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柔红霉素对HL-60细胞的促凋亡作用及其与ROS、CER、NF-κB关系的实验研究

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中华血液学杂志 2002年第9期23卷 471-473页

作者：陈敏冯文莉黄宗干重庆医科大学检验系临床血液学教研室重庆医科大学第一临床学院

目的　探讨柔红霉素 (DNR)在体外作用于HL 6 0细胞时细胞发生凋亡的规律及一些相关机制。方法　应用光镜、流式细胞仪 (FCM)及DNA电泳检测DNR诱导HL 6 0细胞的凋亡作用 ;用免疫细胞化学 (IC)、FCM观察相关蛋白的变化。加入活性氧 (ROS)... 详细信息

目的　探讨柔红霉素 (DNR)在体外作用于HL 6 0细胞时细胞发生凋亡的规律及一些相关机制。方法　应用光镜、流式细胞仪 (FCM)及DNA电泳检测DNR诱导HL 6 0细胞的凋亡作用 ;用免疫细胞化学 (IC)、FCM观察相关蛋白的变化。加入活性氧 (ROS)抑制剂四氢吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)或神经酰胺 (CER)合成酶抑制剂马廉菌素B1(FB1)后 ,观察DNR诱导的HL 6 0细胞凋亡率的变化。结果　当DNR浓度为 0 .2～ 2 .0 μmol/L时 ,HL 6 0细胞发生的凋亡率随药物浓度的增加与作用时间的延长而升高 ,可见典型的凋亡细胞及明显的DNA梯度条带。当 1.0 μmol/LDNR作用于HL 6 0细胞后 ,细胞中Bcl 2与C myc蛋白的荧光强度指数 (FI)总的趋势降低 ,Bax、caspase 3的FI值在作用 2h时上升 ,而 5h时降低 ,核因子κB(NF κB)的FI值持续升高。PDTC可抑制DNR对HL 6 0细胞的凋亡诱导作用 ,而FB1无影响。结论　一定浓度的DNR在体外可诱导HL 6 0细胞凋亡 ,发生凋亡的机制可能是通过抑制Bcl 2和C myc蛋白的表达、激活Bax、caspase 3蛋白诱导的 ;此凋亡过程与ROS、NF κB有关。

关键词：柔红霉素细胞凋亡活性氧神经酰胺核因子-κB

血管内皮生长因子反义寡核苷酸对人白血病细胞血管内皮生长因子表达的影响

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中华血液学杂志 2004年第1期25卷 22-25页

作者：张伶涂植光冯文莉黄宗干重庆医科大学检验系 400016 重庆医科大学临床学院血液科

目的　探讨血管内皮生长因子 (VEGF)反义寡脱氧核苷酸 (AS ODN)对人白血病细胞系VEGF表达的影响。方法　将VEGFAS ODN与K5 6 2和HL 6 0细胞共孵育 ,采用RT PCR技术、免疫组化方法以及ELISA法观察VEGFAS ODN对人白血病细胞系VEGFmRNA和... 详细信息

目的　探讨血管内皮生长因子 (VEGF)反义寡脱氧核苷酸 (AS ODN)对人白血病细胞系VEGF表达的影响。方法　将VEGFAS ODN与K5 6 2和HL 6 0细胞共孵育 ,采用RT PCR技术、免疫组化方法以及ELISA法观察VEGFAS ODN对人白血病细胞系VEGFmRNA和蛋白水平的影响。应用MTT法观察VEGFAS ODN作用后的白血病细胞培养上清对人脐静脉血管内皮细胞 (ECV30 4 )增殖的影响。结果　K5 6 2细胞和HL 6 0细胞经VEGFAS ODN(2 .5～ 15 .0 μmol L)作用 2 4h后 ,VEGFmRNA的表达量呈剂量依赖性减少 ,而其表达量不受VEGF错义ODN的影响 ;当加入 5 .0 μmol LVEGFAS ODN作用 2 4h后 ,细胞内及其培养上清液中VEGF蛋白水平显著减少 ,其培养上清对ECV30 4细胞的促增殖作用减弱 ,而错义ODN处理组白血病细胞VEGF蛋白水平及其作用未见明显改变。结论　VEGFAS ODN在体外能够抑制人白血病细胞VEGF的表达。

