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南方水稻抛秧田杂草药剂防除技术研究

广东农业科学 2010年第5期37卷 94-96页

作者：黄文文陈永黄劲飞钟国华华南农业大学昆虫毒理研究室广东广州510642

由于栽培方式的改变,水稻抛秧田杂草的发生危害呈逐年加重的趋势。连续两年的田间药效试验结果证明,30%苄嘧磺隆·丁草胺可湿性粉剂(WP)(苄嘧磺隆1.5%∶丁草胺28.5%)可有效防除水稻抛秧田一年生杂草,以每667m2用量120～150g喷施后45d内... 详细信息

由于栽培方式的改变,水稻抛秧田杂草的发生危害呈逐年加重的趋势。连续两年的田间药效试验结果证明,30%苄嘧磺隆·丁草胺可湿性粉剂(WP)(苄嘧磺隆1.5%∶丁草胺28.5%)可有效防除水稻抛秧田一年生杂草,以每667m2用量120～150g喷施后45d内对各类目标杂草的株防效和鲜重防效均可达80%以上,与单用10%苄嘧磺隆WP和50%丁草胺乳油(EC)相比,扩宽了杀草谱,提高了防效,整体控制效果良好,推荐剂量下施用对水稻安全,可供选用防除南方水稻抛秧田杂草。

关键词：苄嘧磺隆·丁草胺WP 水稻抛秧田杂草防效

甜菜夜蛾过氧化氢酶cDNA序列克隆、序列分析和表达特征

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昆虫学报 2011年第11期54卷 1249-1257页

作者：胡振左洪亮李亚楠黄劲飞胡美英华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室广州510642

过氧化氢酶(catalase,CAT)作为生物体内的重要物质,其主要功能是参与活性氧代谢过程,在清除H2O2、超氧自由基和过氧化物以及阻止羟基自由基形成等方面发挥着重要作用。本研究利用RT-PCR技术和RACE方法首次克隆和分析了甜菜夜蛾Spodopter... 详细信息

过氧化氢酶(catalase,CAT)作为生物体内的重要物质,其主要功能是参与活性氧代谢过程,在清除H2O2、超氧自由基和过氧化物以及阻止羟基自由基形成等方面发挥着重要作用。本研究利用RT-PCR技术和RACE方法首次克隆和分析了甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hübner)CAT基因,命名为SexiCAT,GenBank登录号为JN051294,其cNDA序列全长为1755bp,开放阅读框长1524bp,推测编码507个氨基酸。经氨基酸序列比对,此多肽序列具有高度保守性,与其他昆虫CAT的序列一致性分别为:家蚕Bombyxmori(87%)、黑腹果蝇Drosophila melanogaster(73%)、埃及伊蚊Aedes aegypti(71%)和赤拟谷盗Tribolium castaneum(70%)。对该基因在甜菜夜蛾各个发育时期以及不同组织表达量的荧光定量PCR分析表明,SexiCAT基因在甜菜夜蛾各个发育阶段的表达水平存在显著差异,其中成虫期的表达量最高,是卵期表达量的7倍,幼虫期次之,卵期最低;SexiCAT基因在5龄幼虫体壁、中肠、脂肪体和马氏管组织中都有表达,但在脂肪体中表达量最高。甜菜夜蛾SexiCAT基因的成功克隆及同源建模将为今后对其功能研究以及作为靶标设计新型氧化酶抑制剂提供了基础。

关键词：甜菜夜蛾过氧化氢酶基因克隆序列分析同源建模表达谱

印楝素A诱导Sf9细胞凋亡的显微和超微形态变化

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华南农业大学学报 2010年第4期31卷 52-58页

作者：程杏安黄劲飞胡美英胡黎明张颜博华南农业大学昆虫毒理研究室广东广州510642

利用倒置显微镜和透射电子显微镜技术观察印楝素A诱导草地贪夜蛾Spodoptera frugperda蛹卵巢Sf9细胞凋亡的显微和超微形态变化.结果表明：1.5μ***-1印楝素A对Sf9细胞具有显著的凋亡诱导作用,从凋亡小体和贴壁细胞数量变化判断,印楝素A... 详细信息

