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超高含量的α-酮戊二酸和谷胱甘肽促成HeLa细胞耐受纳米银

中国菌物学会2018年学术年会

作者：鲁志松王玲孙琦李金寒刘阳西南大学材料与能源学部中国农业科学院农产品加工研究所

近年来纳米技术飞速发展,各种各样具备特殊功能的纳米材料不断被设计和制备出来,并已被广泛应用到能源、环境、生命科学等诸多领域。当材料的尺度降低至纳米水平,往往能表现出很多独特的性质,如能将其与生物传感器结合将有望进一步提高... 详细信息

近年来纳米技术飞速发展,各种各样具备特殊功能的纳米材料不断被设计和制备出来,并已被广泛应用到能源、环境、生命科学等诸多领域。当材料的尺度降低至纳米水平,往往能表现出很多独特的性质,如能将其与生物传感器结合将有望进一步提高生物传感器的性能。在前期的研究中,我们发展了多种基于功能纳米材料的高灵敏生物传感体系,并将其应用于真菌毒素检测、真菌生长以及产毒机制的研究中。在这次的报告中,我将首先简述纳米生物传感器的设计原理,并总结本课题组在真菌生长及毒素检测研究中的相关工作;在此基础上,详细介绍基于核酸适配体—纳米材料荧光淬灭体系的构建,并展示其在黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFB1）和赭曲霉毒素A（Ochratoxin A,OTA）检测中的优良性能1-3;随后,介绍我们利用纳米材料的催化活性构建的多种活性氧电化学传感器,并以柠檬酸抑制黄曲霉产毒机制研究为例,展示纳米生物传感器在真菌产毒机制研究中的优势4-6;最后,将汇报真菌单细胞检测平台的构建,及利用该方法研究活性氧调节黄曲霉生长的过程。

关键词：纳米传感器真菌毒素核酸适配体生物分析

来源： cnki会议评论

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生物工程学报 2023年第10期39卷 4189-4203页

作者：陈鹤鸣何雨婧陈学情邓富昌鲁志松刘英帅杜华茂西南大学蚕桑纺织与生物质科学学院重庆400715 中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所北京100021 西南大学材料与能源学院重庆400715

纳米银(silver nanoparticles,AgNPs)兼有优良的抗菌和抗癌作用,但病原体或癌细胞对其的耐受作用将影响其临床应用,前者耐受纳米银已见报道。本研究以HeLa细胞为模型,探讨癌细胞耐受纳米银的可能性及耐受机制。将HeLa细胞代谢物与纳米... 详细信息

纳米银(silver nanoparticles,AgNPs)兼有优良的抗菌和抗癌作用,但病原体或癌细胞对其的耐受作用将影响其临床应用,前者耐受纳米银已见报道。本研究以HeLa细胞为模型,探讨癌细胞耐受纳米银的可能性及耐受机制。将HeLa细胞代谢物与纳米银混合后测定其抗菌活性和细胞毒性变化,并用紫外-可见(ultraviolet visible,UV-Vis)分光光度计、粒度仪和透射电镜等检测混合体系中纳米银的理化特征。用非靶向代谢组学分析纳米银结合的代谢物种类,经腹腔注射HeLa细胞建立荷瘤小鼠,并分析血清对纳米银稳定性的影响。结果表明HeLa细胞代谢物可抑制纳米银的抗癌和抗菌作用,这种抑制作用表现出剂量依赖性,对纳米银生物学活性产生抑制作用的效应代谢物耐热、不溶于氯仿、含硫元素,分子量小于1 kDa。抑制作用的实质是使纳米银发生了聚集,筛选得到有115种代谢物能结合纳米银。进一步探究发现仅当α-酮戊二酸(α-ketoglutarate,AKG)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)的浓度共同达到一定阈值才导致纳米银聚集,而HeLa细胞代谢物中两者的浓度分别是正常宫颈上皮细胞的10倍和6倍,达到了该阈值。动物实验结果显示荷瘤小鼠血清导致纳米银聚集率显著高于健康鼠血清(P<0.05)。本研究揭示HeLa细胞中具有超常含量的α-酮戊二酸和谷胱甘肽,两者协同破坏纳米银的胶体稳定性,从而实现逃逸纳米银的抗癌作用。