关键词：血管内皮生长因子反义寡核苷酸白血病 RT-PCR技术免疫组织化学血管新生细胞培养

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肾上腺皮质激素治疗血液病的经验与教训

实用内科杂志 1992年第3期 118-119页

作者：黄宗干重庆医科大学第一医院 630042

肾上腺皮质激素(简称激素)对血液病的治疗具有有一定的地位,不少血液病擂要激亲治疗才能获得较显著的效果.但是目前在

关键词：患者激素类药物血液病血液疾病疾病肾上腺皮质激素血小板计数精尿病慢性型

B细胞非霍奇金淋巴瘤bcl-2/JH融合基因的检测及临床意义

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中华血液学杂志 1997年第7期18卷 361-363页

作者：冯文莉黄宗干重庆医科大学临床血液学教研室重庆医科大学附属第一医院血液内科

目的：研究Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤（Ｂ－ＮＨＬ）ｂｃｌ－２／ＪＨ重排发生情况及其临床意义。方法：采用ＤＮＡ多聚酶链反应（ＰＣＲ）扩增２３例Ｂ－ＮＨＬ患者新鲜肿瘤组织、骨髓和外周血标本中ｂｃｌ－２重排的主要和次要断裂点（Ｍ... 详细信息

目的：研究Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤（Ｂ－ＮＨＬ）ｂｃｌ－２／ＪＨ重排发生情况及其临床意义。方法：采用ＤＮＡ多聚酶链反应（ＰＣＲ）扩增２３例Ｂ－ＮＨＬ患者新鲜肿瘤组织、骨髓和外周血标本中ｂｃｌ－２重排的主要和次要断裂点（ＭＢＲ、ｍｃｒ）。结果：易位断裂点分别在１０例新鲜肿瘤组织（其中７例滤泡型中有５例，占７１．４％；１６例弥漫型中有５例，占３１．３％）、８例骨髓和７例外周血标本中被测到，绝大部分断裂点发生在ＭＢＲ，仅１例位于ｍｃｒ。同时还发现１８例骨髓形态学检查正常的患者中，有４例ＰＣＲ阳性，其中包括２例临床Ⅰ、Ⅱ期患者，提示其骨髓已有肿瘤细胞存在。从治疗后观察得知，治疗前骨髓ＰＣＲ阴性患者比阳性患者更易达到缓解。结论：ｂｃｌ－２／ＪＨ融合基因的检测对淋巴瘤的诊断与分期、治疗方案的选择、疗效观察及微量残留病的监测均有重要意义。

关键词：融合基因聚合酶链反应非霍奇金淋巴瘤 B细胞

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临床症状鉴别诊断学第4版第1版

临床症状鉴别诊断学第4版

2001年

作者：黄宗干

本书共提出了100余个常见症状和体征，内容包括内、外、妇、儿、神经、精神、眼、耳鼻咽喉、口腔、皮肤等临床各科。对每一症状或体征先叙述病因、机制和诊断方法，在此基础上介绍了足以产生这一症状的疾病和鉴别诊断方法。

关键词：症状鉴别诊断

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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汇雅图书（南通市图书馆）

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体外诱导脐血造血细胞定向分化的研究

第三军医大学学报 2003年第6期25卷 540-542页

作者：张伶李维黄宗干重庆医科大学临床血液学教研室重庆400016 重庆市血液中心输血研究室重庆400015 重庆医科大学临床学院血液科重庆400016

目的　探讨造血生长因子体外诱导脐血造血细胞向粒系细胞分化的能力。方法　从新鲜的脐血标本中分离的单个核细胞接种于含脐血血清和造血生长因子的IMDM培养液中悬浮培养 5周 ,采用有核细胞计数、免疫荧光染色计数和祖细胞集落测定对有... 详细信息

目的　探讨造血生长因子体外诱导脐血造血细胞向粒系细胞分化的能力。方法　从新鲜的脐血标本中分离的单个核细胞接种于含脐血血清和造血生长因子的IMDM培养液中悬浮培养 5周 ,采用有核细胞计数、免疫荧光染色计数和祖细胞集落测定对有核细胞总数、CD3 4+ 细胞和粒单系祖细胞进行动态检测。结果　用粒系集落刺激因子、粒单系集落刺激因子、干细胞因子、白介素 3和白介素 6培养脐血单个核细胞 3周 ,可以显著扩增有核细胞总数和CFU GM ,扩增倍数分别为培养前的 5 8 3倍和 12 2倍 ,且培养后的细胞以中性粒细胞为主。而CD3 4+ 细胞占细胞总数的比例则从 0 97%下降到 0 0 5 %。按照此培养条件 ,可以使单份新鲜脐血样本中有核细胞总数增加 ( 5 1± 2 3 )倍 ,CFU GM增加 ( 2 2± 0 95 )倍。结论　本培养体系在体外可以诱导脐血造血细胞向粒系定向诱导分化。

