊亚群, 好发于骨, 特别是青年患者颅面骨, 表现为上皮样细胞和/或梭形细胞形态, 预后不良。

关键词：横纹肌肉瘤上皮样细胞间变性淋巴瘤激酶颈淋巴结转移梭形细胞镜下形态青年患者结蛋白

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小鼠胸腺T细胞淋巴瘤模型的建立

小鼠胸腺T细胞淋巴瘤模型的建立

作者：黄榕芳福建医科大学

学位级别：硕士

【目的】通过腹腔注射DNA烷化剂N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)诱导小鼠胸腺淋巴瘤,建立相应动物模型;应用组织形态学、免疫表型、超微结构观察及巢式聚合酶链反应(PCR)方法鉴定肿瘤细胞来源并分型。【方法】1.第一部分,选用6～8周龄C57BL/6小... 详细信息

【目的】通过腹腔注射DNA烷化剂N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)诱导小鼠胸腺淋巴瘤,建立相应动物模型;应用组织形态学、免疫表型、超微结构观察及巢式聚合酶链反应(PCR)方法鉴定肿瘤细胞来源并分型。【方法】1.第一部分,选用6～8周龄C57BL/6小鼠52只,随机分实验组40只和对照组12只。实验组小鼠腹膜腔内注射新鲜配制MNU诱导液(50mg/kg体重);对照组腹膜腔内注射等量生理盐水,共注射2次(分别于第0、8周)。注射后观察动物一般情况,对濒死及死亡小鼠进行解剖观察。第22周采用颈椎脱位法处死全部小鼠,解剖检查胸腺淋巴瘤的发生及其他脏器情况。2.第二部分,应用光镜和透射电镜,对诱发的胸腺淋巴瘤及其侵袭脏器进行研究,分析其组织学及超微结构特点。通过免疫组织化学方法(所选抗体有CD3、CD20、TdT及PCNA)鉴定肿瘤细胞来源、分型。3.第三部分,采集8例实验组胸腺淋巴瘤组织及4例对照组胸腺组织,迅速放入液氮罐内,后置入-70℃冰箱冻存。提取基因组DNA,采用巢式PCR方法,对采集样本进行T细胞受体β链(TCRβ)和γ链(TCRγ)克隆性基因重排分析,并对TCRγ基因重排的PCR产物直接测序。【结果】1.实验后期,实验组小鼠体重明显下降。第22周,67.5%(27?40)实验组小鼠产生胸腺淋巴瘤。不同性别对成瘤率影响无明显差异。77.8%胸腺淋巴瘤合并其他脏器侵犯。2. 27例胸腺淋巴瘤光镜下主要表现为:胸腺结构破坏,代之以弥漫分布的中等大小淋巴样细胞,细胞形态比较一致,胞质稀少,核圆形、卵圆形或扭曲核,染色质细腻,核仁显著,核分裂象多见,可见“星空”现象。免疫组化显示瘤细胞表达CD3和TdT。超微结构观察,瘤细胞平均直径7.02±1.12μm,表面无突起,核形相对规则或伴有扭曲核,核仁靠近核膜,核浆比例高,胞质内细胞器极少,凋亡细胞易见。3. 8例胸腺淋巴瘤检测TCRβ和TCRγ均呈克隆性基因重排,阳性率100%;4例对照组胸腺组织均未检测到TCRβ或TCRγ克隆性基因重排。DNA序列测定证实TCRγ基因PCR扩增产物为基因重排产物。【结论】1.腹腔分次注射MNU可以诱导小鼠产生胸腺淋巴瘤,其生物学行为与人类肿瘤相似。2.结合光镜、免疫组化和电镜检查结果,证实所有肿瘤为胸腺T淋巴细胞起源的前驱淋巴母细胞淋巴瘤。3.巢式PCR TCRβ和TCRγ的基因重排检测及DNA序列分析证实,MNU诱导的小鼠胸腺淋巴瘤实际上是T淋巴细胞的单克隆性增生,是来源于T细胞的肿瘤。总之,MNU诱导的小鼠胸腺淋巴瘤在生物学行为、形态学、免疫表型和遗传学方面均与人类相应肿瘤极其相似,可作为人类这一肿瘤实体的理想动物模型。

