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鸡毒支原体对泰乐菌素的耐药判定标准研究

鸡毒支原体对泰乐菌素的耐药判定标准研究

作者：黄安雄华中农业大学

学位级别：硕士

鸡毒支原体又称鸡败血霉形体,主要感染鸡和火鸡,引起鸡的慢性呼吸道系统传染病,是现阶段养殖业较为严重的疾病之一。泰乐菌素作为动物专用药,对畜禽的呼吸道疾病具有良好的治疗作用,并且不易产生药物残留,毒性作用弱,具有极高的安全性,... 详细信息

鸡毒支原体又称鸡败血霉形体,主要感染鸡和火鸡,引起鸡的慢性呼吸道系统传染病,是现阶段养殖业较为严重的疾病之一。泰乐菌素作为动物专用药,对畜禽的呼吸道疾病具有良好的治疗作用,并且不易产生药物残留,毒性作用弱,具有极高的安全性,进一步促进了其在兽医临床上的应用。我国目前养殖业用药的不合理已经导致耐药现象的产生,耐药检测具有必要性和紧迫性。为了减缓鸡毒支原体对泰乐菌素的耐药性产生,保护和维持泰乐菌素的有效性,需要对鸡毒支原体开展耐药监控措施。耐药判定标准是对细菌进行有效耐药监控的科学手段,是判断细菌耐药性的科学准则。因此,为了监测耐药性产生,分析耐药现状和发展规律,更科学的指导临床用药,本课题参考CLSI中耐药判定标准制定的方法建立符合我国国情的野生型临界值、PK-PD临界值和临床临界值,为耐药判定标准的制定工作提供科学数据。1.泰乐菌素对鸡毒支原体的野生型临界值(COWT)的制定本实验从临床感染鸡只中分离鸡毒支原体107株,与实验室保存的标准菌株4株共111株鸡毒支原体。采用肉汤稀释法测定了泰乐菌素对111株鸡毒支原体的最小抑菌浓度(MIC),结果显示MIC50为0.5 μg/mL,MIC90为2 μg/mL。将得到的MIC数据带入Ecoffinder软件,进行线性回归模拟,得到不同置信区间下的野生型临界值。根据ECOFFinder软件分析结果显示,95.0%和97.5%的Subset ECOFF都为2μg/mL,所以选择2 μg/mL为最终的野生型临界值。2.泰乐菌素对鸡毒支原体的药效学临界值(COPD)的制定结合体外药效学数据,选取了 MIC90的菌株进行SPF级鸡胚毒力实验,最终选择M 17菌株进行PK-PD试验,制定药效学临界值。使用微量肉汤稀释法测定泰乐菌素对鸡毒支原体M 17在FM-4肉汤、鸡血浆和肺组织中的MIC和最小杀菌浓度(MBC),结果显示在肉汤、鸡血浆和肺组织中的MIC都为2 μg/mL,MBC都为4μg/mL;用琼脂稀释法测定泰乐菌素对鸡毒支原体M 17的防突变浓度(MPC),测得MPC为5.12 μg/mL;采用菌与药孵育后去除的方法测定泰乐菌素对鸡毒支原体的体外抗菌后效应(PAE),测得孵育1 h的PAE为1.55～2.32 h,孵育2 h的PAE为4.24～4.92 h。根据MIC测定结果,设置不同浓度的泰乐菌素药物分别与鸡毒支原体M 17孵育,在不同时间点进行滴度测定,绘制泰乐菌素对鸡毒支原体M 17的体外杀菌曲线。根据泰乐菌素给药后不同时间点中血浆和肺组织中的药物浓度,在空白血浆和肺组织中加入相应浓度的药物,与鸡毒支原体M 17孵育,绘制半体内血浆杀菌曲线和半体内肺组织杀菌曲线。通过PAE和半体内杀菌曲线研究,发现泰乐菌素对鸡毒支原体的抗菌作用主要呈现为一定的浓度依赖型和长时间依赖型,所以最后选择的PK-PD 参数是 AUC/MIC。试验选取112羽3周龄的白羽肉鸡,随机分为2组,健康组和人工感染组各56只。人工感染组用鸡毒支原体M 17进行气管灌注,感染7天建立鸡毒支原体患病模型。健康组和患病组均以25 mg/kg b.w.的给药剂量灌胃给药酒石酸泰乐菌素可溶性粉,给药后 0.33、0.67、1、1.5、2、3、4、6、8、12、24、36 和 48 h 采集鸡血浆和肺组织,经样品前处理后用高效液相色谱法检测不同时间点泰乐菌素的浓度。采用WinNonlin软件中的一级吸收二室模型对药动学数据进行拟合,得到泰乐菌素在健康鸡和患病鸡靶组织肺中的药动学参数:峰浓度(Cmax)分别为6.284和6.174 μg/mL,24 h药时曲线下面积(AUC24h)分别为35.569和60.949 h.μg/mL,达峰时间(Tmax)分别为2.079和2.107 h,吸收半衰期(T1/2α)分别为1.512和1.403 h,消除半衰期(T1/2β)分别为1.700和21.737 h,清除率/生物利用度(CL/F)分别为0.703和0.410 mL/kg/h。利用抑制型Sigmoid Emax模型对半体内条件下健康组和患病组的AUC24h/MIC值与鸡毒支原体数量变化的对数值进行拟合,得到健康组和患病组的模型参数:Emax分别为 2.17 和 2.20,E0 分别为-4.59 和-4.53,EC50 分别为 27.40 和 27.68。预防(E=0)、治疗(E=-3)和根除(E=-4)目的下AUC24h/MIC靶标值:健康组依次为18.98、48.84、86.59 h;患病组依次为19.25、51.19、95.26 h。由于患病组更贴近实际用药对象,按照患病组 AUC24h/MIC 的靶标值,根据剂量计算公式:(?),得到当泰乐菌素对鸡毒支原体的MIC为2 μg/mL,临床推荐的按体重给药的预防剂量为17.25 m