关键词：胎血造血细胞细胞因子诱导分化

急性白血病患者白细胞介素6和肿瘤坏死因子水平改变及意义

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中华内科杂志 1993年第2期32卷 85-87页

作者：罗云萍黄宗干 630046，重庆医科大学临床血液教研室重庆医科大学第一医院血液科

为了解白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子（TNF）在急性白血病发生中的作用，我们检测了一组急性白血病患者血浆和细胞诱生的TNFα以及细胞诱生IL-6。与正常对照组比较，急性淋巴细胞性白血病（ALL）和急性非淋巴细胞白血病（ANLL）患... 详细信息

为了解白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子（TNF）在急性白血病发生中的作用，我们检测了一组急性白血病患者血浆和细胞诱生的TNFα以及细胞诱生IL-6。与正常对照组比较，急性淋巴细胞性白血病（ALL）和急性非淋巴细胞白血病（ANLL）患者IL-6诱生活性水平异常增高（P＜0.05）。TNFα的诱生活性水平和血浆含量在ANLL中明显升高，而在ALL中诱生TNFα也高于正常。我们进一步观察了IL-6、TNFα在体外对上述各类急性白血病细胞的作用，结果发现IL-6可明显地促进其增殖生长，而TNFα则呈抑制作用。本研究提示，IL-6和TNFα可能参与了急性白血病的发病过程。

关键词：白血病白细胞介素6 肿瘤坏死因子

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真性红细胞增多症的治疗及评价

实用内科杂志 1989年第10期 507-508页

作者：黄宗干重庆医科大学附属第一医院

真性红细胞增多症(以下简称真红)是一种原因不明的骨髓多能干细胞异常增殖性疾病。其特征为起病隐袭,进展缓慢,病程较长,红细胞和血容量明显增高,伴有粒细胞和血小板增加。本病相对少见,国内自1957年首先报道此病,至1985年有376例,近15... 详细信息

真性红细胞增多症(以下简称真红)是一种原因不明的骨髓多能干细胞异常增殖性疾病。其特征为起病隐袭,进展缓慢,病程较长,红细胞和血容量明显增高,伴有粒细胞和血小板增加。本病相对少见,国内自1957年首先报道此病,至1985年有376例,近15年在我院住院诊治者仅9例。1968年国际真性红细胞

关键词：病人真性红细胞增多症真红骨髓抑制剂治疗方法

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脐血造血细胞的定向诱导分化

癌症 2002年第4期21卷 447-448页

作者：张伶黄宗干刘国卿重庆医科大学临床血液学教研室重庆400016 重庆医科大学临床学院血液科重庆400016

大剂量化疗是临床治疗恶性肿瘤和骨髓移植前预处理的常规手段之一，但它可导致粒细胞减少，从而引发严重的感染。虽然应用抗生素和造血生长因子可以减少感染并发症，但大剂量化疗往往损伤的是晚期祖细胞和白血胞，由此而导致的感染则需... 详细信息

大剂量化疗是临床治疗恶性肿瘤和骨髓移植前预处理的常规手段之一，但它可导致粒细胞减少，从而引发严重的感染。虽然应用抗生素和造血生长因子可以减少感染并发症，但大剂量化疗往往损伤的是晚期祖细胞和白血胞，由此而导致的感染则需成熟的白细胞来治疗。脐血作为一种新的血浆，含有较多的白细胞和具有自我复制及多向分化潜力的造血干、祖细胞，体外诱导造血细胞向粒系定向分化，可以增加脐血粒细胞群数量。目前的研究多限于针对分离纯化的CD34~+细胞和采用小牛血清培养。我们采用脐血单个核细胞研究脐血血清联合造血生长因子诱导干/祖细胞向粒系的定向分化，为单份脐血粒细胞输注治疗大剂量化疗后的感染奠定实验基础。

关键词：脐血造血细胞细胞培养定向诱导分化