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毕赤酵母表达的neurturin对恒河猴帕金森氏病模型中黑质多巴胺能神经元的保护作用

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生物化学与生物物理进展 2004年第8期31卷 722-726页

作者：李鸿钧苏婷马雁冰和占龙鲁帅尧戴长柏孙茂盛中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所昆明650118

帕金森氏病 (PD)是由于多巴胺能神经元变性、坏死 ,导致黑质纹状体系统的多巴胺含量下降而引起的一种神经系统退行性疾病 ,目前还没有一种很好的方法能使之治愈 .Neurturin (NTN)能特异地作用于中脑多巴胺能神经元 ,对该类神经元具营... 详细信息

帕金森氏病 (PD)是由于多巴胺能神经元变性、坏死 ,导致黑质纹状体系统的多巴胺含量下降而引起的一种神经系统退行性疾病 ,目前还没有一种很好的方法能使之治愈 .Neurturin (NTN)能特异地作用于中脑多巴胺能神经元 ,对该类神经元具营养和保护作用 .经静脉注射 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (MPTP)诱导恒河猴产生帕金森氏病模型 ,并在NTN治疗组 ,注射MPTP之前 4 8h脑室内注射重组毕赤酵母表达的人NTN 1mg .结果表明 :模型组猴均逐渐出现了PD症状 ,而NTN治疗组猴 ,PD症状比较轻或不明显 ;荧光分光光度法测定MPTP模型组猴黑质、壳核和尾状核多巴胺 (DA)、 5 羟色胺 (5 HT)和 5 羟吲哚乙酸 (5 HIAA)的含量结果与正常对照组相比均显著降低 ,NTN治疗组猴的黑质、壳核和尾状核中的DA、 5 HT和 5 HIAA与对照组相比无显著性差异 ,而与模型组相比 ,DA、 5 HT和 5 HIAA含量均明显增加 ;光镜检查MPTP模型组猴黑质神经元细胞明显脱失 ,而NTN治疗组猴黑质神经元细胞丢失不明显 ,与正常对照组猴无差别 .上述结果表明 ,制备的重组人NTN在恒河猴体内能保护中脑黑质多巴胺能神经元不受MPTP的损伤 ,使其DA含量及多巴胺能神经元维持正常。

关键词：帕金森氏病多巴胺能神经元变性坏死毕赤酵母表达

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携带hFGF21基因慢病毒的制备及鉴定

细胞与分子免疫学杂志 2013年第12期29卷 1258-1261,1266页

作者：鲁帅尧严敏王晓囡和占龙周艳赵远禹文海李鸿钧中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的包装人成纤维细胞生长因子21(hFGF21)慢病毒颗粒、确定包装细胞人胚肾293T(HEK293T)细胞的形态特征以及对目的基因的转导能力。方法对慢病毒重组质粒Lv105-hFGF21进行测序鉴定,在HEK293T细胞中包装为慢病毒颗粒并浓缩,经反转录PCR(R... 详细信息

目的包装人成纤维细胞生长因子21(hFGF21)慢病毒颗粒、确定包装细胞人胚肾293T(HEK293T)细胞的形态特征以及对目的基因的转导能力。方法对慢病毒重组质粒Lv105-hFGF21进行测序鉴定,在HEK293T细胞中包装为慢病毒颗粒并浓缩,经反转录PCR(RT-PCR)和电镜检测鉴定后,利用实时定量PCR测定病毒滴度。然后感染Vero细胞,经RT-PCR检测hFGF21 mRNA的表达、免疫荧光检测hFGF21蛋白的表达。结果 RT-PCR结果表明重组慢病毒能转录hFGF21 mRNA,电镜检测结果可以看到典型的慢病毒颗粒形态特征,其直径在40～70 nm;重组病毒原液的滴度是3.68×108VG/mL、浓缩液的滴度是1.25×109VG/mL;重组慢病毒感染Vero细胞后经RT-PCR检测到细胞中有hFGF21mRNA表达,免疫荧光测到Vero细胞中有hFGF21蛋白表达。结论成功包装了hFGF21慢病毒颗粒并在靶细胞中获得表达。

关键词：人成纤维细胞生长因子-21 慢病毒颗粒细胞表达

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云南三个地区野生猕猴的种群结构分析

兽类学报 2012年第3期32卷 203-208页

作者：赵远王俊斌和占龙禹文海鲁帅尧中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118

通过齿式及牙齿磨损情况判断年龄及称量体重的方法,对2004年至2010年间从云南景东县、镇沅县、宁蒗县三个地区捕获的23群共670只野生猕猴进行了种群年龄组成、性别比例及体重差异的调查。结果表明:(1)景东县、镇沅县、宁蒗县三地猕猴种... 详细信息