关键词：鸡毒支原体泰乐菌素野生型临界值药效学临界值临床临界值耐药判定标准

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文门赏石

椰城 2008年第7期 11-12页

作者：黄安雄

早春二月的一天,我取道从"石门子"进入天涯镇邻近天涯海角风景区的黎族自然村文『j村。举目远眺,那真是石头的世界。山上山下,村里村外,田问地头,湖堤河岸、屋圯路旁,到处可见各种形状的大石、小石、顽石、灵石、奇石、美石姿态万千,形... 详细信息

早春二月的一天,我取道从"石门子"进入天涯镇邻近天涯海角风景区的黎族自然村文『j村。举目远眺,那真是石头的世界。山上山下,村里村外,田问地头,湖堤河岸、屋圯路旁,到处可见各种形状的大石、小石、顽石、灵石、奇石、美石姿态万千,形象逼真,惟妙惟肖。或"金鸡独立",或群象下山,乱石叠阵,或连环如锁,或星罗棋布,或武士站岗,或元宝聚盆池……

关键词：石头故事民间文学

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男人·大海

椰城 2008年第3期 45-46页

作者：黄安雄

我海边的故乡,有的是漫眼无际的湛蓝,有的是震撼人心的澎湃,有的是纯朴厚醇的海腥,更有的是一群以海为家的打渔男人。海风拨动着海的韵律,悠扬的旋律随着海浪飘逸……嘹亮粗犷的劳动号子从苍凉透蓝的海面隐隐传来,由远及近,从低沉浑厚... 详细信息

我海边的故乡,有的是漫眼无际的湛蓝,有的是震撼人心的澎湃,有的是纯朴厚醇的海腥,更有的是一群以海为家的打渔男人。海风拨动着海的韵律,悠扬的旋律随着海浪飘逸……嘹亮粗犷的劳动号子从苍凉透蓝的海面隐隐传来,由远及近,从低沉浑厚到高亢激扬,

关键词：登高一呼

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昌化江·二水洲·天鹅石

椰城 2007年第10期 45-46页

作者：黄安雄

悠悠昌化江,你从海南岛最高的峰岭流来,你从苍茫翠绿的五指山麓流来,横贯海南岛西北部,流经五个民族市县。你静静的流淌,见证多少历史的漫长岁月,

关键词：昌化江昌化县

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海头海尾·水头水尾

椰城 2007年第11期 43-45页

作者：黄安雄

海南岛北部湾畔的西海岸,有一条源自黎母山的珠碧江,自东向西,奔腾欢唱着田野牧歌,滋润了百八十里大地,在她扑向大海怀抱时,恋恋不舍转了个身,成半环状后汇入茫茫的大海。入海口的环北面是儋州辖地屿港海头,而南面则是昌江黎族自治县辖... 详细信息