关键词：纳米银癌细胞耐药性代谢组学胶体稳定性

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甲醛致DNA断裂作用的机制及修复的研究

环境科学学报 2005年第7期25卷 994-998页

作者：刘英帅丁书茂鲁志松乔琰王丽乔永康杨旭华中师范大学生命科学学院环境科学实验室武汉430079

应用单细胞凝胶电泳技术研究了甲醛致DNA断裂作用、作用机制以及断裂的修复.结果表明,甲醛在低浓度下可以诱导DNA的断裂(P<0.01);该断裂作用可以显著地被羟基自由基(·OH)清除剂甘露醇和二甲基亚砜抑制(P<0.01),以及受到超氧阴离子自由... 详细信息

应用单细胞凝胶电泳技术研究了甲醛致DNA断裂作用、作用机制以及断裂的修复.结果表明,甲醛在低浓度下可以诱导DNA的断裂(P<0.01);该断裂作用可以显著地被羟基自由基(·OH)清除剂甘露醇和二甲基亚砜抑制(P<0.01),以及受到超氧阴离子自由基(O·-2)清除剂超氧化物歧化酶(SOD)显著抑制(P<0.01),但其抑制效果要弱于甘露醇和二甲基亚砜.甲醛引起DNA断裂作用是通过活性氧自由基介导的,且在90min时基本上可被完全修复.

关键词：甲醛 DNA断裂自由基清除剂断裂修复

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活性氧在柠檬醛抑制黄曲霉产毒过程中的作用

核农学报 2016年第7期30卷 1316-1322页

作者：李金寒商博梁丹丹 Jonathan Nimal Selvaraj 鲁志松刘阳中国农业科学院农产品加工研究所/农业部农产品加工综合性重点实验室北京100193 西南大学洁净能源与先进材料研究院/洁净能源材料与技术重庆市重点实验室重庆400715

为探究ROS在柠檬醛抑制黄曲霉产毒过程中的作用,对柠檬醛作用下黄曲霉细胞释放ROS的含量、胞内ROS水平、抗氧化酶类活性和细胞氧化损伤程度的变化进行监测。结果表明,柠檬醛会使黄曲霉细胞内ROS含量明显增多,并部分释放到胞外。与甘油... 详细信息

为探究ROS在柠檬醛抑制黄曲霉产毒过程中的作用,对柠檬醛作用下黄曲霉细胞释放ROS的含量、胞内ROS水平、抗氧化酶类活性和细胞氧化损伤程度的变化进行监测。结果表明,柠檬醛会使黄曲霉细胞内ROS含量明显增多,并部分释放到胞外。与甘油处理组相比,柠檬醛处理组的黄曲霉毒素含量明显较低,柠檬醛作用下的黄曲霉胞内抗氧化酶(CAT、SOD和GSH-Px)活性明显增强,胞内MDA和蛋白质羰基含量明显增大。扫描电镜观察发现,柠檬醛处理组的细胞损伤程度明显高于甘油处理组。综上,黄曲霉在柠檬醛作用下产生ROS,造成黄曲霉氧化损伤,从而抑制黄曲霉毒素的产生。本研究结果对粮食仓储具有一定理论指导意义。

关键词：柠檬醛黄曲霉毒素 ROS 电化学传感器抑制机理

气态甲醛致小白鼠肝脏DNA-DNA交联的研究

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环境科学学报 2006年第3期26卷 501-504页

作者：何胡军鲁志松刘英帅彭光银丁书茂杨旭华中师范大学生命科学学院武汉430079 南洋理工大学化学与生物医学工程学院新加坡639798

为了探讨气态甲醛致生物体内DNADNA交联效应,进一步评价甲醛的遗传毒性作用,以昆明纯系小鼠为实验材料,进行了72h动态吸入式连续染毒,采用荧光检测法检测甲醛染毒后小鼠肝细胞DNADNA交联形成的效应.实验结果表明,0.5mg·m-3的气态甲醛... 详细信息

为了探讨气态甲醛致生物体内DNADNA交联效应,进一步评价甲醛的遗传毒性作用,以昆明纯系小鼠为实验材料,进行了72h动态吸入式连续染毒,采用荧光检测法检测甲醛染毒后小鼠肝细胞DNADNA交联形成的效应.实验结果表明,0.5mg·m-3的气态甲醛能引起明显的DNADNA交联(p<0.05),较高浓度的甲醛(1.0mg·m-3、3.0mg·m-3,p<0.01)可以产生极为明显的DNADNA交联作用.以上实验结果显示了0.5mg·m-3的气态甲醛就能致生物体内DNADNA交联效应,且随着浓度的升高DNADNA交联率越高.