通过齿式及牙齿磨损情况判断年龄及称量体重的方法,对2004年至2010年间从云南景东县、镇沅县、宁蒗县三个地区捕获的23群共670只野生猕猴进行了种群年龄组成、性别比例及体重差异的调查。结果表明:(1)景东县、镇沅县、宁蒗县三地猕猴种群雄雌性别比分别为1∶1.21、1∶1.55、1∶1.52;(2)三个地区猕猴种群年龄结构稳定,幼年组、青年组和中壮年组的个体数量占整个种群数量的80%以上,处于发展阶段;(3)三个地区猕猴种群体重到了中壮年后均出现雄性明显高于雌性(P<0.01)的性二型现象,同时,发现宁蒗县猕猴种群体重明显高于其他两个地区(P<0.01)。以上三个地区野生猕猴种群均处于较高生育高峰,呈现出发展壮大的趋势。本文为云南省猕猴资源的保护与合理开发利用提供一定的依据,同时也为了解云南省野生猕猴群体结构及生长发育规律,建立人工繁育的不同地域(种、亚种)猕猴种质特性数据库和进一步研究提供相应的基础数据支持。

关键词：猕猴性比年龄结构种群性二型

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猕猴自发性糖尿病的临床病理学分析

中国兽医科技 2001年第11期31卷 40-41页

作者：和占龙鲁帅尧赵远陈丽雄王俊斌中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所云南昆明650118

糖尿病(Diabetes mellitus)是一种以糖代谢紊乱为主要表现的内分泌-代谢疾病,早期不显临床症状,晚期病例可表现多食、多饮、多尿和体重减轻为特点的典型症状.2000年11月,中国医学科学院医学生物学研究所实验动物中心繁殖猴群中1只猕猴... 详细信息

糖尿病(Diabetes mellitus)是一种以糖代谢紊乱为主要表现的内分泌-代谢疾病,早期不显临床症状,晚期病例可表现多食、多饮、多尿和体重减轻为特点的典型症状.2000年11月,中国医学科学院医学生物学研究所实验动物中心繁殖猴群中1只猕猴表现严重脱毛,身体迅速消瘦.发现异常后单笼隔离饲养观察,于2001年1月衰竭死亡,经实验室检验和病理剖检确诊为自发性糖尿病.

关键词：猕猴自发性糖尿病症状病理变化病理学

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猕猴被毛氨基酸含量的初步研究

四川动物 2009年第2期28卷 189-192页

作者：鲁帅尧和占龙禹文海赵远中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118

为建立实验猕猴被毛氨基酸含量的参考数据和对猕猴饲料氨基酸配比的筛选提供实验基础数据,挑选不同生活环境的猕猴共30只,即笼养猴10只、半自然圈养(猴园)猴10只、野外猴10只,用氨基酸自动分析仪测定其被毛氨基酸的含量。分析结果表明,... 详细信息

为建立实验猕猴被毛氨基酸含量的参考数据和对猕猴饲料氨基酸配比的筛选提供实验基础数据,挑选不同生活环境的猕猴共30只,即笼养猴10只、半自然圈养(猴园)猴10只、野外猴10只,用氨基酸自动分析仪测定其被毛氨基酸的含量。分析结果表明,按不同生活环境分组,猕猴被毛的脯氨酸、缬氨酸、氨和精氨酸以及胱氨酸的含量是人工饲养猴(包括笼养猴和猴园猴)低于野外猴(P0.05)。因此,影响猕猴被毛大部分氨基酸含量的因素不仅是食物相应氨基酸的含量,生活环境也有很大的影响;性别因素对猕猴被毛的大部分氨基酸的含量是没有影响的。

关键词：猕猴被毛氨基酸

不同剂量链脲菌素对恒河猴某些常规生理指标的影响

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中国实验动物学报 2003年第1期11卷 54-57页

作者：匡德宣代解杰鲁帅尧叶尤松孙晓梅中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所昆明650118

目的　研究链脲菌素 (STZ)对恒河猴摄食、饮水、排尿、体重、血糖及尿糖等生理指标的影响 ,为建立糖尿病动物模型积累资料。方法　通过静脉给 7只恒河猴注射不同剂量的STZ。结果　使用不同剂量STZ后 ,7只恒河猴均在不同时间、不同程度... 详细信息