关键词：恶性淋巴瘤 T细胞淋巴瘤胸腺动物模型化学致癌剂 N-甲基-N-亚硝基脲/MNU 免疫组织化学超微结构聚合酶链反应基因重排

软体类海产品主要过敏原的基因克隆及生物信息学分析

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软体类海产品主要过敏原的基因克隆及生物信息学分析

作者：黄榕芳中国海洋大学

学位级别：硕士

海产品中的软体类动物引发食物过敏的现象越来越多，其主要的过敏原是原肌球蛋白（Tropomyosin，TM）。临床数据显示不同来源的原肌球蛋白可能发生交叉反应，但引发过敏的能力和症状也可能不相同。目前对不同物种过敏原之间交叉反应的... 详细信息

海产品中的软体类动物引发食物过敏的现象越来越多，其主要的过敏原是原肌球蛋白（Tropomyosin，TM）。临床数据显示不同来源的原肌球蛋白可能发生交叉反应，但引发过敏的能力和症状也可能不相同。目前对不同物种过敏原之间交叉反应的研究集中于氨基酸序列相似性分析，对结构相似性研究较少;而对于过敏原差异性研究甚少。本论文以我国重要的经济贝类——栉孔扇贝（Chinesescallop, Chlamys farreri）为研究对象，克隆其原肌球蛋白基因序列，并利用生物信息学方法预测其致敏性。然后结合已经报道的软体类主要过敏原，利用生物信息学方法对过敏原的同源性及序列微不均一性进行分析，探讨软体类海产品过敏原的交叉反应性及差异性，为进一步了解食物过敏反应提供科学依据。1、采用RACE技术克隆栉孔扇贝（Chinese scallop, Chlamys farreri）原肌球蛋白cDNA序列。结果显示，栉孔扇贝原肌球蛋白cDNA序列全长855bp，共编码284个氨基酸，其氨基酸序列不含有色氨酸（W）、脯氨酸（P）和半胱氨酸（C）;分子量为32.5kDa，等电点为4.46。栉孔扇贝原肌球蛋白的生物信息学分析结果表明，栉孔扇贝原肌球蛋白二级结构以α-螺旋结构为主，没有复杂的三、四级结构空间结构;具有较高的亲水性和溶剂可及性，抗原指数高。综合分析结果表明栉孔扇贝TM具有致敏性。2、利用生物信息学方法对不同软体类过敏原之间的同源性进行分析。结果表明，软体类原肌球蛋白序列的相似性在65.1%9.6%之间，其中连续6个氨基酸残基完全一致的区域共有4个（120-125、164-178、214-228、251-261），其中251-261区域包含在已报道的过敏原原肌球蛋白抗原表位6中，极有可能是交叉抗原表位。对氨基酸组成的分析结果表明，软体类原肌球蛋白的氨基酸在组成上都缺少脯氨酸（P），结构中主要为二级结构，其中α-螺旋含量高于80%，均没有复杂的三、四级结构空间结构;蛋白亲水性和溶剂可及性较高，抗原指数高。共同的基本性质及结构信息是软体类过敏原之间交叉反应的基础。3、分析了软体类海产品原肌球蛋白之间的序列微不均一性。结果显示，在分析的软体类原肌球蛋白氨基酸序列中，共涉及300个氨基酸突变、90个氨基酸位点（占序列全长284个位点的31.2%）。其中147个氨基酸突变（占300个突变总数的49.0%）各自对序列稳定产生显著的影响，93个氨基酸突变（占300个突变总数的31.0%）发生在抗原表位区。差异氨基酸主要为丝氨酸（S）和丙氨酸（A）。本文首次对软体类海产品中原肌球蛋白氨基酸序列的微不均一性进行分析，为揭示不同软体类海产品引发过敏的差异性提供了分子水平上的依据。综上所述，本研究克隆了栉孔扇贝原肌球蛋白cDNA序列，并利用生物信息学软件分析了其结构及基本理化性质。结合已经报道的软体类海产品主要过敏原序列，分析了不同软体类原肌球蛋白同源性及理化性质差异，特别是对氨基酸序列微不均一性进行了系统的分析，找出了不同软体类海产品原肌球蛋白之间的主要差异氨基酸，为解释软体类海产品引发人体发生过敏症状的差异提供了分子水平上的基础数据。