海南岛北部湾畔的西海岸,有一条源自黎母山的珠碧江,自东向西,奔腾欢唱着田野牧歌,滋润了百八十里大地,在她扑向大海怀抱时,恋恋不舍转了个身,成半环状后汇入茫茫的大海。入海口的环北面是儋州辖地屿港海头,而南面则是昌江黎族自治县辖地海尾。

关键词：海尾镇

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昌江的海湾

椰城 2008年第4期 9-10页

作者：黄安雄

人们都说三亚的海湾如何如何的美,是海南海湾的第一名片。故有到海南不到三亚,等于不到海南,到了三亚而不观赏三亚湾,是旅游一行的遗憾之说。但不怕你笑话,我有时总爱拿故乡的海湾与三亚湾相比较,也许是受"谁不说自己家乡美"观念的熏陶... 详细信息

人们都说三亚的海湾如何如何的美,是海南海湾的第一名片。故有到海南不到三亚,等于不到海南,到了三亚而不观赏三亚湾,是旅游一行的遗憾之说。但不怕你笑话,我有时总爱拿故乡的海湾与三亚湾相比较,也许是受"谁不说自己家乡美"观念的熏陶,总觉得两湾各有千秋。如果说三亚湾犹如出水芙蓉,玲珑剔透,

关键词：三亚湾棋子湾

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霸王岭景物

椰城 2007年第8期 41-42页

作者：黄安雄

喀斯特俄贤岭从霸王岭沿着盘山公路向王下乡进发。车转到雅加大岭群山中的俄贤岭,只见一座座山峰突兀地从远处的地面冒出来。喀斯特!车内有人兴奋的高叫。这是一个对我来说陌生洋化的名字,心里疑惑着。一位作家介绍说,"喀斯特"是原南斯... 详细信息

喀斯特俄贤岭从霸王岭沿着盘山公路向王下乡进发。车转到雅加大岭群山中的俄贤岭,只见一座座山峰突兀地从远处的地面冒出来。喀斯特!车内有人兴奋的高叫。这是一个对我来说陌生洋化的名字,心里疑惑着。一位作家介绍说,"喀斯特"是原南斯拉夫一个高原的地名。

关键词：九峰山霸王岭

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十月田

椰城 2007年第9期 44-45页

作者：黄安雄

你雄踞海南岛西昌江黎族自治县中部,东邻石碌镇,西北和西南与海尾镇、乌烈镇毗邻,南依叉河镇,是黎族同胞聚居地区。你是一片肥沃辽阔充满希望的热土,是生产香蕉、橡胶、甘蔗的重镇。你有一个如火如诗般的名字,叫"十月田"。十月田,读着... 详细信息

你雄踞海南岛西昌江黎族自治县中部,东邻石碌镇,西北和西南与海尾镇、乌烈镇毗邻,南依叉河镇,是黎族同胞聚居地区。你是一片肥沃辽阔充满希望的热土,是生产香蕉、橡胶、甘蔗的重镇。你有一个如火如诗般的名字,叫"十月田"。十月田,读着你的名字,我们的眼前是一片金黄,

关键词：香水菠萝十月田镇昌江县

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重回黎乡看王下

椰城 2021年第5期 66-70页

作者：黄安雄不详

五月的海南,阳光灿烂,繁花似锦。五月的王下,鸟语花香,岁月静好。趁着"五一"假期,王下"黎花里"文化旅游项目开张之际,我踏着木棉花红的泥香,在凤凰花怒放的招手致意中重访曾经工作过的"中国第一黎乡"王下。王下乡地处海南霸王岭深山腹地... 详细信息

五月的海南,阳光灿烂,繁花似锦。五月的王下,鸟语花香,岁月静好。趁着"五一"假期,王下"黎花里"文化旅游项目开张之际,我踏着木棉花红的泥香,在凤凰花怒放的招手致意中重访曾经工作过的"中国第一黎乡"王下。王下乡地处海南霸王岭深山腹地,从县城石碌驾车近一个小时至峰巅向下行走时,只见两边峰岭耸立,西侧俄贤岭直上云端,雾霭缭绕,一幅天然画境。面前河流纵横交错,山清水秀,气候温润,四季凉爽。看着景色深呼吸,崇山峻岭的气势和绿韵荡涤心头,把五脏六腑洗得一干二净。

关键词：王下乡气候温润木棉花文化旅游项目深呼吸