目的　研究链脲菌素 (STZ)对恒河猴摄食、饮水、排尿、体重、血糖及尿糖等生理指标的影响 ,为建立糖尿病动物模型积累资料。方法　通过静脉给 7只恒河猴注射不同剂量的STZ。结果　使用不同剂量STZ后 ,7只恒河猴均在不同时间、不同程度出现与人糖尿病相类似的“三多一少”症状 ,同时对糖尿病猴使用不同剂量胰岛素可使其症状减轻。尤其是中、高剂量组的动物症状较为明显 ,而低剂量组体重有一个短时间的增加后又迅速下降。实验组中血糖和尿糖均出现不同程度的升高 ,以中、高 2个剂量组的动物变化较大。结论　采用中、高剂量组的STZ可诱导类似人类糖尿病的急性动物模型 ,而使用胰岛素治疗或低剂量STZ可使该动物模型疾病病程延长 ,有利于进行其并发症的研究。

关键词：恒河猴链脲菌素数据生理学糖尿病动物模型

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猕猴配合饲料氨基酸含量测定及比较分析

云南畜牧兽医 2006年第2期 44-45页

作者：陈瑜鲁帅尧中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所云南昆明650118

通过测定两种猕猴配合饲料氨基酸的含量,分析饲料Ⅰ和饲料Ⅱ的各种氨基酸占饲料粗蛋白的百分比和必需氨基酸指数。结果表明,饲料Ⅰ的各种氨基酸含量均不同程度高于饲料Ⅱ,各种氨基酸占饲料粗蛋白的百分比和必需氨基酸指数均高于饲料Ⅱ... 详细信息

通过测定两种猕猴配合饲料氨基酸的含量,分析饲料Ⅰ和饲料Ⅱ的各种氨基酸占饲料粗蛋白的百分比和必需氨基酸指数。结果表明,饲料Ⅰ的各种氨基酸含量均不同程度高于饲料Ⅱ,各种氨基酸占饲料粗蛋白的百分比和必需氨基酸指数均高于饲料Ⅱ。因此,饲料Ⅰ的蛋白质质量优于饲料Ⅱ。

关键词：配合饲料氨基酸猕猴

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携带eGFP基因慢病毒颗粒的制备及鉴定

生物技术 2013年第6期23卷 76-80页

作者：陈瑜杨耀云鲁帅尧王晓囡和占龙乞素冬李鸿钧中国医学科学院北京协和医学院医学生物研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的:通过eGFP基因慢病毒颗粒的包装和感染,明确重组慢病毒对外源基因在细胞中的转导能力。方法:把慢病毒质粒Lv105-eGFP转染到293 Ta细胞中并包装为慢病毒颗粒,经电镜检测病毒颗粒和实时定量PCR(qPCR)测定病毒滴度,之后感染H1299细胞,... 详细信息

目的:通过eGFP基因慢病毒颗粒的包装和感染,明确重组慢病毒对外源基因在细胞中的转导能力。方法:把慢病毒质粒Lv105-eGFP转染到293 Ta细胞中并包装为慢病毒颗粒,经电镜检测病毒颗粒和实时定量PCR(qPCR)测定病毒滴度,之后感染H1299细胞,通过荧光显微镜观察比较eGFP在靶细胞中的表达效率。结果:eGFP在包装细胞中转染和表达效率在48h时达90%以上,到72h时细胞病变效应(CPE)逐渐显著;电镜检测可看到典型的慢病毒颗粒形态特征;病毒原液的滴度是4.4×107VG/mL、浓缩液的是2.68×1010VG/mL;1μL病毒原液感染H1299细胞时,eGFP表达水平可达10%、增加到100μL感染时表达水平达到99%以上,证明eGFP基因得到有效转导并可在细胞中高水平表达绿色荧光蛋白。结论:成功包装了eGFP慢病毒颗粒并可在靶细胞中获得高效表达。

关键词：增强绿色荧光蛋白慢病毒颗粒包装细胞表达

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害获灭和虫克星驱除猕猴体内寄生虫比较实验

动物科学与动物医学 2001年第5期18卷 36-37页

作者：和占龙赵远鲁帅尧肖德友中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所昆明650118

用猕猴为实验对象分成两个实验组 ,比较害获灭和虫克星驱除猕猴体内寄生虫的效果。结果驱除后第 10天 ,粪便中虫体、虫卵转阴率为 10 0 %。表明两种药物都能有效驱除体内寄生虫。

关键词：害获灭虫克星猕猴寄生虫