关键词：甲醛 DNA-DNA交联遗传毒性体内

SOD模拟化合物对人离体肝癌细胞内源SOD活力的影响

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中国现代医学杂志 2005年第7期15卷 1020-1022,1028页

作者：丁书茂吴连锋鲁志松乔琰李晨岚廖展如华中师范大学生命科学学院湖北武汉430079 华中师范大学化学学院湖北武汉430079

目的研究SO D模拟化合物(m odels ofsuperoxide dism utase,M SO D)对人肝癌细胞增殖的影响、细胞内外环境SO D活力和蛋白含量变化。方法采用离体培养的人肝癌细胞SSM C-7721细胞株,加入SO D模拟化合物。结果模拟化合物[M n(ED T B)(A C... 详细信息

目的研究SO D模拟化合物(m odels ofsuperoxide dism utase,M SO D)对人肝癌细胞增殖的影响、细胞内外环境SO D活力和蛋白含量变化。方法采用离体培养的人肝癌细胞SSM C-7721细胞株,加入SO D模拟化合物。结果模拟化合物[M n(ED T B)(A C)(AC)]具有SO D酶的活性,并能通过SSM C-7721肝癌细胞膜进入细胞内,使细胞内SO D的活力上升,抑制肝癌细胞的增殖。结论M SO D可以改变肿瘤细胞内的氧化还原水平,此研究将对抗癌药物的研究具有重要意义。

关键词： SOD 模拟化合物肝癌细胞:活力

用单细胞凝胶电泳技术检测粉纹夜蛾5BI细胞DNA损伤的研究

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华东昆虫学报 2004年第1期13卷 38-41页

作者：甘耀坤乔琰鲁志松刘凯于杨旭广西玉林师范学院化学与生物系广西玉林537000 华中师范大学生命科学学院湖北武汉430079

为了探测昆虫细胞的 DNA损伤 ,本实验应用单细胞凝胶电泳技术 ,对不同剂量的过氧化氢和甲醛引起的粉纹夜蛾 5 BI细胞 DNA损伤效应进行了研究 ,结果表明 5 0 μM、10 0 μM、15 0 μM的过氧化氢能引起粉纹夜蛾 5 BI细胞的 DNA断裂 ,且断... 详细信息

为了探测昆虫细胞的 DNA损伤 ,本实验应用单细胞凝胶电泳技术 ,对不同剂量的过氧化氢和甲醛引起的粉纹夜蛾 5 BI细胞 DNA损伤效应进行了研究 ,结果表明 5 0 μM、10 0 μM、15 0 μM的过氧化氢能引起粉纹夜蛾 5 BI细胞的 DNA断裂 ,且断裂程度和浓度水平之间成正相关关系 ;10 μM、30 μM、5 0 μM的甲醛能引起粉纹夜蛾 5 BI细胞 DNA损伤 ,其中在 10μM时引起 DNA断裂 ,在 30μM、5 0μM时引起 DNA交联。

关键词：单细胞凝胶电泳 DNA损伤粉纹夜蛾 5BI细胞

SOD酶模型化合物对口腔颊黏膜细胞DNA的影响

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湖北预防医学杂志 2003年第4期14卷 4-6页

作者：于非非朱燕丁书茂鲁志松乔琰廖展如华中师范大学武汉430079

目的　探讨超氧化物歧化酶模型化合物 (m odel of superoxide dism utase,MSOD) (Cu2 C2 1 N1 4H2 7Cl1 3)作用于正常口腔颊黏膜细胞的安全剂量范围。方法　用单细胞凝胶电泳法 ,通过观察 Tail Mom ent和Tail DNA %这两项指标的变化情... 详细信息

目的　探讨超氧化物歧化酶模型化合物 (m odel of superoxide dism utase,MSOD) (Cu2 C2 1 N1 4H2 7Cl1 3)作用于正常口腔颊黏膜细胞的安全剂量范围。方法　用单细胞凝胶电泳法 ,通过观察 Tail Mom ent和Tail DNA %这两项指标的变化情况检测染毒后口腔颊黏膜细胞的 DNA损伤情况。结果　测试结果表明 2 5、5 0、1 0 0μg/ m l MSOD处理组相互之间、与阴性对照组之间均无显著性差异 ,但与阳性对照组之间有极显著性差异。结论　当 MSOD浓度 <1 0 0μg/ ml时 ,没有发现 MSOD对口腔颊黏膜细胞

关键词：超氧化物歧化酶模型化合物口腔颊黏膜细胞单细胞凝胶电泳 MSOD

H2O2无酶传感器的构建及其在柠檬醛抑制黄曲霉产毒机理研究中的应用

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H2O2无酶传感器的构建及其在柠檬醛抑制黄曲霉产毒机理研究中的应...