关键词：软体类海产品过敏原生物信息学交叉反应性序列微不均一性

p16、GATA3表达及人乳头状瘤病毒分型检测在宫颈癌累犯膀胱病理诊断中的价值

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中华病理学杂志 2017年第6期46卷 388-392页

作者：黄榕芳何诚朱伟峰李燕陈刚福建省肿瘤医院福建医科大学附属肿瘤医院病理科福州350014

目的探讨p16、GATA3的表达及人乳头状瘤病毒（HPV）分型检测在宫颈癌累犯膀胱病理诊断中的价值.方法收集2008年12月至2016年3月16例宫颈癌累犯膀胱标本,对其进行组织学观察,采用免疫组织化学检测p16、GATA3的表达水平,采用PCR-反向点... 详细信息

目的探讨p16、GATA3的表达及人乳头状瘤病毒（HPV）分型检测在宫颈癌累犯膀胱病理诊断中的价值.方法收集2008年12月至2016年3月16例宫颈癌累犯膀胱标本,对其进行组织学观察,采用免疫组织化学检测p16、GATA3的表达水平,采用PCR-反向点杂交法检测HPV基因分型.结果患者发病年龄25～76岁,中位年龄52岁.宫颈癌累犯膀胱病例中,14例（14/16）肿瘤细胞在膀胱固有层或肌层内巢状浸润.免疫组织化学示15例（15/16）膀胱病灶弥漫强表达p16,1例10%细胞表达;7例（7/7）宫颈原发灶均弥漫强阳性.13例（13/16）膀胱病灶GATA3染色阴性,3例局部弱-中等阳性（≤30%）;3例（3/7）宫颈原发灶弱-中等阳性（≤20%）.15例（15/16）高危型HPV阳性,其中8例HPV16型,1例HPV31型,5例为HPV16＋HPV18双重基因型,1例HPV18＋HPV45双重基因型. 结论单独使用p16或GATA3鉴别诊断价值有限.结合病史p16、GATA3免疫组织化学和HPV分型检测可有助于宫颈癌累犯膀胱病例的诊断与鉴别诊断.

关键词：宫颈肿瘤细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂p16 GATA3转录因子人乳头状瘤病毒16 免疫组织化学

间变性淋巴瘤激酶阳性的大B细胞淋巴瘤病理形态学及分子遗传学研究

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中华病理学杂志 2011年第3期40卷 169-172页

作者：黄榕芳陈刚宫丽平陆俐丽福建省肿瘤医院病理科福州350014 首都医科大学病理学系

目的探讨问变性淋巴瘤激酶（ALK）阳性的大B细胞淋巴瘤的临床病理及分子遗传学特点。方法对3例ALK阳性的大B细胞淋巴瘤进行光镜观察，采用免疫组织化学EliVision法及分子遗传学方法检测，并结合文献进行分析和讨论。结果3例患者均为成... 详细信息