利用倒置显微镜和透射电子显微镜技术观察印楝素A诱导草地贪夜蛾Spodoptera frugperda蛹卵巢Sf9细胞凋亡的显微和超微形态变化.结果表明：1.5μ***-1印楝素A对Sf9细胞具有显著的凋亡诱导作用,从凋亡小体和贴壁细胞数量变化判断,印楝素A处理12 h,细胞开始出现少量凋亡小体,12~24 h凋亡小体逐渐增多,但贴壁细胞未见明显减少,因此24 h之前（0~24 h）属于凋亡早期阶段;24~36 h凋亡小体大量出现,贴壁细胞逐渐减少,属于凋亡中期;处理36 h以上,凋亡小体和贴壁细胞急剧减少,细胞凋亡进入晚期.观察诱导24 h的细胞超微结构发现,胞内的主要细胞器在数量或形态上发生了显著变化,包括溶酶体数量显著增加,线粒体内部嵴变模糊,内质网从囊泡状变成线管状,细胞核出现分页、皱缩以及区域性膨大等.

关键词：细胞凋亡凋亡小体印楝素A 超微结构 Sf9细胞系

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喜树碱诱导的草地贪夜蛾Sf9细胞凋亡

昆虫学报 2011年第8期54卷 894-901页

作者：王文祥钟国华胡美英黄劲飞葛萃萃广州出入境检验检疫局广州510623 华南农业大学资源环境学院广州510642

传统植物源杀虫剂喜树碱具有优异的抑制昆虫生长发育活性,其诱导昆虫细胞凋亡的作用方式和机制尚不明确,极大地限制了喜树碱在植物保护领域的应用开发。本研究以1μmol/L喜树碱诱导草地贪夜蛾Spodopterafrugiperda Sf9细胞呈现细胞皱缩... 详细信息

传统植物源杀虫剂喜树碱具有优异的抑制昆虫生长发育活性,其诱导昆虫细胞凋亡的作用方式和机制尚不明确,极大地限制了喜树碱在植物保护领域的应用开发。本研究以1μmol/L喜树碱诱导草地贪夜蛾Spodopterafrugiperda Sf9细胞呈现细胞皱缩、微绒毛消失和染色质边集等典型细胞凋亡早期超微结构形态特征,中期凋亡小体逐渐出现并急剧增多,DNA电泳分析可见清晰DNA片段化凋亡特征。流式细胞术分析表明1μmol/L喜树碱诱导Sf9细胞12h凋亡率达到最大值39.67%,是对照的13.13倍,随后减小。喜树碱诱导Sf9细胞凋亡在12h和24h时Sf caspase-1分别出现两个活性高峰,表明其作为效应因子在细胞凋亡级联反应过程中具有影响作用。喜树碱显著抑制Sf9细胞拓扑异构酶Ⅰ活性,阻断解旋负超螺旋pBR322DNA,导致DNA损伤进而启动细胞凋亡级联反应使Sfcaspase-1活性增加,提示其信号转导过程是细胞凋亡诱导机制之一。本研究通过分析喜树碱的诱导昆虫Sf9细胞凋亡,对揭示喜树碱诱导昆虫细胞凋亡的作用机制具有重要启示和帮助。

关键词：草地贪夜蛾喜树碱 Sf9细胞细胞凋亡级联反应流式细胞术

6种生物碱对斜纹夜蛾离体培养细胞的作用方式

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华中农业大学学报 2010年第1期29卷 31-36页

作者：黄劲飞贾建文罗建军翁群芳钟国华华南农业大学昆虫毒理研究室广州510642

通过倒置显微镜观察斜纹夜蛾细胞凋亡小体,采用MTT法测定细胞增殖抑制作用,并使用流式细胞仪检测细胞周期时相,研究了骆驼蓬碱、喜树碱、蓖麻碱、苦参碱、博落回碱和烟碱对斜纹夜蛾离体培养细胞系SL-1的作用方式和细胞毒理。结果表明:... 详细信息