目的探讨问变性淋巴瘤激酶（ALK）阳性的大B细胞淋巴瘤的临床病理及分子遗传学特点。方法对3例ALK阳性的大B细胞淋巴瘤进行光镜观察，采用免疫组织化学EliVision法及分子遗传学方法检测，并结合文献进行分析和讨论。结果3例患者均为成年男性，年龄32～42岁，平均年龄36．3岁，病变累及淋巴结。镜下观察：淋巴结结构破坏，可见淋巴窦侵犯，肿瘤细胞大，呈免疫母细胞样／浆母细胞样形态。免疫组织化学示肿瘤细胞CD45、CD138、上皮细胞膜抗原、ALK阳性，且ALK蛋白染色呈胞质内颗粒状阳性，CD3、CD20、CD79a和CD30均阴性。3例间期荧光原位杂交均检测到ALK基因易位。结论ALK阳性大B细胞淋巴瘤是弥漫性大B细胞淋巴瘤的少见独立亚型，好发于中年男性，病变部位以淋巴结多见，具有特征性形态学、免疫表型和分子遗传学特点。

关键词：淋巴瘤 B细胞免疫表型分型原位杂交荧光诊断鉴别

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细胞蜡块在乳腺肿块细针穿刺细胞学中的应用

临床与实验病理学杂志 2016年第7期32卷 815-817页

作者：何诚黄榕芳朱伟峰陈刚福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院病理科福州350014

目的探讨细胞蜡块(cell block,CB)技术在乳腺肿块细胞学诊断中的应用价值。方法对327例乳腺肿块患者行细针穿刺细胞学(fine needle aspiration cytololgy,FNAC)检查,并制作CB,与术后组织学病理诊断结果进行对比分析。结果经组织病理学对... 详细信息

目的探讨细胞蜡块(cell block,CB)技术在乳腺肿块细胞学诊断中的应用价值。方法对327例乳腺肿块患者行细针穿刺细胞学(fine needle aspiration cytololgy,FNAC)检查,并制作CB,与术后组织学病理诊断结果进行对比分析。结果经组织病理学对照,FNAC诊断敏感度为95.96%,特异度为96.12%,假阳性率为3.88%,假阴性率为4.04%,阳性预示值为97.44%,阴性预示值为93.94%,诊断准确率为96.02%。CB联合FNAC诊断敏感度为97.98%,特异度为98.45%,假阳性率为1.55%,假阴性率为2.02%,阳性预示值为98.98%,阴性预示值为96.95%,诊断准确率为98.17%。结论 CB可以弥补FNAC的不足,CB联合FNAC检测可有效提高诊断敏感度、特异度及准确率。

关键词：乳腺肿瘤细针穿刺细胞学细胞蜡块活组织检查

不同处理方式对芡实中游离氨基酸和碳水化合物的含量及淀粉消化率的影响

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食品与发酵工业 2020年第5期46卷 166-173页

作者：王忠合王军张菁黄榕芳韩山师范学院食品工程与生物科技学院广东潮州521041

以芡实为原料,采用水煮后冷冻干燥、水煮后热风干燥、冷冻干燥、太阳晒干、热风干燥等5种方式处理芡实,测定处理后芡实中游离氨基酸、还原糖、总糖、淀粉含量及淀粉消化率,比较不同处理方法的差异性。结果表明:热风干燥、冷冻干燥、太... 详细信息

以芡实为原料,采用水煮后冷冻干燥、水煮后热风干燥、冷冻干燥、太阳晒干、热风干燥等5种方式处理芡实,测定处理后芡实中游离氨基酸、还原糖、总糖、淀粉含量及淀粉消化率,比较不同处理方法的差异性。结果表明:热风干燥、冷冻干燥、太阳晒干对芡实中还原糖、总糖和游离氨基酸的含量影响差异极显著(P0.05)。水煮加工处理显著影响芡实中还原糖、总糖和游离氨基酸的含量(P0.05)。淀粉体外消化率分析表明,各样品的淀粉体外消化率均随着消化时间的增加而呈现上升的趋势,不同干燥方式显著影响芡实中淀粉的体外消化率,冷冻干燥、热风干燥、太阳晒干的芡实中淀粉体外消化率依次增大,水煮后样品中淀粉的体外消化率增加,且水煮后冷冻干燥的样品中淀粉的体外消化率最高。