通过倒置显微镜观察斜纹夜蛾细胞凋亡小体,采用MTT法测定细胞增殖抑制作用,并使用流式细胞仪检测细胞周期时相,研究了骆驼蓬碱、喜树碱、蓖麻碱、苦参碱、博落回碱和烟碱对斜纹夜蛾离体培养细胞系SL-1的作用方式和细胞毒理。结果表明:骆驼蓬碱5.0μg/mL、20.0μg/mL和喜树碱0.5μmol/L、1.0μmol/L处理后48～60 h,斜纹夜蛾离体培养细胞系SL-1表现出明显的细胞凋亡诱导作用,处理后12～48 h,明显抑制SL-1细胞增殖,流式细胞仪检测显示细胞阻滞于G2/M期;博落回碱和蓖麻碱5.0μg/mL、20.0μg/mL对SL-1具有细胞增殖抑制作用,以20.0μg/mL处理具有细胞周期时相阻滞作用,同样使细胞阻滞于G2/M期,但无明显的细胞凋亡诱导作用;烟碱和苦参碱在5.0μg/mL、20.0μg/mL对SL-1具有细胞增殖抑制作用。

关键词：生物碱斜纹夜蛾细胞

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不同杀虫成分对Sf9细胞凋亡的影响

华南农业大学学报 2009年第4期30卷 29-35页

作者：贾建文黄劲飞王文祥胡美英钟国华华南农业大学昆虫毒理研究室广东广州510642

通过倒置显微形态观察凋亡小体、DNA琼脂糖凝胶电泳确证的模型,研究了8种代表性杀虫成分对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda离体培养细胞系Sf9的凋亡诱导效果,以探讨不同杀虫成分对昆虫细胞凋亡的影响.结果表明,印楝素0.15-1.50μg/mL... 详细信息

通过倒置显微形态观察凋亡小体、DNA琼脂糖凝胶电泳确证的模型,研究了8种代表性杀虫成分对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda离体培养细胞系Sf9的凋亡诱导效果,以探讨不同杀虫成分对昆虫细胞凋亡的影响.结果表明,印楝素0.15-1.50μg/mL处理后72 h内、喜树碱0.35-3.50μg/mL处理后36 h,Sf9细胞产生大量典型凋亡小体,处理时间延长或剂量加大则以造成细胞坏死为主;DNA电泳产生典型的DNA Ladder,表明印楝素和喜树碱对Sf9具有明显的细胞凋亡诱导作用.印楝素1.5μg/mL诱导处理Sf9细胞凋亡高峰期为处理后24-48 h,喜树碱0.35-3.50μg/mL诱导处理Sf9细胞凋亡高峰期为处理后12 h.苦参碱、氟铃脲、毒死蜱、灭多威、氯氰菊酯以0.1-10.0μg/mL及昆虫蜕皮激素20-羟基蜕皮酮（20-hydroxyecdysone）以0.048-4.800μg/mL处理后72 h内对Sf9均无明显的细胞凋亡诱导作用.杀虫剂对昆虫细胞凋亡诱导效应随供试化合物、细胞种类、处理剂量、处理时间而异.

关键词：细胞凋亡草地贪夜蛾细胞系Sf9 印楝素喜树碱

小菜蛾活化蛋白激酶C受体1基因PxyRACK1在变态发育调控中的作用

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昆虫学报 2021年第8期64卷 887-896页

作者：胡晓汉田素芬林硕陈艺欣魏辉顾晓军黄劲飞福建农林大学植物保护学院福州350002 福建省农业科学研究院福建省作物有害生物监测与治理重点实验室福州350013 福建省农业科学研究院农业农村部福州作物有害生物科学观测试验站福州350013

【目的】活化蛋白激酶C受体1(receptor for activated C kinase 1,RACK1)参与了多细胞生物体中重要的信号传导,调节生物体的生长发育。本研究旨在克隆小菜蛾Plutella xylostella RACK1基因PxyRACK1,调查其表达模式,明确其对小菜蛾化蛹... 详细信息