关键词：芡实干燥游离氨基酸高分辨质谱体外消化率

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涎腺分泌性癌细针穿刺细胞病理学特征

中华病理学杂志 2020年第2期49卷 183-186页

作者：黄榕芳何诚朱伟峰卢建平吴宇陈刚福建省肿瘤医院福建医科大学附属肿瘤医院病理科福州350014 福建医科大学基础医学院临床病理教研室福州350004 福建省肿瘤医院福建医科大学附属肿瘤医院头颈外科福州350014 福建省肿瘤生物治疗重点实验室福州350014

目的探讨涎腺分泌性癌的细针穿刺细胞病理学特征。方法收集福建省肿瘤医院2017年12月至2018年5月2例腮腺分泌性癌患者的临床资料,对其进行细胞学、组织学观察、免疫组织化学及分子遗传学方法检测,并结合文献进行讨论。结果2例细胞学涂... 详细信息

目的探讨涎腺分泌性癌的细针穿刺细胞病理学特征。方法收集福建省肿瘤医院2017年12月至2018年5月2例腮腺分泌性癌患者的临床资料,对其进行细胞学、组织学观察、免疫组织化学及分子遗传学方法检测,并结合文献进行讨论。结果2例细胞学涂片均显示富于细胞,主要呈乳头结构或单个散在分布。肿瘤细胞核偏位,胞质丰富,嗜酸性或空泡状。免疫组织化学示肿瘤细胞弥漫表达细胞角蛋白7(CK7)、波形蛋白和S-100蛋白。例1 DOG1和Mammaglobin灶性阳性,例2 Mammaglobin弥漫强阳性,DOG1阴性。例2免疫细胞化学示肿瘤细胞弥漫表达Mammaglobin,而S-100蛋白仅局部表达,不表达DOG1。间期荧光原位杂交(FISH)检测到ETV6基因易位。结论涎腺分泌性癌细胞学形态与其他涎腺肿瘤重叠,仅仅根据细胞学形态诊断存在困难。制备细胞蜡块并借助免疫细胞化学和FISH检查可准确诊断。

关键词：福建省肿瘤医院细胞学涂片分泌性癌肿瘤细胞核空泡状免疫组织化学涎腺肿瘤病理学特征

内镜活检标本中胃泌酸腺肿瘤6例临床病理特征

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临床与实验病理学杂志 2021年第5期37卷 603-605页

作者：陈雪燕陈刚朱伟峰黄榕芳福建医科大学附属肿瘤医院/福建省肿瘤医院病理科福州350014

目的探讨内镜活检标本中胃泌酸腺肿瘤的临床病理表现,提高病理诊断的准确率。方法重新阅片3674例内镜活检病例,根据组织学形态筛选可疑胃泌酸腺肿瘤,查阅其内镜特征,补充免疫组化标记,并复习相关文献。结果3674例内镜活检病例中胃泌酸... 详细信息

目的探讨内镜活检标本中胃泌酸腺肿瘤的临床病理表现,提高病理诊断的准确率。方法重新阅片3674例内镜活检病例,根据组织学形态筛选可疑胃泌酸腺肿瘤,查阅其内镜特征,补充免疫组化标记,并复习相关文献。结果3674例内镜活检病例中胃泌酸腺肿瘤6例,女性4例,男性2例,年龄44~69岁。内镜显示胃底/胃体多发或单发息肉,无HP、肠化及萎缩。低倍镜下见腺体结构复杂、相互融合,结构异型明显;高倍镜下见细胞呈多层或复层,以主细胞为主,散在少量壁细胞,细胞异型性小,部分细胞核从基底层上移,核仁小而不明显。首次病理诊断:胃底腺息肉(2/6)、增生性息肉(1/6)、异型增生(1/6)、泌酸腺息肉(1/6)、胃底腺腺癌(1/6)。补充免疫组化标记:主细胞表达Pepsinogen 1。3例行ESD术,另3例失访。结论胃泌酸腺肿瘤发病率低,部分病理医师对其认识不足,存在误判现象,其组织形态具有特征性,在内镜活检中识别该病变具有重要意义。

关键词：胃泌酸腺肿瘤诊断内镜活检 ESD