【目的】活化蛋白激酶C受体1(receptor for activated C kinase 1,RACK1)参与了多细胞生物体中重要的信号传导,调节生物体的生长发育。本研究旨在克隆小菜蛾Plutella xylostella RACK1基因PxyRACK1,调查其表达模式,明确其对小菜蛾化蛹的影响及其机制。【方法】克隆PxyRACK1的全长cDNA,进行生物信息学分析,并利用qPCR检测其在小菜蛾各发育阶段(卵、1-4龄幼虫、预蛹、蛹和成虫)的表达;通过dsPxyRACK1显微注射小菜蛾4龄幼虫进行RNA干扰,并检测RNAi后PxyRACK1及蛹期特异表达基因PxyBr-Z2/3的表达量;统计死亡率、化蛹率、平均化蛹时间以及蛹重。【结果】小菜蛾PxyRACK1(GenBank登录号:MW160739)序列全长为1148 bp,开放阅读框长960 bp,编码319个氨基酸,具有7个WD40重复序列,每个WD40重复序列包含39~42个氨基酸。PxyRACK1在小菜蛾各发育阶段均有表达,其中4龄第2天幼虫中表达量最高,2日龄蛹中表达量最低。显微注射dsPxyRACK124 h后,处理组4龄幼虫中PxyRACK1和PxyBr-Z2/3表达量较对照组(dsGFP注射组)的分别显著降低了36.26%和83.46%,并且显微注射dsPxyRACK1导致试虫死亡率上升、化蛹推迟、化蛹率降低以及蛹重减轻。【结论】结果说明PxyRACK1参与调控小菜蛾蛹期变态发育。本研究为进一步阐明小菜蛾变态发育的信号调控通路及开发新型昆虫生长调节剂提供了思路。

关键词：小菜蛾 PxyRACK1 PxyBr-Z2/3 RNA干扰显微注射

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植物源物质诱导的斜纹夜蛾细胞凋亡

昆虫学报 2008年第4期51卷 449-453页

作者：钟国华水克娟黄劲飞贾建文胡美英华南农业大学昆虫毒理研究室、农药与化学生物学教育部重点实验室广州510642

为了研究植物源物质对斜纹夜蛾Spodoptera litura离体培养细胞系SL-1的凋亡诱导作用,采用倒置相差显微镜观察了印楝素、喜树碱等9种物质各自对SL-1凋亡小体的浓度效应及时序性。结果表明：印楝素0.1～5.0μg/mL和喜树碱0.5～20.0μmol/... 详细信息

为了研究植物源物质对斜纹夜蛾Spodoptera litura离体培养细胞系SL-1的凋亡诱导作用,采用倒置相差显微镜观察了印楝素、喜树碱等9种物质各自对SL-1凋亡小体的浓度效应及时序性。结果表明：印楝素0.1～5.0μg/mL和喜树碱0.5～20.0μmol/L处理SL-1,24～48h后均产生大量典型的凋亡小体;茶皂素、蓖麻碱、黄樟油、丹皮酚、烟碱、苦参碱和博落回碱0.1～20.0μg/mL处理SL-1后,整个观察期72h内均无明显凋亡小体出现,凋亡诱导作用不明显。印楝素0.75μg/mL诱导SL-1细胞凋亡,从凋亡小体判断,处理后0～36h属细胞凋亡早期,36～60h属细胞凋亡中期,60h后为细胞凋亡晚期。喜树碱5.0μmol/L诱导SL-1细胞凋亡,处理后0～24h属细胞凋亡前期,24～54h属细胞凋亡中期,54h后进入细胞凋亡晚期。初步认为印楝素和喜树碱对SL-1有凋亡诱导作用,并具有一定的浓度依赖性和时序性。

关键词：细胞凋亡植物源物质凋亡小体印楝素喜树碱斜纹夜蛾细胞系SL-1

印楝素诱导Sf-9细胞凋亡的线粒体信号途径研究

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印楝素诱导Sf-9细胞凋亡的线粒体信号途径研究